MI
TS'ÏUNN DE L'ENSEIGNEMEÀTT SI'PERIEUR ET DELA
REC|IF'-RCIIE SCIEI\ITIX'IQT}E UIVTYERSITEAKLI
MOHAND OT]LHADJ-BOT'IRA
FACT]LTT DES SCIENCES DE LA NATT]RE ET DE
LA
VIE ET DES SCMÀICES DELA
TERREDNPIRTEUEI{T
DEBIOLOGIE
iï'r'
MEMOIRE
DE
FIN
D'ETT]DES
EN VIJE DE
L'OBTENTION
DU
DIPLOME
MASTBR
Domaine:
SNIV
Filière
: Sciences
Biologiques
Etude
in
vitro
de
L'ffit,Èntffitiitzumnb
et
trastuzumnb
sar
Ia
viabilité
de
Ia
lan
e
hydatiqae
Echinoc
oc
cas
granuk)
sus
Soutcnu
le
zMt
Ull2Ol9
Non
et PrênomMru
HanidS
Mm. Boutel.djaR
Mr.labdiri.
Devant
le
jury
composé
de
:
Gradc MCB MCB MCB Univ. dc Bouira Univ. de Bouira Univ. de Bouira Présidcnt Promotrtce Exatnfunteur
t
I
I
J
Table
des
matières
Remerciements
Dédicaee
Liste des
fizures
r.-'(i ja' Liste des tableauxListc des abréviations
Introduction
Chapitre
I
: L'échinococcose kyste...
I
I.1 Dé{inition.
...1I.2
Taxonomie:...
...11.2.1
Echinococcus granulosus granulosus(Gl)
...21.2.2
Echinococcus granulosus equinus(Ga):...
...31.2.3
Echinococcus granulosus canadensis (G6-G8 etGl0
) et boréalis :...-t...3il.
Répartition gtugraphique
de kyste hydatide... ....,...3III.
Parasitologiedu
lryste hydatique: ... ,...4IV.
Anatomopathologie du lcyste hydatique:IV.l
La structure du kystehydatique..
...6IV.1.1
Loadventice:...
...6IV.l.2
La membrane ou cuticuleanhiste...
...6IV.1.3
La membrane proligère ou membrane germinative...
...6IV.l.4
Les vésicules proligères (300 à 800pm)...
...6IV.1.5
Les vésicules fillesendogènes.
...6IV.l.6
Les vésicules fillesexogènes...
...:... 7IV.1.7
Le liquidehydatique..
...7IV.1.8
Le sablehydatique..
...7l
l
I!
l
t'a
I
VI.
L'aspectclinique
de l'échinococcose lcystique... ...10VI.l Symptomatologie...
...l0
Vl.2
Diagnostic deséchinococcoses...
... I IVI.2.1
Le diagnostic clinique et morphologique de l'hydatidose ...l1
VL2.2
Diagnosticbiologique
...l
l
VI.3
Traitement d'échinococcose kystiqueÆrydatidose(EK)...
... I IVI.4
L'immunité...
...12\4.5
Prophylaxie...
...12Chapitre
II:
les anticancéreuxI.
Histopathologie decrncer.
t3
IIL
Ciblethérapeutique....-.
ru.1
Facteur de croissance et récepteur âu facteur decroissance.."...
... 16Ill.2
Anticorps monoclonaux ciblant les tumeurssolides
...17III.2.\
Trastuzumab :(Herceptin@)...
... 17III.2.l.l Définition
...17III.2.|.2
Mécanismed'action....
...17lll.2.2
Bevacizumab(Avastin@)...
... 19IIl.2.2.l
Définition
...1911I.2.2.2
Mécanismed'action...
... 19Chapitre
III
: matériels et méthodesl
: I'1
IJ
tl
IJ
-r
i IJ
-t
t i ! .a r? I : i -<t:
I ! tII.
Techniques depréparation
des coupes histotogiquesII.] Matériels
...23U.1.1
Matériel nonbiologique...
...23il.1.1.1
Afonrei11age...
...23U.1.1.2
Réactifs
...,...23il.1.1.3
Verrerie et accessoires...
,...24Il.l.2
Matérielbiologique
...25II.1.2.1
Le milieu deculture..
..,...2511.1.2.2 Le kyste
hydatique..
...,...25II.2
Méthodes et techniquesd'analyse...
...25ll.2.l
Le test de fertilité et de la viabilité des parasites du liquide hydatique.. ...26II.2.1.1
Examen de la fertilité des kysteshydatique..
...2611.2.1.2 Test de viabilité des protoscolex
...
...26II.2.1.3
Etude microscopique desprotoscolex
...2711.2.2
Histologie des kysteshydatiques.
,...271I.2.2.1,
Le
prélèvement...
...;...
...;...2711.2.2.2 Mise e culture les fragments
kystiques
...2711.2.2.3 La fixation des pièces dans le formaldéhyde
4Yo
...291I.2.2.4
Déshydratation etéclaircissement...
