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CHAPITRE 1 :

2. Cadre, matériel et méthodes d’étude

2.3. Méthodes d’étude

2.3.7. Dosage du calcium

Avant le dosage, des tubes à hémolyse en plastique sont identifiés et disposés sur un portoir suivant l'ordre : blanc réactif, étalon, contrôle, échantillon.

(IMC=Poids/taille2)

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Principe du dosage

En milieu alcalin, le 0-crésolphtaleine complexon ou CPC réagit avec les ions calcium pour former un complexe colore rouge foncé dont l'absorbance, mesurée à 570 nm, est proportionnelle à la concentration en calcium de l'échantillon.

Tableau 1: Mode opératoire du dosage de calcium (Biolabo)

Blanc Etalon Control Dosage

Réactif 1 500µl 500µl 500µl 500µl

Bien mélanger et incuber pendant 5 minutes à température ambiante

Lire les absorbances a 570 nm contre le blanc réactif au spectrophotomètre.

Température : 25°C

Faire le zéro optique avec de l'eau distillée.

Valeurs normales : 85 à 105 mg/l

Suite aux dosages effectués, les résultats obtenus sont inscrits dans un tableau.

Contrôle de qualité

Le contrôle de qualité a été apprécié par la répétabilité et la reproductibilité

Répétabilité

Le sérum d'un échantillon est dosé 10 fois dans la même série de dosage pour la calcémie dans la même journée. On détermine la moyenne, l'écart type, le

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variation est inferieure à 5 % [31].

Reproductibilité

La reproductibilité a été réalisée grâce a un sérum de contrôle normal

(biolaboexatrol-n) pour la série d'analyse. Le contrôle est préparé et repartie dans des tubes Eppendoff. Les contrôles sont conservés au congélateur et utilisés seulement pour une journée. Le contrôle est dosé au début de chaque série journalière. On détermine le coefficient de variation qui doit être inferieur à 5 %.

Traitement et analyse des données

La saisie des données, les moyennes avec leur écart type ont été réalisées à l’aide du logiciel Microsoft Excel 2007.

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RESULTATS ET

DISCUSSION

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3.1. Résultats

Notre population d’étude est composée de 50 ans et plus.

3.1.1. Répartition de la population selon les tranches d’âges

Figure 4 : Répartition de la population d’étude selon les tranches d’âges La tranche d’âge la plus représentée est cell

(30%). Les sujets âgés de 80 à 84 ans sont les moins représentés (1%). L’âge moyen des sujets de notre étude est de 58,37± 8,01 ans.

30%

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Notre population d’étude est composée de 100 femmes ménopausées âgés de

3.1.1. Répartition de la population selon les tranches d’âges

Répartition de la population d’étude selon les tranches d’âges La tranche d’âge la plus représentée est celle des sujets âgés de 50 à 54 ans (30%). Les sujets âgés de 80 à 84 ans sont les moins représentés (1%). L’âge moyen des sujets de notre étude est de 58,37± 8,01 ans.

21%

100 femmes ménopausées âgés de

3.1.1. Répartition de la population selon les tranches d’âges

Répartition de la population d’étude selon les tranches d’âges e des sujets âgés de 50 à 54 ans (30%). Les sujets âgés de 80 à 84 ans sont les moins représentés (1%). L’âge

Age

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3.1.2. Les résultats du contrôle de qualité

Tableau 2 : Résultats du contrôle de qualité préalablement réalisé Répétabilité

inférieures à 5% en ce qui concerne nos résultats. Il en est de même pour le test de la reproductibilité.

3.1.3. Répartition de la population selon le bilan biologique routinier

Figure 5: Répartition de la population selon le bilan biologique routinier Le bilan biologique routinier n’est pratiqué que chez 9% de la population

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3.1.2. Les résultats du contrôle de qualité

Résultats du contrôle de qualité préalablement réalisé

Répétabilité Reproductibilité inférieures à 5% en ce qui concerne nos résultats. Il en est de même pour le test de la reproductibilité.

ion de la population selon le bilan biologique

: Répartition de la population selon le bilan biologique routinier Le bilan biologique routinier n’est pratiqué que chez 9% de la population

N'avoir jamais fait

Fréquence

Fréquence

35

Résultats du contrôle de qualité préalablement réalisé Reproductibilité

XS CV%

94,8±2,30 2%

tre inférieur ou égal à 5% pour la technique de référence sont inférieures à 5% en ce qui concerne nos résultats. Il en est de même pour le

ion de la population selon le bilan biologique

: Répartition de la population selon le bilan biologique routinier Le bilan biologique routinier n’est pratiqué que chez 9% de la population

Fréquence

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Tableau 3: Répartition de la population selon le niveau d’instruction Niveau d’instruction

Pas moins de 83% des femmes de notre échantillon ne sont pas allé au

primaire dans leur scolarité et parmi ces femmes 65% n'ont pas, pour une raison ou une autre, fréquenté l'école.

