Méthode de calcul des grandeurs thermodynamiques

● Pergunta global

● Questionário XI-5 traduzido (XI-5-PT),

● Questionário objetivo da boca seca (ODMQ) ● Questionário OHIP-14 traduzido (OHIP-14-PT)

O preenchimento destes questionários tem como objetivo sua validação para português e o de classificar as queixas do paciente antes e depois da utilização dos

sistemas em estudo (Xeros® _{e um colutório de prática corrente em pacientes}

hipossiálicos). Realizámos entre sistemas um período de wash-out para separar os efeitos de cada sistema, sendo considerados 15 dias como suficientes uma vez que os mesmos não possuem ação sistémica. Foi também solicitada a suspensão da toma de pilocarpina 24h antes de todas as visitas, uma vez que neste dia foram sempre realizadas colheitas salivares.

Assim voluntários preencheram estes inquéritos em todas as visitas.

3.1.7.2.3. Sialometrias

Todas as colheitas foram realizadas seguindo um técnica modificada pelo nosso grupo de investigação com base em métodos previamente estabelecidos(da Mata et al., 2009; Navazesh, 1993).

As colheitas da saliva produzida em repouso e estimulada mecanicamente foram realizadas como descritas anteriormente.

3.1.7.2.3.1. Secreção salivar estimulada gustativamente (SSEG)

Para determinar a secreção salivar estimulada quimicamente os pacientes engoliram toda a saliva presente na cavidade oral e de seguida foi-lhes administrado, de acordo com o grupo de estudo em que se incluíam, um dos estimulantes gustativos

de secreção salivar. Os participantes no Grupo Xeros® _{colocaram então o comprimido}

no dorso da língua e solicitou-se aos mesmos para dar uma indicação aos investigadores aquando da dissolução completa do comprimido.

Efeitos de estimulantes gustativos de secreção salivar na cavidade oral e qualidade de vida numa população portuguesa com síndrome de Sjögren Primária

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No Grupo CPC o paciente realizou um bochecho durante 2 minutos com o respetivo produto. Após o bochecho descartou o excesso (não enxaguando a cavidade oral com água) e a colheita foi iniciada.

O cronómetro foi então iniciado e os pacientes recolheram a saliva para dentro de tubos de centrífuga previamente pesados nos tempos pré-determinados (2´,4’, 6´, 8’, 10’, 15’ e 20’). Os tubos de centrífuga já com a saliva recolhida no seu interior, foram pesados novamente. Com estes valores procedeu-se ao cálculo do fluxo de secreção salivar estimulada gustativamente expresso em ml/min.

3.1.7.3. Procedimentos laboratoriais

3.1.7.3.1. Medição do pH salivar

O pH salivar das amostras foi determinado com um microeléctrodo de pH (electro de INLAB 423®_{, Meter Toledo, EUA). Foram realizadas três medições por}

amostra e calculada a sua média. O medidor de pH foi inspecionado a cada 20 medições, usando tampões padronizados para garantir fiabilidade das medições. Em caso de discrepância o medidor foi novamente calibrado.

3.1.7.3.2. Determinação da capacidade tampão

A capacidade tampão da saliva foi determinada pelo método modificado de Kitasato(da Mata et al., 2009; Kitasako et al., 2005). Depois da colheita inicial da saliva estimulada mecanicamente durante 8 minutos, 500 µL de saliva foram colocados num tubo Eppendorf 1,5ml (Eppendorf®, Hamburg, Alemanha) e um microeléctrodo de pH (electro de INLAB 423®, Meter Toledo, EUA) foi utilizado para medir imediatamente o valor de pH durante 30 segundos.

Posteriormente, 50 μL de HCl (Merck, Daarmstad, Alemanha) foram adicionados à amostra e o pH medido. A capacidade tampão foi incluída numa de 3 categorias: alta (pH superior a 5,5), média (pH entre 4,5 e 5,5) e baixa (pH inferior a 4,5) capacidade de tampão.

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3.1.8. Desfechos

3.1.8.1 Desfechos Primários

Foram definidos como desfechos primários o tempo com pH salivar inferior a 4,5 induzido pelos estimulantes gustativos, expresso em minutos (média +/-intervalo de confiança de 95%). Por forma a permitir uma quantificação mais exata das diferenças no potencial erosivo, estas foram registadas como número de eventos com períodos com pH inferior a 4,5 superiores a um minuto. Foram realizadas análises adicionais para calcular a redução risco absoluto (RRA) e o número necessário tratar (NNT), em função das respetivas taxas de eventos.

Finalmente foram definidos o resultado do total e das sub-dimensões para cada questionário de qualidade de vida e xerostomia, não só para verificar o efeito dos estimulantes gustativos de secreção salivar, mas também para realizar a sua validação.

3.1.8.2. Desfechos Secundários

Como desfechos secundários foram definidas as seguintes variáveis:

- Variações do pH salivar, em função do tempo (min), induzidas pelos estimulantes gustativos expressas como uma média (intervalo de confiança de 95%) das três medições das amostras obtidas nos tempos definidos.

- O fluxo salivar induzido pelo estimulante gustativo expresso em ml/min numa média (intervalo de confiança de 95%) do fluxo obtido nos diferentes tempos.

- Os fluxos salivares totais, calculados e expressos em ml/min como a média e intervalo de confiança de 95% do volume total (calculada dividindo a massa obtida pela densidade salivar de 1,004) de saliva estimulada dividido pelo tempo total de cada série experimental. Para a saliva basal esta foi dividida por 15 minutos. Para a colheita utilizando um dos estimulantes o volume foi dividido por dois minutos para os tempos 2,4 ,6, 8 e 10 minutos e 5 minutos para os tempos 15 e 20 minutos.

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- Os débitos salivares finais, definidos como a diferença entre o fluxo estimulado e o fluxo basal e expressos em ml/min.

3.1.9. Dimensão da amostra

Considerando especificamente a validação dos questionários através da comparação das taxas de eventos nos dois grupos foi utilizado o teste exato de Fisher. Para se detetar uma diferença de 25% proporcional entre os dois grupos com um poder de 80% e um nível de significância de 0,05, seriam necessários 60 membros efetivos por grupo valor esse que foi ultrapassado.

Em relação ao efeito dos estimulantes nas pontuações dos questionários, a Minimal Important Difference (MID) foi extraída pelos autores na pontuação total de 4(Thomson et al., 2011). A partir dos resultados de um estudo piloto previamente realizado, o desvio padrão foi estimado em 3(da Mata et al., 2012). Assim o recrutamento de 40 partcipantes por grupo, permitiria a deteção de duas unidades de diferença da pontuação total (50% do MID) entre grupos, com um poder de 80%, nível de significância de 0,05 e atrição de 20%.

3.1.10. Técnica de aleatorização

A aleatorização dos voluntários no estudo foi realizada através de uma técnica

computadorizada, com recurso a software informático (GraphPad® _Software

QuickCalcs Web site: http://www.graphpad.com/quickcalcs/randomize1/). O novo estimulante gustativo da secreção salivar foi estudado no grupo A (teste) e o colutório de prática corrente foi estudado no grupo B (controlo). Em virtude de os sistemas serem constituídos por produtos completamente diferentes, não foi possível garantir o efeito cego nos voluntários durante a sua utilização.

3.1.11. Análise Estatística

Todos os dados recolhidos foram analisados segundo o plano pré-

estabelecido. Foi empregue o recurso a um programa estatístico informático (SPSS 23.0, SPSS Inc, Chicago, IL, USA).

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