- les globules blancs ou leucocytes

(1)

Le sang

- les globules blancs ou leucocytes

Histologie A1

Nathalie Bourgès-Abella Ecole Nationale Vétérinaire de Toulouse

(2)

Les leucocytes

Chien, May Grünwald Giemsa, x1000

(3)

Les leucocytes

May Grünwald - Giemsa (MGG)

May Grünwald (éosinate de bleu de méthylène):

5 min Eau

(robinet ou ppi)

Giemsa

R

(bleu et violet de méthylène+éosinate d’azur)

1/10

^e^:

5-10 min

Eau robinet Sécher

Avantages MGG

/ colorations rapides:

Coloration polychromatique = éventail de teintes plus grand

Basophile: bleu violacé

Azurophile: rouge pourpre Eosinophile: rose orangé

Neutrophile: grisâtre à brunâtre

Rappel: coloration du frottis sanguin

(4)

Les leucocytes

Granulocytes (anciens « polynucléaires ») G. Neutrophiles (GNN)

G. Eosinophiles (GNE) G. Basophiles (GNB)

Agranulocytes (leucocytes mononuclées) Lymphocytes

Monocytes

(5)

Le granulocyte neutrophile: morphologie

Microscopie photonique:

Mammifères (cas général)

Diamètre: 12 à 18 mm

(6)

Le granulocyte neutrophile: morphologie

(7)

Le granulocyte neutrophile: variations morphologiques



liées à l’espèce

Granulation hétérophile ou pseudoéosinophile

 liées au sexe

Corpuscule de Barr

(1 - 10% femelles)

 liées à l’âge

 granulocyte non segmenté

ou band cell

(8)

GNN

• Rat  Corpuscule de Barr

Le granulocyte neutrophile: variations morphologiques

(9)

Les jeunes granulocytes: Band cells

Le granulocyte neutrophile: variations morphologiques

(10)

Le granulocyte neutrophile: morphologie

Microscopie électronique

(homme, lapin)

spécifiques

(11)

Le granulocyte neutrophile: morphologie

Composition chimique des granulations du granulocyte neutrophile (GNN)

GNN Activité Granulation primaire (azurophile)

Granulation secondaire (spécifique)

bactéricidie myeloperoxydase lactoferrine lysozyme (1/3) lysozyme (2/3) protéines cationiques

défensines

lytique hydrolases acides collagenase hydrolases neutres

(12)

Le granulocyte neutrophile: morphologie

Composition chimique des granulations du GNN

Contenu et fonctions des granulations du GNN

In « Tizard I.R., Vet. Immunology, an introduction, 7th ed., 2004, Elsevier (USA) »

(13)

Le granulocyte neutrophile: cytophysiologie

Moelle osseuse

Production Maturation Réserve

Sang

GNN marginés

GNN circulants

(12 heures)

Tissus

Fonctions et mort du GNN

(2 à 3 jours)

Ponction veineuse

diabase diapédèse

Les différents compartiments des GNN dans l’organisme

(14)

Le granulocyte neutrophile: données numériques

Chien Chat Cheval de sang Bovin

Leucocytes x10⁹/L 11,5 (6-17)

12,5 (5,5-19,5)

9,05 (5,4-14,3)

8,00 (4,0-12,0)

GNN matures %

70 (60- 77) 59 (35-75) 53 (22-72) 28 (15-45)

/mL 3000-11500 2500-12500 2260-8580 600-4000

Autres espèces: cf tableaux

(15)

Le granulocyte neutrophile: données numériques

Chien Chat

Leucocytes x10

⁹

/l ^11,5

(6-17)

12,5 (5,5-19,5)

GNN /ml 3000-11500 2500-12500

Leucocytose

adrénaline GNN  Lymphocytes 

glucocorticoïdes GNN  GNN 

STRESS

(16)

Le granulocyte neutrophile: cytophysiologie

Diapédèse et chimiotactisme

Vue simplifiée des protéines et de leurs ligands engagés dans l’adhésion du GNN à

l’endothélium

In « Tizard I.R., Vet. Immunology, an introduction, 7th ed., 2004, Elsevier (USA) »

In « Wheater et al., Histologie fonctionnelle, 4ème ed.,2001, de Boeck Université »

(17)

