LA THERAPIE GENIQUE DANS LE DOMAINE DU CANCER: CAS DE TISAGENLECLEUCEL ET DE L’AXICABTAGENE CILOLEUCEL.

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MOHAMMED V DE RABAT

FACULTE DE MEDECINE ET DE PHARMACIE - RABAT

DOYENS HONORAIRES :

1962 – 1969 : Professeur Abdelmalek FARAJ 1969 – 1974 : Professeur Abdellatif BERBICH 1974 – 1981 : Professeur Bachir LAZRAK 1981 – 1989 : Professeur Taieb CHKILI

1989 – 1997 : Professeur Mohamed Tahar ALAOUI 1997 – 2003 : Professeur Abdelmajid BELMAHI 2003 - 2013 : Professeur Najia HAJJAJ – HASSOUNI

ADMINISTRATION :

Doyen

Professeur Mohamed ADNAOUI

Vice-Doyen chargé des Affaires Académiques et estudiantines

Professeur Brahim LEKEHAL

Vice-Doyen chargé de la Recherche et de la Coopération

Professeur Toufiq DAKKA

Vice-Doyen chargé des Affaires Spécifiques à la Pharmacie

Professeur Jamal TAOUFIK

Secrétaire Général

1 - ENSEIGNANTS-CHERCHEURS MEDECINS ET PHARMACIENS

PROFESSEURS :

DECEMBRE 1984

Pr. MAAOUNI Abdelaziz Médecine Interne – Clinique Royale

Pr. MAAZOUZI Ahmed Wajdi Anesthésie -Réanimation

Pr. SETTAF Abdellatif Pathologie Chirurgicale

NOVEMBRE ET DECEMBRE 1985

Pr. BENSAID Younes Pathologie Chirurgicale

JANVIER, FEVRIER ET DECEMBRE 1987

Pr. LACHKAR Hassan Médecine Interne

Pr. YAHYAOUI Mohamed Neurologie

DECEMBRE 1989

Pr. ADNAOUI Mohamed Médecine Interne –Doyen de la FMPR

Pr. OUAZZANI Taïbi Mohamed Réda Neurologie

JANVIER ET NOVEMBRE 1990

Pr. HACHIM Mohammed* Médecine-Interne

Pr. KHARBACH Aîcha Gynécologie -Obstétrique

Pr. TAZI Saoud Anas Anesthésie Réanimation

FEVRIER AVRIL JUILLET ET DECEMBRE 1991 Pr. AZZOUZI Abderrahim Anesthésie Réanimation- Doyen de FMPO

Pr. BAYAHIA Rabéa Néphrologie

Pr. BELKOUCHI Abdelkader Chirurgie Générale

Pr. BENCHEKROUN Belabbes Abdellatif Chirurgie Générale

Pr. BENSOUDA Yahia Pharmacie galénique

Pr. BERRAHO Amina Ophtalmologie

Pr. BEZAD Rachid Gynécologie Obstétrique Méd. Chef Maternité des

Orangers

Pr. CHERRAH Yahia Pharmacologie

Pr. CHOKAIRI Omar Histologie Embryologie

Pr. KHATTAB Mohamed Pédiatrie

Pr. SOULAYMANI Rachida Pharmacologie- Dir. du Centre National PV Rabat Pr. TAOUFIK Jamal Chimie thérapeutique V.D à la pharmacie+Dir. du CEDOC +

DECEMBRE 1992

Pr. AHALLAT Mohamed Chirurgie Générale Doyen de FMPT

Pr. BENSOUDA Adil Anesthésie Réanimation

Pr. CHAHED OUAZZANI Laaziza Gastro-Entérologie

Pr. CHRAIBI Chafiq Gynécologie Obstétrique

Pr. EL OUAHABI Abdessamad Neurochirurgie

Pr. FELLAT Rokaya Cardiologie

Pr. GHAFIR Driss* Médecine Interne

Pr. JIDDANE Mohamed Anatomie

Pr. TAGHY Ahmed Chirurgie Générale

Pr. ZOUHDI Mimoun Microbiologie

MARS 1994

Pr. BENJAAFAR Noureddine Radiothérapie

Pr. BEN RAIS Nozha Biophysique

Pr. CAOUI Malika Biophysique

Pr. CHRAIBI Abdelmjid

Endocrinologie et Maladies Métaboliques Doyen de la

FMPA

Pr. EL AMRANI Sabah Gynécologie Obstétrique Pr. EL BARDOUNI Ahmed Traumato-Orthopédie

Pr. EL HASSANI My Rachid Radiologie

Pr. ERROUGANI Abdelkader Chirurgie Générale – Directeur du CHIS-Rabat

Pr. ESSAKALI Malika Immunologie

Pr. ETTAYEBI Fouad Chirurgie Pédiatrique

Pr. HASSAM Badredine Dermatologie

Pr. IFRINE Lahssan Chirurgie Générale

Pr. MAHFOUD Mustapha Traumatologie – Orthopédie

Pr. RHRAB Brahim Gynécologie –Obstétrique

Pr. SENOUCI Karima Dermatologie

MARS 1994

Pr. ABBAR Mohamed* Urologie Directeur Hôpital My Ismail Meknès Pr. ABDELHAK M’barek Chirurgie – Pédiatrique

Pr. BENTAHILA Abdelali Pédiatrie

Pr. BENYAHIA Mohammed Ali Gynécologie – Obstétrique Pr. BERRADA Mohamed Saleh Traumatologie – Orthopédie Pr. CHERKAOUI Lalla Ouafae Ophtalmologie

Pr. LAKHDAR Amina Gynécologie Obstétrique

Pr. MOUANE Nezha Pédiatrie

MARS 1995

Pr. ABOUQUAL Redouane Réanimation Médicale

Pr. AMRAOUI Mohamed Chirurgie Générale

Pr. BARGACH Samir Gynécologie Obstétrique Pr. DRISSI KAMILI Med Nordine* Anesthésie Réanimation Pr. EL MESNAOUI Abbes Chirurgie Générale Pr. ESSAKALI HOUSSYNI Leila Oto-Rhino-Laryngologie

Pr. HDA Abdelhamid* Cardiologie Inspecteur du Service de Santé des FAR Pr. IBEN ATTYA ANDALOUSSI Ahmed Urologie

Pr. OUAZZANI CHAHDI Bahia Ophtalmologie

Pr. SEFIANI Abdelaziz Génétique

Pr. ZEGGWAGH Amine Ali Réanimation Médicale

DECEMBRE 1996

Pr. AMIL Touriya* Radiologie

Pr. BELKACEM Rachid Chirurgie Pédiatrie

Pr. BOULANOUAR Abdelkrim Ophtalmologie Pr. EL ALAMI EL FARICHA EL Hassan Chirurgie Générale

Pr. GAOUZI Ahmed Pédiatrie

Pr. MAHFOUDI M’barek* Radiologie

Pr. OUZEDDOUN Naima Néphrologie

Pr. ZBIR EL Mehdi* Cardiologie DirecteurHôp.Mil. d’Instruction Med V Rabat

NOVEMBRE 1997

Pr. ALAMI Mohamed Hassan Gynécologie-Obstétrique

Pr. BEN SLIMANE Lounis Urologie

Pr. BIROUK Nazha Neurologie

Pr. ERREIMI Naima Pédiatrie

Pr. FELLAT Nadia Cardiologie

Pr. KADDOURI Noureddine Chirurgie Pédiatrique

Pr. KOUTANI Abdellatif Urologie

Pr. LAHLOU Mohamed Khalid Chirurgie Générale

Pr. MAHRAOUI CHAFIQ Pédiatrie

Pr. TOUFIQ Jallal Psychiatrie Directeur Hôp.Ar-razi Salé

Pr. YOUSFI MALKI Mounia Gynécologie Obstétrique

NOVEMBRE 1998

Pr. BENOMAR ALI Neurologie Doyen de la FMP Abulcassis Pr. BOUGTAB Abdesslam Chirurgie Générale

Pr. ER RIHANI Hassan Oncologie Médicale

Pr. BENKIRANE Majid* Hématologie

JANVIER 2000

Pr. ABID Ahmed* Pneumo-phtisiologie

Pr. AIT OUAMAR Hassan Pédiatrie

Pr. BENJELLOUN Dakhama Badr.Sououd Pédiatrie

Pr. BOURKADI Jamal-Eddine Pneumo-phtisiologie Directeur Hôp. My Youssef Pr. CHARIF CHEFCHAOUNI Al Montacer Chirurgie Générale

Pr. ECHARRAB El Mahjoub Chirurgie Générale Pr. EL FTOUH Mustapha Pneumo-phtisiologie

Pr. EL MOSTARCHID Brahim* Neurochirurgie

Pr. MAHMOUDI Abdelkrim* Anesthésie-Réanimation Pr. TACHINANTE Rajae Anesthésie-Réanimation Pr. TAZI MEZALEK Zoubida Médecine Interne