3.1.5. Détermination de la

Figure 6: Représentation graphique de la calcémie dans la population La moyenne de la calcémie dans la population est de 91,46 ± 5,79mg/l avec 86% de normocalcémie. L’hypocalcémie à une prévalence si

chez les femmes ménopausées.

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: Répartition de la population selon le niveau d’instruction

Effectifs Fréquence en %

65 18 12 5 100

Pas moins de 83% des femmes de notre échantillon ne sont pas allé au

primaire dans leur scolarité et parmi ces femmes 65% n'ont pas, pour une raison ou une autre, fréquenté l'école.

. Détermination de la calcémie dans la population

: Représentation graphique de la calcémie dans la population La moyenne de la calcémie dans la population est de 91,46 ± 5,79mg/l avec

% de normocalcémie. L’hypocalcémie à une prévalence significative (13%) chez les femmes ménopausées.

: Répartition de la population selon le niveau d’instruction Fréquence en %

Pas moins de 83% des femmes de notre échantillon ne sont pas allé au-delà du primaire dans leur scolarité et parmi ces femmes 65% n'ont pas, pour une

calcémie dans la population

: Représentation graphique de la calcémie dans la population La moyenne de la calcémie dans la population est de 91,46 ± 5,79mg/l avec

gnificative (13%)

Calcémie

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3.1.6. Détermination de la calcémie dans la population selon les tranches d’âge

Figure 7: Représentation de la calcémie dans la population selon les tranches d’âge

La calcémie dans l’ensemble de la population est normale. Toutefois, on note une légère diminution de la calcémie (90,43 mg/l) dans la tranche d’âge 65 à 69 ans et une légère augmentation de la calcémie (92,33 mg/l) dans la tranche d’âge 60 à 64 ans qui restent cependant dans les valeurs normales.

3.1.7. Répartition de la population selon l’IMC Tableau 4: Répartition de la population selon l’IMC Caractéristiques de l’IMC Effectifs Fréquences

(%)

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qui représente un surpoids

moyenne de 34,3 ± 5,3 et 29 % ont un surpoids avec une moyenne de 27,88±

1,3. Au total 64% des patients ont un excès pondéral.

3.1.8. Répartition de la c d’étude

Figure 8: Répartition de la calcémie selon l’IMC

La calcémie dans l’ensemble de la population est normale. Toutefois, on note une légère augmentation de la calcémie chez les patient

Cependant les valeurs demeurent normales.

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représente un surpoids ; 35 % de la population d’étude est obèse

34,3 ± 5,3 et 29 % ont un surpoids avec une moyenne de 27,88±

1,3. Au total 64% des patients ont un excès pondéral.

. Répartition de la calcémie selon l’IMC dans la population

Répartition de la calcémie selon l’IMC

La calcémie dans l’ensemble de la population est normale. Toutefois, on note une légère augmentation de la calcémie chez les patientes ayant un surpoids.

Cependant les valeurs demeurent normales.

Corpulence

la population d’étude est obèse avec une 34,3 ± 5,3 et 29 % ont un surpoids avec une moyenne de 27,88±

alcémie selon l’IMC dans la population

La calcémie dans l’ensemble de la population est normale. Toutefois, on note es ayant un surpoids.

Calcémie

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3.1.9. Répartition de la population selon la consommation calcique Tableau 5: Répartition de la population selon la consommation calcique

Consommation calcique

Effectifs Fréquence en % Apport nettement

insuffisant

95 95

Apport insuffisant 5 5

Apport suffisant 0 0

Total 100 100

La moyenne de la consommation calcique dans la population générale est de 313,93±113,11mg avec 95% d’apport nettement insuffisant.

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Nous avons déterminé à travers une étude transversale descriptive et analytique la calcémie des femmes ménopausées âgées de 50 ans et plus, admises au laboratoire de l'hôpital de zone de Suru-Léré.

L'âge moyen des sujets de notre étude est 58,37 ± 8,01 ans. Entre autre FARDELLONE et al. (2010) dans une étude sur l'apport de calcium et risque d’ostéoporose et de fractures chez les femmes françaises ménopausées ont trouvé un âge moyen de 67,9±10,0 ans. Ceci s’expliquerait d’une part, par la rareté des femmes ménopausées très âgées à venir à l’hôpital pour des bilans de routine et d’autre part par le manque d’information.

