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CHAPITRE 1 :

1. Synthèse bibliographique

1.3. La ménopause

1.3.5. Bilans biologiques d’exploration de la ménopause

1.3.5.2. Bilan calcique

Au cours de la ménopause, la balance calcique est négative (-30 à -150 mg/j) en relation avec une résorption osseuse accrue malgré une formation

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la calcémie qui reste cependant dans les valeurs normales. La carence ostrogénique diminue l'absorption digestive du calcium ainsi que sa réabsorption tubulaire, favorisant également l'hypercalciurie : un traitement substitutif ostrogénique corrige rapidement ces fonctions. La parathormone est inchangée avant et après la ménopause, de même que la vitamine D en l'absence de carence [15,16,29].

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CADRE, MATERIEL ET

METHODES D’ETUDE

Réalisé et soutenu par DJOSSOU Rock et HOUNTON Sylvestre 24 Humaine (GBH) où nous avons suivi notre formation professionnelle pendant trois ans.

2.1.2. Cadre technique

Notre stage s’est déroulé au laboratoire de l’Hôpital de Zone de Suru-Léré à Cotonou.

2.1.2. 1. Historique

Conformément aux dispositions du Décret n°2002-0113 du 12 mars 2002 portant approbation des statuts des Hôpitaux de Zone en République du Bénin, l’hôpital de zone de Suru-Léré est « un établissement public à caractère social, doté de la personnalité morale et jouissant d’une autonomie de gestion. »

L’HZ-SL a été construit sur le site de l’ancien Centre de Santé de la Commune de Cotonou III (Akpakpa) avec l’appui financier du Fonds Européen de Développement (FED), et a effectivement démarré ses activités en mai 2004. Il est situé à Akpakpa à la limite des quartiers Suru-Léré et Kowegbo, au bord de la grande voie pavée allant de l’église Saint Martin au quartier Yénawa. Administrativement, la zone de couverture de l’Hôpital concerne toute la population d’Akpakpa (Ex Cotonou II et III). Mais, en réalité son aire sanitaire s’étend au-delà et couvre une bonne partie de la commune de Sèmè-Kpodji.

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La population bénéficiaire de ses prestations est estimée à 278529 habitants environ en 2011 selon les estimations de l’Institut National de Statistiques et d’Analyses Economiques (INSAE).

2.1.2.2. Présentation de l’Hôpital

L’Hôpital de Zone de Suru-Léré dispose d’organes consultatifs qui assistent la Direction dans sa gestion quotidienne. Nous avons : le Comité de Direction; la Commission Médicale Consultative; et la Commission d’hygiène et de sécurité. Dans le cadre de son fonctionnement, l’Hôpital de Zone de Suru-Léré dispose d’un certain nombre de services Médico-Techniques à savoir:

- le service de la médecine interne ;

- le service de chirurgie avec une unité d’anesthésie- réanimation et deux (02) blocs opératoires ;

- le service de pédiatrie avec une unité de néonatologie ; - le service de maternité (gynéco- obstétrique) ;

- le service d’ophtalmologie ; - le service de radiologie ; - le service de kinésithérapie ; - le service de stomatologie ;

- le service d’Oto Rhino Laryngologie ; - la pharmacie ;

- l’unité de vaccination

- le service de laboratoire (lieu de notre stage).

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Situé en face du service de radiologie à environ 50 mètres de l’entrée principale de l’hôpital, le laboratoire d’analyses biomédicales dudit hôpital comporte :

- Une salle d’accueil qui sert de salle de prélèvement;

- Une salle dans laquelle se font la biochimie et l’électrophorèse de l’hémoglobine ;

- Une salle d’hématologie, de sérologie et de parasitologie (GEDP) ; - Une salle de parasitologie (AKOP) et de bactériologie;

- Deux salles de garde;

- Une salle d’eau;

- Un bureau pour le responsable du laboratoire ;

A ces différents sections s’ajoute une section d’immunologie ou se font les analyses biologique de suivi des personnes vivants avec le VIH.

2.1.2.2.2. Ressources humaines

Le personnel exerçant dans ce laboratoire est composé de:

Quatre (4) ingénieurs de travaux dont le responsable ; Deux (2) aides de laboratoire

Six (6) techniciens de laboratoire Un (1) technicien supérieure de santé

Ce personnel a le devoir de se tenir informé de l’évolution des nouvelles technologies de la biologie médicale.

