E AN HI

INFLUENCE DE LA SUPPLÉMENTATION DES PROTÉINES

DE BLÉ PAR DES DOSES CROISSANTES DE LYSINE

SUR LA TENEUR EN ACIDES AMINÉS LIBRES DU SANG

ET DU MUSCLE DU RAT EN CROISSANCE

M. PAWLAK, ^{R. PION}

Monique

^{ALLEZ, G. BAYLE} J. ^LEROUX Laboratoire

d’Études

des Métabolismes,

Centre de Recherches

zootechniques et

vétérinaires, 63 - Theix

près

Clermont-Ferrand Institut national de la Recherche

agronomique

SOMMAIRE

De

jeunes

rats, pesant ¹⁰⁰g ^au début de

l’expérience, reçoivent pendant

^{deux semaines, des ra-}

tions

isoénergétiques

^et isoazotées, dont la seule source de

protéine

^{est du} blé, additionné ^de

lysine,

thréonine,

tryptophane

^et méthionine, de telle manière que ^tous les besoins des animaux soient cou- verts à

l’exception

^{du besoin en}

lysine.

^{Le taux de}

lysine

^{est variable et échelonné de} 30 p. ¹⁰⁰

(blé

sans

lysine additionnelle)

^{à 200}p. ¹⁰⁰ du besoin

théorique.

^Des

gains

^de

poids

^{moyens de}

5 ,8

^à

7 , 25

g par

jour

^{sont obtenus dans tous les cas où les besoins en}

lysine

des animaux sont satisfaits. La teneur en

lysine

libre du sang augmente ^{avec la teneur en}

lysine

^{de la} ration, et l’accroissement ^est

particulièrement

^net

lorsque

^{le taux de}

lysine

alimentaire

dépasse

^{le besoin.}

Une

augmentation

similaire, ^mais

beaucoup plus marquée,

^est observée dans le cas du muscle : la teneur en

lysine

^{libre des muscles des rats}

qui

^ont consommé la ration la

plus

^{riche en}

lysine

^est

égale

à 27fois celle des muscles des animaux ayant ^{consommé le blé non}

supplémenté

^en

lysine,

^alors

que

les valeurs les

plus

^élevées observées dans le sang ^{ne sont} que 7 fois

supérieures

^aux

plus

^faibles.

INTRODUCTION

Les

acides aminés libres du sang constituent la

principale

^{forme de}

transport

^des

produits

^{de la}

digestion

^{des matières azotées}

alimentaires,

^{et leurs teneurs traduisent}

l’équilibre

^{entre les}

apports

^et les besoins. Plusieurs auteurs, et en

particulier ^{L ON -}

GENECKER ^et HAUSE

(1959)

^{chez le}

^Chien, MORRISSON,

MIDDI,ETON et MCI,AUGHI,AN

(1 9 6 1

)

^{chez le}

^Rat,

^{ZiMMERMANet SCOTT}

(r 9 65)

^{chez le}

^Poulet,

^{ont mis en évidence une}

relation entre la

composition

^en acides aminés libres du

plasma sanguin

^et la compo- sition des matières azotées

ingérées.

Or,

^il y ^a

également

^un

équilibre

^entre

apport

^et utilisation au niveau des tissus consommateurs d’acides

aminés,

^{et en}

particulier

^du

muscle, qui

constitue la masse

azotée la

plus importante

^de

l’organisme,

^{et est le}

siège,

^en

période

^de

croissance,

^d’une

synthèse protéique

^{intense. De}

plus,

^{HARPER et ROGERS}

( 19 65)

^ont constaté chez le Rat que

des déséquilibres

^en

^acides

aminés modifiaient

plus

les teneurs en acides ami- nés libres du muscle que ^celles

du

sang.

’

Aussi

avons-nous

entrepris ^l’étude comparative

^de

l’influence

de la

composition

des

protéines alimentaires

^{sur la}

composition

^{en acides aminés}

^libres

^{du sang et du}

muscle chez ^le Rat en croissance.

