UE8 - Histologie
Pr.Libouban
Les techniques histologiques et cytologiques
Rappel, QCM, points clés
Les particules énergétique sont les photons.
1) Le microscope de travail
Il s’agit du microscope du lycée, il peut facilement être porté/déplacé.
2) Le microscope de recherche
Plus sophistiqué, il est plus puissant, peut être couplé à une caméra.
Microscopie optique :
17/08/2020 3
Les particules énergétique sont les électrons.
1) Le microscope électronique à transmission
Il permet l’étude de l’ultrastructure des cellules et des organites.
2) Le microscope électronique à balayage
Il permet l’étude des contours et de la surface des échantillons.
Microscopie électronique :
Il est plus volumineux, plus sophistiqué et il est utilisé par des professionnels
A) L’empreinte est utilisé pour le frottis sanguin et consiste à étaler une goutte de sang sur la lame.
B) La fixation est une épate très importante et doit se faire rapidement.
C) La fixation permet une conservation des constituants et aussi l’immobilisation de l’activité de la cellules.
D) La coloration se fait majoritairement de façon manuelle et de moins en moins souvent de façon automatique.
E) Aucune des propositions ci-dessus n’est exacte
QCM 1 : CONCERNANT LES TECHNIQUES DE PRÉPARATIONS CYTOLOGIQUES, QUELLES SONT LA OU LES PROPOSITIONS EXACTES ?
17/08/2020 5
A) L’empreinte est utilisé pour le frottis sanguin et consiste à étaler une goutte de sang sur la lame. FAUX il s’agit de l’étalement. L’empreinte consiste à tapoter l’organe sur une lame pour que les cellules s’y collent.
B) La fixation est une épate très importante et doit se faire rapidement. VRAI
C) La fixation permet une conservation des constituants et aussi l’immobilisation de l’activité de la cellules. VRAI
D) La coloration se fait majoritairement de façon manuelle et de moins en moins souvent de façon automatique. FAUX la méthode manuelle est moins utilisé sauf pour les
demandes spécifiques.
QCM 1 : CONCERNANT LES TECHNIQUES DE PRÉPARATIONS CYTOLOGIQUES, QUELLES SONT LA OU LES PROPOSITIONS EXACTES ?
1) Le recueil sur les lames de verre : Les techniques de préparations cytologiques :
17/08/2020 7
-
Par étalement : goutte sur une lame-
Par empreinte : cellule collé sur une lame-
Par centrifugation : isolation ou récupération de cellules-
Par cytocentrifugation : projette directement les cellules sur une lame de verre.2) La fixation
Les techniques de préparations cytologiques :
-
Conservation des constituants-
Prévention de l’autolyse cellulaire-
Immobilisation de l’activité cellulaire-
Doit être fait rapidementLe temps de fixation est variable en fonction du volume du prélèvement.
Utilisation de fixateur comme le mélange alcool/éther
La fixation du frottis sanguin est particulière puisqu’elle se réalise par séchage à l’air.
1) La méthode manuelle
Utilisé pour les demandes spécifiques et ponctuelles.
C’est un système de bac en verre.
2) La méthode automatique
Programmation de plusieurs lavages, plusieurs colorations.
Ex :
-
Coloration MGG pour les frottis sanguin-
Coloration papanicolaou pour les frottis gynécoLes techniques de préparations cytologiques :
17/08/2020 9
Il y a deux types de méthodes de colorations :
A) L’éthanol est un fixateur permettant de réticuler les protéines et le formol qui est le plus utilisé permet de coaguler les protéines.
B) La déshydratation correspond à la substitution du fixateur par de l’éthanol.
C) À la fin de l’inclusion, les tissus comportent 60% de paraffine liquide.
D) Les coupes sont réalisées grâce à un microtome et mesure entre 3 et 5 micromètres.
E) Aucune des propositions ci-dessus n’est exacte
QCM 2 : CONCERNANT LES TECHNIQUES DE PRÉPARATIONS HISTOLOGIQUES, QUELLES SONT LA OU LES PROPOSITIONS EXACTES ?
A) L’éthanol est un fixateur permettant de réticuler les protéines et le formol qui est le plus utilisé permet de coaguler les protéines. FAUX c’est l’inverse.
