3.3.1. Métabolites secondaires présents dans la poudre de Tridax procumbens
Les phytobiotiques sont couramment utilisés en élevage de volailles pour améliorer les performances de croissance, ainsi que la qualité et la conservation de la viande (Windisch et al., 2008 ). L’usage de ces phytobiotiques en aviculture est lié à la grande variété des métabolites secondaires responsables de leurs activités biologiques (Guardia et al., 2011).
Dans la présente étude, le screening phytochimique réalisé sur la poudre Tridax procumbens révèle la présence des alcaloïdes, des polyphénols, des flavonoïdes, des anthocyanes, des leuco-anthocyanes, des composés réducteurs, des terpènes des stérols, mucilages, des saponosides et des tanins.
Cependant, les anthraquinones, les coumarines et les quinones sont absentes.
Les résultats obtenus pour ce screening sont conformes à ceux rapportés par Tejaswini et al. (2011) en Inde, mais différent de ceux de Terrunum et al.
(2012) qui ont identifié en plus de ces métabolites la présence des anthraquinones dans les feuilles de T. procumbens récoltées au Nigéria. Cette différence dans la composition chimique de la poudre de Tridax procumbens utilisée dans notre étude peut être liée à la différence de zones agro-écologiques en rapport avec les facteurs climatiques et environnementaux comme l’ont notifié Kubmarawa et al. (2007).
3.3.2. Digestibilité apparente de la matière sèche des poulettes ISA Brown Les résultats obtenus pour le test de digestibilité apparente indiquent que les poulets ayant reçu en substitution de la poudre Tridax procumbens ont présenté une digestibilité similaire par rapport au lot témoin. Cela suggère que les différents taux d’incorporation de la poudre de Tridax procumbens n’ont pas significativement influencé la digestibilité apparente de la matière sèche chez les poulettes. Toutefois, bien qu’il n’existe aucune différence entre les
différents lots pour le CUDa, les poulettes qui ont reçu la poudre de Tridax procumbens à 10% et 20% ont présenté une digestibilité légèrement inférieure à celle du lot témoin. Ceci est lié à l’incorporation de Tridax procumbens dans la provende. En effet, les poulets ne possèdent pas comme les herbivores des microorganismes leur permettant de valoriser les fibres contenues dans les feuilles. Par ailleurs, Ikewuchi et al.,(2009) ont rapporté que la tige et les feuilles séchées de cette plante contiennent respectivement 16,41 ± 0,26% et 6,13 ± 0,40% de fibres. Ceci peut donc expliquer les résultats obtenus pour la digestibilité.
3.3.3. Consommation alimentaire, croissance pondérale, gain moyen quotidien et indice de consommation des poulettes ISA Brown
Les poids moyens finaux des animaux des lots T10 et T20 sont supérieurs à ceux des lots témoins. Ceci s’explique par la richesse en protéines de la plante séchée. Selon Ikewuchi et al. (2009), la tige séchée de T. procumbens renferme 37,44 ± 0,26g de protéines et les feuilles séchées, 34,57 ± 0,00g. Les paramètres zootechniques ont significativement varié d’un lot à l’autre. Ceci suggère que, par rapport au lot témoin, les lots ayant reçu en substitution de la poudre de Tridax procumbens ont eu un poids plus élevé. Les meilleurs taux de survie ont été obtenus au niveau des lots T10 et T20. Les multiples vertus et plus particulièrement les propriétés anti-oxydantes de T. procumbens rapportées par Agrawal et al. (2009) et qui sont dues à ses constituants chimiques pourraient expliquer ces résultats. Le taux de protéines à l’étape brute du tourteau de soja varie de 44 à 48 % valeur supérieure à celle de la
En effet le résultat du screening phytochimique a révélé que cette plante est riche en flavonoïdes. Les propriétés anti-stress des flavonoïdes ont été amplement développées par Mc Geown (2003). Il est à remarquer que l’une des contraintes fondamentales de l’élevage avicole dans les pays tropicaux réside dans les facteurs de stress auxquels sont soumis les poulets d’élevage.
Les stress de différentes sources comme l’excès de chaleur ou de froid affectent sérieusement la croissance des poulets. C’est ce qui explique le gain de poids supérieur chez les poulettes des lots T10 et T20 qui ont consommé la provende à base de T. procumbens. En outre, selon Saxena et Albert (2005) ; Mundada et Shivhare (2010), T. procumbens renferme naturellement des facteurs déparasitants et anti-microbiens. La présence de ces facteurs dans la ration alimentaire constitue une prédisposition favorable à la croissance des poulettes qui ont ingéré de l’aliment à base de cette plante.