Après

^avoir

constaté,

^{dans une}

première expérience,

!PAWI,AK

^et

^PION, 19 67) qu’une

^forte carence en

lysine

^modifiait

beaucoup plus

^la

teneur en

lysine

^{du muscle} que celle du _sang, nous avons cherché à déterminer dans la

présente expérience

l’influence de doses croissantes de

lysine,

allant d’une forte

carence à un

excès,

sur la teneur en acides aminés libres de ces tissus.

MATÉRIEL

ET

MÉTHODES

i. Animaux

Des rats mâles ^de souche Wistay, élevés dans des locaux éclairés de 6 h à 18 h, maintenus à 22° et de

degré hygrométrique

^contrôlé

(6 0

p.

100 ), reçoivent

^un

régime

^standard

depuis

le sevrage

jusqu’à

ce

qu’ils atteignent

^un

poids

^{de 100à I Io} g

soit pendant

^{io à}

12 jours.

^{Ils sont alors}

répartis en lots

de 8 dont les

poids

moyens ^ne diffèrent pas les ^uns des autres de

plus

^{de 2g.}

Ils sont élevés en cages individuelles et

reçoivent

^{à volonté} les rations

expérimentales

^{sous forme}

semi-liquide pendant

^{2semaines. Les} consommations sont mesurées

chaque jour,

^et la croissance est contrôlée par

pesée

^{tous les 2}

jours.

^Les différents lots ^ont été

répartis

^en quatre

expériences (tabl . 5 )

effectuées à des

époques

différentes.

2 . Régirrzes

Ils sont à base de blé de deux variétés différentes, ayant ^{subi une} conservation de durée variable

après

la récolte

(tabl. i),

additionné de minéraux et de vitamines

(tabl.

^2et

3 )

^et

supplémenté

^{en DL-} méthionine,

L-tryptophane

^et L-thréonine

(tabl. 4 ),

^ainsi que par des doses de

L-lysine

^variables

selon les lots

(tabl. 5 ).

^{Le taux}

protéique

de la ration est voisin de iz p. ^10°;

l’équilibre énergétique (

4 50

o

kilocalories _par

kg

^{de matière}

sèche)

^{est assuré} par addition d’amidon ^{de maïs} et d’huile d’ara- chide en modifiant les

proportions

d’amidon de maïs et d’huile d’arachide.

3

. Prélèvement des échantillons

En fin de

période expérimentale,

^{les rats sont abattus le matin entre 10et 12h sans avoir subi}

de

jeûne préalable.

Le sang carotide ^est

prélevé

^sous anesthésie à l’éther et recueilli directement dans sept ^{fois son} volume d’éthanol froid

(― io o ).

Les muscles des membres

postérieurs

^sont

disséqués

^et

placés

immédiatement dans l’azote

liquide.

Les

prélèvements correspondant

à l’ensemble des animaux de

chaque

^{lot sont}

regroupés

pour l’ana-

lyse.

^Les échantillons sont conservés à-20°C.

4

. Extractions

a)

Acides aminés libres des sangs.

L’agent

d’extraction est l’éthanol 84p. ¹⁰⁰utilisé à froid. Une

quantité

^connue de norleucine est

ajoutée

à l’échantillon afin de contrôler le caractère

quantitatif

des différentes

opérations.

^{La mise}

en

présence

^des

composés

à extraire et du solvant est effectuée par

broyage (quatre

^{fois i}

mn)

^{au Wa-}

ring

Blendor. Les pots ^{sont refroidis} entre deux

broyages

successifs.

Les extraits sont

séparés

du résidu par

centrifugation

^{à froid}

( 4

500

g).

^{Le résidu est}

repris

^et

extrait à nouveau, et l’ensemble ^des

manipulations

^est

répété quatre

fois. Les différents extraits

(70

0

^{à 800ml} pour ^20à 30g de sang

frais)

^{obtenus sont}

regroupés,

^{amenés à un}

pH compris

^entre

3

^{et 4}par addition d’acide

acétique glacial

^et

purifiés

par passage ^sur

échangeurs

^{de cations}

(Amberlite

IR

120 )

^{sous forme II+}

qui

fixe les acides aminés et amides et les cations minéraux.