NOVEMBRE 2000

Pr. AIDI Saadia Neurologie

Pr. AJANA Fatima Zohra Gastro-Entérologie

Pr. BENAMR Said Chirurgie Générale

Pr. CHERTI Mohammed Cardiologie

Pr. ECH-CHERIF EL KETTANI Selma Anesthésie-Réanimation

Pr. EL HASSANI Amine Pédiatrie - Directeur Hôp.Cheikh Zaid

Pr. EL KHADER Khalid Urologie

Pr. EL MAGHRAOUI Abdellah* Rhumatologie

Pr. GHARBI Mohamed El Hassan Endocrinologie et Maladies Métaboliques

Pr. MDAGHRI ALAOUI Asmae Pédiatrie

Pr. ROUIMI Abdelhadi* Neurologie

DECEMBRE 2000

Pr.ZOHAIR ABDELLAH * ORL

Pr. BALKHI Hicham* Anesthésie-Réanimation

Pr. BENABDELJLIL Maria Neurologie

Pr. BENAMAR Loubna Néphrologie

Pr. BENAMOR Jouda Pneumo-phtisiologie

Pr. BENELBARHDADI Imane Gastro-Entérologie

Pr. BENNANI Rajae Cardiologie

Pr. BENOUACHANE Thami Pédiatrie

Pr. BEZZA Ahmed* Rhumatologie

Pr. BOUCHIKHI IDRISSI Med Larbi Anatomie

Pr. BOUMDIN El Hassane* Radiologie

Pr. CHAT Latifa Radiologie

Pr. DAALI Mustapha* Chirurgie Générale

Pr. DRISSI Sidi Mourad* Radiologie

Pr. EL HIJRI Ahmed Anesthésie-Réanimation

Pr. EL MAAQILI Moulay Rachid Neuro-Chirurgie

Pr. EL MADHI Tarik Chirurgie-Pédiatrique

Pr. EL OUNANI Mohamed Chirurgie Générale

Pr. ETTAIR Said Pédiatrie - Directeur Hôp. d’EnfantsRabat

Pr. GAZZAZ Miloudi* Neuro-Chirurgie

Pr. HRORA Abdelmalek Chirurgie Générale

Pr. KABIRI EL Hassane* Chirurgie Thoracique Pr. LAMRANI Moulay Omar Traumatologie Orthopédie

Pr. LEKEHAL Brahim Chirurgie Vasculaire Périphérique Pr. MAHASSIN Fattouma* Médecine Interne

Pr. MEDARHRI Jalil Chirurgie Générale

Pr. MIKDAME Mohammed* Hématologie Clinique

Pr. MOHSINE Raouf Chirurgie Générale

Pr. NOUINI Yassine Urologie - Directeur Hôpital Ibn Sina

Pr. SABBAH Farid Chirurgie Générale

Pr. SEFIANI Yasser Chirurgie Vasculaire Périphérique Pr. TAOUFIQ BENCHEKROUN Soumia Pédiatrie

DECEMBRE 2002

Pr. AL BOUZIDI Abderrahmane* Anatomie Pathologique

Pr. AMEUR Ahmed * Urologie

Pr. AMRI Rachida Cardiologie

Pr. AOURARH Aziz* Gastro-Entérologie

Pr. BAMOU Youssef * Biochimie-Chimie

Pr. BELMEJDOUB Ghizlene* Endocrinologie et Maladies Métaboliques

Pr. BENZEKRI Laila Dermatologie

Pr. BENZZOUBEIR Nadia Gastro-Entérologie Pr. BERNOUSSI Zakiya Anatomie Pathologique Pr. BICHRA Mohamed Zakariya* Psychiatrie

Pr. CHOHO Abdelkrim * Chirurgie Générale

Pr. CHKIRATE Bouchra Pédiatrie

Pr. EL ALAMI EL Fellous Sidi Zouhair Chirurgie Pédiatrique

Pr. EL HAOURI Mohamed * Dermatologie

Pr. FILALI ADIB Abdelhai Gynécologie Obstétrique

Pr. HAJJI Zakia Ophtalmologie

Pr. IKEN Ali Urologie

Pr. JAAFAR Abdeloihab* Traumatologie Orthopédie

Pr. KRIOUILE Yamina Pédiatrie

Pr. MABROUK Hfid* Traumatologie Orthopédie

Pr. MOUSSAOUI RAHALI Driss* Gynécologie Obstétrique Pr. OUJILAL Abdelilah Oto-Rhino-Laryngologie

Pr. RACHID Khalid * Traumatologie Orthopédie

Pr. RAISS Mohamed Chirurgie Générale

Pr. RGUIBI IDRISSI Sidi Mustapha* Pneumo-phtisiologie

Pr. RHOU Hakima Néphrologie

Pr. SIAH Samir * Anesthésie Réanimation

Pr. THIMOU Amal Pédiatrie

JANVIER 2004

Pr. ABDELLAH El Hassan Ophtalmologie

Pr. AMRANI Mariam Anatomie Pathologique

Pr. BENBOUZID Mohammed Anas Oto-Rhino-Laryngologie

Pr. BENKIRANE Ahmed* Gastro-Entérologie

Pr. BOULAADAS Malik Stomatologie et Chirurgie Maxillo-faciale

Pr. BOURAZZA Ahmed* Neurologie

Pr. CHAGAR Belkacem* Traumatologie Orthopédie

Pr. CHERRADI Nadia Anatomie Pathologique

Pr. EL FENNI Jamal* Radiologie

Pr. EL HANCHI ZAKI Gynécologie Obstétrique

Pr. EL KHORASSANI Mohamed Pédiatrie Pr. EL YOUNASSI Badreddine* Cardiologie

Pr. HACHI Hafid Chirurgie Générale

Pr. JABOUIRIK Fatima Pédiatrie

Pr. KHARMAZ Mohamed Traumatologie Orthopédie

Pr. MOUGHIL Said Chirurgie Cardio-Vasculaire

Pr. OUBAAZ Abdelbarre * Ophtalmologie

Pr. TARIB Abdelilah* Pharmacie Clinique

Pr. TIJAMI Fouad Chirurgie Générale

Pr. ZARZUR Jamila Cardiologie

JANVIER 2005

Pr. ABBASSI Abdellah Chirurgie Réparatrice et Plastique Pr. AL KANDRY Sif Eddine* Chirurgie Générale

Pr. ALLALI Fadoua Rhumatologie

Pr. AMAZOUZI Abdellah Ophtalmologie

Pr. AZIZ Noureddine* Radiologie

Pr. BAHIRI Rachid Rhumatologie Directeur Hôp. Al Ayachi Salé

Pr. BARKAT Amina Pédiatrie

Pr. BENYASS Aatif Cardiologie

Pr. DOUDOUH Abderrahim* Biophysique

Pr. EL HAMZAOUI Sakina * Microbiologie

Pr. HAJJI Leila Cardiologie (mise en disponibilité

Pr. HESSISSEN Leila Pédiatrie

Pr. JIDAL Mohamed* Radiologie

Pr. LAAROUSSI Mohamed Chirurgie Cardio-vasculaire

Pr. LYAGOUBI Mohammed Parasitologie

Pr. RAGALA Abdelhak Gynécologie Obstétrique

Pr. SBIHI Souad Histo-Embryologie Cytogénétique

AVRIL 2006

Pr. ACHEMLAL Lahsen* Rhumatologie

Pr. AKJOUJ Said* Radiologie

Pr. BELMEKKI Abdelkader* Hématologie

Pr. BENCHEIKH Razika O.R.L

Pr. BIYI Abdelhamid* Biophysique

Pr. BOUHAFS Mohamed El Amine Chirurgie - Pédiatrique

Pr. BOULAHYA Abdellatif* Chirurgie Cardio – Vasculaire. Pr. CHENGUETI ANSARI Anas Gynécologie Obstétrique

Pr. DOGHMI Nawal Cardiologie

Pr. FELLAT Ibtissam Cardiologie

Pr. FAROUDY Mamoun Anesthésie Réanimation

Pr. HARMOUCHE Hicham Médecine Interne

Pr. HANAFI Sidi Mohamed* Anesthésie Réanimation Pr. IDRISS LAHLOU Amine* Microbiologie

Pr. JROUNDI Laila Radiologie

Pr. KARMOUNI Tariq Urologie

Pr. KILI Amina Pédiatrie

Pr. KISRA Hassan Psychiatrie

Pr. KISRA Mounir Chirurgie – Pédiatrique

Pr. LAATIRIS Abdelkader* Pharmacie Galénique Pr. LMIMOUNI Badreddine* Parasitologie

Pr. MANSOURI Hamid* Radiothérapie

Pr. OUANASS Abderrazzak Psychiatrie

Pr. SAFI Soumaya* Endocrinologie

Pr. SEKKAT Fatima Zahra Psychiatrie

Pr. SOUALHI Mouna Pneumo – Phtisiologie

Pr. TELLAL Saida* Biochimie

Pr. ZAHRAOUI Rachida Pneumo – Phtisiologie

DECEMBRE 2006

Pr SAIR Khalid Chirurgie générale Dir. Hôp.Av.Marrakech

OCTOBRE 2007

Pr. ABIDI Khalid Réanimation médicale

Pr. ACHACHI Leila Pneumo phtisiologie

Pr. ACHOUR Abdessamad* Chirurgie générale

Pr. AIT HOUSSA Mahdi * Chirurgie cardio vasculaire Pr. AMHAJJI Larbi * Traumatologie orthopédie