Au préalable, il est important de faire le contrôle de qualité de la méthode qui a servi à doser le calcium. Le coefficient de variation (CV) pour le test de reproductibilité est inférieur à 5%. Ce qui traduit une bonne stabilité du sérum contrôle. Dans un test de répétabilité, le CV est le reflet de la dispersion relative des résultats du dosage d'un échantillon biologique dans une même série selon Bernard (1985). Le coefficient de variation pour le test de répétabilité est inférieur à 5%. Ce qui traduit la fiabilité de nos résultats.

La valeur moyenne de la calcémie est de 91,2 mg/L ; nous remarquons un taux élevé de sujet ayant une calcémie normale (86%), ceci s’expliquerait par le fait que la majorité des sujets de notre étude sont encore en activité (moins de 60 ans). Ces résultats sont confortés par les observations de LIGNERES et al. (1986) qui affirme que chez les femmes ménopausées on note une légère augmentation de la calcémie mais qui reste cependant dans les valeurs normales.

Cependant une étude plus approfondie a permis d’observer une prévalence de dyscalcémie de 14% au sein de notre population d’étude. La forme de dyscalcémie la plus observée est l’hypocalcémie (13%). Ce résultat est similaire à celui trouvé par SOUBAI et al. (2012) qui affirme que

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l’hypocalcémie est plus fréquente que l’hypercalcémie chez les femmes ménopausées. Par ailleurs, il y a une prévalence significative des dyscalcémies chez les sujets présentant une surcharge pondérale.

Nous notons également que 61,53% des patientes hypocalcémiques n’ont pas été au-delà du primaire et n’ont aucune connaissance sur le bilan biologique routinier. En effet, après la ménopause, la carence oestrogénique diminue l’absorption digestive du calcium ainsi que sa réabsorption tubulaire (LIGNERES et coll 1986). Selon CRDRIVCFNB (2010), en présence d’une hypocalcémie, la résorption osseuse survient afin de libérer du calcium des os dans le sang. Au fil des années, cet état peut entrainer l’apparition de l’ostéoporose ce qui augmente le risque de fracture de la hanche et des vertèbres ainsi que de déformations spinales et de diminution de la taille.

Il est à noter que la calcémie bien que normale, a été retrouvé en augmentation chez les femmes en surpoids (92,21mg/l) par rapport aux femmes présentant une corpulence normale (91,48 mg/l). Ce résultat est en contradiction avec celui trouvé par LATAB (2006) qui a rapporté une augmentation de la calcémie chez les femmes de poids normal (95mg/l) et une diminution chez les femmes en surpoids (86mg/l).

Il convient aussi de préciser que la consommation calcique journalière obtenue chez les sujets de notre population d’étude (313,93 mg) est bien en dessous de celle recommandée par l’OMS qui est comprise entre 1000 et 1500mg/j. Nos résultats sont concordants aux études tunisiennes et marocaines menées respectivement chez 1123 femmes de plus de 45 ans avec une ration calcique moyenne basse de 427±160 mg/j et 130 femmes ménopausées de plus de 12 mois avec une ration calcique moyenne basse de 448,38 mg/j.

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CONCLUSION

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Le but de notre étude était de montrer l’importance du dosage du calcium chez les femmes ménopausées admises au laboratoire de l’hôpital de zone de Suru-Léré. Cette détermination a révélé une forte prévalence de surpoids et d’obésité ainsi qu’une prévalence significative (13%) d’hypocalcémie dans la population d’étude. Néanmoins, il faudrait œuvrer vers la prévention qui est peu coûteuse par des conseils diététiques appropriés, sur le choix des aliments et leurs équivalents nutritionnels et énergétiques, la pratique d'une activité physique afin de lutter contre les surpoids et ses corollaires métaboliques avérés. Insister sur une supplémentation calcique pouvant réduire le risque de fractures. Le maintien d'une alimentation riche en calcium est primordial à tous les âges de la vie. Ceci montre l’intérêt d’un bilan calcique dans la prévention des dyscalcémies, des affections osseuse et thyroïdienne. Par ailleurs cette étude pourrait être étendue à un échantillon de taille plus importante et représentative de la population de Cotonou pour être généralisée à tous les départements du Bénin.