Les

composés

^non retenus sont éliminés _par

lavage

^{à l’eau}

bidistillée, puis

^la

majorité

^{des acides}

aminés et amides sont élués par ^une solution

d’ammoniaque

^2N

( 1 , 5

^{fois le volume de}

la résine)

suivie d’un

rinçage

par ^un

égal

volume d’eau bidistillée. Les

plus

^{fortement retenus sont} élués par ^une solu- tion

d’ammoniaque

4 N

( 3

^{fois le volume de la}

résine)

suivie d’un

rinçage

^{à l’eau} bidistillée.

Les extraits sont

mélangés

^et l’ammoniac est éliminé _par

évaporation

^{sous vide}

(source chaude

3

8°, ^{source froide -}

20 °).

^{Ils sont} alors concentrés et

repris

par ^un volume connu de tampon ^citrate

pH

2,2^{en vue} du

dosage

^{des acides} aminés par

chromatographie

^{sur colonne.}

b)

Acides aminés libres des muscles.

Les échantillons additionnés de norleucine sont extraits par l’acide

picrique

^{à i} p. ¹⁰⁰

(TA LLA N,

M

OOREet STEIN,

1954 ),

^{selon une}

technique d’épuisements

successifs similaire à celle

employée

pour l’extraction des acides aminés libres des sangs. Le volume total des extraits ^est de 600à 700 ml pour 4

0à 50 g de muscle frais.

L’acide

picrique

^{est éliminé} par passage ^des extraits sur une colonne ^de résine

échangeuse

d’anions Dowex 2 X

8 ( 5 o

^{à 100}

mesh).

^{Les acides aminés ne sont} pas retenus sur cette résine et sont recueillis dans l’effluent,

qui

^{est concentré} par

évaporation

^{sous vide.} L’échantillon est ensuite ^{trai -} té

(M OORE

^et STEIN,

195 8),

de manière à éliminer l’interférence du

glutathion

dans le fractionnement des acides aminés,

puis ajusté

^{à un volume connu à l’aide de} tampon ^citrate

pH

^{2,2en vue du}

dosage.

5

.

Séparation

^et

dosage

^{des acides} aminés.

Ils sont

séparés

^{et dosés sur}

appareil automatique (S PAC xntArr,

^{MOOREet STEIN,}

195 8).

^{Les acides}

aminés acides et neutres sont séparés ^en 15 h sur une colonne de ₁₄₀ x o,g ^cm de résine AMINEX

Q

150

S

(Bio

^Rad

Laboratories)

^{maintenue à}

5 o o C,

^au moyen de tampons citrates ^de sodium

pH

3,25 et 4,25

(MOORE,

^{SPACKMAN et STEIN,}

195 8).

^Le débit utilisé est de 45 ml par heure, ^{et le}

changement

de tampon ^est

effectué 7 h 15

^mn

après

^{le début de l’élution.}

Les acides aminés

basiques, l’ammoniac,

l’ansérine et la carnosine sont

séparés

^en 7 ^{h sur une} colonne _{de 25} X 0,9^cm de résine XX 93730

0 (Phoenix

^Précision

Instrument).

L’élution est effectuée d’abord à 40° ^{avec du} tampon citrate 0,35 N

pH

4,26

jusqu’à

^{la sortie}

de l’ansérine,

puis

^à 50° ^{avec du} tampon citrate 0,35 N

pH

5,28. ^Le

débit

du tampon est de 50ml par heure.

Le mode de fractionnement utilisé pour les acides aminés acides et neutres ne permet pas de sé- parer ^la sérine de la

glutamine,

^{et la}

proline

^{de la} citrulline.

RÉSULTATS

I,es

différents

essais de

supplémentation

^des

régimes

^{à base de blé} par la

lysine

ont été

réalisés

^en

_quatre expériences,

^{dont nous}

analyserons séparément

^{les résultats.}

1

. Croissance et eonsommation

(tabl. 5 )

Expérience

^{I. Les taux de}

^lysine

^{utilisés sont tous} inférieurs aux besoins de l’animal.

L’importante différence

^de

croissance (plus

^de 35 p.

1 00 )

^{observée entre les lots m}

et 12 est

obtenue

^sans

augmentation importante

^{de la} consommation d’aliment. Les doses de

lysine supplémentaires

^{dans les}

régimes ^consommés

par les animaux des lots

r3

^et 14n’entraînent

qu’une

^très

^faible augmentation

de croissance. En

revanche,

les consommations

alimentaires

sont

légèrement ^diminuées (respectivement

^de

4 ^à 8 p.

ioo),

^{et l’indice de}

consommation

est amélioré.