Pr. AOUFI Sarra Parasitologie

Pr. BAITE Abdelouahed * Anesthésie réanimation Directeur ERSSM Pr. BALOUCH Lhousaine * Biochimie-chimie

Pr. BOUTIMZINE Nourdine Ophtalmologie Pr. CHERKAOUI Naoual * Pharmacie galénique Pr. EHIRCHIOU Abdelkader * Chirurgie générale

Pr. EL BEKKALI Youssef * Chirurgie cardio-vasculaire Pr. EL ABSI Mohamed Chirurgie générale

Pr. EL MOUSSAOUI Rachid Anesthésie réanimation

Pr. EL OMARI Fatima Psychiatrie

Pr. GHARIB Noureddine Chirurgie plastique et réparatrice

Pr. HADADI Khalid * Radiothérapie

Pr. ICHOU Mohamed * Oncologie médicale

Pr. ISMAILI Nadia Dermatologie

Pr. KEBDANI Tayeb Radiothérapie

Pr. LALAOUI SALIM Jaafar * Anesthésie réanimation

Pr. LOUZI Lhoussain * Microbiologie

Pr. MADANI Naoufel Réanimation médicale

Pr. MAHI Mohamed * Radiologie

Pr. MARC Karima Pneumo phtisiologie

Pr. MASRAR Azlarab Hématologie biologique

Pr. MRANI Saad * Virologie

Pr. OUZZIF Ez zohra * Biochimie-chimie

Pr. RABHI Monsef * Médecine interne

Pr. RADOUANE Bouchaib* Radiologie

Pr. SEFFAR Myriame Microbiologie

Pr. SEKHSOKH Yessine * Microbiologie

Pr. SIFAT Hassan * Radiothérapie

Pr. TABERKANET Mustafa * Chirurgie vasculaire périphérique

Pr. TACHFOUTI Samira Ophtalmologie

Pr. TAJDINE Mohammed Tariq* Chirurgie générale Pr. TANANE Mansour * Traumatologie-orthopédie

Pr. TLIGUI Houssain Parasitologie

Pr. TOUATI Zakia Cardiologie

DECEMBRE 2008

Pr TAHIRI My El Hassan* Chirurgie Générale

MARS 2009

Pr. ABOUZAHIR Ali * Médecine interne

Pr. AGADR Aomar * Pédiatrie

Pr. AIT ALI Abdelmounaim * Chirurgie Générale Pr. AIT BENHADDOU El Hachmia Neurologie

Pr. AKHADDAR Ali * Neuro-chirurgie

Pr. ALLALI Nazik Radiologie

Pr. ARKHA Yassir Neuro-chirurgie Directeur Hôp.des Spécialités Pr. BELYAMANI Lahcen* Anesthésie Réanimation

Pr. BJIJOU Younes Anatomie

Pr. BOUHSAIN Sanae * Biochimie-chimie

Pr. BOUI Mohammed * Dermatologie

Pr. BOUNAIM Ahmed * Chirurgie Générale

Pr. BOUSSOUGA Mostapha * Traumatologie-orthopédie

Pr. CHTATA Hassan Toufik * Chirurgie Vasculaire Périphérique

Pr. DOGHMI Kamal * Hématologie clinique

Pr. EL MALKI Hadj Omar Chirurgie Générale Pr. EL OUENNASS Mostapha* Microbiologie

Pr. ENNIBI Khalid * Médecine interne

Pr. FATHI Khalid Gynécologie obstétrique

Pr. HASSIKOU Hasna * Rhumatologie

Pr. KABBAJ Nawal Gastro-entérologie

Pr. KABIRI Meryem Pédiatrie

Pr. KARBOUBI Lamya Pédiatrie

Pr. LAMSAOURI Jamal * Chimie Thérapeutique Pr. MARMADE Lahcen Chirurgie Cardio-vasculaire

Pr. MESKINI Toufik Pédiatrie

Pr. MESSAOUDI Nezha * Hématologie biologique

Pr. MSSROURI Rahal Chirurgie Générale

Pr. NASSAR Ittimade Radiologie

Pr. OUKERRAJ Latifa Cardiologie

Pr. RHORFI Ismail Abderrahmani * Pneumo-Phtisiologie

OCTOBRE 2010

Pr. ALILOU Mustapha Anesthésie réanimation

Pr. AMEZIANE Taoufiq* Médecine Interne

Pr. BELAGUID Abdelaziz Physiologie

Pr. CHADLI Mariama* Microbiologie

Pr. CHEMSI Mohamed* Médecine Aéronautique

Pr. DAMI Abdellah* Biochimie- Chimie

Pr. DARBI Abdellatif* Radiologie

Pr. DENDANE Mohammed Anouar Chirurgie Pédiatrique

Pr. EL HAFIDI Naima Pédiatrie

Pr. EL KHARRAS Abdennasser* Radiologie

Pr. EL MAZOUZ Samir Chirurgie Plastique et Réparatrice

Pr. EL SAYEGH Hachem Urologie

Pr. ERRABIH Ikram Gastro-Entérologie

Pr. LAMALMI Najat Anatomie Pathologique

Pr. MOSADIK Ahlam Anesthésie Réanimation

Pr. MOUJAHID Mountassir* Chirurgie Générale

Pr. NAZIH Mouna* Hématologie

DECEMBRE 2010

Pr.ZNATI Kaoutar Anatomie Pathologique

MAI 2012

Pr. AMRANI Abdelouahed Chirurgie pédiatrique Pr. ABOUELALAA Khalil * Anesthésie Réanimation Pr. BENCHEBBA Driss * Traumatologie-orthopédie

Pr. DRISSI Mohamed * Anesthésie Réanimation

Pr. EL ALAOUI MHAMDI Mouna Chirurgie Générale Pr. EL KHATTABI Abdessadek * Médecine Interne Pr. EL OUAZZANI Hanane * Pneumophtisiologie

Pr. ER-RAJI Mounir Chirurgie Pédiatrique

Pr. JAHID Ahmed Anatomie Pathologique

Pr. MEHSSANI Jamal * Psychiatrie

Pr. RAISSOUNI Maha * Cardiologie

* Enseignants Militaires FEVRIER 2013

Pr.AHID Samir Pharmacologie

Pr.AIT EL CADI Mina Toxicologie

Pr.AMRANI HANCHI Laila Gastro-Entérologie

Pr.AMOR Mourad Anesthésie Réanimation

Pr.AWAB Almahdi Anesthésie Réanimation

Pr.BELAYACHI Jihane Réanimation Médicale

Pr.BELKHADIR Zakaria Houssain Anesthésie Réanimation

Pr.BENCHEKROUN Laila Biochimie-Chimie

Pr.BENKIRANE Souad Hématologie

Pr.BENNANA Ahmed* Informatique Pharmaceutique

Pr.BENSGHIR Mustapha * Anesthésie Réanimation

Pr.BENYAHIA Mohammed * Néphrologie

Pr.BOUATIA Mustapha Chimie Analytique et Bromatologie Pr.BOUABID Ahmed Salim* Traumatologie orthopédie

Pr BOUTARBOUCH Mahjouba Anatomie

Pr.CHAIB Ali * Cardiologie

Pr.DENDANE Tarek Réanimation Médicale

Pr.DINI Nouzha * Pédiatrie

Pr.ECH-CHERIF EL KETTANI Mohamed Ali Anesthésie Réanimation Pr.ECH-CHERIF EL KETTANI Najwa Radiologie

