Transfusion sanguine

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Transfusion sanguine

TRANSFUSION SANGUINE

Dr Marie-Luce Boënnec et Dr Mylène Flammang

Etablissement français du sang - IFSI- 2021

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plan

PARTIE 1 : IMMUNOHÉMATOLOGIE

• Bases en Immunohématologie

• Les systèmes de groupes sanguins

• Système ABO

• Système RH

• Système KEL

• Autres systèmes

• Les examens d’immunohématologie nécessaires pour transfuser

• Groupe ABO RH KEL

• RAI (Recherche d’Anticorps Irrégulier Anti-érythrocytaire)

• EDC épreuve de compatibilité

• Règles de prélèvement et d’étiquetage

Etablissement français du sang - IFSI- 2021 2

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Immunohématologie – quelques définitions

• Antigène (Ag) : substance capable d’induire une réponse immunitaire et de réagir de façon spécifique avec le produit de cette réponse

En immunohématologie : capable d’induire la formation d’anticorps spécifiques.

• Anticorps (Ac) : protéine (immunoglobuline) produite par un lymphocyte B en réponse à l’exposition de l’organisme à un antigène, et capable de se lier de façon spécifique avec cet antigène

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Antigènes de groupes sanguins

Les antigènes de groupes sanguins érythrocytaires sont des protéines ou des sucres portés par des protéines, des glycoprotéines ou des glycolipides génétiquement induits exprimés à la surface du globule rouge (et d’autres cellules)

36 systèmes de groupes sanguins caractérisés > 300 antigènes

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Anticorps des groupes sanguins

Ac naturels:

Apparaissent de façon apparemment spontanée: Ag présent dans

l’environnement

Ac régulier:

Ac présent systématiquement chez un individu dépourvu de l’Ag

correspondant.

Ac immuns

Apparaissent après un évènement

immunisant : grossesse ou transfusion ou greffe

Ac irrégulier:

Ac jamais présent dans le sérum d’un individu qui est dépourvu de l’Ag correspondant.

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Immunohématologie – quelques définitions

• Agglutination: Réaction entre un antigène particulaire et un anticorps constituant un réseau se visualisant sous forme d’un agglutinat.

Laboratoire d’immunohématologie : Groupe ABO RH KEL

RAI Carte de contrôle ultime

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Le système ABO

•Le plus important des systèmes de groupes sanguins

•Il se caractérise par

• 2 antigènes

• Antigène A

• Antigène B

Présents ou absents sur le globule rouge définissant 4 groupes sanguins.

Ag ubiquitaires, présents sur de nombreuses cellules de l’organisme (intérêt en transplantation)

• des anticorps présents systématiquement dans le plasma et

correspondants aux antigènes absents ; ce sont des anticorps naturels réguliers : • Anticorps anti A

• Anticorps anti B

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Les phénotypes du système ABO

Les 4 principaux phénotypes ABO se caractérisent par :

Groupe sanguin

Antigènes globulaires

Anticorps plasmatiques

Fréquence dans la population caucasienne(%)

A B AB

O

A B A et B aucun

anti-B anti-A aucun

anti-A et anti-B

45

9

3

43

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Implication clinique du système ABO

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Règles de compatibilité ABO

Eviter la rencontre d’un antigène avec l’anticorps correspondant en respectant impérativement la compatibilité ABO

• Ne jamais apporter d’antigènes (GR) chez un patient possédant l’anticorps correspondant

Un patient de groupe O ne peut recevoir que des GR de groupe O

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Règles de compatibilité ABO

Eviter la rencontre d’un antigène avec l’anticorps correspondant en respectant impérativement la compatibilité ABO

• Ne jamais apporter d’anticorps (plasma) chez un patient possédant l’antigène correspondant

Un patient de groupe AB ne peut recevoir que du plasma de groupe AB

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Implication clinique du système ABO

Le non respect de ces règles de compatibilité peut entraîner une destruction immédiate des hématies en intra-vasculaire (hémolyse), accident le plus grave et le plus redouté en

transfusion pouvant conduire au décès du patient

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Le système RH

•Système complexe > 54 antigènes,

• 5 principaux antigènes RH: 1,2,3,4,5 (D, C, E, c, e) constituent le phénotype RH