Expérience

^{II. - Les} croissances obtenues sont, ^{à taux de}

lysine égal,

^{un peu}

supé-

rieures à

celles

^de

l’expérience précédente.

^{Les taux de}

supplémentation

^les

plus élevés, choisis

l’un pour satisfaire

largement

les besoins du

Rat,

^et l’autre pour lui _appor- ter un net

excès,

entraînent une

augmentation

^de

croissance,

^au

prix

^d’un

léger

accroissement de la consommation.

L’amélioration importante

de la croissance

(qui

^est presque

doublée) permise

par l’addition ^au blé de

2 , 1 6

g de

lysine

est obtenue avec une

augmentation

^relative-

ment faible de la

consommation (de ^l’ordre

^de 4,5 p.

100 ).

Expérience

^{III. - Dans cette}

expérience,

les deux taux de

lysine

alimentaire les

plus

faibles

correspondent

sensiblement

à

la satisfaction du

besoin,

^tandis que les deux taux

supérieurs correspondent

^{à un excès :}

^les

croissances

obtenues

sont toutes

élevées.

La croissance tend à

augmenter plus

vite que la

consommation.

Expérience

^{IV. -Un excès de}

^lysine

alimentaire

(environ

deux fois le

besoin)

^{a été com-}

’ paré

^{à un}

régime théoriquement équilibré.

^Les croissances obtenues dans les deux

cas sont voisines de celles

qui

avaient été observées dans

l’expérience

^I.

2

.

Composition

^{en acides} aminés libres du

sang et

^{du muscle}

(tabl.

^{6 à}

9 )

Certains

composés ^azotés, qui

^ne

figurent

^{pas sur} les tableaux de

résultats,

^sont

présents

^{dans les tissus}

analysés.

^{C’est le cas notamment de la}

taurine,

^de lacarnosine et de

l’ansérine,

que l’on ^trouve dans les muscles en

quantités beaucoup plus impor-

tantes que les acides aminés. I,a

proline,

^la

citrulline,

et, ^en faible

proportion,

^la cys- tine sont

présentes

dans les deux

tissus,

mais n’ont pas été dosées

quantitativement.

Composition comparée

des tissus

sanguins et

musculaires.

La teneur en acides aminés libres et amides libres totaux des muscles des animaux recevant ^un

régime équilibré

^est environ dix fois

plus

élevée que celle des sangs ^cor-

respondants.

^Cette différence est

due,

^en

majeure partie,

^{à la}

présence

^{dans le muscle}

de

quantités importantes

^de

glycine,

ainsi que d’acide

aspartique,

^d’acide

glutamique

et

d’alanine,

^de

glutamine

^{et de} sérine. Les différences observées dans le cas des acides aminés

indispensables

^sont

beaucoup plus ^faibles,

^{et ne} concernent que certains d’entre

eux : la

thréonine, l’histidine,

^la

lysine et,

^{à un moindre}

degré, l’arginine.

Influence

^{de la teneur en}

lysine

^{de la ration.}

Lysine (fig. i).

La ^{teneur en}

lysine

^{libre du}

sang augmente proportionnellement

^{à celle de l’ali-}

ment,

lorsque

^cette

^dernière

passe

de

_2,g

(blé non supplémenté) à 8, 5 g par kg

^{de matière}

sèche

ingérée.

^Une

augmentation supplémentaire

^{de 10}p. ¹⁰⁰ de la teneur en

lysine

de l’aliment entraîne une

augmentation

^de 30 p. ^ioo environ de la concentration de cet acide aminé dans le _sang. La courbe de concentration semble

présenter

^{ensuite un}

plateau, ^redevient

^{à nouveau} ascendante

lorsque

la dose de

lysine

alimentaire passe de 11,7 ^à 12,5 g par

kg

^d’aliment sec,

puis

^{atteint un nouveau}

plateau

^{au-dessus de}

ce taux.