Pr.EL FATEMI NIZARE Neuro-chirurgie

Pr.EL GUERROUJ Hasnae Médecine Nucléaire

Pr.EL JAOUDI Rachid * Toxicologie

Pr.EL KABABRI Maria Pédiatrie

Pr.EL KHANNOUSSI Basma Anatomie Pathologique

Pr.EL KHLOUFI Samir Anatomie

Pr.EL KORAICHI Alae Anesthésie Réanimation

Pr.EN-NOUALI Hassane * Radiologie

Pr.ERRGUIG Laila Physiologie

Pr.FIKRI Meryem Radiologie

Pr.GHFIR Imade Médecine Nucléaire

Pr.IMANE Zineb Pédiatrie

Pr.IRAQI Hind Endocrinologie et maladies métaboliques

Pr.KABBAJ Hakima Microbiologie

Pr.KADIRI Mohamed * Psychiatrie

Pr.MAAMAR Mouna Fatima Zahra Médecine Interne

Pr.MEDDAH Bouchra Pharmacologie

Pr.MELHAOUI Adyl Neuro-chirurgie

Pr.MRABTI Hind Oncologie Médicale

Pr.NEJJARI Rachid Pharmacognosie

Pr.OUBEJJA Houda Chirugie Pédiatrique

Pr.OUKABLI Mohamed * Anatomie Pathologique

Pr.RAHALI Younes Pharmacie Galénique

Pr.RATBI Ilham Génétique

Pr.RAHMANI Mounia Neurologie

Pr.REDA Karim * Ophtalmologie

Pr.REGRAGUI Wafa Neurologie

Pr.RKAIN Hanan Physiologie

Pr.ROSTOM Samira Rhumatologie

Pr.ROUAS Lamiaa Anatomie Pathologique

Pr.ROUIBAA Fedoua * Gastro-Entérologie

Pr SALIHOUN Mouna Gastro-Entérologie

Pr.SAYAH Rochde Chirurgie Cardio-Vasculaire

Pr.SEDDIK Hassan * Gastro-Entérologie

Pr.ZERHOUNI Hicham Chirurgie Pédiatrique

AVRIL 2013

Pr.EL KHATIB MOHAMED KARIM * Stomatologie et Chirurgie Maxillo-faciale

MAI 2013

Pr.BOUSLIMAN Yassir Toxicologie

MARS 2014

Pr. ACHIR Abdellah Chirurgie Thoracique

Pr.BENCHAKROUN Mohammed * Traumatologie- Orthopédie

Pr.BOUCHIKH Mohammed Chirurgie Thoracique

Pr. EL KABBAJ Driss * Néphrologie

Pr. EL MACHTANI IDRISSI Samira * Biochimie-Chimie

Pr. HARDIZI Houyam Histologie- Embryologie-Cytogénétique

Pr. HASSANI Amale * Pédiatrie

Pr. HERRAK Laila Pneumologie

Pr. JANANE Abdellah * Urologie

Pr. JEAIDI Anass * Hématologie Biologique

Pr. KOUACH Jaouad* Gynécologie-Obstétrique

Pr. LEMNOUER Abdelhay* Microbiologie

Pr. MAKRAM Sanaa * Pharmacologie

Pr. OULAHYANE Rachid* Chirurgie Pédiatrique

Pr. RHISSASSI Mohamed Jaafar CCV

Pr. SABRY Mohamed* Cardiologie

Pr. SEKKACH Youssef* Médecine Interne

Pr. TAZI MOUKHA Zakia Gynécologie-Obstétrique

AVRIL 2014

PROFESSEURS AGREGES :

DECEMBRE 2014

Pr. ABILKASSEM Rachid* Pédiatrie

Pr. AIT BOUGHIMA Fadila Médecine Légale

Pr. BEKKALI Hicham * Anesthésie-Réanimation

Pr. BENAZZOU Salma Chirurgie Maxillo-Faciale

Pr. BOUABDELLAH Mounya Biochimie-Chimie

Pr. BOUCHRIK Mourad* Parasitologie

Pr. DERRAJI Soufiane* Pharmacie Clinique

Pr. DOBLALI Taoufik* Microbiologie

Pr. EL AYOUBI EL IDRISSI Ali Anatomie

Pr. EL GHADBANE Abdedaim Hatim* Anesthésie-Réanimation

Pr. EL MARJANY Mohammed* Radiothérapie

Pr. FEJJAL Nawfal Chirurgie Réparatrice et Plastique

Pr. JAHIDI Mohamed* O.R.L

Pr. LAKHAL Zouhair* Cardiologie

Pr. OUDGHIRI NEZHA Anesthésie-Réanimation

Pr. RAMI Mohamed Chirurgie Pédiatrique

Pr. SABIR Maria Psychiatrie

Pr. SBAI IDRISSI Karim* Médecine préventive, santé publique et Hyg.

AOUT 2015

Pr. MEZIANE Meryem Dermatologie

Pr. TAHRI Latifa Rhumatologie

JANVIER 2016

Pr. BENKABBOU Amine Chirurgie Générale

Pr. EL ASRI Fouad* Ophtalmologie

Pr. ERRAMI Noureddine* O.R.L

Pr. NITASSI Sophia O.R.L

JUIN 2017

Pr. ABI Rachid* Microbiologie

Pr. ASFALOU Ilyasse* Cardiologie

Pr. BOUAYTI El Arbi* Médecine préventive, santé publique et Hyg.

Pr. BOUTAYEB Saber Oncologie Médicale

Pr. EL GHISSASSI Ibrahim Oncologie Médicale

Pr. OURAINI Saloua* O.R.L

Pr. RAZINE Rachid Médecine préventive, santé publique et Hyg.

Pr. ZRARA Abdelhamid* Immunologie

2 - ENSEIGNANTS-CHERCHEURS SCIENTIFIQUES

PROFESSEURS/Prs. HABILITES

Pr. ABOUDRAR Saadia Physiologie

Pr. ALAMI OUHABI Naima Biochimie-chimie

Pr. ALAOUI KATIM Pharmacologie

Pr. ALAOUI SLIMANI Lalla Naïma Histologie-Embryologie

Pr. ANSAR M’hammed Chimie Organique et Pharmacie Chimique

Pr .BARKIYOU Malika Histologie-Embryologie

Pr. BOUHOUCHE Ahmed Génétique Humaine

Pr. BOUKLOUZE Abdelaziz Applications Pharmaceutiques Pr. CHAHED OUAZZANI Lalla Chadia Biochimie-chimie

Pr. DAKKA Taoufiq Physiologie

Pr. FAOUZI Moulay El Abbes Pharmacologie

Pr. IBRAHIMI Azeddine Biologie moléculaire/Biotechnologie

Pr. KHANFRI Jamal Eddine Biologie

Pr. OULAD BOUYAHYA IDRISSI Med Chimie Organique

Pr. REDHA Ahlam Chimie

Pr. TOUATI Driss Pharmacognosie

Pr. ZAHIDI Ahmed Pharmacologie

Mise à jour le 10/10/2018 Khaled Abdellah

A mon très cher Père

Abderrahmane JERROUNDI

Celui qui a toujours été mon model dans cette vie, qui a toujours été là pour me

pousser à être la meilleure de ce que je suis.

Celui qui m’a appris que le savoir est la plus précieuse valeur à suivre.

Je te serai cher père reconnaissante toute ma vie, pour tout le mal que tu t’es

donné pour moi à chaque étape de ma vie, pour ta patience, ton amour et tes

sacrifices.

Rien au monde ne saurait exprimer toute ma gratitude et le respect que je porte

pour toi.

Ce titre de Docteur en Pharmacie, je te le dédie tout particulièrement.

Je t’aime papa.

A ma très chère Mère

Malika NAITI

Aucune dédicace au monde aussi éloquent soit-elle ne saura rendre toutes les

sacrifices qu’elle a consentis pour moi depuis ma naissance à ce jour.

Je t’aime Maman, tu es mon ange gardien à travers tes bénédictions et je te dois

A mon très cher frère

Mohammed JERROUNDI

Aucun mot ne saurait exprimer l’amour, le respect et la gratitude que j’ai pour toi.

À travers ces années, tu étais le bouclier qui me protège à chaque fois du mal, la

première personne qui me vient à l’esprit à l’heure du besoin, sans toi je ne serai jamais

arrivé où je suis maintenant.

Je te souhaite tout le bonheur et la réussite au monde, parce que tu mérites d’être

heureux

A ma très chère sœur

Rajae JERROUNDI

Ils disent qu’une sœur est une deuxième maman, pour moi c’est exactement le cas.

Même de loin, tu ne m’as jamais privé de ton amour ni ton affection, t’essayais

toujours de me rendre heureuse par tous les moyens.

Tu m’as toujours gardé proche et tu étais ma confidente à travers ces années.

Je souhaite de tout mon cœur que tu réaliseras tes rêves un jour, que je te verrai

épanouie et fière de toi-même, car sœur tu es magnifique et tu mérites le bonheur.

Ce succès est le nôtre.

Je t’adore ma chérie.

A ma très chère belle-sœur

Houda SALHI

Je te remercie pour ton soutien continu.

Je suis chanceuse de t’avoir à mes côtés.

Puisses-tu trouver dans son travail le témoin de mon amour et de mon affection.

A mes chers amis

Je ne peux trouver les mots justes et sincères pour vous exprimer mon affection et

mes pensées, vous êtes pour moi des frères et sœurs et des amis sur qui je peux

compter.

En témoignage de l’amitié qui nous uni et des souvenirs de tous les moments que

nous avons passé ensemble, je vous dédie ce travail et je vous souhaite une vie

Aux familles

JERROUNDI

NAITI

Veuillez trouver dans ce travail l’expression de mon respect

Le plus profond et mon affection la plus sincère.

A notre maître et président de thèse

Monsieur Rachid EL JAOUDI

Professeur de Toxicologie

Vous avez aimablement accepté de présider le jury de cette thèse, nous en sommes

touchés.

Nous vous exprimons notre grande admiration pour vos hautes qualités morales,

humaines et professionnelles.

Avec tout le respect que nous vous devons, veuillez trouver ici, l’expression de

notre profond respect et nos vifs remerciements.

A notre maître et rapporteur de thèse

Monsieur Azzedine IBRAHIMI

Professeur de Biologie Moléculaire

Je ne saurais exprimer ma reconnaissance pour votre implication personnelle dans

ce travail. Tous mes remerciements à vous pour votre confiance en moi en

m’octroyant ce sujet de thèse, pour votre constante disponibilité.

