.
.
.
Conditions de culture tind
tinc
[nisine]
[bactéries](
A
Figure 27 délai entre l’
de l’induction ([bactéries]), E.
une forme dégradée de MBP Conditions de culture
ind(h): 1
inc(h): 5 [nisine]
[bactéries](
A
D
Antigènepurifié
Figure 27 délai entre l’
de l’induction ([bactéries]), E.
une forme dégradée de MBP
Figure 28 L. plantarum ProDer
passage des bactéries recombinantes au Cell Disrupter. Un équivalent de 8×10
plantarum chargé sur gel.
Conditions de culture (h): 1
(h): 5
[nisine] (ng/mL) : 25 [bactéries](
D
AntigènepurifiéAntigènepurifié
Figure 27 délai entre l’
de l’induction ([bactéries]), E.
une forme dégradée de MBP
Figure 28 L. plantarum ProDer
passage des bactéries recombinantes au Cell Disrupter. Un équivalent de 8×10
plantarum chargé sur gel.
Conditions de culture (h): 1
(ng/mL) : 25 [bactéries](DO
37
Figure 27.Optimisation de la production de MBP délai entre l’étape d’
de l’induction ([bactéries]), E.
une forme dégradée de MBP
Figure 28 L. plantarum
ProDer p 1 purifié est comparée à un lysat total obtenu par passage des bactéries recombinantes au Cell Disrupter. Un équivalent de 8×10
plantarum chargé sur gel.
1 T (°C) Conditions de culture
(ng/mL) : 25 DO600 nm
0 37
Optimisation de la production de MBP étape d’
de l’induction (tinc
([bactéries]), E. La forme entière de une forme dégradée de MBP
Figure 28.Dosage de la production de MBP
L. plantarum[pMEC240]. Une gamme de dilution de MBP p 1 purifié est comparée à un lysat total obtenu par passage des bactéries recombinantes au Cell Disrupter. Un équivalent de 8×10
plantarum[pMEC240] produisant MBP chargé sur gel.
MBP (°C) Conditions de culture
(ng/mL) : 25
600 nm): 0,15
1 30
Optimisation de la production de MBP étape d’inoculation de la culture et
inc), C
La forme entière de une forme dégradée de MBP
Dosage de la production de MBP
[pMEC240]. Une gamme de dilution de MBP p 1 purifié est comparée à un lysat total obtenu par passage des bactéries recombinantes au Cell Disrupter. Un équivalent de 8×10
[pMEC240] produisant MBP chargé sur gel.
0,8 MBP
: 0,15
30
Optimisation de la production de MBP inoculation de la culture et
), C ; la concentration en inducteur ([nisine]), D La forme entière de
une forme dégradée de MBP
Dosage de la production de MBP
[pMEC240]. Une gamme de dilution de MBP p 1 purifié est comparée à un lysat total obtenu par passage des bactéries recombinantes au Cell Disrupter. Un équivalent de 8×10
[pMEC240] produisant MBP 0,8
MBP-ProDer p 1 purifié (µg) : 0,15
Conditions de culture
2,5
Optimisation de la production de MBP inoculation de la culture et
; la concentration en inducteur ([nisine]), D La forme entière de
une forme dégradée de MBP-ProDer p 1.
Dosage de la production de MBP
[pMEC240]. Une gamme de dilution de MBP p 1 purifié est comparée à un lysat total obtenu par passage des bactéries recombinantes au Cell Disrupter. Un équivalent de 8×107
[pMEC240] produisant MBP 0,6
ProDer p 1 purifié (µg) Conditions de culture
T (°C) tind(h) tinc(h): 3 [bactéries](
[nisine]
Optimisation de la production de MBP inoculation de la culture et
; la concentration en inducteur ([nisine]), D La forme entière de
ProDer p 1.