Le granulocyte neutrophile: cytophysiologie

Endocytose

Opsonisation d’une bactérie par Ac et complément In « Tizard I.R., Vet. Immunology, an introduction, 7th ed., 2004, Elsevier (USA) »

(18)

Le granulocyte neutrophile: cytophysiologie

Activité biologique des GNN

 Système bactéricide O

₂

dépendant:

« l’explosion respiratoire » (respiratory burst)

Production de substances oxydantes et de leurs dérivés bactéricides H₂O₂ et OCl^- dans le GNN

In « Tizard I.R., Vet. Immunology, an introduction, 8th ed., 2009, Saunders, Elsevier) » NOX: NADPH Oxydase

survient dans sec. qui suivent la liaison avec la bactérie

consommation d’O2 par GNN augmentée (x100)

activation du système MPO - halogénure (Cl^-, I^-) - H₂O₂

Contre: bactéries, virus, champignons

 Système bactéricide O

₂

indépendant:



libération d’enzymes lytiques (hydrolases acides, lysozyme) et de peptides antimicrobiens (protéines cationiques, lactoferrine) contenues dans granulations

(19)

Les leucocytes

(20)

Le granulocyte éosinophile: morphologie

Microscopie photonique Mammifères (cas général) Diamètre: 12 à 18 mm

noyau bilobé

granulations éosinophiles

étape sanguine: 30 minutes

½ vie tissus: 12 jours

(21)

Chien Cheval

Bovin Chat

Le granulocyte éosinophile: variations morphologiques

Variations liées à l’espèce

(22)

GNE: morphologie

(23)

GNE: morphologie

Microscopie électronique

(24)

GNE: composition biochimique des granulations

Cellule Activité Granulation primaire Granulation secondaire spécifique (cristalloïde)

Eosinophile

antiparasitaire protéine majeure basique (MBP) –coeur- Eosinophil cationic protéin (ECP)

-matrice- E. peroxydase (EPO)

E. derived neurotoxin (EDN) anti-

inflammatoire

histaminase arylsulfatase B

phospholipases B et D

(25)

GNE: Cytophysiologie

1-Fonctions communes avec le GNN:

LE CHIMIOTACTISME

 Par IL5, produite par lymphocytes Th2 et mastocytes (cf cours d’Immunologie)

 Par éotaxines (histamine, acide acétique imidazole, leucotriène B4, PAF), produit de dégranulation des mastocytes

….caractéristiques des Réactions d’Hypersensibilité type I

Régulation de la mobilisation, du chimiotactisme et de l’activation des GNE

In « Tizard I.R., Vet. Immunology, an introduction, 8th ed., 2009) »

(26)

GNE: Cytophysiologie

1-Fonctions communes avec le GNN:

LA PHAGOCYTOSE

• Activité moindre  /GNN

LA BACTERICIDIE

• Activité moindre  /GNN

• Système peroxydase/H₂0₂/halogénure (ion Br-)

(27)

GNE: histophysiologie

Mechanisms involved in the self-cure reaction against intestinal helminths

In « Tizard I.R., Vet. Immunology, 8th ed, 2009 »

 Destruction de parasites (Helminthes)

muqueuse intestinale

Toxocara canis

1-Fonctions spécifiques avec le GNN:

Phénomène de Cytotoxicité

(28)

GNE: données numériques

% 4 (2-10) 5,5 (2-12) 3,5 (0-10) 9,0 (0-20)

/mL 100-1250 0-1500 0-1000 0-2400

Autres espèces :« intervalles de référence en hémato. vétérinaire » sur moodle

(29)

Le granulocyte basophile: morphologie

Microscopie photonique Mammifères (cas général) Diamètre: 14 à 15 mm

-Noyau moyennement lobé à polylobé

-Granulations basophiles (0.5 à 2 mm) dites

« métachromatiques au bleu de Toluidine »

(30)

Le granulocyte basophile: variations morphologiques

Cheval Chat

Chien

(31)

GNB: morphologie

Microscopie électronique

(32)

GNB: morphologie

GNB mastocyte (moelle osseuse)

(33)

Le granulocyte basophile: morphologie

GNB/Mastocyte

 Homologies:

 Précurseur médullaire commun (CD34)

 Nature de certaines granulations

 Rôle dans hypersensibilité immédiate

 Différences:

 GNB: - différenciation MO, forme mature et fonctionnelle circulante - Durée de vie <2sem

