DURÉE DE PASSAGE DANS L’ÉPIDIDYME
DES SPERMATOZOIDES DE VERRAT MARQUÉS AU 32 P
G SINGH
Station de Recherches de
Physiologie animale,
Centre national de Recherches
zootechniques, Jouy-en-,/osas (!!Ke-f<-0:!).
.- -. _-._
SOMMAIRE
9
Verrats
Large
White ont reçu 20mc de32 PO,IlNa,
par voie intraveineuse. Ils ont été castrés le z4e,z 5 e , z6 e , z ge ,
3oe,32 e jour après l’injection.
La radioactivitéspécifique
de l’acidedésoxyribo- nucléique
desspermatozoïdes
a été déterminéeaprès
isolement de ceux-ci dans les différentesparties
de
l’épididyme.
Les résultats
indiquent
que lespremiers spermatozoïdes
à acidedésoxyribonucléique
radio-actif
apparaissent
dans lapartie proximale
de la tête del’épididyme
z5jours après l’injection
de12
P. Comme on les trouve dans
l’éjaculat
le39 e jour,
on en déduit que la durée du passage dansl’épididyme
est de r4jours.
Parailleurs,
on constate que la durée de laspermatogenèse
estplus
courte, donc
plus efficace,
chez le Verrat que chez le Bélier et le Taureau.!!_! !_ !_!
Les spermatozoïdes
àacide désoxyribonucléique radioactif apparaissent dans l’éjaculat de
Verrat39 jours après l’injection de
32P(S INGH , ig6i a) c’est-à-dire
plus
tôt quechez le Bélier : 42 e - 45 e jour (OxTAVArrT, r 955 ; D AWS O N , 195 8)
et quechez
leTaureau : 49 e - 52 e jour (D AWSON , 195 8 b ; Ko!!’o!D-JoHrrs!N, 1959;
O RG
>
~
siN, 19 6 1 ). Ceci peut résulter soit d’une durée plus
courte des processus sperma-togénétiques, soit d’un transit épididymaire plus rapide.
La vitesse du transit épididymaire
aété étudiée chez plusieurs animaux (Rat, Bélier, Taureau)
soit parinjection dans
le retetestis de particules étrangères (encre
de Chine, milieu radioopaque) qui
sontsupposées
progresser à la mêmevitesse
queles spermatozoïdes (G UNN , r 93 6 ;
MACM ILLAN
etH ARRISSON , i 955 ), soit
enprovo- quant la formation d’anomalies spermatiques
parisolation scrotale
et endéterminant
l’apparition de
cesspermatozoïdes
anormaux dansl’éjaculat (M AC
KFNzin etPmr,r,iPS, r 934 ), soit enfin
enmarquant
lesspermatozoïdes
àl’aide de radioisotopes
et en
suivant la progression de
cesspermatozoïdes marqués (ORTAVANT, 1954, I959 !
1(r)
Adresse actuelle : Division of animal Genetics,Indian
veterinary
Research Institute,Izitnagar,
Ii. l’.(India).
ORG!Brn-, z 9 6z). Cette dernière méthode permet
une mesureprécise
etdirecte du déplacement des spermatozoïdes. C’est pourquoi
nousl’avons choisie
pour étudierla durée du transit épididymaire
chez le Verrat pourlaquelle
nous nepossédons
aucune
donnée, du moins
à notreconnaissance.
MATÉRIEL
ETMÉTHODE
Les testicules et
épididymes
de9 V c rrats Large
l1’hite ayant reçu par voie intraveineuse 20 nie de 3’P sous forme de
32 P0 4 HNaa
ont étéprélevés
z4, z5,2 6, 2 8,
30, et 32jours après l’injection.
Après
enlèvement del’albuginée
et de lamajeure partie
du tissuconjonctif séparant
les diffé-rents lobules
épididymaires,
lesépididymes
droit etgauche
ont été fractionnés en : têteproximale
et tête
distale,
corps, queueproximale
et queue distale.Chaque
fraction a étécoupée
en très finsfragments
dans 40-50ml d’une solution froidehypotonique (Krebs-Ringer,
100ml !- eaubidistillée,
400
ml)
etgardée pendant
2 heures à +5 °C.
Puis elles ont été filtrées sur 6 couches de gaze afin d’éliminer les débris tissulaires. Les filtrats ont étécentrifugés
et les culots lavés 3fois avec la même solutionhypotonique
afin de les débarrasser des hématies. l’uis ils ont étéhomogénéisés
et traitésselon la
technique
décriteprécédemment (StNGH, i 9 6r)
pour la détermination de la radioactivitéspécifique
de l’acidedésoxyribonucléique.
