Travaux Dirigés Histologie A1

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HISTOLOGIE A1 - Nathalie Bourgès-Abella Ecole Nationale Vétérinaire de Toulouse

Travaux Dirigés Histologie A1

 5 séances:

1. Le prélèvement histologique. Le tube digestif 2. Les cellules sanguines

3. Glandes annexes tube digestif, Glandes endocrines, Peau

4. Organes lymphoïdes, Poumon 5. Rein, Ovaire, Testicule

 Avoir son cahier de TP d’histologie

 Séances matinée à 8h30, après-midi à 13h30

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Le prélèvement histologique

Nathalie Bourgès-Abella

Ecole Nationale Vétérinaire de Toulouse

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introduction

 3 temps dans l’analyse histologique:

 Prélèvement

 Traitement par laboratoire

 Lecture

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1. Opérations effectuées par le praticien

 Le prélèvement

 La fixation

 L’expédition du prélèvement

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Le prélèvement

 Différents types:

 Autopsie: examen du cadavre et des viscères d’un animal, le plus souvent en vue de déterminer les causes de la mort.

 Pièce d’exérèse chirurgicale, biopsie

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Le prélèvement

 Réalisation:



Matériel



Taille/recoupe de l’organe et recoupe du prélèvement

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N.B.:

la recoupe du prélèvement au laboratoire

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Le prélèvement

Tenir compte de la topographie de l’organe :

 unités identiques (foie, rate, muscle,…)

Foie Chien

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Le prélèvement

Tenir compte de la topographie de l’organe :

 organes complexes (rein, nœuds lymphatiques, gl.surrénales,…)

non

cortex médulla

Rein Chien

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Le prélèvement

Tenir compte de la topographie de l’organe :

 viscères creux (tube digestif; voies respiratoires, urinaires, génitales,…)

T.Digestif Chien

I.Grêle Chien

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Le prélèvement « lésionnel »

► échantillonnage de prélèvements représentatifs des lésions

► jonction tissu « sain »-tissu lésionnel

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Le prélèvement de tissu lésionnel:

Ex: tumeurs mammaires CN

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Opérations effectuées par le praticien

 Le prélèvement

 La fixation

 L’expédition du prélèvement

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La fixation

 But:

 empêcher la dégradation enzymatique (autolyse- putréfaction) du tissu en le conservant dans un état aussi proche que possible de celui présent à l’état vivant

 durcir le matériel pour faciliter l’obtention de coupes tissulaires fines

 Principe:

 dénaturation des protéines (interaction aldéhyde-protéine)

 …. congélation

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La fixation

 Quand?



Immédiatement après avoir réalisé le prélèvement

 Comment?



Volume de fixateur: 10 fois volume pièce à fixer



Flacons: col large, fermeture hermétique

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Les fixateurs

 Formol à 10%

 Liquide de Bouin: solution aqueuse saturée d’acide picrique

 Autres : examens particuliers

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Les fixateurs

 Formol à 10%

CIRC: Centre International de Recherche sur le Cancer

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Opérations effectuées par le praticien

 Le prélèvement

 La fixation

 L’expédition du prélèvement

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L’expédition du prélèvement

 Où?

 Fiche de renseignements obligatoire

Laboratoire d’Anatomie Pathologique Laboratoire d’Histocytopathologie

Laboratoire d’Histologie VETERINAIRE

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2. Opérations

effectuées par le laboratoire

Technique histologique

conventionnelle

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Histologie- ENVT Année A1 -

nba 21

Opérations effectuées par le laboratoire

d’histologie

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Recoupe et mise en cassette du

prélèvement

histologique

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nba 23

Déshydratation et

Enrobage en paraffine

FORMOL EAU ALCOOL TOLUENE PARAFFINE

Rinçage Déshydratation Enrobage

Durée moyenne: 15 heures

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Inclusion

en paraffine

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nba 25

Inclusion en bloc de paraffine

In « Aughey E., Frye FL., Comparative veterinary histology, 2001 »

Paraffine liquide (~ 60°C dans le moule)

Blocs de paraffine froids

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Coupes au microtome:

3 à 5 mm d’épaisseur

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nba 27

Confection de la lame blanche

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Séchage des lames blanches

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nba 29

Coloration et montage

hémalun- éosine

Déparaffinage Réhydratation Coloration Déshydratation Montage

Lame

TOLUENE ALCOOL EAU ^COLORANTS EAU ALCOOL TOLUENE

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