•Par convention, tout sujet porteur de l’antigène RH1 (D) est dit RH positif (85% de la population caucasienne) et tout sujet qui ne possède pas est dit RH négatif (15% de la population caucasienne)

•Pas d’anticorps naturels : Il n’y a pas d’anticorps circulants permanents correspondants aux antigènes que l’on ne possède pas

Ce sont des anticorps immuns et irréguliers

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Le système RH

•Nomenclature

•Exemple

Chaque antigène peut être désigné par une lettre ou un chiffre : les deux écritures figurent sur les documents.

Un signe « - » signifie que l’antigène n’est pas présent sur le globule rouge

O RH:-1,-2,-3,4,5 O D- C- E- c+ e+

A RH:1,-2,3,-4,5

A D+C- E+ c- e+

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Implications cliniques du système RH

• Allo immunisation

• Contrairement au système ABO où les anticorps anti A et anti B sont naturels et réguliers, les anticorps dirigés contre les antigènes des autres systèmes de groupe ne sont pas présents en permanence. Ils n’apparaissent que chez certaines personnes et le plus souvent après contact avec un antigène inconnu (transfusion, grossesse, fausse couche ou IVG)

=>anticorps irréguliers ou anticorps anti-érythrocytaires

• Ils apparaissent quand on transfuse à une personne un antigène de groupe qu’elle ne possède pas

• Certains antigènes sont plus immunogènes que d’autres: l’antigène RH1 est le plus immunogène. Risque d’immunisation très élevé :

apparition d’anticorps anti RH : 1( D) lorsqu’il est transfusé à un sujet RH:-1( D-)

• Certaines personnes s’immunisent et d’autres non, c’est imprévisible

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Implications cliniques du système RH

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Implications cliniques du système RH

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Implications cliniques du système RH

•

Allo immunisation et grossesse

• Exemple : Mère RH:-1 et fœtus RH1

• Passage par le placenta des anticorps anti RH1 de la mère RH:-1 qui vont se fixer sur les globules rouges du nouveau-né (RH1).

• Responsable d’une anémie et ictère chez le fœtus pouvant aboutir

au décès : la Maladie Hémolytique du Nouveau-Né (MHNN)

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Implications cliniques du système RH

•

Prévention de la maladie hémolytique du nouveau né

• Injection anti RH1 passif chez les femmes enceintes RH:-1 à 28 SA (Rhophylac*) et à l’accouchement si nouveau né RH:1.

• Transfusion de CGR O RH:-1 en urgence vitale et en l’absence de document de groupage valide pour les femmes de moins de 50 ans.

• Respect du phénotype RH KEL1 chez les femmes de moins de 50

ans.

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Le système KEL

• Un antigène principal : KEL1

• L’antigène KEL 1 présent chez 9% de la population caucasoïde est très immunogène donc à tester systématiquement lors du

phénotypage érythrocytaire (= phénotype RH KEL1)

• Les anticorps du système KEL sont des anticorps immuns qui

peuvent donner lieu à des accidents hémolytiques

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Autres systèmes

• Les principaux systèmes dangereux en transfusion:

• Kidd : JK1, JK2

• Duffy : FY1, FY2

• MNS : Ss

Les antigènes de ces systèmes sont moins immunogènes que les antigènes RH et KEL1

• Lewis : LE1, LE2

• ...

• La détermination d’antigènes autres que RH KEL1 s’appelle «

Phénotypage étendu »

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• Les examens d’immunohématologie nécessaires pour transfuser

Objectifs :

Garantir les règles de bonnes pratiques transfusionnelles et la

sécurité transfusionnelle

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Examens IHE

• Avant toute transfusion

• Groupage ABO RH1 et phénotype RH KEL1 (2 déterminations) => Phénotype érythrocytaire

• RAI : recherche d’Ac anti érythrocytaires

• En fonction du contexte :

• Phénotype étendu (autres Ag que RHKEL1)

• Epreuve directe de compatibilité (Si RAI +) (EDC)

• Test direct à l’antiglobuline (TDA) (Coombs) => Examen direct à l’antiglobuline (EDA)