2.1.2.2.3. Organisation du travail au laboratoire

Le laboratoire est organisé pour fonctionner 24h/24. Il existe pour ce

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fait une équipe de permanence et une équipe de garde. Le travail commence avec les patients qui ont fini de remplir les formalités pour leur demande d’examens au service clientèle de l’hôpital. Ensuite ils sont accueillis à la salle de prélèvement où deux techniciens s’occupent de leur prise en charge. Les échantillons (sang, selles, urines …) bien étiquetés et enregistrés sont acheminés dans la salle principale. Il en est de même pour les prélèvements faits dans les autres services. Auniveau de la salle principale, le travail est organisé comme suit :

-enregistrement des examens à faire sur chaque échantillon dans les cahiers de paillasse respectifs;

-répartition des tubes selon les sections ;

-centrifugation des tubes sec, citraté et fluoré.

A la fin des manipulations, le technicien passe au remplissage du matériel utilisé est le suivant :

- Plateau de prélèvement - Coton hydrophile

- Pissette d’alcool iodé - Sparadrap

- Etiquette - Garrot

- Aiguilles vacutainer à usage unique + corps vacutainer

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- Savon liquide

- Boite de sécurité pour aiguilles utilisées - Tubes secs sous vide à gel

- Gants - Portoir - Marqueur

2.2.2. Matériel de dosage

La réalisation de la calcémie passe par l’utilisation du matériel suivant : - Gants

- Tubes à hémolyse en plastique neufs de 5 ml à usage unique - Marqueurs

- Compresses propres - Pissette d’eau distillée

- Cônes neufs (bleus et jaunes) - Micropipettes réglables - Eau distillée

- Cahier de paillasse - Centrifugeuse à tube - Spectrophotomètre

Comme réactifs, nous avons utilisé : Le kit de calcium CPC de marque BIOLABO, le sérum de contrôle et le sérum des patients.

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2.3. Méthodes d’étude

2.3 .1. Type et période d'étude

Il s'agit d'une étude transversale descriptive et analytique qui s'est déroulée sur la période allant du 25 Août au 19 septembre 2014.

2.3.2. Population d'étude

La population d'étude est constituée de femmes ménopausées de 50 ans et plus, admises au laboratoire de l'Hôpital de Zone de Suru-Léré.

Taille de l'échantillon

La taille de notre échantillon est de 100 patients. Notre échantillonnage a été fait par recrutement exhaustif.

Critère d'inclusion

Sont incluses dans l'étude les femmes ménopausées âgées de 50 ans et plus et admises au service de laboratoire d’analyses biomédicales dans la période d'étude.

Critère d'exclusion

Sont exclues de l’étude les femmes ménopausées vivant avec le VIH et les patientes qui sont sous traitement.

2.3.3. Collecte de données

Nous avons soumis les sujets à un questionnaire pour recueillir des données d'identification, d'examens cliniques et paracliniques. Celles-ci nous ont permis de nous renseigner sur l'état des patientes. Ces données comprennent

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d'instruction ainsi que le traitement suivi.

Le poids a été mesuré chez les patientes grâce à une pèse personne. La taille a été prise à l’aide d’une toise. L’IMC (kg/m2) est calculé à partir du poids et la taille selon la formule suivante :

2.3.4. Variables étudiés

L'âge, l'IMC, la concentration sérique du calcium ont été pris en compte.

2.3.5. Prélèvement

Chaque sujet est prélevé à jeun. Le prélèvement est fait par ponction veineuse au pli du coude dans un tube sec contenant du gel.

2.3.6. Centrifugation

Les échantillons de sang ainsi obtenus chez les sujets sont centrifugés à 3000 TPM pendant 10 mn. Une évaluation de l'aspect du sérum est effectuée après centrifugation afin de détecter toute interférence macroscopique, hémolyse, ictère, lipémie.

2.3.7. Dosage du calcium

Avant le dosage, des tubes à hémolyse en plastique sont identifiés et disposés sur un portoir suivant l'ordre : blanc réactif, étalon, contrôle, échantillon.

(IMC=Poids/taille2)

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Principe du dosage

En milieu alcalin, le 0-crésolphtaleine complexon ou CPC réagit avec les ions calcium pour former un complexe colore rouge foncé dont l'absorbance, mesurée à 570 nm, est proportionnelle à la concentration en calcium de l'échantillon.

Tableau 1: Mode opératoire du dosage de calcium (Biolabo)

Blanc Etalon Control Dosage

Réactif 1 500µl 500µl 500µl 500µl

Bien mélanger et incuber pendant 5 minutes à température ambiante

Lire les absorbances a 570 nm contre le blanc réactif au spectrophotomètre.