.,...2911.2.2.5
Inclusion
@nrobage)
...31II.2.2.6
Confection descoupes
...311I.2.2.7
Étalement.
...3211.2.2.8 Déparaffinages et
hydratation...
...,...3211.2.2.9
Coloration
...3211.2.2.10
Déshydratation...
...33II.2.2.I1
Montage deslames
...33I
a
a
I
Chapitre
VI
:
résultat et discussion...35
..
l.l
Analyse dtrne pièced'exérèse...
...351.2
Observation microscopique de fragments de kystehydatique
...351.3
Études Histologies du kyste hydatique defoie...
...351.3.1
Étude histologie de paroi de kyste hydatique non traité par les anticancéreux..351.3.2
Étude histologie de paroi de kyste hydatique traité par les anticancéreux...361.3.2.1
Avastin@..
...361.3.2.2
Herceptin@
...371.3.3
Etude deI'effet
invitro
d'avastin@ sur I'integreté des fragments de membranede
kyste hydatique defoie...
...'...381.3.3.1
Avastin@ à10pM
...381.3.3.2
Avastin@ à 20uM
...391.3.3.3
Avastin@ à 30pM
...391.3.3.4
Avastin@ à 40pM
...401.3.3.5
Avastin@ à 50pM
...411.3.4
Etude deI'effet
invitro
d'herceptin@ sur l'intégrité des fragments de kyste hydatique defoie...
...421.3.4.1
Herceptin@ àl0
uM
...421.3.4.2
Herceptin@ à 20pM....
...421.3.4.3
Herceptin@ à 30pM....
...431.3.4.4
Herceptin@ à 40pM....
...431.3.4.5
HerceptinO à 50pM.,..
...441.4
Examen de la fertilité des kysteshydatiques
...451.5
Examen de la viabilité des protoscolex parcoloration...
... 461.5.1
Examen dela
viabilité avec lesanticancéreux...,...
...461.5.1.1
Avastin@(500pM)
...,...471.5.t.2
Herceptin @(106pM)
...47il
1
f
1.6.2
Herceptin@106pM...'t
...491.7
L'effet
des anticanoéreux sur lesvésicules...
...511.7
.l
L'effet
d'herceptin(D sur les vésiculesfiIles...
...5l
1.7.2
L'effet
d'avastin sur les vésiculesfilles...
...51Tt''
il.
I)iscussion..lç...,...o..r... lk ':r Conclusion AnnexesRéference biblio graphique
Résumé ...52
ti
L;ll.
',1ri
a I f, 'tlRésume
L'échinococcose granulosus, est une infection zoonotique causée par I'espèce Cestode du geme Echinococcus,
avec un traitement limité. Donc Il est urgent de développer un nouvel agent anti-hydatique. Iæ Traitement avec
les deux anticancéreux ont montré une irrégularisation de
la
structure des protoscolex et une distorsionsfucturelle de deux couches laminaire et germinative du métacestode d'E.granulosus. Notre travail a
porté
leseffets antiparasitaires de deux anticancéreux herceptin@ et Avastin@ à déférents concentations sur I'intégrié
de la membrane et les parasites du métacestode d'E. granulosus in vitro. Nous avons constaté selon les résultats
des études histopathologiques que les antcancéreux de l0jusqu'a 50 uM ont un effetdêgénéranf sur I'intégrité
de la membrane hydatique et une altération et destruction les parasiûes (protoscolex) in vitro, et qui ont affectê
de
manière significativeet
efficace surla
larve d'Echinococcus granulosus. Ce travail révèle que lesanticancéreux sont un nouveau candidat potentiel prometteur médicament pour le trait€ment de l'échinococcose
granolosus.
MOtS
ClgfS3
6chinococcose, zoonotique, E.granulosus, herceptin@, Avastin@, métacestodgprotmcolex.
Abstract
Echinococcosis granulosus is a zoonotic infection caused by the Cesûode species of the genus Echinococcus,
with limit€d treatment. So it is urgent to develop a new anti-hydatic agent. Treatment with both anti-cancer
agents showed an irregularity of the protoscolex structure and a stmctural distortion of two lami16 and germinal
layers of the E. granulosus metacestode. Our work canied the antiparasitic effects of two anticancer agents,
herceptia@ and Avastin@, and at different concentrations on the membrane inægrity and the parasites of the E
metacesûode. granulosus in vitro. We have found from histopathological studies that anticancer drugs of up to 50
lrM have a degenerative effect on the hydatid membrane integrity and an alteration and destruction of parasiûes
(protoscolex) in vitro which have significantly affected and effective on Echinococcus larvae. This work reveals
that anticancer drugs are a promising new candidaûe drug candidaûe for the treatment of echinococcosis.
Key words:
echinococcosis, zoonotic, E.granulæus, herceptin@, Avastin@, metacestode, protoscrolerUÉTL
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