Malgré vos obligations professionnelles et familiales vous m’avez toujours

réservé un accueil chaleureux. C’est avec une joie

et un plaisir immense que j’exprime ma gratitude pour

tous vos efforts déployés pour la réalisation de ce travail. Merci

A notre maître et juge de thèse

Madame Mouna OUADGHIRI

Professeur de microbiologie et biologie moléculaire

Nous sommes sensibles à l’honneur que vous nous faites en acceptant de

participer au jury de notre thèse et très touchés par la gentillesse avec laquelle

vous nous avez toujours accueillis.

Puisse ce travail être pour nous, l’occasion de vous exprimer notre profond

respect et notre gratitude la plus sincère.

A notre maître et juge de thèse

Madame Laila HESSISEN

Professeur de Pédiatrie

Vous nous faites l’honneur d’accepter avec une très grande amabilité de siéger

parmi notre jury de thèse.

Veuillez accepter ce travail maître, en gage de notre grand respect et notre

profonde reconnaissance.

Liste

ABREVIATIONS :

ADN db : ADN double brin

AEG : Altération de l’Etat Général

ASCT : Greffe Autologue de Cellules Souches

CAR : Récepteurs Antigéniques Chimériques

CD 9 : Classe de Différenciation 19

Cmax : Concentration Maximale

CMH : Complexe Majeur d’Histocompatibilité

CPA : Cellules Présentatrices d’Antigènes

CR : Complete Response Reported

CRS : Syndrome de Relargage Cytokinique

EFS : Survie Sans Evènement

EMA : L'Agence Européenne des Médicaments

FDA : Food and Drug administration

HSCT/ GCSH : Greffe de Cellules Souches Hématopoïétiques

IHC : Immunohistochimie

LAB : Leucémie Aigue Biphénotypique

LAL r/r : Leucémie Aigüe Lymphoblastique récurrente ou réfractaire

LAL : Leucémie Aigue Lymphoblastique

LB : Lymphocyte B

Lh : Lymphocyte Helper

LT : lymphocyte T

NFS : Numération de Formule Sanguine

OMS : Organisation Mondiale de la santé

PK : Pharmacocinétique

RC : Rémission Complète

scFv : Single Chain Fragment Variable

SG : Survie Globale

TCR : Récepteur des Lymphocytes T

Liste

Liste de figures

Figure 1 : Chronologie montrant le développement de l'approche de la thérapie génique ...5 Figure 2 : Les indications traitées par les essais cliniques de thérapie génique ...6 Figure 3: Nombre d'essais cliniques de thérapie génique approuvés dans le monde entier entre 1989 et 2017 ...7 Figure 4:Stratégies de découverte de ligands-médicaments. Approche structurale et approche par criblage ... 11 Figure 5: Organisation génomique d'un vecteur dérivé à partir d'un virus adéno-associé (AAV). Le génome parental se compose principalement de réplicase codant pour le rep, le cap et les protéines structurelles. L’expression des protéines AAV est pilotée par les promoteurs p5, p19 et 40 et toutes les transcriptions partagent le même poly (A) ... 17 Figure 6 : Thérapie génique in-vivo et ex-vivo ... 19 Figure 7: Structure du récepteur de l'antigène chimérique (CAR) ... 32 Figure 8: Le processus de la thérapie par les cellules CAR-T ... 34 Figure 9: Les différentes générations des cellules CAR-T ... 36 Figure 10: Les principales sociétés développant des cellules CAR-T. ... 47 Figure 11: Schéma de l’hématopoïèse physiologiquement normale ... 51 Figure 12: Rôle des anomalies génétiques dans la leucémogénèse des LAL B (Mullighan CG. Hematology 2012) ... 53 Figure 13: Classification des leucémies aiguës lymphoblastiques selon l'OMS[61]. ... 55 Figure 14: L'index de pronostic international de la DLBCL [ ... 75 Figure 15: Schéma montrant les lignes de traitement du DLBCL ... 82 Figure 16: Les obstacles de l’immunité anti-tumorale dans les tumeurs malignes des cellules B et comment la technologie CAR pourrait les résoudre (A), et la représentation schématique d’une CAR (B)

Introduction

...1

Partie 1 : Généralités sur la thérapie génique

...3 I. Histoire de la thérapie génique dans le domaine du cancer ...4 II. Thérapie génique en quelques chiffres ...6 1. Catégories de maladies ciblées par la thérapie génique ...6 2. Nombre d’essais cliniques en thérapie génique ...6 3. Progrès et tendances actuelles de thérapie génique ...8 III. Les techniques de traitement par la thérapie génique ...9 1. L’objectif thérapeutique du « gène médicament » : ...9 1.1. Les stratégies thérapeutiques en thérapie génique : ...9 1.2. Le « gène-médicament »... 11 1.2.1. Le « gène médicament » ... 12 1.2.2. La protéine-médicament : ... 12 1.2.3. Le ligand-médicament ... 12 2. Transfert du gène ... 13 2.1. Vecteurs non viraux... 14 2.2. Les vecteurs viraux ... 15 2.2.1. Les vecteurs rétroviraux ... 15 2.2.2. Les vecteurs lentiviraux ... 16 2.2.3. Les vecteurs adénoviraux... 16 2.2.4. Les adéno-associés (AAV) ... 17 2.2.5. Les baculovirus : ... 18 2.2.6. Les virus de l’herpès simplex (HSV) ... 18 2.2.7. Les poxvirus ... 19 3. Traitement par thérapie génique ex vivo, in vivo ... 19 3.1. Traitement par la thérapie génique ex vivo ... 20 3.1.1. Modification génétiques des cellules... 21 3.1.2. Le choix du vecteur ... 21 3.2. Le traitement par la thérapie génique in vivo ... 22

IV. Limites de la thérapie génique ... 24 V. Les cellules CAR-T : ... 27 1. L’immunothérapie anti-tumorale ... 27 1.1. Effecteurs de l’immunité anti-tumorale... 28 1.1.1. Les LT-CD 8 dits cytotoxiques ... 28 1.1.2. Les LT-CD4 (auxiliaire ou « helper ») ... 28 1.2. Types de l’immunothérapie anti-tumorale : ... 29 2. Principe des cellules CAR-T ... 29 3. Mécanisme immunologique : ... 30 3.1. Les lymphocytes T cytotoxiques ... 30 3.2. Objectifs de la reprogrammation génétique ... 31 3.3. Structure et fonctionnement du récepteur antigénique chimérique ... 31 3.3.1. Structure générale: ... 31 3.3.2. Fonctionnement des CAR : ... 33 3.4. Pharmacocinétique des cellules CAR-T: ... 34 4. Les différentes générations de CARs ... 35 4.1. La 1ère génération : ... 36 4.2. La 2ème génération : ... 37 4.3. La 3ème génération : ... 37 4.4. 4ème génération : les TRUCKS ou « armored CARs » ... 38 4.5. Les CAR-T universelles : ... 38 4.6. Cellules CAR-T ciblées sur CD19 ... 38 5. Processus de fabrication des médicaments... 39 5.1. Approche autologue ... 39 5.2. Approche allogénique ... 40 6. La toxicité des cellules CAR-T : ... 40 6.1. Le syndrome de relargage cytokinique :... 40 6.2. Toxicités neurologiques : ... 43 6.3. Toxicité « On Target/Off Tumor » : Toxicité sur la tumeur cible / hors cible ... 44 7. Efficacité thérapeutique ... 45

8. Rôle des vecteurs : ... 45 9. Les principaux acteurs : ... 46

Partie 2 : Exemple de Tisagenlecleucel dans le traitement des leucémies

aigues lymphoblastiques

... 48

I. Généralités : ... 50 II. Physiopathologie : ... 52 III. Classification des LAL ... 54 IV. Diagnostic ... 56 1. Aspect clinique : ... 56 2. Diagnostic biologique : ... 57 2.1. Hémogramme ... 57 2.2. Myélogramme : ... 58 2.3. Biopsie ostéo-médullaire ... 58 2.4. Etude cytochimique : ... 58 2.5. Immunophénotypage : ... 59 2.6. La cytogénétique : ... 59 2.7. Biologie moléculaire ... 60 2.8. Autres examens : ... 60 2.8.1. Bilan d'hémostase : ... 60 2.8.2. Bilan métabolique... 60 V. Prise en charge actuelle de la LAL :... 61 1. Chimiothérapie ... 61 1.1. Induction de la rémission : ... 62 1.2. La consolidation ... 63 1.3. Entretien ... 64 1.4. Maladie réfractaire/récidive ... 64 2. Allogreffe de cellules souches hématopoïétiques : ... 65 3. Radiothérapie ... 65 VI. Place de tisagenlecleucel dans la stratégie thérapeutique : ... 66 1. Importance de la chimiothérapie de conditionnement : ... 67

2. Efficacité : principaux résultats des essais cliniques: ... 68 3. Sécurité et tolérance: ... 69 VII. Population cible : ... 71

Partie 3 : Exemple de l’Axicabtagene Ciloleucel dans le traitement des

lymphomes non hodgkiniens à cellules B agressif

... 72

I. Généralités : ... 74 II. Classification : ... 74 III. Pathologie ... 76 IV. Diagnostic : ... 77 1. Aspect clinique : ... 77 2. Diagnostic biologique ... 78 2.1. Immunophénotypage ... 78 2.2. Cytogénétique ... 80 V. Prise en charge actuelle : ... 81 VI. Place de l’axicabtagene ciloleucel dans la stratégie thérapeutique : ... 82 1. Efficacité / tolérance : ... 84 2. Sécurité : ... 85 VII. Population cible : ... 87

Conclusion

... 88

Résumés

1

2

Selon l'Organisation Mondiale de la Santé (OMS), le cancer est une cause majeure de décès dans le monde, à l’origine de 18,1 millions de nouveaux cas et de 9,6 millions de décès en 2018; Avec 509,590 (2.8%) de nouveaux cas, 248.724 (2.6%) de décès pour les lymphomes non-hodgkinien, et 437,033 (2.4%) nouveaux cas, 309,006 (3.2 %) de décès pour les leucémies aigues lymphoblastiques [1].