B) La déshydratation correspond à la substitution du fixateur par de l’éthanol. VRAI
C) À la fin de l’inclusion, les tissus comportent 60% de paraffine liquide. FAUX il s’agit de paraffine solide.
D) Les coupes sont réalisées grâce à un microtome et mesure entre 3 et 5 micromètres. VRAI
E) Aucune des propositions ci-dessus n’est exacte
QCM 2 : CONCERNANT LES TECHNIQUES DE PRÉPARATIONS HISTOLOGIQUES, QUELLES SONT LA OU LES PROPOSITIONS EXACTES ?
17/08/2020 11
1) La fixation
Les techniques de préparations histologiques :
À la fin de la fixation, l’échantillon contient 60% de fixateur.
Fixateur :
- Éthanol : coagule les protéines
- Formol : réticule les protéines
- Acide picrique et/ou acide acétique
2) La préparation à la coupe
Les techniques de préparations histologiques :
17/08/2020 13
a- La déshydratation :
Passage de 60% de fixateur à 60% d’éthanol
b- L’infiltration :
Passage de 60% d’éthanol à 60% de xylène (sert à solubiliser les lipides)
c- L’imprégnation:
Passage de 60% de xylène à 60% de paraffine liquide
d- L’inclusion :
Passage de 60% de paraffine liquide à 60% de paraffine solide
Cas Particulier :
Les techniques de préparations histologiques :
L’inclusion du tissu osseux :
Le tissu est trop dur donc cela ne peut pas se faire dans de la paraffine et cela pourrait casser la lame de rasoir.
Les solutions :
- Enlever le calcium : rend le tissu mou
- Utilisation d’une résine spécifique plastique
A) Le trichrome de Masson permet de mettre en évidence les noyaux, le cytoplasme et le collagène.
B) La coloration PAS permet de mettre en évidence les fibres élastiques.
C) La coloration argentique de Grimélius permet de mettre en évidence les fibres de réticuline.
D) La coloration argentique aux sels d’argents permet de mettre en évidence les cellules endocrines.
E) Aucune des propositions ci-dessus n’est exacte
QCM 3 : CONCERNANT LES COLORATIONS HISTOLOGIQUES, QUELLES SONT LA OU LES PROPOSITIONS EXACTES ?
17/08/2020 15
A) Le trichrome de Masson permet de mettre en évidence les noyaux, le cytoplasme et le collagène. VRAI
B) La coloration PAS permet de mettre en évidence les fibres élastiques. FAUX il met en évidence les cellules à mucus. Les fibres élastiques sont mis en évidence par l’orcéine.
C) La coloration argentique de Grimélius permet de mettre en évidence les fibres de réticuline. FAUX il met en
évidence les cellules endocrines.
D) La coloration argentique aux sels d’argents permet de mettre en évidence les cellules endocrines. FAUX il met en évidence les fibres de réticulines
E) Aucune des propositions ci-dessus n’est exacte
QCM 3 : CONCERNANT LES COLORATIONS HISTOLOGIQUES, QUELLES SONT LA OU LES PROPOSITIONS EXACTES ?
Les épithéliums
Rappel, QCM, points clés
Rappels
L ES
DIFFÉRENCIATIONS
DE SURFACE
17/08/2020 19
Les différenciations de surface
La surface libre de l’épithélium peut être pourvue de structures spécialisées, adaptées à la fonction de la cellule.