Les

différences

de concentration

observées

au niveau du tissu musculaire sont

beaucoup plus

nettes ; les ^teneurs

augmentent graduellement

pour les

plus

^faibles

taux de

supplémentation

^{et sont 6 fois}

plus

élevées chez les animaux

ayant

reçu ^une ration contenant

8, 5

g de

lysine

par

kg

^{d’aliment sec} que chez ^ceux

qui

^ont

ingéré

^le

blé non

supplémenté

^en

lysine.

^{Une addition}

supplémentaire

^de

lysine (g, 3

^{au lieu de}

8,

5

g par

kg

de matière sèche

ingérée)

^{entraîne une}

augmentation

^{brutale de la teneur}

du muscle

qui

^{est doublée. Des}

quantités plus

^élevées

comprises

^entre 9,3^et ii,7g par

kg

n’entraînent

plus d’augmentation

^{de la teneur en}

lysine

^{libre du muscle. Celles-}

ci se manifestent à nouveau pour

des supplémentations plus importantes.

Il _y a donc un

parallélisme

^{entre les}

phénomènes

^{observés au niveau du} sang et

au niveau du

muscle,

^mais

l’amplitude

^des variations est

beaucoup plus importante

dans le ^cas de ^ce dernier. Les concentrations ^en

lysine

^{libre du muscle et du} sang des rats recevant la

plus

^forte

supplémentation

^sont

respectivement

^{28 fois et} 7^fois

plus

élevées que celles des animaux

qui

consomment le

régime

^le

plus

pauvre ^{en cet} acide

aminé,

^ce

qui

^semble

indiquer qu’il

y ^{a une} accumulation

importante

^de

lysine

^dans

le muscle.

Thréonine.

Elle a été

apportée

^{dans les rations en}

quantité légèrement supérieure

^{à l’estima-}

tion du besoin du Rat

(no

p.

ioo),

de manière à ce que celui-ci soit certainement satis- fait. Les teneurs en thréonine du _sang et du muscle des animaux consommant les ra-

tions déficientes en

lysine

^{sont très}

élevées,

^et traduisent une certaine accumulation de cet acide

aminé,

dont l’utilisation _par les tissus est limitée _par la faible

quantité

de

lysine qui

^est mise à leur

disposition.

^{Elles tendent à diminuer avec la}

supplémen-

tation en

lysine

^des

rations,

^en

particulier

^{dans le cas} du muscle. Toutes les teneurs en thréonine observées aussi bien dans le sang que dans le muscle au cours de

l’expé-

rience I et IV sont inférieures à celles

qui

^ont été mesurées pour les ^autres lots.

Autres acides aminés.

Il ne semble pas que l’influence de la teneur en

lysine

^{de la ration} ait d’influence très nette sur les concentrations dans les tissus

sanguins

^et musculaires des autres acides aminés

indispensables ;

^{il en est} de même dans la

majorité

^{des cas des acides}

aminés non

indispensables.

DISCUSSION

Méthodologie

Choix de la

période expérimentale.

La

période choisie,

^{dans la}

phase prépubertaire

^{de la}

croissance,

^est caractérisée par ^une

synthèse protéique ^intense,

^{favorable à l’étude de} l’utilisation des acides ami-

nés,

^{et à la mise en} évidence des carences et des

déséquilibres

éventuels. Le

poids

^des

animaux au début de

l’expérience

^{est suffisant} pour leur

permettre

^de

supporter

^sans

trop

^de

dommages ^des

^carences alimentaires relativement

importantes,

^{et de consom-}

mer la ration

expérimentale

^en

quantité

suffisante pour que l’on

puisse

^{en mesurer}

effectivement les effets.

La durée de

l’expérience

^est suffisamment

longue

pour éliminer l’influence du

changement

^de

régime, qui

^{n’influe sur la} consommation _que

pendant

^{les trois}

premiers jours.

^*

Composition

^des

régimes.

Ils ont été établis de manière à _assurer, dans l’état actuel de nos

connaissances,

la couverture des besoins des animaux sans excès

notables,

^à

l’exception

^{du besoin}

en

lysine,

^{et leur}

ingestion

^a assuré des croissances élevées pour ^tous les lots dont les rations n’étaient pas

trop

fortement carencées en

lysine.