Température : 25°C

Faire le zéro optique avec de l'eau distillée.

Valeurs normales : 85 à 105 mg/l

Suite aux dosages effectués, les résultats obtenus sont inscrits dans un tableau.

Contrôle de qualité

Le contrôle de qualité a été apprécié par la répétabilité et la reproductibilité

Répétabilité

Le sérum d'un échantillon est dosé 10 fois dans la même série de dosage pour la calcémie dans la même journée. On détermine la moyenne, l'écart type, le

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variation est inferieure à 5 % [31].

Reproductibilité

La reproductibilité a été réalisée grâce a un sérum de contrôle normal

(biolaboexatrol-n) pour la série d'analyse. Le contrôle est préparé et repartie dans des tubes Eppendoff. Les contrôles sont conservés au congélateur et utilisés seulement pour une journée. Le contrôle est dosé au début de chaque série journalière. On détermine le coefficient de variation qui doit être inferieur à 5 %.

Traitement et analyse des données

La saisie des données, les moyennes avec leur écart type ont été réalisées à l’aide du logiciel Microsoft Excel 2007.

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RESULTATS ET

DISCUSSION

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3.1. Résultats

Notre population d’étude est composée de 50 ans et plus.

3.1.1. Répartition de la population selon les tranches d’âges

Figure 4 : Répartition de la population d’étude selon les tranches d’âges La tranche d’âge la plus représentée est cell

(30%). Les sujets âgés de 80 à 84 ans sont les moins représentés (1%). L’âge moyen des sujets de notre étude est de 58,37± 8,01 ans.

30%

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Notre population d’étude est composée de 100 femmes ménopausées âgés de

3.1.1. Répartition de la population selon les tranches d’âges

Répartition de la population d’étude selon les tranches d’âges La tranche d’âge la plus représentée est celle des sujets âgés de 50 à 54 ans (30%). Les sujets âgés de 80 à 84 ans sont les moins représentés (1%). L’âge moyen des sujets de notre étude est de 58,37± 8,01 ans.

21%

100 femmes ménopausées âgés de

3.1.1. Répartition de la population selon les tranches d’âges

Répartition de la population d’étude selon les tranches d’âges e des sujets âgés de 50 à 54 ans (30%). Les sujets âgés de 80 à 84 ans sont les moins représentés (1%). L’âge

Age

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3.1.2. Les résultats du contrôle de qualité

Tableau 2 : Résultats du contrôle de qualité préalablement réalisé Répétabilité

inférieures à 5% en ce qui concerne nos résultats. Il en est de même pour le test de la reproductibilité.

3.1.3. Répartition de la population selon le bilan biologique routinier

Figure 5: Répartition de la population selon le bilan biologique routinier Le bilan biologique routinier n’est pratiqué que chez 9% de la population

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3.1.2. Les résultats du contrôle de qualité

Résultats du contrôle de qualité préalablement réalisé

Répétabilité Reproductibilité inférieures à 5% en ce qui concerne nos résultats. Il en est de même pour le test de la reproductibilité.

ion de la population selon le bilan biologique

: Répartition de la population selon le bilan biologique routinier Le bilan biologique routinier n’est pratiqué que chez 9% de la population

N'avoir jamais fait

Fréquence

Fréquence

35

Résultats du contrôle de qualité préalablement réalisé Reproductibilité

XS CV%

94,8±2,30 2%

tre inférieur ou égal à 5% pour la technique de référence sont inférieures à 5% en ce qui concerne nos résultats. Il en est de même pour le

ion de la population selon le bilan biologique

: Répartition de la population selon le bilan biologique routinier Le bilan biologique routinier n’est pratiqué que chez 9% de la population

Fréquence

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Tableau 3: Répartition de la population selon le niveau d’instruction Niveau d’instruction

Pas moins de 83% des femmes de notre échantillon ne sont pas allé au

primaire dans leur scolarité et parmi ces femmes 65% n'ont pas, pour une raison ou une autre, fréquenté l'école.

3.1.5. Détermination de la

Figure 6: Représentation graphique de la calcémie dans la population La moyenne de la calcémie dans la population est de 91,46 ± 5,79mg/l avec 86% de normocalcémie. L’hypocalcémie à une prévalence si

chez les femmes ménopausées.

