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Milieux utilisés pour la recherche de Salmonella

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Academic year: 2022

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Fiche Technique n°8 Milieux utilisés pour la recherche de Salmonella

Milieux d'enrichissement

Bouillon au vert malachite et au

chlorure de magnésium

Bouillon sélénite-

cystine Bouillon de Miiller-Kauffman Molécules

organiques azotées

Tryptone 4,5g 5g 7g

L-cystéine 10mg

Extrait de viande 1g

Extrait de levure 2g

Peptone 5g

Glucides Lactose 4g

Inhibiteurs Vert brillant - - 9,5mg

Oxalalte de vert

malachite 36mg

(sélénite) (tétrathionate) (MgCI2,6H2O)

Ions minéraux ajoutés

NaCI 7,2g 5g

KH2PO4 1,5g

Na2HPO4,12 H2O 9,9g

MgCI2,6 H2O 36g

NaHSeO3 (sélénite) 4g

Iode 6g

IK (iodure) 5g

Na2S2O3 40,7g

CaCO3 25g

Eau qsp 1dm3 1dm3 1dm3

L'iode ajouté réagit sur le thiosulfate pour donner le tétrathionate dans la réaction classique des dosages iodométriques. La quantité finale d'iodure est importante.

Il est probable que le vert malachite et la concentration élevée en chlorure de magnésium soient les deux agents sélectifs du milieu.

Milieux d'isolement

Gélose

SS Gélose

DCL Gélose

DCLS Gélose

Hektoen Gélose VB et RP Molécules organiques

azotées Peptone

Extrait de viande Extrait de levure

5g

5g 5g

5g 10g 12g

3g

10g 3g

Glucides Lactose

Saccharose Salicine

10g 10g 5g

5g 12g

12g 2g

10g 10g Autres molécules

carbonées

Citrate de sodium Citrate de fer III

10g 1g

8,5g 1g

10,5g 1,5g

Indicateur de sulfures Fer III présence présence présence

Inhibiteurs Désoxycholate Vert brillant Fuchsine

8,5g

0,3mg 5g 2,5 g 9g

40mg 5mg

Indicateur de pH pH final RN

25 mg 7,3

RN 20 mg

7,3

RN 30 mg

7,2

BBT 65mg

7,5

RP 90mg

6,9 Ions minéraux

ajoutés NaCI

K2HPO2

NaH2PO4

Na2S2O3 8,5g 5,4g 5g

5g

5g

1g 0,6g

Agar 15g 12g 12g 13,5g 12g

Eau qsp 1dm3 1dm3 1dm3 1dm3 1dm3

Fanny Demay – BTS BioAnalyses & Contrôles 1/2

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Ces milieux ne sont généralement pas autoclavables. La quantité d'eau contenue doit être mesurée avec précision. Signification des symboles et noms particuliers donnés à certains d'entre eux :

- SS : Salmonella-ShigelIa (bien que les Shigella ne cultivent pas très bien sur lui...) ; - DCL : désoxycholate citrate lactose (milieu de Hynes) ;

- DCLS : désoxycholate citrate lactose saccharose ;

- VB et RP : vert brillant et rouge de phénol (gélose d'Edel et Kampelmarcher, de composition proche du milieu de Kristensen) : Salmonella Typhi n'y cultive pas.

Fanny Demay – BTS BioAnalyses & Contrôles 2/2

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