On peut avoir:
• une surface lisse : pas de différenciation
• une surface présentant des différenciations
Épithélium oesophagien Épithélium du canal épididymaire à stéréocils
Définition : Extensions/projections digitiformes de la surface apicale UNIQUEMENT
➢ Plateau strié
➢ Bordure en brosse
LES MICROVILLOSITÉS
Hauteur : 1-2 um Mobilité active Localisation : Entérocyte de
l’épithélium intestinal
Plateau strié
17/08/2020 21
Hauteur : 3-6 um Mobilité active
Localisation : tube
contourné proximal du néphron
Bordure en Brosse
17/08/2020 23
Structure d’une microvillosité
Pour la cohésion, les protéines de liaison : Actine et Terminale Web : villine et fimbrine MFA externes et MP : myosine I et ezrine MFA internes et MP : spectrine
Microvillosité
Terminal Web : ensemble des filaments parallèles à la MP
Cell coat : revêtement glycoprotéique au dessus de la MP (MET)
Cell coat
Terminal Web
17/08/2020 25
Stéréocils
• Hauteur : 10-15 um
• Pas de mobilité volontaire
• Localisation :
épithélium du canal
épidydimaire chez
l’homme
Les cils vibratiles
• Hauteur : 3-6 um
• Mobilité active
• Battements synchrones
• Localisation :
épithélium respiaratoire de la trachée et des
bronches
17/08/2020 27
Les cils vibratiles
Coupe transversale: 9 doublets
périphériques et un doublet central Coupe longitudinale :
9 triplets périphériques
Microscopie électronique
2 microtubules de tubulines
Bras de dynéïne
Replis membranaires intra- cytoplasmiques
• Visible uniquement en ME
• Extension vers l’intérieur de la cellule
• Localisation : épithélium pseudo
stratifié urinaire de la vessie
17/08/2020 29
Replis membranaires intra- cytoplasmiques
Vessie vide : l'épithélium est plus épais et les cellules sont en dômes de parapluies
Vessie pleine : donc l’épithélium est moins épais
Épithélium pseudo stratifié urinaire de la vessie
Les jonctions communicantes
• Organisation en connexons
• Permettent la communication entre deux cellules
• Permet de synchroniser les
réponses des cellules
17/08/2020 31
Les jonctions serrées
• Forme une ceinture qui entoure la cellule
• Permet une forte adhésion entre les cellules
• C’est une barrière par rapport à
l’espace intra-cellulaire
A) Les desmosomes ou macula adhaerens sont composés de microfilaments d’actine.
B) Les desmosomes sont constitués de desmoplakines et de plakoglobines.
C) Les jonctions zonula adhaerens sont composés de filaments intermédiaires de citokératine.
D) La zonula adhaerens sont constitués de caténines et de plakoglobines.
E)
Aucune des propositions ci-dessus n’est exacteQCM 4 : CONCERNANT LES JONCTIONS DE LA RÉGION LATÉRALE, QUELLES SONT LA OU LES PROPOSITIONS EXACTES ?
A) Les desmosomes ou macula adhaerens sont composés de microfilaments d’actine. FAUX ils sont composés de filaments intermédiaires.
B) Les desmosomes sont constitués de desmoplakines et de plakoglobines. VRAI
C) Les jonctions zonula adhaerens sont composés de filaments intermédiaires de citokératine. FAUX il s’agit de microfilaments d’actines.
D) La zonula adhaerens sont constitués de caténines et de plakoglobines. VRAI
E)
Aucune des propositions ci-dessus n’est exacteQCM 4 : CONCERNANT LES JONCTIONS DE LA RÉGION LATÉRALE, QUELLES SONT LA OU LES PROPOSITIONS EXACTES ?
17/08/2020 33
Concernant la région latérale :
Un tableau récapitulatif
Jonction de type macula adhaerens (=desmosome)
Jonction de type zonula adhaerens
Protéines de liaison : Les desmoplakines et les plakoglobines
Les caténines et les plakoglobines
La partie du cytosquelette impliqué :
Les filaments intermédiaires de cytokératine
Les microfilaments d’actines
Les molécules d’adhésions de type cadhérines :
Les desmogléines et les desmocollines
Les desmogléines et les desmocollines
Les autres confusions :
Il faut bien connaître les constituants de chaque jonction pour éviter de les confondre. Il y a aussi des jonctions au niveau de la région basale qui sont composés de
constituants à la fois identiques et aussi différents.
C’est pourquoi il peut y avoir certaines confusions entre les composants de chaque jonction.
17/08/2020 35
Les confusions peuvent être fait avec les hémidesmosomes et les contacts focaux.
Concernant la région basale :
Un tableau récapitulatif
Les hémidesmosomes Les contacts focaux
Protéines de liaison : Les desmoplakines Il y a : de l’alpha actinine, de la vinculine et de la taline.
La partie du cytosquelette impliqué :
Les filaments intermédiaires de cytokératine
Les microfilaments d’actines
Les molécules d’adhésions :
Ils sont de type intégrines (SAM)
Ils sont de type intégrines (SAM)
17/08/2020 37
Épithélium de revêtement
On y retrouve :
- Les revêtements cutanées avec l’épiderme, le derme et l’hypoderme.