Arrêté du 15 mai 2018 fixant les conditions de réalisation des examens de biologie médicale d’immuno-hématologie érythrocytaire

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Les prélèvements sanguins

• La vérification de l’identité du patient prélevé et

l’identification des tubes de prélèvements doit faire l’objet d’une attention renforcée car source fréquente d’erreur : des erreurs dans l’identification du patient tout au long de son parcours de soin sont à l’origine de 60% des IG de la chaine transfusionnelle

• Effectuée après vérification de l’identité du patient par une question ouverte : « Pouvez-vous épeler vos nom de naissance, nom d’usage, prénom, date de naissance?»

• Ou à défaut lorsque cela n’est pas possible par le dossier du patient, le bracelet d’identification, la famille etc...

• Identification immédiatement après le prélèvement, au chevet du patient avec une étiquette qui comporte l’identité complète du patient : nom de naissance, prénom, nom d’usage, sexe, date de naissance, la date et, si possible, l’heure du prélèvement ainsi que l’identifiant patient

lorsqu’il existe. Au mieux en ayant fait relire l’étiquette au patient

24 Etablissement français du sang - IFSI- 2021

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Les prélèvements sanguins

• La transmission au laboratoire

• Des échantillons

• De la fiche de prélèvement avec:

• la date et l’heure du prélèvement, le nom, prénom, signature, qualité de la personne qui l’a effectué et le nombre d’échantillon transmis

• Le degré d’urgence des analyses

• Les renseignements cliniques pouvant être utiles pour l’interprétation des résultats : date d’intervention, antécédent transfusionnel, date de grossesse, injection de Rhophylac*…

25 Etablissement français du sang - IFSI- 2021

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Les non conformités de prescription

• Absence de demande d’examens

• Absence totale d’identification du patient sur la demande d’examens

• Nature des examens non précisée

• Absence d’identification du service demandeur

• Absence d’identification du prescripteur

• Absence de date de prélèvement

• Absence d’identification du préleveur

• Absence de renseignements cliniques pertinents

• Double étiquetage à deux identités différentes

Exemples laboratoire IHE EFS BFC :

Non-conformité majeure / non-conformité mineure / non-conformité minime

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Les non conformités des échantillons

• Absence de prélèvement

• Absence totale d’identification du patient sur le prélèvement

• Identification du patient incomplète sur le prélèvement : absence du nom de naissance, prénom, nom usuel, date de naissance ou sexe

• Double étiquetage à deux identités différentes

• Discordance majeure d’identité entre la demande d’examens et le prélèvement

• Prélèvement Hémolysé

• Prélèvement décanté

• Echantillon biologique non adapté

• Prélèvement coagulé, lactescent

• Volume de prélèvement insuffisant

Exemples laboratoire IHE EFS BFC :

Non-conformité majeure / non-conformité mineure / non-conformité minime

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Groupe ABO-RH1 et phénotype RH-KEL1

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Groupe ABO

Anticorps Anti A et Anti B

(immunoglobuline) Epreuve globulaire (ou de Beth Vincent):

mise en évidence des Ag A et B à la surface des GR de l’individu

Epreuve plasmatique (ou de Simonin):

mise en évidence des Acs A et B dans le plasma de l’individu GR

patient

Plasma

patient Hématies tests de

groupe A, B et AB

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Groupe ABO-RH1 et Phénotype RH-KEL1

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Recherche d’agglutinines irrégulières (RAI)

• Dépistage dans le plasma des anticorps dirigés contre les antigènes érythrocytaires autres que A et B, en particulier les anticorps d’allo- immunisation (apparus après une transfusion ou à l’occasion d’une grossesse incompatible).

Exemple : anti-D (RH1), anti-K (KEL1)…

• éviter la rencontre d’un anticorps présent dans le plasma du receveur avec un antigène présent sur les hématies du CGR à transfuser

Plasma du patient ( Ac immuns libres)

GR tests de phénotype

connu Antiglobuline

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RAI => Test in vitro fait au laboratoire

32

Panel d’hématies de donneurs dont le phénotype érythrocytaire est connu plasma

patient

Réaction – Réaction +

1^ere étape dépistage : durée 45 mn

2eme étape identification : durée 45 mn minimum RAI négative

Panel d’hématie de donneurs dont le phénotype érythrocytaire est connu

plasma patient

Etablissement français du sang - IFSI- 2021

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Recherche d’agglutinines irrégulières (RAI)

!