^Les estimations des besoins

en acides aminés utilisées sont celles de RANHOTRA et

J OHNSON (i 9 65) correspondant

à des vitesses de croissance

élevées.

Prélèvements. ^, HI

LL et OLSEN

( 19 6 3 ),

confirmant des travaux

antérieurs,

^ont montré chez le Poulet

qu’un jeûne

^{de 12’à}

4 8

heures entraînait une modification

importante

^{des te-}

neurs en acides aminés libres du

plasma, et,

^en

particulier,

^une accumulation de

lysine

et de thréonine.

Aussi,

^{dans cette}

expérience,

^{les rats,}

qui

^avaient constamment de la nourriture à leur

disposition,

^et n’étaient pas astreints ^à des repas, n’ont-ils pas subi de

jeûne

^{avant les}

prélèvements.

^{Ils ont} été sacrifiés entre 10et 12heures du

matin, après

avoir pu s’alimenter normalement

pendant

^la

journée

^{et la nuit}

précédente.

Conservation des échantillons et extractions.

Les

dosages

^{ont été effectués sur} le sang total pour les raisons

qui

^{ont été}

exposées précédemment (PION,

FAUCONNEAU et

R!x!.T, i 9 6 4 ). ^I,es

^muscles

prélevés

^{ont été}

choisis en fonction de leur taille et de leur facilité de

prélèvement qui permettent

^une fixation

rapide

^des échantillons par

congélation

dans l’azote

liquide.

Les extraits

alcooliques

^{obtenus à}

partir

^des sangs ^se conservent très facilement à -

r5!C ;

les muscles

congelés

nécessitent

plus

^de

précautions :

^une

décongélation

accidentelle de courte durée modifie fortement leurs teneurs en acides aminés libres.

Nous avons constaté

qu’une décongélation

^d’une demi-heure

pouvait multiplier

^les

teneurs en acides aminés libres par ^{2 ou} 3.

Aussi,

^les échantillons ont-ils été maintenus

congelés

^{et à basse}

température jusqu’au

^{moment où ils ont été}

broyés

^{dans l’acide}

picrique.

^{Les teneurs en} acides aminés de ces extraits

picriques

^sont

identiques,

^aux

erreurs

expérimentales près,

pour la

plupart

des acides

aminés,

et, ^en

particulier,

pour tous les acides aminés

indispensables dosés,

^{à celles} que l’on

peut

observer dans les extraits

alcooliques

^{obtenus à}

partir

^{des mêmes} échantillons. La

technique d’épuise-

ments successifs

présente

^{une bonne}

^sécurité, puisque près

^de 90 p. ^ioo des acides aminés se trouvent dans le

premier

^extrait.

Résultats Croissance.

Les

augmentations

de croissance obtenues par l’addition au blé de doses crois- santes de

lysine

^{n’ont été}

accompagnées

que de faibles

augmentations

^{de consomma-}

tion,

^et

même,

pour les ^taux les

plus

élevés utilisés dans

l’expérience ^I,

^{d’une baisse}

de consommation. La

supplémentation

^se traduit donc par ^une amélioration de .la transformation de

l’aliment

^{en tissus}

^animaux,

^et n’intervient _que faiblement sur

la consommation. Ce fait, qui

^{semble être en} contradiction avec

l’augmentation

^de

la

quantité d’aliment ingérée généralement

^{associée à la}

supplémentation

^en

lysine,

^est

probablement

^{dû à ce} que la consommation de ceux de nos

animaux,

dont la ration était la

plus carencée,

^était

déjà

^{très élevée.}

Des croissances de 5,7^à 6 g par

jour

^ont été obtenues avec des rations ne conte- nant que 5,5 g ^de

lysine

par gramme de matière sèche ^ce

qui

^laisse supposer que la

lysine

alimentaire est utilisée

plus économiquement

^{chez les animaux}

carencés,

^ou que les tissus

synthétisés

^{par ces animaux} contiennent moins de

lysine.

^Ce dernier fait

pourrait

être le corollaire de

l’augmentation

^de

l’incorporation

de thréonine dans les

protéines,

constatée par VOSMDAet al.