RÉSULTATS
Les résultats
sontconsignés
dansles
tableaux i et 2. Ilsindiquent
quel’activité
du résiduspermatique délipidé de
la têteproximale
del’épididyme augmente légèrement le 25 e jour après l’injection,
pouratteindre des valeurs élevées dès le 30
e jour.
Pour lerésidu spermatique provenant de
latête distale ceci
ne seproduit
que le
3 o e jour
et pour celui du corps le32 e jour.
Les variations subies
parl’activité spécifique de l’acide désoxyribonucléique
donnent des indications plus précises. L’activité spécifique de l’ADN des spermato-
zoïdes
de lapartie proximale
de la tête del’épididyme devient significative
le25 e
jour après l’injection.
Celle
de l’AI>Ndes spermatozoïdes de
lapartie distale de la
têtede l’épididyme
le devient le 28e
jour,
etdans
le corpsde l’épididyme
le3 o e jour.
Les premiers spermatozoïdes
à ADNradioactif
arriventdonc dans l’épididyme
le
25 &dquo; jour après injection
et cesspermatozoïdes progressent ensuite
lelong du
canalépididymaire.
DISCUSSIUN
Nous avons montré
auparavant (S INGH , i g 6i)
que lesspermatozoïdes
àADN
radioactif
apparaissent
dansl’éjaculat
39jours après l’injection.
Or nous constatonsici
que ces mêmesspermatozoïdes
se trouventdans
lapartie proximale de la
têtede l’épididyme, 25 jours après l’injection.
Onpeut
donc en conclure que cesspermato- zoïdes
ont misr 4 jours
pour traverserl’épididyme.
Ce
chiffre
est trèscomparable
à celui obtenu chez le Bélierdans des conditions
comparables (OxTwwT, 1955 )
etil
estplus élevé
quecelui
trouvéexpérimentale-
ment chez le
Taureau,
àsavoir
8-mjours (O RG r·, B m, ig6i).
Par contre
l’apparition des spermatozoïdes radioactifs dans
la têtede l’épididyme
le
25 e jour après l’injection
estplus précoce
que chez leBélier, 30 e jour,
etbeaucoup plus
quechez le Taureau, 4W jour. la durée de
laspermatogenèse
estdonc beaucoup plus
courtechez
le Verrat quechez les
deux autresanimaux domestiques. C’est
cette
particularité qui explique
queles spermatozoïdes
à ADNradioactifs
appa- raissentplus
tôt dansl’éjaculat
chez ces Verrats que chez les autresanimaux domes-
tiques
étudiés.REMERCIEMENTS
L’auteur remercie R.
OxTnvnt·;T,
Directeur de Recherches à l’Institut national de la Rechercheagronomique
pour lui avoirsuggéré
ce travail et l’avoirguidé
tout aulong
de sa réalisation.Ce travail a pu être effectué
grâce
à deux bourses du gouvernementfrançais.
Reçu en janvier i 9 6i.
SUMMARY
DURATION OF I’ASSING THROUGH THE FPIDID1’nllS OF 32P LABELLED BOAR SPERMATOZOA
r. Six young Boars were
injected
each with 20me of radioactivephosphate ( 32 P) intravenously
and were castrated on different
days, 24 th, z 5 th, 2 6th, 3 oth
and 32days
after theinjection.
2
. The
epididymides
wereseparated
and cleared off excess connective tissue. Eachepididymis
was cut into five
portions,
theproximal
and the distal parts of the head and the tail and thebody
of the
epididymis.
Fachportion
was then cut into smallpieces
and soaked inhypotonic
solution at_5°C
in arefrigerator
for two hours to allow maceration then filtered.3
. The filtrate
containing
sperm wascentrifuged
and the residuehomogenised
and treatedby
the standardtechnique employed
for the extraction ofdesoxyribonucleic
acid.4
. The
specific
activities of the residue sperm and DNA fraction of sperm recovered from different parts of theepididymis
were estimated.5
. The
specific activity
in the DNA fraction of spermappeared
on thez 5 th day
after theinjection.
From this
finding
and the results of the earlierinvestigation showing
the appearance of acti-vity
at first in the spermdesoxyribonticleic
acid of theejaculate ( 39 th days),
it is estimated that the sperm will take 14days
to tracelthrough
theepididymat
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desspermatozoïdes
de Verrat avec duphosphore
radioactif 321’, in &dquo;&dquo;’O..1nn.niol. anim. l3ioc7z.