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• Indications de la RAI:

• Avant une transfusion :

• sa réalisation ne doit pas retarder la délivrance de PSL en cas d’urgence vitale !

• Après une transfusion : dans un délai de 1 à 3 mois

• Chez les patients polytransfusés

• En cas d’accident hémolytique après transfusion

• Dans le suivi des grossesses (calendrier règlementaire)

Recherche d’agglutinines irrégulières (RAI)

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Les anticorps apparaissent et disparaissent : leur concentration varie avec le temps selon le rythme des stimulations

Il faut toujours tenir compte d'un allo-Ac connu, même si on ne retrouve plus l’Ac

« UN ANTICORPS UN JOUR, UN ANTICORPS TOUJOURS »

Prescription de CGR avec RAI + ou ATCD de RAI + => Test de compatibilité au labo et transfusion de CGR compatibilisés

Recherche d’agglutinines irrégulières (RAI)

Une rai négative ne signifie pas « absence d’allo-immunisation »

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L’épreuve directe de compatibilité : edc

Objectif :

•

Vérifier l’absence de réaction Ag/Ac entre le CGR à transfuser et le plasma du patient

• Eviter un accident d’hémolyse lié à un 1 Ac non dépisté par la RAI

Test in vitro fait au laboratoire

échantillon de la poche

à transfuser phénocompatible plasma patient

Réaction – Réaction +

Transfusion OK Pas de transfusion

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EDC : épreuve direct de compatibilité

• Indication:

• Patient ayant une RAI positive ou un antécédent de RAI positive

• Patient drépanocytaire

• Délai de rendu des résultats:

• En urgence 45 mn

• En routine 3 heures

• Mettre des CGR en réserve pour anticiper tout besoin transfusionnel chez des patients nécessitant des CGR compatibilisés

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•Documents de phénotype érythrocytaire acceptés pour transfuser:

• Compte rendu format A4 de laboratoire

• Carte de groupe

•Document conforme doit comporter:

• Identification du patient : nom de naissance, complété s’il y a lieu par le nom d’usage, prénom(s) , date de naissance et sexe

• Résultats de 2 déterminations de groupe ABO.RH1 et phénotype RH.KEL1 effectuées sur 2 prélèvements sanguins différents exprimés en nomenclature internationale et standard

• Date de réalisation des analyses

• Identification et coordonnées du laboratoire ayant effectué les analyses

• Signature du biologiste

•La carte de groupe e

st amenée à disparaître (arrêté du 15 mai 2018) => transmission informatisée des résultats.

Documents de phénotype érythrocytaire

conformes

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Un résultat de groupe sanguin valide doit comporter

Identification du laboratoire :

Nom du laboratoire – Adresse –

Téléphone

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Un résultat de groupe sanguin valide doit comporter

Identification du patient : -Nom d’usage

-Nom de naissance -Prénom(s)

-Sexe

-Date de naissance

(41)

Un résultat de groupe sanguin valide doit comporter

Phénotypes érythrocytaires -Résultat de chaque

détermination

-la date de la détermination

(42)

Un résultat de groupe sanguin valide doit comporter

Signature du biologiste

(43)

Un résultat de groupe sanguin valide doit comporter

Autre:

-Allo anticorps anti érythrocytaire

-Mentions biologiques spéciales

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Etablissement français du sang - IFSI- 2021 4 4

• Non conforme

Absence d’identification et coordonnées du laboratoire Identification incomplète du patient

1 seule détermination

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• Conforme?

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• Non conforme

Retranscription manuelle + gommette autocollante 1 seule détermination

Identification du patient incomplète (absence de sexe)

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• Non conforme

Présence de gommettes autocollantes Retranscription manuelle

Une détermination incomplète

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• Conforme?

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• Conforme?

(50)

• Document de consignes transfusionnelles post

allogreffe de CSH

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