Le traitement standard de ces deux dernieres consiste essentiellement en chimiothérapie, radiothérapie et en greffe de cellules souches, mais l'efficacité du traitement actuel reste limitée par leurs toxicités associées. Il est par conséquent nécessaire d’établir des approches thérapeutiques nouvelles.

La thérapie génique a révolutionné le 21ème siècle et bientôt, elle aura une influence importante sur de nombreux secteurs de notre vie. Les progrès dans ce domaine ont ouvert la possibilité de traitement pour de nombreuses maladies qui sont jusqu'ici incurables notamment le cancer. Dans un contexte global, elle implique la correction d'un défaut génétique en introduisant une version normale d'un gène défectueux ou manquant, corrigeant ainsi un trouble sous-jacent [2]. Elle se différencie des thérapies habituelles puisqu’elle ne se fonde pas sur la prise régulière d’un médicament mais sur l’injection ponctuelle d’un fragment d’ADN porté par un vecteur.

Ce travail détaillera en premier lieu les principes de la thérapie génique afin de présenter les stratégies nécessaires à la mise en place d’un traitement à la base de cette technique. Nous nous intéresserons ensuite particulièrement à l’utilisation des cellules CAR-T en détaillant leur principe et mécanisme immunologique. Dans un second temps nous analyserons la nature des deux produits issus de cette thérapie impliquée dans le traitement des leucémies aigues lymphoblastiques et des lymphomes non hodgkiniens. Nous nous intéresserons particulièrement à leur place dans la stratégie thérapeutique actuelle ainsi que leur efficacité.

3

Partie 1 :

Généralités sur

la thérapie génique

4

I. Histoire de la thérapie génique dans le domaine du cancer

Les traitements du cancer remontent au dix-huitième siècle, lorsque la chirurgie était le traitement principal des stades précoces du cancer et que les patients souffraient de récidives fréquentes.

Une fois la maladie propagée, les patients étaient traités avec des médicaments à base de plantes, de l'huile de ricin ou de l'arsenic. En 1895, la radiothérapie a été découverte, mais a abouti à peu de guérisons.

En 1943, la moutarde à l'azote était utilisée dans la prise en charge des patients atteints de lymphome et, en 1948, les antagonistes de l'acide folique entraînaient une rémission transitoire dans la leucémie infantile.

Les virus se sont également révélés efficaces pour lutter contre les tumeurs malignes chez les modèles animaux, puis chez l’homme en 1956. Les adénovirus en particulier ont fait l'objet d'études plus poussées chez l'homme, avec le développement ultérieur de la thérapie génique.

En 1987, l'immunothérapie a été introduite dans la prise en charge des patients cancéreux avec l'approbation ultérieure par la FDA (Food and Drugs Administration) des anticorps anti-rituximab dans le traitement des patients atteints de lymphome (1997).

La première expérience de thérapie génique approuvée par la FDA aux États-Unis a eu lieu en 1990 pour un patient atteint d'un trouble d'immunodéficience combiné sévère. Depuis lors, de nombreux essais cliniques ont été menés auprès de patients atteints de cancer; utilisant différentes approches en thérapie génique, avec des résultats positifs rapportés chez des patients atteints de leucémie lymphoïde chronique, de leucémie lymphocytaire aiguë, de tumeurs cérébrales, etc. [3]

En Aout 2017 la FDA a approuvé la toute première version du traitement ciblé de certains cancers et hémopathies issus de la thérapie CAR-T cell, le tisagenlecleucel (KYMRIAH®), ainsi qu’une autre molécule en octobre, l’axicabtagene ciloleucel (YESCARTA®).

5

Figure 1 : Chronologie montrant le développement de l'approche de la thérapie génique [2, 4].

• Découverte de la structure d'ADN

1953

• Proposition de l'approche de la thérapie génique

1966

• Utilisation des virus en tant que vecteurs pour le transfert de gène

1968

• Premier essai de thérapie génique

1990

• Approbation du premier virus oncotique

2005

• Premiers médicaments de thérapie géniques,mécanismes moléculaires et indications cliniques approvées

2008

• L'EMA a recommandé pour la première fois un produit de thérapie génique apprové par l'Union Européenne

2012

• approbation par la FDA de tisagenlecleucel et de l'axicabtagene ciloleucel

6

II. Thérapie génique en quelques chiffres

1. Catégories de maladies ciblées par la thérapie génique

La grande majorité (76,1%) des essais cliniques de thérapie génique menés à ce jour ont porté sur le cancer (65,0%) et les maladies monogéniques héréditaires (11,1%), ces dernières ayant obtenu les plus grands succès de la thérapie génique à ce jour[5].

Figure 2 : Les indications traitées par les essais cliniques de thérapie génique [5].

2. Nombre d’essais cliniques en thérapie génique

Le nombre d'essais initiés chaque année a tendance à baisser au cours des années suivant les déclarations d'événements indésirables graves, tels que 2003 et 2007, mais 2005, 2006 et 2008 ont été des années remarquables pour les essais de thérapie génique . Depuis l'année 2012, le nombre d'essais est en augmentation constante.

Les années les plus récentes tendent à être sous-représentées dans la base de données car il faut du temps pour la publication des articles, ce qui complique l'obtention d'informations sur les essais les plus récents. C'est le cas pour le nombre d'essais rapportés en 2016.[5]

7

0000

Figure 3: Nombre d'essais cliniques de thérapie génique approuvés dans le monde entier entre 1989 et 2017 [5].

8

3. Progrès et tendances actuelles de thérapie génique

Depuis la mise à jour en 2012, il y a eu 754 autres essais sur la thérapie génique initiés globalement. Une des thérapies hors concours a été dans l’immunothérapie du cancer, utilisant les cellules CAR-T pour cibler l’antigène de surface cellulaire associée à la tumeur.

Cette approche a reçu l’attention générale et rassemble le potentiel d'expansion et la persistance des lymphocytes T cytotoxiques avec la spécificité de l’anticorps monoclonal pour combattre les tumeurs, souvent là où d'autres traitements anticancéreux ont échoué.

Depuis le rapport sur le journal de la médecine de la Nouvelle-Angleterre en 2012, décrivant un patient en rémission complète à la suite d'une perfusion de cellules T autologues transduites, modifiées pour exprimer un CAR spécifique de l’antigène CD19 ; Plusieurs centaines de patients ont été traités dans le cadre de plusieurs essais avec cette modalité, des taux de rémission sans précédent étant observée chez les patients atteints de leucémie ou de lymphome, en particulier la leucémie aiguë lymphoblastique.

Le succès de l'application de ce traitement à la clinique a été mis en évidence par «l'immunothérapie», sélectionnée par les rédacteurs en chef de Science comme percée de l'année 2013.

Notamment, en mai 2017, Emily Whitehead, la première patiente pédiatrique traitée avec la thérapie cellulaire CAR-T à l’hopital des enfants de la Philadelphie,a marqué 5 ans en rémission, et le premier produit CAR-T, tisagenlecleucel, a également été approuvé par la FDA en 2017 [5].

9

III. Les techniques de traitement par la thérapie génique

1. L’objectif thérapeutique du « gène médicament » :

1.1. Les stratégies thérapeutiques en thérapie génique :

Afin de valoriser rapidement les génomes, il est important de découvrir le lien potentiel existant entre une maladie et un ou plusieurs gènes, responsables de cette affection ou impliqués dans ses manifestations indésirables [6].

La thérapie génique a pour objectif de soigner certaines maladies géniques le plus souvent rares et incurables en utilisant des acides nucléiques, c’est-à-dire des séquences d’ADN ou d’ARN

En fonction de la pathologie à traiter, cet objectif peut être atteint en utilisant différentes stratégies thérapeutiques :

 La principale stratégie de thérapie génique consiste à délivrer aux cellules du patient un gène à action thérapeutique qui permettra de relayer la fonction du gène déficient ou de l’empêcher de s’exprimer si son rôle est néfaste pour l’individu ;  L’ajout d’un gène fonctionnel pourra, quant à lui, aller directement remplacer le

gène défectueux à l’origine de la maladie ;

 Il est également possible de modifier la lecture d’un gène altéré par une technique baptisée le « saut d’exon », réalisée en injectant des molécules capables de se fixer sur l’exon muté, qui correspond à la partie codante du gène responsable de la maladie.