(i 9 66),

chez des animaux dont la ration com-

portait

^un

large

^{excès de thréonine.}

Le _{fait que} ^nous

n’ayons

pas constaté de diminution de la croissance chez les animaux dont les rations

comportaient

^{un excès de}

lysine

n’est pas ^en contradiction

avec les baisses notables observées par de nombreux

auteurs,

^{et en}

particulier

par

RÉ

RA

T,

^BOUFFAULTet

JACQUOT ( 195 6),

^car les doses utilisées _par ces derniers étaient

beaucoup plus

^fortes que les nôtres. Il

est,

^en

revanche,

^{en désaccord avec} les observa- tions de ZI!R!AN et SCOTT

( 19 6 5 ), qui

^ont observé dans des

conditions

^voisines

des nôtres une diminution de croissance de 20p. ^ioo chez le Poulet.

Les consommations alimentaires et les croissances observées au cours des

expé-

riences I et IV sont

plus

faibles que celles

qui

^ont été obtenues pour des lots _compa- rables au cours des

expériences

^{II et III.} Ces différences sont

peut-être

^{dues à la nature} du blé

utilisé, qui

^{avait été conservé un an à la}

température

^{ambiante dans le cas des}

expériences

^{I et IV.}

Teneur en acides aminés libres du

sang et

^{du muscle.}

Lysine.

Le

changement

^de

pente

des courbes de concentration observé aussi bien dans le cas du sang que dans celui du muscle

lorsque

^{la teneur en}

lysine

^{de l’aliment}

dépasse

8,5 g

par

kg

de matière

sèche,

^laisse supposer que le besoin ^{en cet} acide aminé est alors

satisfait, qu’il

^{y a un certain}

stockage

des excédents dans les

tissus,

et, ^en

particulier,

dans le tissu musculaire. Il doit donc être

possible

d’utiliser ces courbes pour ^mesurer le

degré

^de satisfaction du besoin ^en

lysine

des animaux à la suite de

l’ingestion

^d’une

ration

donnée, et,

par

conséquent,

^le

degré

^de

disponibilité

^{de la}

lysine

^des

protéines qu’elle

^{contient. La}

grande amplitude

^des variations observées au niveau du tissu mus-

culaire

permet d’espérer

^obtenir des résultats

plus précis

par l’étude de ^ce tissu que par celle du sang.

La valeur obtenue pour le besoin est nettement

plus

faible que celle

qui

^est

géné-

ralement admise. Ce fait

peut

^être dû aussi bien à la souche et aux conditions

d’élevage

des animaux utilisés

qu’à l’équilibre

^de l’ensemble de la

ration.

Nous n’avons pas observé d’accumulation

importante

^de

lysine

^dans le sang des animaux dont la ration contenait un

large

^{excès de cet acide}

aminé,

contrairement à ce

qu’ont

^{observé MCI,AUGHI,ANet II,I,MAN}

( 19 6 7 )

^{chez le Rat et Zm!Exn!nN et}

S

COTT

( 19 6 5 )

^{chez le}

Poulet,

^{dans des} conditions

expérimentales

^assez différentes des nôtres. En

revanche,

^{la nette} accumulation de

lysine

libre dans le tissu musculaire constatée chez les animaux

ayant

reçu ^une dose de

lysine

alimentaire sensiblement

égale

^{au double du}

besoin, permet

^de supposer que ^cet acide aminé n’est catabolisé _que lentement par

l’organisme,

^et

qu’il peut

^{être stocké au moins}

pendant

^{un certain}

temps.

^{Il est donc}

possible qu’une protéine

alimentaire déficiente ^en

lysine puisse

^être

supplémentée

efficacement _{par de la}

lysine

^libre

provenant

^d’une

ingestion

^antérieure

ou d’une

absorption plus rapide.

^’

Aut y

es acides aminés.

Les différents acides aminés

indispensables

^sont

présents

^en

quantité

relativement faible dans les

prélèvements

de sang ^et de muscle _que nous avons

analysés,

^à

l’excep-

tion de la

thréonine,

^ce

qui

^confirme les résultats

obtenus

par G.

W ELLERS , J.

^CHE-

VANet N.

GAGENT ( 19 66).

