(1)PBS Lp

PBS Lp 0

300 600 900

1200 **

IL-12p40(ng/mL)

PBS Lp

0 300 600 900

1200 **

IL-10(pg/mL)

pCDNA3 CD14 CD36 0

2 4

6 *

Activitéluciférase (tauxd'augmentation)

pCDNA3 CD14 CD36 0

3 6

9 **

Productiond'IL-8 (tauxd'augmentation)

0 30 120 240

Temps (min)

BMDC WT

BMDC CD14^-/-

BMDC CD36^-/-

0,64 ± 0,04 % 33,04 ± 0.61 % 41,20 ± 0.67 % 49,66 ± 0.98 %

0,64 ± 0,02 % 27,02 ± 1,09 % 27,98 ± 0,71 % 36,18 ± 0,47 %

0,58 ± 0,04 % 26,36 ± 0,75 % 26,82 ± 0,40 % 29,78 ± 0.56 %

* ** **

** ** **

A

Figure 21.Identification de co-récepteurs participant à la capture de Lactobacillus plantarum et à l’activation de la DC. Des BMDCs (suspension cellulaire à 10⁶cellules/mL) sauvages (WT) ou déficientes pour CD14 (CD14^-/-) ou CD36 (CD36^-/-) ont été incubées avec des bactériesL. plantarum(suspension cellulaire à 100×10⁶CFU/mL) marquées au FITC et la fluorescence de ces BMDCs a été analysée par cytométrie de flux après les temps d’incubation indiqués (A). Production de cytokines (IL-12 p40, B ; IL-10, C) des BMDC WT et CD14^-/-(10⁶ cellules) après 24h de stimulation parL. plantarum(Lp, 10×10⁶CFU) ou par une solution saline (PBS) comme contrôle. Des cellules HEK exprimant constitivement TLR2 (cellules HEK T2Y recombinantes) ont été transfectées avec un plasmide rapporteur NF-B-luciférase et un plasmide vide comme contrôle (pCDNA3, vecteur vide) ou par des vecteurs permettant l’expression de CD14 (CD14) ou CD36 (CD36). Après stimulation pendant 24h par 10×10⁶CFU de bactériesL. plantarum(Lp) ou par une solution saline (PBS) comme contrôle, l’activité luciférase des cellules HEK (D )et leur production d’IL-8 (E) ont été dosés (les valeurs des cellules stimulées parL. plantarumont été rapportées aux valeurs des cellules non stimulées). Les données portées en graphiques sont exprimées en moyenne ± ESM. *P≤ 0,01, **P≤ 0,001 (BMDC WT vs BMDC CD14^-/-et BMDC CD36^-/-; vecteur vide vs CD14 et CD36).

D E

Vecteurvide CD14 CD36 Vecteurvide CD14 CD36

Nombrerelatifdecellules

Intensité de fluorescence

Lp PBS Lp PBS

PBS Lp PBS Lp

BMDC WT BMDC CD14^-/- BMDC WT BMDC CD14^-/-

B C