Cela permet à la machinerie cellulaire du patient d’éviter de lire l’erreur présente sur l’exon et donc de contribuer à le soigner.

10

Pour parvenir aux objectifs désirés, les acides nucléiques à visée thérapeutiques utilisés par la thérapie génique peuvent être injectés directement dans les cellules de l’individu sous forme d’ADN nu, mais ils sont généralement transportés par un vecteur. Dans ce cas, le vecteur est responsable du transport du « gène-médicament » dans les cellules cibles du patient.

Afin de parvenir à ce résultat, il est important que ces systèmes de transfert de gènes soient sûrs, efficaces et capables d’exercer leur fonction dans des cellules qui ne se divisent pas, ils doivent également assurer la stabilité de l’expression du gène à action thérapeutique.

Parmi les différents types de vecteurs existants, les vecteurs viraux issus de virus modifiés représentent la référence et sont utilisés dans plus de 70% des essais cliniques menés actuellement.

Le principal avantage des virus repose sur leur capacité à franchir les barrières de protection qui dressent le corps humain lorsque celui-ci reconnait qu’un ADN étranger pénètre dans son génome.

Ils sont capables d’introduire efficacement le matériel génétique qu’ils transportent dans les cellules cibles qu’ils parviennent à infecter. C’est la raison pour laquelle les chercheurs ont eu l’idée de les utiliser pour transférer les gènes thérapeutiques dans les cellules des patients.

Dans le cadre de la thérapie génique, les virus utilisés sont préalablement modifiés en retirant, au sein de leur propre génome, les séquences nécessaires à leur réplication et à leur virulence, afin que ceux-ci ne présentent pas de danger pour le patient ou son environnement.

Pour fonctionner, la thérapie génique nécessite donc toujours la présence de plusieurs éléments : un « gène-médicament », un vecteur pour le transport et d’une cellule cible où le gène peut s’exprimer.

La modification génique peut ensuite se réaliser de façon in vivo (directement chez le patient) ou ex vivo (à l’extérieur du corps humain) ; Ces protocoles varient en fonction des indications et des objectifs thérapeutiques à atteindre.

11

Cependant, ils consistent toujours à modifier génétiquement les cellules de la personne atteinte de la maladie, de manière ex vivo ou in vivo et d’une façon pouvant être pérenne ou transitoire.

1.2. Le « gène-médicament »

Une fois la relation entre le gène, son produit (la protéine) et la maladie est établie, il s’agit de mettre en place une stratégie thérapeutique.

On distingue actuellement trois approches majeures : le gène-médicament, la protéine-médicament et le ligand-protéine-médicament :

Figure 4:Stratégies de découverte de ligands-médicaments. Approche structurale et approche par criblage [6].

12

1.2.1. Le « gène médicament »

Permet d’envisager de «réparer» un gène défectueux ou d’adjoindre dans les cellules un gène codant pour une protéine potentiellement thérapeutique : c’est l’approche par thérapie génique.

Le potentiel de cette stratégie est énorme mais des problèmes difficiles restent encore à résoudre, notamment en ce qui concerne la vectorisation et la biotolérance.

1.2.2. La protéine-médicament :

Dans le cas où le défaut génétique conduit à l’absence d’expression d’une protéine ou à son dysfonctionnement, Nous pouvons administrer la protéine fonctionnelle pour rétablir la réponse biologique.

Cette approche est bien établie comme le démontre l’usage courant de l’insuline ou de l’hormone de croissance.

La liste des protéines actuellement en cours d’étude clinique montre également le potentiel de cette stratégie. Son champ d’application reste cependant limité du fait de la faible biodisponibilité de ces molécules et de leur coût de production relativement élevé.

1.2.3. Le ligand-médicament

C’est la méthode la plus classique. Il s’agit de découvrir une molécule pouvant se lier (le ligand) à l’ADN, à l’ARN ou à la protéine cible de manière puissante et sélective, permettant ainsi d’en moduler la fonction selon les nécessités thérapeutiques. La plupart des médicaments existants fonctionnent selon ce principe.

Dans le contexte post-génomique, il y a deux voies : la conception rationnelle fondée sur la connaissance de la structure de la cible ; le criblage robotisé, systématique ou intelligemment ciblé.

L’approche rationnelle bénéficie de l’essor de la biologie structurale et des progrès de la modélisation moléculaire. De plus en plus souvent les structures tridimensionnelles (3D) des cibles sont accessibles et permettent la conception «sur mesure» de ligands adaptés grâce à des logiciels d’aide à la conception.

La créativité des chercheurs a conduit à l’émergence de nouveaux types de ligands tels que les molécules anti-sens, ou les protein nucleic acids(PNA), complémentaires des acides nucléiques endogènes.

13

Le potentiel thérapeutique de ces substances reste cependant à démontrer. La modélisation et les techniques de recherche de pharmacophores viennent parfois aider les chimistes à découvrir des molécules innovantes et présentant un intérêt thérapeutique [6].

2. Transfert du gène

La thérapie génique est sur le point de devenir une thérapie anti-tumorale de routine, avec le potentiel d’élever cette méthodologie en tant que traitement de première ligne pour les maladies cancéreuses [2].

La thérapie génique, qui se base sur le remplacement d'un gène défectueux résultant une protéine fonctionnelle de ce gène, est une approche bénéfique pour le traitement du cancer, en particulier par rapport à la chimiothérapie, qui manque souvent de sélectivité et qui peut entraîner une toxicité non spécifique [7].

Trois éléments entrent en jeu pour tout essai de thérapie génique quelle que soit la maladie:

 Le gène thérapeutique encore appelé transgène,  Le vecteur qui assure le transfert efficace du vecteur,

 La cellule dans laquelle est ciblée l’expression du transgène. En outre, pour atteindre une efficacité thérapeutique, il faut :

 Obtenir une expression durable, spécifique du transgène,  Limiter les effets indésirables (cytotoxicité, inflammation…).

Il existe trois moyens principaux de transfert des gènes dans les cellules tumorales: les vecteurs non viraux, les vecteurs viraux et les véhicules à base de cellules.

Pour la plupart des tumeurs, une expression de gènes thérapeutiques à court terme peut suffire pour tuer les cellules tumorales. En outre l'élimination rapide des vecteurs viraux de la circulation sanguine a permis le développement de vecteurs synthétiques d'administration de gènes. Toutefois, porter l’ADN d’intérêt sur les dépôts métastasique distants reste un inconvénient majeur de ces approches.

14

Les vecteurs de libération de gènes non viraux sont généralement injectés localement. Bien qu'une injection locale soit bénéfique pour les tumeurs telles que le mélanome, les cancers de la tête et du cou ou le carcinome péritonéale; elle ne convient pas aux patients atteints de métastases hématogènes.

Les vecteurs viraux et non viraux doivent survivre dans le sang pour être arrêtés dans le tissu tumoral ciblé, se lier à des cellules spécifiques et ensuite pénétrer dans les cellules pour enfin atteindre le noyau [7].

2.1. Vecteurs non viraux

L'ADN plasmique, qui est principalement utilisé en thérapie génique non virale, est facilement dégradé par les nucléases. Par conséquent, certaines stratégies visant à réduire la taille et à prévenir la dégradation ont été développées.

Les agents les plus couramment utilisés pour la délivrance de gènes sont les lipides cationiques, le groupe de tête cationique des lipides se liant à l'ADN et la queue lipidique permettant l'effondrement du complexe ADN lipidique.

Les complexes ADN lipidiques cationiques (lipoplexes) (LPD / ADN) pénètrent dans la cellule cible par une voie endosomale. Cependant, l'efficacité d'expression du transgène est très faible avec les lipoplexes.

Il a été démontré que seule une très petite partie de l'ADN injecté par voie systémique pouvait atteindre le tissu tumoral [8].

Contrairement aux vecteurs viraux, les systèmes non viraux offrent divers avantages, tels qu'un risque de biosécurité réduit, une source de matériau étendue, une structure chimique contrôlable, une modification biofonctionnelle multiple, aucune limite de capacité et une production de forme simplifiée.

Plus important encore, les vecteurs non viraux sont capables de délivrer des composés synthétiques tels que le siRNA ou d'autres oligonucléotides comme l’ADNp [9].

15

2.2. Les vecteurs viraux

Ces dernières années, les applications des vecteurs viraux ont prouvés un effet remarquable et encourageant en thérapie génique. Des améliorations significatives dans l'ingénierie vectorielle, la vectorisation et la sécurité ont placé la thérapie virale à base de vecteurs à la pointe de la médecine moderne.

Des vecteurs viraux ont été utilisés pour le traitement de diverses maladies : métaboliques, cardiovasculaires, musculaires, hématologiques, ophtalmologiques et infectieuses ainsi que différents types de cancer.

Un développement récent dans le domaine de l'immunothérapie a fourni à la fois des approches préventives et thérapeutiques [10].

Les virus ont la capacité naturelle de transmettre les acides nucléiques de leur propre génome à des types de cellules spécifiques, y compris les cellules cancéreuses. Cette capacité rend ces véhicules de livraison de gènes attractifs et populaires.

