Traduction dans le formalisme PADAWAN : interaction, agents, primitives

Teste de sono induzido por tiopental

O tiopental é uma droga sedativo-hipnótica da classe dos barbitúricos, cujos efeitos dependem da via de administração e da dose utilizada. Este fármaco foi usado para induzir o sono, como descrito anteriormentepor Vogel e Vogel (1997).

Os parâmetros avaliados neste teste são: a latência para (tempo de indução do sono) e a duração da perda do reflexo postural (reflexo de endireitamento) dos animais; estes foram registrados estabelecendo-se um limite de três horas para a observação. A latência é compreendida como o período entre a injeção do tiopental sódico até a perda do reflexo de endireitamento do animal, isto é, quando o animal perde a capacidade de voltar à posição normal de ambulação (sob as quatro patas) após ter sido colocado em decúbito dorsal. O animal somente é colocado nesta posição (decúbito dorsal) quando se apresenta cambaleante ou imóvel. Já o tempo de sono compreende o período entre a perda

do reflexo de endireitamento do animal até a recuperação do mesmo. Após a recuperação deste reflexo, o animal é novamente recolocado em decúbito dorsal e somente foi considerado recuperado o animal que conseguiu retornar à posição normal em três tentativas consecutivas (Wambebe, 1985; Rolland et al., 1991; Ramirez et al., 1998), como ilustrado na figura 6. Todas as sessões experimentais ocorreram no período vespertino entre 13:00 e 17:00 h.

Figura 6 - Fotografia do teste de sono induzido por tiopental para avaliação do efeito hipnótico.

3.8. Delineamento experimental

O desenvolvimento da presente pesquisa compreendeu duas etapas distintas. Na 1ª Etapa o objetivo foi comparar o perfil fitoquímico e ações comportamentais do extrato aquoso das folhas da variedade da Passiflora edulis (Passiflora edulis Simsvar. edulis e

Passiflora edulis var. flavicarpaDegener) e investigar se esse extrato teria alguma ação

na atividade ansiolítica/ansiogênica, antidepressiva e sedativa, bem como na atividade locomotora. Já na 2ª Etapa, foi investigar o mecanismo responsável pela ação do tipo antidepressiva da espécie de Passiflora edulis Simsvar. edulis e suas frações.

1ª ETAPA

3.8.1 Experimento 1: Investigação da ansiedade experimental no LCE

Este experimento foi realizado para avaliar os efeitos dos extratos aquosos das folhas de Passiflora edulis Simsvar. edulis (PEE) e Passiflora edulis var.

flavicarpaDegener(PEF) na ansiedade experimental de camundongos submetidos ao

LCE. Durante este experimento foram testados, além do grupo controle, três doses do extrato aquoso da PEE (100, 300 e 1000 mg/kg) e quatro doses da PEF (30, 100, 300 e 1000 mg/kg), a fim de se investigar o papel ansiolítica/ansiogênico dessas duas variedades de Passiflora edulis (Figura 7).

Figura 7 – Esquema demonstrativo do delineamento experimental da 1ª etapa do experimento 1. Tratamento e doses utilizadas para investigar a atividade ansiolítica/ansiogênico de variedades de Passiflora edulis no LCE. DZP: Diazepam, PEE:

Passiflora edulis Simsvar. edulis, PEF: Passiflora edulis var. flavicarpaDegener, LCE:

labirinto em cruz elevado.

3.8.2 Experimento 2: Investigação da depressão experimental no TNF

Este experimento foi realizado para avaliar os efeitos dos extratos das folhas de PEE e PEF na depressão experimental de camundongos submetidos ao TNF. Durante este experimento foram testadas, além do grupo controle, três doses do extrato aquoso da PEE (100, 300 e 1000 mg/kg) e duas doses da PEF (300 e 1000 mg/kg) a fim de investigar os efeitos dessas duas variedades de Passiflora edulis na depressão experimental (Figura 8).

Figura 8 – Esquema demonstrativo do delineamento experimental da 1ª etapa do experimento 2. Tratamento e doses utilizadas para investigar a ação na depressão experimental induzida pelas variedades de Passiflora edulis. NORT: nortriptilina, PEE:

Passiflora edulis Simsvar. edulis, PEF: Passiflora edulis var. flavicarpaDegener, TNF:

teste da natação forçada.

3.8.3 Experimento 3: Investigação do efeito sedativo experimental no teste de sedação induzido por tiopental

Este experimento foi realizado para avaliar os efeitos dos extratos das folhas de PEE e PEF no efeito hipnótico em camundongos submetidos ao teste de sedação induzido por tiopental. Durante este experimento foram testadas, além do grupo controle, duas doses do extrato aquoso da PEE e PEF (300 e 1000 mg/kg) a fim de investigar o efeito dessas duas variedades de Passiflora edulis na sedação induzida por tiopental (Figura 9).

Figura 9 – Esquema demonstrativo do delineamento experimental da 1ª etapa do experimento 3. Tratamento e doses utilizadas para investigar o efeito das variedades de

Passiflora edulis na sedação induzida por tiopental. PEE: Passiflora edulis Simsvar. edulis, PEF: Passiflora edulis var. flavicarpaDegener; sedação:teste de sedação induzido

3.8.4 Experimento 4: Investigação da atividade locomotora no teste de campo aberto

Este experimento foi realizado para avaliar os efeitos dos extratos das folhas de PEE e PEF na atividade locomotora de camundongos submetidos ao teste de campo aberto. Durante este experimento foram testadas, além do grupo controle, duas doses do extrato aquoso da PEE e PEF (300 e 1000 mg/kg) a fim de investigar possíveis alterações na locomoção dos animais devido ao tratamento com as variedades de Passiflora edulis (Figura 10).

