lesquelles est incorporé le récepteur de la transferrine (internalisation d’anticorps reconnaissant spécifiquement le récepteur de la transferrine et de protéine A marquée à la ferritine pour la détection). B. La fusion de corps multivésiculaires avec la membrane plasmique et la libération dans le milieu extracellulaire des vésicules intraluminales a aussi été montrée. Ces vésicules portent à leur surface le récepteur de la transferrine.
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Tableau 1.2: Les différents types de vésicules membranaires sécrétées et leurs caractéristiques physicochimiques.
Il existe de nombreuses vésicules extracellulaires sécrétées par les cellules. Ces populations de vésicules présentent des caractéristiques physiques (taille, densité, apparence en microscopie électronique à transmission, sédimentation) et biochimiques (composition lipidique et protéique) qui peuvent être utilisées pour les différencier mais qui parfois se recoupent. L’origine cellulaire est un critère permettant de distinguer les exosomes des autres vésicules extracellulaires.
Théry, C., Ostrowski, M. and Segura, E. Nat Rev Imm 2009
100nm
Figure 1.14 : Aspect des exosomes observés en microscopie électronique à transmission.
Cette micrographie a été réalisée sur des exosomes secrétés par des lymphocytes B. Ils présentent une forme concave et, comme cela est montré dans l’insert en bas à gauches, ils contiennent des molécules du CMH II et la tetraspanine CD63.
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Figure 1.15 : Voie de biogenèse des exosomes et acteurs moléculaires impliqués
Une vésicule d’endocytose se forme par invagination de la membrane plasmique puis fusionne avec un endosome précoce, qui lui-même fusionne ensuite avec un endosome tardif. Les exosomes se forment par invagination de la membrane limitante des endosomes tardifs. Des vésicules intraluminales (ILVs) sont ainsi créées et le compartiment est appelé corps multivésiculaire (MVB). Celui-ci peut alors fusionner avec les lysosomes entraînant la dégradation de son contenu, ou alors fusionner avec la membrane plasmique libérant les ILVs le milieu extracellulaire. Ces vésicules sont les exosomes.
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Figure 1.16 : Composition protéique des exosomes
Ce schéma représente les protéines les plus classiquement retrouvées dans les exosomes de différentes types cellulaires. Il est basé sur 15 différentes analyses protéomiques, réalisées avec des exosomes purifiés à partir de surnageants de cellules en culture et de liquides biologiques.
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Figure 1.17 : Mécanismes d’interaction entre les exosomes et une cellule réceptrice.
Les exosomes peuvent interagir de différentes façons avec les cellules réceptrices. La phosphatidylsérine des exosomes peut être reconnue par les récepteurs TIM1 et TIM4 sur les LT, ou par la protéine soluble Mfge8. Cette dernière peut ensuite interagir directement avec les intégrines %v"3 et %v"5 à la surface cellulaire. Il a aussi été montré que les exosomes portent à leur surface des intégrines reconnues par la molécule ICAM-1 sur les fibroblastes activés. Les exosomes de DCs peuvent eux-mêmes exposer ICAM-1 à leur surface et interagir avec des cellules exprimant LFA1 (DCs et LT activés). Les exosomes peuvent ensuite rester à la surface des cellules ou fusionner avec la membrane plasmique permettant le transfert de leur contenu dans le cytoplasme de la cellulaire. Ils peuvent aussi être phagocytés puis éventuellement fusionner avec la membrane du phagosome.
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Figure 1.18 : Les effets activateurs et inhibiteurs des exosomes tumoraux sur les cellules du système immunitaire.
Les fonctions des exosomes tumoraux produits et purifiés in vitro sur l’activité des cellules immunitaires in vitro et in vivo ont été étudiées par de nombreux groupes. Sur la partie gauche du schéma sont représentées les fonctions pro-tumorales par activation d’une réponse immunitaire anti-tumorale spécifique. A droite du schéma se trouvent les fonctions pro- tumorales attribuées aux exosomes, par inhibition de la réponse immunitaire anti-tumorale et promotion d’un environnement immunosuppresseur et inflammatoire. Enfin, comme cela est représenté en bas du schéma, les vésicules (pas de démonstration directe que ce soit des exosomes) peuvent transférer des ARN et des protéines oncogènes aux cellules tumorales ou aux autres cellules de l’environnement.
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