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: Répartition de la population selon le niveau d’instruction

Effectifs Fréquence en %

65 18 12 5 100

Pas moins de 83% des femmes de notre échantillon ne sont pas allé au

primaire dans leur scolarité et parmi ces femmes 65% n'ont pas, pour une raison ou une autre, fréquenté l'école.

. Détermination de la calcémie dans la population

: Représentation graphique de la calcémie dans la population La moyenne de la calcémie dans la population est de 91,46 ± 5,79mg/l avec

% de normocalcémie. L’hypocalcémie à une prévalence significative (13%) chez les femmes ménopausées.

: Répartition de la population selon le niveau d’instruction Fréquence en %

Pas moins de 83% des femmes de notre échantillon ne sont pas allé au-delà du primaire dans leur scolarité et parmi ces femmes 65% n'ont pas, pour une

calcémie dans la population

: Représentation graphique de la calcémie dans la population La moyenne de la calcémie dans la population est de 91,46 ± 5,79mg/l avec

gnificative (13%)

Calcémie

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3.1.6. Détermination de la calcémie dans la population selon les tranches d’âge

Figure 7: Représentation de la calcémie dans la population selon les tranches d’âge

La calcémie dans l’ensemble de la population est normale. Toutefois, on note une légère diminution de la calcémie (90,43 mg/l) dans la tranche d’âge 65 à 69 ans et une légère augmentation de la calcémie (92,33 mg/l) dans la tranche d’âge 60 à 64 ans qui restent cependant dans les valeurs normales.

3.1.7. Répartition de la population selon l’IMC Tableau 4: Répartition de la population selon l’IMC Caractéristiques de l’IMC Effectifs Fréquences

(%)

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qui représente un surpoids

moyenne de 34,3 ± 5,3 et 29 % ont un surpoids avec une moyenne de 27,88±

1,3. Au total 64% des patients ont un excès pondéral.

3.1.8. Répartition de la c d’étude

Figure 8: Répartition de la calcémie selon l’IMC

La calcémie dans l’ensemble de la population est normale. Toutefois, on note une légère augmentation de la calcémie chez les patient

Cependant les valeurs demeurent normales.

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représente un surpoids ; 35 % de la population d’étude est obèse

34,3 ± 5,3 et 29 % ont un surpoids avec une moyenne de 27,88±

1,3. Au total 64% des patients ont un excès pondéral.

. Répartition de la calcémie selon l’IMC dans la population

Répartition de la calcémie selon l’IMC

La calcémie dans l’ensemble de la population est normale. Toutefois, on note une légère augmentation de la calcémie chez les patientes ayant un surpoids.

Cependant les valeurs demeurent normales.

Corpulence

la population d’étude est obèse avec une 34,3 ± 5,3 et 29 % ont un surpoids avec une moyenne de 27,88±

alcémie selon l’IMC dans la population

La calcémie dans l’ensemble de la population est normale. Toutefois, on note es ayant un surpoids.

Calcémie

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3.1.9. Répartition de la population selon la consommation calcique Tableau 5: Répartition de la population selon la consommation calcique

Consommation calcique

Effectifs Fréquence en % Apport nettement

insuffisant

95 95

Apport insuffisant 5 5

Apport suffisant 0 0

Total 100 100

La moyenne de la consommation calcique dans la population générale est de 313,93±113,11mg avec 95% d’apport nettement insuffisant.

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Nous avons déterminé à travers une étude transversale descriptive et analytique la calcémie des femmes ménopausées âgées de 50 ans et plus, admises au laboratoire de l'hôpital de zone de Suru-Léré.

L'âge moyen des sujets de notre étude est 58,37 ± 8,01 ans. Entre autre FARDELLONE et al. (2010) dans une étude sur l'apport de calcium et risque d’ostéoporose et de fractures chez les femmes françaises ménopausées ont trouvé un âge moyen de 67,9±10,0 ans. Ceci s’expliquerait d’une part, par la rareté des femmes ménopausées très âgées à venir à l’hôpital pour des bilans de routine et d’autre part par le manque d’information.

Au préalable, il est important de faire le contrôle de qualité de la méthode qui a servi à doser le calcium. Le coefficient de variation (CV) pour le test de reproductibilité est inférieur à 5%. Ce qui traduit une bonne stabilité du sérum contrôle. Dans un test de répétabilité, le CV est le reflet de la dispersion relative des résultats du dosage d'un échantillon biologique dans une même série selon Bernard (1985). Le coefficient de variation pour le test de répétabilité est inférieur à 5%. Ce qui traduit la fiabilité de nos résultats.

