Table des matières
I. INTRODUCTION 1
1. Les cascades de transduction de signaux 2 1.1. Les cascades de signalisation intracellulaire 3
1.1.1. La cascade de l’AMPc 3 1.1.2. Voie des phoshatidylinositols 5 1.1.3. Cascade impliquant des récepteurs à activité tyrosine kinase 6
1.1.3.1. La voie des MAPKs 6 1.1.3.2. La voie de la PI3K/Akt 8 1.2. Réponse nucléaire : l’exemple des complexes AP-1 9 1.3. Evènements précoces : l’induction de protooncogènes 10
2. Développement du cancer et invasion tumorale 11 2.1. La matrice extracellulaire 13 2.2. L’adhésion cellulaire 15
3. La thyroïde 16
3.1. Généralités 16
3.2. Fonctionnement de la glande thyroïde 16 3.3. Synthèse des hormones thyroïdiennes 16 3.4. Libération des hormones thyroïdiennes 17 3.5. Régulation du métabolisme thyroïdien 17 3.6. Actions de la TSH 18
4. Les pathologies thyroïdiennes 20
4.1. Généralités 20
4.2. Les adénomes autonomes hyperfonctionnels 20 4.3. Les carcinomes thyroïdiens 21 4.3.1. Les carcinomes papillaires 22 4.3.2. Les carcinomes folliculaires 23 4.3.3. Les carcinomes anaplasiques 23 4.4. Les facteurs de risques : les effets des radiations ionisantes 24 4.5. Les altérations géniques des tumeurs thyroïdiennes 24
4.5.1. Réarrangements Ret/PTC et NTRK1 25
4.5.2. Mutations B-Raf 27
4.5.3. Marqueurs moléculaires des tumeurs thyroïdiennes 28
5. Les microarrays 30
II. BUT DU TRAVAIL 31
III. RESULTATS ET DISCUSSION 34
1. Vue globale du travail 35 1.1. Etudes sur lame Perkin Elmer 35 1.2. Etudes sur lame VIB 37 1.3. Etudes Tissu-MicroArray 38 2. L’étude des profils d’expression des carcinomes papillaires thyroïdiens
sporadiques et post-Tchernobyl (article1) 39 3. L’étude de l’expression génique dans les carcinomes papillaires 41 4. Les adénomes autonomes hyperfonctionnels de la thyroïde (article 2) 46 5. La signature moléculaire des adénomes autonomes et des carcinomes papillaires 49
IV. CONCLUSIONS ET PERSPECTIVES 55
V. ANNEXES 61
1. Matériel et Méthodes 62
1.1. Solutions 62
1.2. Méthodologie 65
1.2.1. Extraction de l’ARN total 65 1.2.2. La technique des microarrays 65 1.2.3. La RT-PCR en temps réel (Taqman) 67 1.2.4. Les tissu-microarrays ou TMA 68 1.2.4.1. L’immunohistochimie 69 1.2.5. Le Western blot 69
1.2.5.1. Extraction et dosage des protéines 69 1.2.5.2. Séparation des protéines par SDS PAGE 70 1.2.5.3. Transfert des protéines 70 1.2.5.4. Immunodétection 71
2. Gènes différentiellement régulés dans les carcinomes papillaires (lames VIB) 72 2.1. Quelques gènes sous-exprimés dans les PTC 75 2.2. Quelques gènes surexprimés dans les PTC 77
3. Listes des gènes différentiellement régulés sur les lames MICROMAX
(Perkin-Elmer) 80
4. Données préexistantes sur l’expression génique dans les carcinomes papillaires 83
VI. BIBLIOGRAPHIE 85