Les rétrovirus, les adénovirus, les virus adéno-associés, le virus de l'herpès simplex, les poxvirus et les baculovirus sont couramment modifiés et utilisés comme vecteurs de thérapie génique dans le cancer. De plus, des systèmes de vecteurs viraux chimériques combinant les propriétés de deux types de virus ou plus sont également développés.

2.2.1. Les vecteurs rétroviraux

Les vecteurs rétroviraux dérivés de rétrovirus contiennent un ARN simple brin linéaire, d'environ 7 à 10 kb et possèdent une enveloppe lipidique. Les particules virales pénètrent dans les cellules exprimant des récepteurs appropriés pour les rétrovirus.

Après sa pénétration dans la cellule, la transcriptase inverse virale transcrit l'ARN du virus en ADN double brin et de la transcription de ce dernier résulte un complexe de pré-intégration de nucléoprotéines (PIC) en se liant avec des protéines cellulaires[11]. Le PIC migre vers le noyau et intègre ainsi le génome de l'hôte.

La capacité d'expression transgénique dans les cellules en division est un avantage des vecteurs rétroviraux, qui évite une expression indésirable dans les cellules non divisées des tissus environnants.

16

L'incorporation de gènes rétroviraux dans le génome de l'hôte fournit une expression à long terme des transgènes; Bien que cela soit avantageux, une incorporation non spécifique de l'ADN viral pourrait altérer la fonction du gène de l'hôte ou induire une expression aberrante d'un oncogène cellulaire.

Cependant, le risque d'oncogenèse par insertion observé lors de l'essai mené auprès de nourrissons X-SCID en 2003 a limité l'utilisation de systèmes de transfert de gènes rétroviraux chez l'homme.

La possibilité de générer des rétrovirus compétents pour la réplication constitue un autre problème de sécurité en ce qui concerne l'utilisation clinique de ces vecteurs[12].

2.2.2. Les vecteurs lentiviraux

Les vecteurs lentiviraux dérivés de rétrovirus peuvent provoquer une intégration stable du transgène dans le génome de l'hôte avec une expression génique à long terme.

La capacité de transduction à la fois de cellules en division ou non rend ces vecteurs plus appropriés et plus efficaces comme véhicule de transfert de gènes par rapport aux rétrovirus[12].

2.2.3. Les vecteurs adénoviraux

Les vecteurs adénoviraux sont largement utilisés pour introduire les gènes thérapeutiques dans les cellules tumorales, ils peuvent infecter un large éventail de types de cellules[13].

Les sérotypes d'adénovirus les plus largement utilisés pour développer des vecteurs dans les études de thérapie génique sur le cancer chez l'homme sont le type 5 (Ad5) et le type 2 (Ad2).

Ils ont une capacité d'environ 8 à 10 kb de gènes thérapeutiques avec des vecteurs de première génération allant jusqu'à 36 kpb. Cependant, parallèlement au potentiel immunogène, la vaste gamme de cellules hôtes contenant l'adénovirus limite son utilisation systémique dans les essais de thérapie génique sur le cancer chez l'homme.

Les stratégies de ciblage ont permis l'utilisation de vecteurs mais ils ne peuvent pas s'intégrer au génome cellulaire, exprimer le transgène de manière épisomique ou induire des mutations aléatoires.

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Néanmoins, l'expression du transgène est limitée de 7 à 10 jours après l'infection, donc des administrations répétées du vecteur sont nécessaires pour obtenir des réponses durables[12].

2.2.4. Les adéno-associés (AAV)

Les virus adéno-associés (AAV) sont des virus simples brin avec un ADN d'environ 4,7 kb [14]; Ils appartiennent à la famille des parvovirus et nécessitent un virus auxiliaire tel que l'adénovirus ou le virus de l'herpès pour leur réplication et libération de la cellule [15].

Ils peuvent infecter une grande variété de cellules indépendamment du cycle cellulaire, cette propriété fait d'AAV un vecteur approprié pour la thérapie génique du cancer.

Figure 5: Organisation génomique d'un vecteur dérivé à partir d'un virus adéno-associé (AAV). Le génome parental se compose principalement de réplicase codant pour le rep, le cap et les protéines structurelles. L’expression des protéines AAV est pilotée par les

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En outre, contrairement aux adénovirus, ils induisent une faible réponse immunitaire lorsqu’ils infectent les cellules hôtes normales.

Un autre avantage des AAV par rapport aux adénovirus est leur capacité à intégrer le transgène à un endroit particulier du 19ème chromosome de cellules; Néanmoins, le principal inconvénient de l'AAV est sa capacité de chargement limitée d'environ 4 kpb de gènes thérapeutiques.

L'AAV pourrait transduire certains types de cellules. De ce fait, des stratégies de ciblage telles que la modification de protéines de capside virales, la liaison d'anticorps monoclonaux ou de protéines bispécifiques ont été développées pour améliorer l'efficacité des systèmes AAV en thérapie génique du cancer [16, 17].

2.2.5. Les baculovirus :

Les baculovirus sont des particules virales enveloppées avec un grand ADN double brin d'environ 80 à 180 kb. Ils infectent naturellement les cellules d'insectes et ne présente pas de maladies liées à l’homme.

Avec leur profil de sécurité élevé chez les humains, leur manipulation et production faciles. Ils semblent des véhicules de thérapie génique très utiles avec une très grande capacité de chargement d'environ 40 kb et de multiples inserts possibles[18].

Le nucléopolyhédrovirus multiples Autographa californica est le type de baculovirus le plus utilisé dans les études de thérapie génique. Ils peuvent facilement transduire des cellules de mammifère, y compris de nombreux types de cellules cancéreuses, et provoquer une expression élevée du transgène dans la cellule hôte [19].

2.2.6. Les virus de l’herpès simplex (HSV)

Le virus de l'herpès simplex (HSV) est un gros virus à ADN double brin avec environ 152 kb de génome; Il a un tropisme naturel pour les tissus nerveux et ne peut pas s'intégrer dans le génome de l'hôte [41].

Les vecteurs HSV peuvent être conçus en trois types différents: amplicons, vecteurs défectueux pour la réplication et vecteurs compétents pour la réplication [20].

En général, les vecteurs HSV compétents pour la réplication sont utilisés comme agents oncolytiques dans les études de thérapie génique du cancer.

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2.2.7. Les poxvirus

Les poxvirus sont les premiers virus à être utilisés comme vecteurs de thérapie génique; Ils ont été utilisés dans la production in vitro de protéines et en tant que vaccins vivants.

Les formes atténuées de poxvirus ont été développées et utilisées dans le développement d'essais de vaccins génétiques contre le cancer; Les propriétés immunostimulantes des poxvirus en font des agents préférables pour induire une immunité contre les tumeurs [12].

3. Traitement par thérapie génique ex vivo, in vivo

Il existe deux grandes approches de thérapie génique (Figure 6). La première, dite ex vivo, consiste à modifier génétiquement des cellules in vitro, puis à greffer ces cellules dans l’organe cible.

La deuxième stratégie, dite in vivo, vise à introduire directement le gène thérapeutique dans les cellules du patient en injectant localement le vecteur dans l’organe (ou la partie de l’organe défectueux).

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3.1. Traitement par la thérapie génique ex vivo

La stratégie ex vivo a été utilisée dans les premiers protocoles de thérapie génique des cellules en prolifération. Ses limites ont stimulé le développement de nouveaux vecteurs capables de transférer directement un gène dans les cellules quiescentes.

Une thérapie génique à médiation rétrovirale telle que lentivurus conduit à une intégration virale dans le génome de l'hôte. Elle peut donc provoquer des événements mutagènes pouvant entraîner une deuxième tumeur maligne[22].

En thérapie génique ex vivo, les cellules d'un patient sont prélevées, maintenues en culture pour introduire un gène thérapeutique dans les cellules, puis transplantées chez le patient.

Le rôle des cellules transplantées, qui sont génétiquement modifiées, est de délivrer un produit de gêne recombinant dans le corps du patient; Les cellules génétiquement modifiées ne sont pas obligées de reconstituer un organe ou un tissu particulier.

Par exemple, les hépatocytes génétiquement modifiés prélevés sur un lobe du foie peuvent être réinjectés dans n'importe quelle partie du foie des patients en thérapie génique ex vivo.

Le principal inconvénient de la thérapie génique ex vivo, est la nécessité de l’élimination et de la transplantation chirurgicale des cellules de l’organisme. Ces étapes chirurgicales sont très douloureuses.

Pourtant, la thérapie ex vivo présente plusieurs avantages par rapport à la thérapie génique in vivo :

 Premièrement, l'efficacité du transfert de gènes dans les cellules ciblées est très élevée par rapport à la thérapie génique in vivo, car la délivrance des gènes est effectuée dans des conditions contrôlées et optimisées.

 En outre, les cellules transduites peuvent être enrichies si le vecteur a un marqueur de gène sélectionnable.

 Enfin, les effets secondaires immunologiques provoqués par les véhicules d’administration de gènes dans la thérapie génique in vivo sont minimisés dans la thérapie génique ex vivo [23].