Vue générale de la régulation du cycle cellulaire par les complexes cyclines/cdk
Cdk active:
tyrosine et thréonine Kinase
(phosphoryle
les protéines cibles)
actif
actif
Différentes Cdk peuvent s’associer avec différentes Cyclines
Chez homme : 13 Cdk
et
25 cyclines
Associations cycline /cdk durant le cycle cellulaire
cdk2 Cycline A
La fluctuation de l’activité des complexes cycline/cdk
est responsable de la progression du cycle cellulaire
Description générale
des protéines kinases
(dimériques )-une unité régulatrice *R+, dont la synthèse est régulée et qui est catalysée après l’utilisation et
-une unité fonctionnelle *C+, qui transmet l’activation sous forme de phosphorylation d’un résidu thréonine ou tyrosine sur une protéine donatrice [K]
Transduction de signal
3 AA essentiels sur Cdk -thréonine 160 ou 161 -tyrosine 15
-thréonine 14
Forme active
Activation du complexe cycline/Cdk Ex : cyclineB/Cdk1
Thréonine 161 phosphorylée
Cycline
: -un domaine de 100 à 150 acides aminés, appelé 'cyclin box', (conservé à travers les espèces)-un domaine d'initiation de leur destruction -forte homologie de séquence des cyclines
Phosphorylation de(s) protéine(s) cible(s)
Complexe actif
Inactivation des cdk:
Dégradation des cyclines par ubiquitination
Cdk Cdk
cycline cycline
Dégradation des cyclines
par deux complexes ubiquitine-ligases différents :
-La SCF, d’expression constante au cours du cycle accroche des résidus ubiquitine sur les cyclines G1 (D et E), seulement après leur phosphorylation (transition G1/S)
- APC/C dégrade les cyclines mitotiques (cyclines A et B) après son activation en anaphase, sans phosphorylation préalable (transition G2/M).
De plus,
APC/Ccdh1 continue à dégrader les cyclines A et B au cours de la phase G1,
(grâce à un partenaire différent, la cdh1 (cdc20 est le partenaire pendant la mitose))
jusqu’à ce qu’une activité cdk suffisante n’inhibe cdh1, laissant ainsi le complexe cycline A - cdk2 promouvoir la phase S.
Les kinases cyclines-dépendantes (CDK) contrôlent le cycle cellulaire.
Les
inhibiteurs
Le 3ème partenaire
Abondance des complexes Cycline / Cdk au cours du cycle cellulaire
Les mécanismes mis en place
chez les organismes supérieurs visent :
-à limiter l’expression des cyclines D et E en G1,
-exclure les cyclines mitotiques (A et B) de la phase G1,
- ne pas laisser pénétrer dans le noyau le complexe cycline B / cdk1,
pourtant exprimé au cours de la phase S.
growth factors and Ras signals through cyclin D to CDKs,
growth-inhibitory responses that emanate from TGF-β act on both p15INK4B or p27KIP1, depending on the cell type,
cellular ageing, also known as senescence, leads to upregulation of p16INK4A,
genotoxic stresses such as DNA damage lead to induction of p21CIP1 through upregulation of p53
Le MPF :transition G2/M
Levée d’activités inhibitrices
Transition G2/M Et entrée en mitose
Phosphatase cdc25
c
cycline B:(phase S , M, et G2 ): intra cytoplasmique,
jusqu'au moment de la disparition de la membrane nucléaire
Régulation de l’activité du complexe cycline B – cdk1
Forme active
du complexe cyclineB/cdk1
activation
inactivation
Cdk1: cdc2: protéine kinase de 34 kDa
Inactivation de Wee1 Activation de cdc25
Phosphorylation de Wee (inactivation) par kinases AKT et p90RSK
Cdc25 A, B et C
Phosphorylation de cycline B
CAK:
cyclinH/cdk7/MAT1
Constitution d’un stock de Cycline B / Cdk 1 inactif
Pendant phase G2
Accumulation de complexes
cyclineB/Cdk1 Inactifs
(en prophase)
n fois
Cycline B Kinase Cycline
B
P P P
P P P
Activation brutale du stock de Cycline B / Cdk 1:
en phase MPolo kinase
cdc25 P
cdk1
Cycline B
cdk1
Cycline B
p p
p p
Forme
« faible activité » de cdc25
Wee1