- Les revêtements des cavités ayant un lien avec l’extérieur
- Les revêtements des cavités closes : - les cavités coelomiques
- l’ensemble cardio-vasculaire
Épithélium de revêtement
1) Les classifications
A- Nombre de couches de cellules :
- Plusieurs couches :
- Stratifié/pluri-stratifié - Une seule couche :
- Uni-stratifié/simple
- Pseudo-stratifié : toutes les cellules sont au contact avec la membrane basale !!
17/08/2020 39
Épithélium de revêtement
1) Les classifications B- La forme des cellules :
- Les cellules aplaties -> forment un épithélium pavimenteux
- Les cellules cubiques -> forment un épithélium cubique
- Les cellules prismatiques -> forment un épithélium prismatique
Épithélium de revêtement
17/08/2020 41
QCM 5 : CONCERNANT LES ÉPITHÉLIUMS GLANDULAIRES
EXOCRINE, QUELLES SONT LA OU LES PROPOSITIONS EXACTES ?
A) La glande de droite possède un aspect en nid d’abeille et un mode d’excrétion holocrine.
B) La glande de droite possède des vacuoles lipidiques et il s’agit d’une glande sébacée.
C) La glande de gauche possède des vacuoles lipidiques et un mode d’excrétion apocrine.
D) La glande de gauche possède un mode d’excrétion mérocrine et il s’agit d’une glande mammaires.
E) Aucune des propositions ci-dessus n’est exacte.
QCM 5 : CONCERNANT LES ÉPITHÉLIUMS GLANDULAIRES
EXOCRINE, QUELLES SONT LA OU LES PROPOSITIONS EXACTES ?
A) La glande de droite possède un aspect en nid d’abeille et un mode d’excrétion holocrine.
B) La glande de droite possède des vacuoles lipidiques et il s’agit d’une glande sébacée.
C) La glande de gauche possède des vacuoles lipidiques et un mode d’excrétion apocrine.
D) La glande de gauche possède un mode d’excrétion
mérocrine et il s’agit d’une glande mammaires. FAUX ce sont bien des glandes mammaires mais le mode d’excrétion est apocrine
17/08/2020 43
Tissu glandulaire exocrine
• Grain de sécrétion du côté apical
• Riche en mitochondries
• Riche en organites de synthèse:
REL,REG, appareil de Golgi
Cellules séreuses Cellules muqueuses
Produit de nature protéique
Essentiellement enzymes digestives
Élaborent et sécrètent du mucus=
Glycoprotéines Nombreuses
Mucus= Glycoprotéine + eau
Tissu glandulaire exocrine
NB: ce sont des glycoprotéines qui sont excrétées et lorsqu‘elles sortent de la cellule elles s’hydratent pour former le mucus
Cellules séreuses Cellules muqueuses
Protéique Glycoproteines
Grains de sécrétions petits et denses aux électrons en position apical
Grains de sécrétions très gros, peu denses en positions apicale
Noyau rond et visible en position basale
/
Cytoplasme foncé Cytoplasme plus clair qu’une cellule séreuse
17/08/2020 45
Tissu glandulaire exocrine
Caractéristiques à connaître
Tissu glandulaire exocrine
Muqueux
Séreux
17/08/2020 47
Tissu glandulaire exocrine
Cellule muqueuse:
- Cellule à pole apical
ouvert = cellule caliciforme - Aspect de forme de pied
de verre
- Localisation : épithélium respiratoire et intestinal
Tissu glandulaire exocrine
Cellule muqueuse:
- Cellule à pole apical fermé
- Localisation : Épithélium gastrique
17/08/2020 49
Tissu glandulaire exocrine
Modes de sécrétions exocrine:
• Mérocrine : le + fréquent, cellules séreuses et muqueuses
• Holocrine : glande sébacée
• Apocrine : glandes mammaires (en
lactation, glandes sudoripares)
Tissu glandulaire exocrine
Sécrétion holocrine:
Les noyaux pycnotiques
correspondent uniquement à ceux du haut, on ne parle
pas de noyau pycnotique
lorsque c’est proche de la
membrane
MERCI POUR VOTRE
ATTENTION
tutorat.ue8.pluripass@gmail.com
AVEZ-VOUS DES QUESTIONS ?