Conclusion et suggestions
La substitution du soja par la poudre de Tridax procumbens à différents taux dans l’aliment a eu un effet favorable sur la croissance pondérale des poulettes. Ainsi il ressort que la poudre de Tridax procumbens peut être utilisée dans le but d’améliorer les performances de productions des poulettes ISA Brown. Au terme de ce travail, nous suggérons de poursuivre l’étude de l’effet de la poudre de Tridax procumbens. Pendant la phase de ponte des œufs et de procéder à l’évaluation de la qualité nutritionnelle des œufs des poules pondeuses soumises à une ration alimentaire à base de la poudre de Tridax procumbens.
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Annexes
Annexe 1 : Screening phytochimique de la poudre de Tridax procumbens Le screening phytochimique est basé sur les réactions (coloration et précipitation) différentielles des principaux groupes de composés chimiques contenus dans les plantes selon la méthode de Houghton (1998). Cette analyse comporte :
Recherche des alcaloïdes
Une quantité de 5 g de la poudre a été mélangée à 25 ml d’acide chlorhydrique dilué à 5%. Le mélange est macéré pendant 24 heures puis filtré. 1ml du filtrat a été recueilli auquel 5 gouttes de réactif de Mayer ont été ajoutés. L’apparition d’un précipité jaune traduit la présence des alcaloïdes.
Recherche des composes polyphénoliques
100 ml d’eau bouillante sont ajoutés à 5 g de poudre dans un erlenmeyer. Le mélange est laissé 15 minutes sous agitation continue, puis filtré. Ce filtrat, réparti en 6 portions, a servi aux recherches ci-après:
Recherche des tanins
A la première portion du filtrat, quelques gouttes de chlorure ferrique à 1%
ont été ajoutées. L’observation d’une coloration bleu-foncée verte ou noire indique la présence des tanins.
- Recherche des tanins catéchiques
A 30 ml de la seconde portion, 15 ml de réactif de Stiasny ont été ajoutés. Le mélange est chauffé au bain-marie à 90°C pendant 15 minutes. L’apparition d’un précipité rose indique la présence des tanins catéchiques.
Recherche de flavonoïdes
A 5 ml de la troisième portion, sont ajoutés 5ml d’alcool chlorhydrique et une pincée de poudre de magnésium : c’est la réaction de la cyanidine, dite réaction de Shinoda.
L’apparition d’une coloration orangée, rouge ou violette indique la présence de flavonoïdes.
Recherche des anthocyanes
Quelques gouttes d’acide chlorhydrique à 5% sont additionnées à 1 ml de la quatrième portion. Ce mélange est ensuite alcalinisé par ajout de quelques gouttes d’ammoniaque à 50%. Une coloration rouge qui s’accentue et vire au bleu-violacé ou verdâtre indique la présence d’anthocyane.
Recherche De Leuco-Anthocyane
A 5 ml de la dernière portion, sont ajoutés 5 ml d’alcool chlorhydrique. Le mélange est ensuite chauffé pendant 15 minutes au bain marie à 90°C.
L’observation d’une coloration rouge cerise ou violacé indique la présence de leuco-anthocyane. 100 ml est réparti dans 10 tubes à essais (hauteur 16 cm x 16 mm de diamètre) en série géométrique de raison de 1\10 de concentration du décocté. Après ajustement à 100 ml avec de l’eau et 30 agitations en 15 secondes, le tube est laissé au repos pendant 15 minutes. La hauteur de la mousse est mesurée. Si
elle est supérieure ou égale à 1 cm dans l’un des tubes, la dilution dans ce tube est l’indice de mousse cherché.
Recherche de polyterpenoides et de stéroïdes
Pour cette recherche, 1 g de poudre est ajouté à 10 ml d’alcool éthylique à 70°C. A ce mélange, sont ajoutés 10 ml d’eau distillée puis 2 ml d’acétate de plomb à 10% à volume égal v\ v. Après 15 minutes de repos, 2 ml de solution aqueuse de phosphate sodique à 10% sont ajoutés au filtrat. Après 15 minutes de repos, le filtrat est recueilli dans une ampoule à décanter et extrait à trois reprises avec 5 ml de chloroforme (CHCl3). Les solutions chloroformiques sont séchées sur du sulfate de sodium puis divisées en deux portions et évaporées à siccité (bain-marie). La première portion est solubilisée par quelques gouttes d’acide acétique. Au mélange obtenu, 3 ml d’un mélange d’anhydride acétique- acide sulfurique sont. Une coloration violette, bleue ou verte indique la présence de polyterpènes. A la deuxième portion, sont ajoutées 2 gouttes d’une solution alcoolique d’acide dinitrobenzoique et 2 gouttes d’hydroxyde de sodium à 1N. L’apparition d’une coloration rouge pourpre ou rouge au vin indique la présence de stéroïdes.