actif
Wee1 phosphorylé
inactif
MPF actif
cdc25
P P
Forme
« forte activité » de cdc25
1
2
2
3 Accumulation forte de MPFactif
(fin phase G2)
Faible quantité De MPF actif
Boucle d’auto activation
Passage dans noyau:
Phosphorylation des protéines cibles
Fin phase S : passage de cdc25 dans N
cdc25
Cytoplasme Noyau
cdc25
Phosphatase PP2A
(en métaphase)
P
MAP: assemblage fuseau mitotique
Condensines, histones, H1, H 3 … (condensation des chromosomes)
APC (Anaphase promoting complex) + Cdc20:
ubiquinylation cdc2/cycline Bphosphoryle également un grand nombre de protéines régulatrices, comme des kinases et des phosphatases
Passage métaphase à anaphase nécessite la dégradation des cyclines B et A
Conséquences de l’activation du MPF:
-Condensation chromosomes
-Désorganisation de l’enveloppe nucléaire (lamines) -Réarrangement cytosquelette (fuseau mitotique) -Attachement des chromosomes au fuseau
-Réarrangement de actine
-Réorganisation de Golgi et réticulum endoplasmique -Dégradation de Cycline B par APC
Désactivation du MPF
- > déphosphorylation de ces protéines
->Réarrangements structures protéiques complexes:
-Décondensation chromosomes
-Réorganisation enveloppe nucléaire
-……….
Réplication Checkpoint
DNA Damage Checkpoint
Mitotic Checkpoint
Les points de contrôle
Protéines impliquées dans ces contrôles:
-Kinases qui se lient à l'ADN, (DNA-PK) : kinase ATM, kinase ATR ,
-Protéines sérine-thréonine kinases Chk1 et Chk2 (check-point protein kinase).
-La protéine Mad2 (Mitotic arrest deficient-2) au point de surveillance métaphase - anaphase
dans cytoplasme
Membrane nucléaire
Si réplication inachevée
Si erreurs de réplication
Activation des kinases Chk Stimulation expression p21
Phase G1 et transition G1/S
-Les signaux mitogènes (facteurs de croissance et molécules d’adhésion) via les intégrines et transduction de signaux initient le processus
-Synthèse de 3 types de cyclines D: D1, D2, D3 se lient à Cdk4/6
-But des cyclines D : Inactiver la protéine Rb pour permettre la libération du facteur de transcription E2F
Cellules maintenues en G1 grâce au piégeage de E2F par Rb Passage du point de restriction en G1
Régulation transcriptionnelle des cyclines D via des transductions de signaux (Récepteurs de facteurs de croissance, ras, MAPK….)
Passe par
des régulations par
phosphorylation
3 types de gènes sous contrôle de E2F:
-Gènes impliqués dans transition G1 /S phase(cyclines E and A, pRb ) -Gènes impliqués dans
synthèse et réplication ADN
-Gènes impliqués dans induction de apoptose (si besoin)
Phase G1 tardive Passage G1/S
Accumulation de cycline D
Transition G1/S Phase G1
DP DP
DP
D1, D2, D3
Passage du point de restriction en G1
Transition G1/S
Contrôle phase S
1
2 Synthèse de cycline E
3
Forme inactive de Rb ->Libération de E2F PP1: phosphatase1 like protein
Protéine Rb toujours présente 4
-Enzymes de réplications -histones
……..
Phosphorylation de DP
Inactivation de E2F
Sortie de phase S
Accumulation de CyclA/Cdk2
Inhibiteurs de la transition G1/S
Cancers: mutations dans gène codant p16
TGF stimule expression de p15/p16 (quiescence cellulaire)
Réplication Checkpoint
DNA Damage Checkpoint
Mitotic Checkpoint
Les points de contrôle
Protéines impliquées dans ces contrôles:
-Kinases qui se lient à l'ADN, (DNA-PK) : kinase ATM, kinase ATR ,
-Protéines sérine-thréonine kinases Chk1 et Chk2 (check-point protein kinase).
-La protéine Mad2 (Mitotic arrest deficient-2) au point de surveillance métaphase - anaphase
ADN lésé : activation de deux voies inhibitrices des complexes Cycline / Cdk de la phase S
Dégradation de cdc25
accumulation
Activation des
kinases Chk Stimulation expression p21
inhibiteur de cycE/cdk2