La valeur moyenne de la calcémie est de 91,2 mg/L ; nous remarquons un taux élevé de sujet ayant une calcémie normale (86%), ceci s’expliquerait par le fait que la majorité des sujets de notre étude sont encore en activité (moins de 60 ans). Ces résultats sont confortés par les observations de LIGNERES et al. (1986) qui affirme que chez les femmes ménopausées on note une légère augmentation de la calcémie mais qui reste cependant dans les valeurs normales.

Cependant une étude plus approfondie a permis d’observer une prévalence de dyscalcémie de 14% au sein de notre population d’étude. La forme de dyscalcémie la plus observée est l’hypocalcémie (13%). Ce résultat est similaire à celui trouvé par SOUBAI et al. (2012) qui affirme que

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l’hypocalcémie est plus fréquente que l’hypercalcémie chez les femmes ménopausées. Par ailleurs, il y a une prévalence significative des dyscalcémies chez les sujets présentant une surcharge pondérale.

Nous notons également que 61,53% des patientes hypocalcémiques n’ont pas été au-delà du primaire et n’ont aucune connaissance sur le bilan biologique routinier. En effet, après la ménopause, la carence oestrogénique diminue l’absorption digestive du calcium ainsi que sa réabsorption tubulaire (LIGNERES et coll 1986). Selon CRDRIVCFNB (2010), en présence d’une hypocalcémie, la résorption osseuse survient afin de libérer du calcium des os dans le sang. Au fil des années, cet état peut entrainer l’apparition de l’ostéoporose ce qui augmente le risque de fracture de la hanche et des vertèbres ainsi que de déformations spinales et de diminution de la taille.

Il est à noter que la calcémie bien que normale, a été retrouvé en augmentation chez les femmes en surpoids (92,21mg/l) par rapport aux femmes présentant une corpulence normale (91,48 mg/l). Ce résultat est en contradiction avec celui trouvé par LATAB (2006) qui a rapporté une augmentation de la calcémie chez les femmes de poids normal (95mg/l) et une diminution chez les femmes en surpoids (86mg/l).

Il convient aussi de préciser que la consommation calcique journalière obtenue chez les sujets de notre population d’étude (313,93 mg) est bien en dessous de celle recommandée par l’OMS qui est comprise entre 1000 et 1500mg/j. Nos résultats sont concordants aux études tunisiennes et marocaines menées respectivement chez 1123 femmes de plus de 45 ans avec une ration calcique moyenne basse de 427±160 mg/j et 130 femmes ménopausées de plus de 12 mois avec une ration calcique moyenne basse de 448,38 mg/j.

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CONCLUSION

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Le but de notre étude était de montrer l’importance du dosage du calcium chez les femmes ménopausées admises au laboratoire de l’hôpital de zone de Suru-Léré. Cette détermination a révélé une forte prévalence de surpoids et d’obésité ainsi qu’une prévalence significative (13%) d’hypocalcémie dans la population d’étude. Néanmoins, il faudrait œuvrer vers la prévention qui est peu coûteuse par des conseils diététiques appropriés, sur le choix des aliments et leurs équivalents nutritionnels et énergétiques, la pratique d'une activité physique afin de lutter contre les surpoids et ses corollaires métaboliques avérés. Insister sur une supplémentation calcique pouvant réduire le risque de fractures. Le maintien d'une alimentation riche en calcium est primordial à tous les âges de la vie. Ceci montre l’intérêt d’un bilan calcique dans la prévention des dyscalcémies, des affections osseuse et thyroïdienne. Par ailleurs cette étude pourrait être étendue à un échantillon de

Le but de notre étude était de montrer l’importance du dosage du calcium chez les femmes ménopausées admises au laboratoire de l’hôpital de zone de Suru-Léré. Cette détermination a révélé une forte prévalence de surpoids et d’obésité ainsi qu’une prévalence significative (13%) d’hypocalcémie dans la population d’étude. Néanmoins, il faudrait œuvrer vers la prévention qui est peu coûteuse par des conseils diététiques appropriés, sur le choix des aliments et leurs équivalents nutritionnels et énergétiques, la pratique d'une activité physique afin de lutter contre les surpoids et ses corollaires métaboliques avérés. Insister sur une supplémentation calcique pouvant réduire le risque de fractures. Le maintien d'une alimentation riche en calcium est primordial à tous les âges de la vie. Ceci montre l’intérêt d’un bilan calcique dans la prévention des dyscalcémies, des affections osseuse et thyroïdienne. Par ailleurs cette étude pourrait être étendue à un échantillon de

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