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SUGGESTIONS

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Au terme de ces travaux, nous suggérons : Aux autorités du ministère de la santé

• D’effectuer des campagnes de sensibilisations aux femmes ménopausées sur les dyscalcémies notamment l’hypocalcémie afin de réduire l’ignorance de ces dernières et de les prévenir contre les maladies cardiovasculaires et l’ostéoporose ;

Aux cliniciens

• De demander systématiquement le bilan phosphocalcique chez les femmes ménopausées en vue de déterminer les anomalies du bilan phosphocalcique;

Aux autorités de l’HZ/SL

• De favoriser la réalisation à coût réduit des bilans phosphocalciques de façon à les rendre accessible aux personnes âgées;

Aux autorités de l’EPAC

• D’augmenter la durée du stage des étudiants en fin de cycle afin de permettre des études plus approfondies ;

• De procéder à une signature systématique de convention avec les structures d’accueil. Il serait souhaitable que cette convention soit assortie du matériel apprêté par l’EPAC à ses structures.

Aux femmes ménopausées

• D’avoir un régime alimentaire riche en calcium et pratiquer les activités physiques et sportives.

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REFERENCES

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29. LIGNERES et Coll., JCEM 1986, vol 62, 3.

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ANNEXES

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82 70 17,85 94 201

83 60 19,31 95 298

84 72 26,67 99 300

85 50 27,35 93 374

86 51 22,50 96 464

87 60 49,33 92 349

88 73 31,61 90 356

89 58 27,68 77 242

90 55 30,11 86 207

91 52 55,88 82 204

92 53 30,44 90 304

93 56 32,52 85 196

94 53 25,47 87 198

95 57 32,84 84 482

96 58 31,63 86 354

97 52 33,75 88 198

98 69 27,58 93 298

99 55 29,06 83 158

100 62 33,28 89 230

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Répétabilité

Nombre de

dosages 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Valeur de la

calcémie 98 98 96 99 97 99 99 97 95 97

Reproductibilité

Nombre de

dosages 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Valeur de la

calcémie 98 97 98 94 96 94 94 92 93 92

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ANNEXE 3: Fiche d’enquête

Date...

Nom: ...

Prénoms : ...

Age :... Poids... Taille...

IMC...

Niveau d'instruction : Analphabète Primaire Secondaire Supérieure

Profession :...

Faites vous des bilans biologiques routiniers ? OUI NON Souffrez vous de :

HTA ? OUI NON Autres affections ? OUI NON

Lesquelles ?...

Depuis quand?...

Prenez vous des médicaments ? OUI NON Lesquels ?...

Ration calcique journalière (cf. fiche de calcul) : Insuffisante Suffisante

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Moins de 500 mg : votre apport journalier en calcium est nettement insuffisant.

De 500 mg à 1000 mg : votre apport journalier en calcium est insuffisant.

1000 g et plus : votre apport en calcium est suffisant.

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TABLES DES MATIERES

LISTE DES ENSEIGNANTS DU DEPARTEMENT DE GENIE DE

BIOLOGIE HUMAINE (GBH) ... ii

CHAPITRE 1 : ... 4

1. Synthèse bibliographique ... 5

1.1. Calcium ... 5

1.1.1. Rôle du calcium ... 5

1.1.2. Répartition du calcium dans l'organisme ... 5

1.1.3. Régulation du calcium ... 6

1.2. Pathologies liées à un trouble phosphocalcique ... 8

1.2.1. Ostéoporose ... 8

1.2.1.1. Définition ... 8

1.2.1.2. Les différents types d'ostéoporose ... 8

1.2.1.3. Epidémiologie et Physiopathologie de l’ostéoporose ... 9

1.2.1.3.1 Epidémiologie ... 9

1.2.1.3.2. Physiopathologie ... 9

1.2.1.4. Facteurs de risque de l'ostéoporose... 11

1.2.1.5. Diagnostic de l’ostéoporose ... 11

1.2.2. Dyscalcémies ... 13

1.2.2.1. Hypocalcémie ... 13

1.2.2.1.1. Définition ... 13

1.2.2.1.2. Principales étiologies des hypocalcémies ... 13

1.2.2.1.3. Bilan d’une hypocalcémie ... 13

1.2.2.2. Hypercalcémie ... 14

1.2.2.2.1. Définition ... 14

1.2.2.2.2. Principales étiologies des hypercalcémies ... 14

1.2.2.2.3. Bilan d’une hypercalcémie ... 14

1.3. La ménopause ... 15

1.3.1. Définition ... 15

1.3.2. Endocrinologie ... 15

1.3.3. Différentes phases ménopausiques ... 17

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