Figura 10 – Esquema demonstrativo do delineamento experimental da 1ª etapa do experimento 4. Tratamento e doses utilizadas para investigar as ações de variedades de

Passiflora edulis na atividade locomotora dos animais. PEE: Passiflora edulis Simsvar. edulis, PEF: Passiflora edulis var. flavicarpaDegener.

2ª ETAPA

3.8.5 Experimento 1: Investigação da ação antidepressiva do extrato aquoso e frações da Passiflora edulisSimsvar. edulis

Este experimento foi realizado para avaliar o efeito da ação antidepressiva do extrato aquoso frações (BuOH, AcOEt e residual) da Passiflora edulisSimsvar. edulis. Para alcançar este objetivo foram testadas, além do grupo controle e controle positivo (nortriptilina), quatro doses de cada fração (Figura 11).

Figura 11 – Esquema demonstrativo do delineamento experimental da 2ª etapa do experimento 1. Tratamento e doses das frações de Passiflora edulis Simsvar. edulis avaliadas no TNF. NORT: nortriptilina, BuOH: fração butanólica,AcOEt: fração acetato de etila, TNF: teste da natação forçada.

3.8.6 Experimento 2: Investigação do mecanismo de ação da Passiflora

edulisSims var. edulis

Este experimento foi realizado para investigar o mecanismo de ação das frações que apresentaram atividade do tipo antidepressiva no teste de natação forçada. Visando investigar a participação de monoaminas neste efeito, os animais foram pré-tratados com PCPA, DSP-4, AMPT e Sulpirida e, posteriormente, tratados com as frações e submetidos ao TNF. Além do grupo controle negativo e positivo, foi testada a dose das frações que apresentou atividade antidepressiva.

Com o intuito de investigar a participação da 5-HT no efeito antidepressivo da

Passiflora edulisSimsvar. edulis, observa-se abaixo na Fase a) o pré-tratamento com

salina ou PCPA100 mg/kgpor quatro dias consecutivos, por via i.p. No quarto dia, 45 minutos após o pré-tratamento com PCPA, os animais foram tratados com salina, nortriptilina, fração BuOH e AcOEt 50 mg/kg, por via oral, e após 1 h, foi realizado o teste de natação forçada (Figura 12).

Figura 12 – Esquema demonstrativo do delineamento experimental da 2ª etapa do experimento 2, Fase a). Tratamento e doses das frações de Passiflora edulis Simsvar.

edulis em animais submetidos ao TNF com ou sem pré-tratamento com PCPA, um

inibidor da síntese de 5-HT. FLU: fluoxetina, BuOH: fração butanólica,AcOEt: fração acetato de etila, TNF: teste da natação forçada.

Visando investigar a participação de catecolaminas na ação antidepressiva de

Passiflora edulisSimsvar. edulis, na Fase b), foi realizadoo pré-tratamento com salina ou

AMPT100 mg/kg,por via i.p., quatro horas antes dos tratamentos. Uma hora antes do teste da natação forçada, foi administrado salina, nortriptilina, fração BuOH e AcOEt 50 mg/kg nos animais com ou sem pré-tratamento com AMPT (Figura 13).

Figura 13 – Esquema demonstrativo do delineamento experimental da 2ª etapa do experimento 2, Fase b). Tratamento e doses das frações de Passiflora edulis Simsvar.

edulis em animais submetidos ao TNF com ou sem pré-tratamento com AMPT, um

inibidor da síntese de catecolaminas. NORT: nortriptilina, BuOH: fração butanólica, AcOEt: fração acetato de etila, TNF: teste da natação forçada.

Para investigar a participação da noradrenalina na mediação do efeito antidepressivo de Passiflora edulisSims var. edulis, o comportamento dos animais pré- tratados com ou sem DSP-4, uma neurotoxina seletiva para neurônios noradrenérgicos, foi avaliado TNF. Na Fase c) foi realizadoo pré-tratamento com salina ou DSP-450 mg/kg,por via i.p., em uma única dose, 7 dias antes da avaliação comportamental. No 7º dia, foi realizado o tratamento com salina, nortriptilina, fração BuOH e AcOEt 50 mg/kg e, 1 hora após, os animais foram submetidos ao teste de natação forçada (Figura 14).

Figura 14 – Esquema demonstrativo do delineamento experimental da 2ª etapa do experimento 2, Fase c). Tratamento e doses das frações de Passiflora edulis Sims var.

edulis em animais submetidos ao TNF com ou sem pré-tratamento com DSP-4, uma

neurotoxina seletiva para neurônios noradrenérgicos. NORT: nortriptilina, BuOH: fração butanólica,AcOEt: fração acetato de etila, TNF: teste da natação forçada.

Por fim, na Fase d), visando avaliar a participação de receptores dopaminérgicos D2 na ação antidepressiva dePassiflora edulisSimsvar. edulis, o comportamento dos animais pré-tratados com ou sem sulpirida, um antagonista seletivo para receptores D2, foi avaliado no TNF. Foi realizadoo pré-tratamento com salina ou sulpirida50 mg/kg, por

via i.p.. Quinze minutos após, os animais foram tratados com salina, nortriptilina, fração BuOH e AcOEt 50 mg/kg e, após 1 hora, foram submetidos ao TNF (Figura 15).

Figura 15 – Esquema demonstrativo do delineamento experimental da 2ª etapa do experimento 2, Fase d). Tratamento e doses das frações de Passiflora edulis Sims var.

edulis em animais submetidos ao TNF com ou sem pré-tratamento com sulpirida, um

antagonista de receptores D2. NORT: nortriptilina, BuOH: fração butanólica, AcOEt: fração acetato de etila, TNF: teste da natação forçada.