Recherche des mucilages
1 ml de décocté à 10% est introduit dans un tube à essai et auquel sont ajoutés 5 ml d’alcool absolu. L’apparition d’un précipité floconneux indique la présence de mucilage après une dizaine de minutes.
Recherche de coumarines
A 20 ml d’éther on ajoute 1 g de poudre puis bouché immédiatement dans un petit erlenmeyer et laissés en macération pendant 24 heures. Le filtrat a été
fluorescence des deux tubes à essai est observée sous UV à 365 nm. Une fluorescence intense dans le tube test indique la présence de coumarines.
Recherche des composés réducteurs
Le décocté à 10% est obtenu par ébullition modérée pendant 3 minutes d’un mélange de 50 ml de poudre. A refroidissement, le filtrat a été ajusté à 50 ml avec de l’eau distillée. 5 ml de filtrat sont introduits dans un tube à essai.
Après le chauffage au bain- marie à 90°C pendant quelques minutes, 1 ml de réactif de Fehling est ajouté (liqueur de Fehling A + liqueur de Fehling B à volume égal). On réchauffe le filtrat quelques minutes après. L’observation d’un précipité rouge vif indique la présence de composés réducteurs.
Recherche des dérivés anthracéniques -Anthracéniques libres
A 1 g de poudre, sont ajoutés 10 ml de chloroforme. Le mélange est chauffé prudemment pendant 3 minutes au bain- marie. Après filtration à chaud, le mélange est complété à 10 ml avec le chloroforme 1 ml de l’extrait chloroformique est additionné de 1 ml d’ammoniaque dilué à 1\2 puis agité.
L’apparition d’une coloration rouge plus ou moins intense indique la présence d’anthracéniques libres.
- Anthracéniques combinés
O-hétérosides
A une partie du résidu épuisé par le chloroforme, sont ajoutés 10 ml d’eau distillée et 1 ml d’acide chlorhydrique concentré. Le tube à essai maintenu au bain marie bouillant pendant 15 minutes est ensuite refroidi sous un courant d’eau. L’hydrolysat est obtenu après filtration et ajustement à 10 ml. 5 ml de l’hydrolysat sont prélevés et agité avec 5 ml de chloroforme. La phase organique soutirée est introduite dans un tube à essai et additionné de 1 ml d’ammoniaque dilué au 1\2 puis agité. La présence d’anthracénique est révélée par la coloration rouge plus ou moins intense. Si la réaction est négative ou faiblement positive, on recherche les O-hétérosides à génines
réduites. Pour ce faire à 5 ml d’hydrolysat sont additionnés 3 à 4 gouttes de FeCL3 (chlorure ferrique) à 10%. Le mélange chauffé au bain marie pendant 5 minutes est enfin refroidi sous courant d’eau puis agité avec 5 ml de chloroforme. A la phase chloroformique soutirée et introduite dans un tube à essai, est ajoute 1 ml d’ammoniaque au 1\2 puis on agite. Une coloration rouge plus ou moins intense signe la présence des O-hétérosides à génines réduites.
C-hétérosides
A la phase aqueuse conservée plus haut, 1ml de FeCL3 à 10% est ajouté. Le mélange est porté à ébullition au bain marie bouillant pendant 30 minutes puis refroidi. Après agitation avec 5 min de chloroforme, la phase chloroformique est soutirée et recueilli dans un tube à essai et 1 ml d’ammoniaque dilué à 1\2 y est ajouté puis agité. Une coloration rouge plus ou moins intense signe la présence de génines de C-hétérosides.
Protéines
Les protéines ont été détectées par le test de biuret. Dans un tube à essai, une quantité aliquote d’extrait est reprise dans 2 ml de NaOH aqueux à 2% (m /v) de CUSO4. L’apparition d’une coloration violette tantôt avec une teinte rougeâtre indique une réaction positive
Quinones
Les quinones ont été mises en évidence par le réactif de Bornstraëgen (ammoniaque dilué au ½). Une prise aliquote d’extrait dissoute dans 5 ml de