^C’est

peut-être

pour ^cette raison que ^nous n’avons pas pu mettre en évidence pour les ^autres acides aminés la

diminution

^{de teneur observée}

dans le cas de la thréonine

lorsque

^{la teneur en}

lysine

de la ration

augmente.

Les teneurs en thréonine observées chez les animaux

ayant

^{consommé du blé} stocké

pendant

^{un an sont}

plus faibles,

aussi bien dans le cas du sang que dans celui du

muscle,

que ^chez

les

^{animaux des deux autres}

expériences.

Il est donc

possible

que la

faiblesse

relative des croissances observées soit

due,

^{au moins en}

partie,

^{à une indis-}

ponibilité partielle

de la thréonine du blé.

CONCLUSION

Ces résultats montrent que la détermination de la teneur en

lysine

^libre

du tissu

musculaire

peut permettre

^{une mesure}

précise

^{de la} satisfaction du besoin des animaux

en cet acide

aminé,

à condition que là ration ^ne contienne pas d’autres facteurs limitants.

Cette

méthode

peut

^être

appliquée

aussi bien à la détermination du besoin d’animaux

ingérant

^{une ration de}

composition

^{bien connue}

qu’à

^{la mesure} in vivo de la

disponi-

bilité de la

lysine des

^{aliments. Il est}

vraisemblable, d’après

les variations ^de

teneurs

observées

dans

^{le cas}

de

la

thréonine, qu’une ^méthode

^similaire

peut

^{être mise au}

point

pour ^cet acide aminé. En

outre, les croissances

élevées observées dans la

plupart

des cas chez les animaux dont

les

rations

n’étaient

pas

trop déficientes

^en

lysine

per- mettent de

supposer

que les acides

aminés

du

blé, au moins lorsqu’il ^n’a pas subi

^de

longue conservation,

^{sont bien utilisés} par l’animal.

’ ’

’

’ &dquo; ’

!

Reçu

pour

publication

^en

juin 19 68.

REMERCIEMENTS ,

Ce travail a été réalisé en

partie grâce

^{au contrat de la}

Délégation générale

^{à la} Recherche ^scien-

tifique

^et

technique

^n° 67^oo 819.

SUMMARY

INFLUENCE OF SUPPLEMENTING WHEAT PROTEINS WITH INCREASING AMOUNTS OF LYSINE ON THE FREE AMINO ACID CONTENT OF BLOOD AND MLTSCLE OF GROWING RATS

The

study

^{was made on Wistar rats reared in} individual _cages and fed on diets based ^on wheat

supplemented

with amino acids

(tables

4and

5 )-

The

requirements

of amino acids except ^for

lysine

^{were covered}

by

^{all diets.} The different diets had

graded

^{amounts of}

lysine

^between 30and ²⁰⁰ _per cent of the theoretical

requirement

^{of the}

animals

(table 5 ).

^{At the} end of the

exp P rimental period ( 2 weeks)

whole blood and muscle of the hind limbs ^were

sampled.

After extraction with cold 84p. ¹⁰⁰ethanol for blood and ¹⁰_p. ¹⁰⁰

picric

acid for muscular tissue, ^free amino acids ^were estimated

by

^column

chromatography.

Growth rates obtained were

high

except ^for diets with the lowest contents of

lysine.

^{Intake of} food ^was

always high

^{and differed little as a result of}

supplementary lysine.

Free

lysine

^{in blood} and muscle increased with that in the feed

(fig. I ),

^{but the}

degree

^of

difference was much

higher

in the muscular tissue. The free

lysine

^{content of muscle in rats}

given

the diet richest in

lysine

^was 27times greater than that in animals

eating

^{wheat not}

supplemented

with

lysine,

^{while the}

highest

^{value seen in blood was}

only

7times the lowest. In both tissues there

was a

large

increase when the

requirement

^{of the animal was} satisfied. The contents of other amino acids

changed

^little, except for threonine which accumulated in blood, ^and

particularly

^{in muscle}

in the ^case of ^a deficit of

lysine.

The

particularly large

increase of

lysine

^seen in muscle when the

requirement

^of

lysine

^{was met} shows that measurement of this concentration could be a

particularly

sensitive method for estima- tion of the

degree

^{to which}

requirement

of this amino acid is satisfied.

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