 Mastocyte: - maturation et localisation tissulaire - forme circulante rare

- durée de vie longue

(34)

Le granulocyte basophile: composition biochimique des granulations

Composition chimique des granulations du GNB:

mélange complexe de molécules vasoactives similaire à celle des mastocytes

Activité Granulation

Médiateurs de l’inflammation propriétés vasoactives Histamine sérotonine propriété anti-coagulante héparine

Facteurs chimiotactiques ECF-A

NCF LTB4

(35)

GNB/mastocytes: histophysiologie

Intervention dans Hypersensibilité immédiate (cf cours Immunologie)

Médiateurs solubles libérés suite à la dégranulation du mastocyte

In: « Diseases of Immunity, Snyder P.W., Diseases of immunity. In Mc Gavin M.D., Zachary J.F., Pathologic basis of Veterinary Disease, 4th ed.,2007, MosbyElsevier »:

(36)

GNB/mastocytes: histophysiologie

Intervention dans Hypersensibilité immédiate (cf cours Immunologie)

Médiateurs solubles libérés suite à la dégranulation du mastocyte

(37)

Le granulocyte basophile: données numériques

Basophilie = pathologie

% rares rares 0,5 (0-4) 0,5 (0-2)

/mL - - 0-290 0-200

(38)

Les lymphocytes: morphologie

granulations azurophiles Grands lymphocytes

Petits lymphocytes microscopie photonique

(39)

Les lymphocytes: morphologie

(40)

Le lymphocyte: données numériques

% 20 (12-30) 32 (20-55) 39 (17-68) 58 (45-75)

/mL 1000-4800 1500-7000 1500-7700 2500-7500

(41)

Les lymphocytes: données numériques

Chien Chat

Leucocytes x10⁹/L ^11,5

(6-17)

12,5 (5,5-19,5)

Lymphocytes /mL ^1000-4800 ^1500-7000

“lymphocytose” 2-6 mois 1-3 mois

(0-1 mois: svt inversion formule)

adrénaline GNN (L ) L 

glucocorticoïdes GNN L

STRESS

AGE

(42)

Immunité spécifique

 à médiation cellulaire: L T

 à médiation humorale: L B

…. Cf Cours d’Immunologie

Les lymphocytes: cytophysiologie

(43)

Les monocytes: morphologie

Microscopie photonique (coloration MGG)

Mammifères (cas général) Diamètre: 25 à 30 mm

cytoplasme gris « ciel d’orage »

vacuoles

(44)

Les monocytes: morphologie

(45)

Le monocyte: morphologie

Microscopie photonique

Le macrophage alvéolaire

Monocyte: In « Wheater et al., Histologie fonctionnelle, 4ème ed.,2001, de Boeck Université »

(46)

Le monocyte: données numériques

Monocyte sanguin macrophage tissulaire

% 5,2 (3-10) 3 (1-4) 4,5 (0-7) 4,0 (2-7)

/mL 150-1350 0-850 0-1000 25-840

(47)

Le monocyte: les différents compartiments

(48)

Le macrophage: cytophysiologie

Pinocytose Rhophéocytose Phagocytose

(ex: goutellette lipidique) (ex: virus) (ex: hématie)

Phagosome Lysosome

Fusion des lysosomes avec le phagosome

Exocytose des

déchets phagolysosome

l’endocytose

Araki N et al. J Cell Sci 2003;116:247-257

(49)

Le macrophage: cytophysiologie

Activités

Sécrétions

(50)

Le macrophage: cytophysiologie

Activités sécrétoires

Principales cytokines sécrétées par les macrophages In « Tizard I.R., Vet. Immunology, 8th ed, 2009 »

(51)

Les plaquettes sanguines: morphologie

Microscopie photonique

Chien, Chat:

présence de formes géantes

Chat:

agrégats plaquettaires (! Num plqs)

(52)

Les plaquettes sanguines: morphologie

Microscopie électronique

(53)

Chien

forme géante

Chat

(54)

Les plaquettes sanguines: données numériques

x10⁹/L 300

(200-500) 450

(300-800) 225

(100-350) 500

(100-800)

Temps de demi-vie: environ 5 jours (CN)

Lieu de séquestration: rate (30 à 40% de la masse plaquettaire totale) Destruction: SPM

(55)

- les globules blancs ou leucocytes

Le sang