Dosage de la production de MBP
[pMEC240]. Une gamme de dilution de MBP p 1 purifié est comparée à un lysat total obtenu par passage des bactéries recombinantes au Cell Disrupter. Un
CFU de la souche [pMEC240] produisant MBP
0,4 ProDer p 1 purifié (µg)
Antigènepurifié
Conditions de culture
°C): 37 (h): 0 (h): 3 bactéries](
B
5 nisine]
Optimisation de la production de MBP inoculation de la culture et
; la concentration en inducteur ([nisine]), D La forme entière de MBP
ProDer p 1.
Dosage de la production de MBP
[pMEC240]. Une gamme de dilution de MBP p 1 purifié est comparée à un lysat total obtenu par passage des bactéries recombinantes au Cell Disrupter. Un
CFU de la souche [pMEC240] produisant MBP
0,4 ProDer p 1 purifié (µg)
Antigènepurifié
Conditions de culture : 37
: 0 (h): 3 bactéries](DO
B
10 nisine] (ng/mL)
Optimisation de la production de MBP inoculation de la culture et
; la concentration en inducteur ([nisine]), D MBP-
ProDer p 1. Antigène purifié
Dosage de la production de MBP
[pMEC240]. Une gamme de dilution de MBP p 1 purifié est comparée à un lysat total obtenu par passage des bactéries recombinantes au Cell Disrupter. Un
CFU de la souche [pMEC240] produisant MBP
0,2 ProDer p 1 purifié (µg)
0
Conditions de culture
DO600 nm
10 (ng/mL)
Optimisation de la production de MBP inoculation de la culture et
; la concentration en inducteur ([nisine]), D ProDer p 1
Antigène purifié
Dosage de la production de MBP
[pMEC240]. Une gamme de dilution de MBP p 1 purifié est comparée à un lysat total obtenu par passage des bactéries recombinantes au Cell Disrupter. Un
CFU de la souche [pMEC240] produisant MBP-ProDer p 1 est
0,2 ProDer p 1 purifié (µg)
0
Conditions de culture
600 nm): 0,15
25 (ng/mL)
Optimisation de la production de MBP
inoculation de la culture et le moment où
; la concentration en inducteur ([nisine]), D ProDer p 1
Antigène purifié
Conditions de culture
Dosage de la production de MBP-ProDer p 1 par [pMEC240]. Une gamme de dilution de MBP p 1 purifié est comparée à un lysat total obtenu par passage des bactéries recombinantes au Cell Disrupter. Un
CFU de la souche ProDer p 1 est
0,1 1
Conditions de culture
: 0,15
25
Optimisation de la production de MBP-ProDer p 1.
le moment où
; la concentration en inducteur ([nisine]), D
ProDer p 1 est désignée par une flèche.
Antigène purifié
Conditions de culture T (°C)
tinc(h): 5 [nisine]
[bactéries](DO
ProDer p 1 par [pMEC240]. Une gamme de dilution de MBP p 1 purifié est comparée à un lysat total obtenu par passage des bactéries recombinantes au Cell Disrupter. Un
CFU de la souche ProDer p 1 est
L.plantarum[pMEC240]
: 0,15
50
ProDer p 1.
le moment où
; la concentration en inducteur ([nisine]), D
est désignée par une flèche.
Antigène purifié : MBP Conditions de culture
(°C): 37 (h): 5 [nisine]
[bactéries](DO
ProDer p 1 par [pMEC240]. Une gamme de dilution de MBP p 1 purifié est comparée à un lysat total obtenu par passage des bactéries recombinantes au Cell Disrupter. Un
CFU de la souche ProDer p 1 est
L.plantarum[pMEC240]
tind
2
50 100
ProDer p 1.
le moment où la production
; la concentration en inducteur ([nisine]), D
est désignée par une flèche.
: MBP Conditions de culture
: 37 (h): 5
[nisine] (ng/mL) : 25 [bactéries](DO
ProDer p 1 par [pMEC240]. Une gamme de dilution de MBP- p 1 purifié est comparée à un lysat total obtenu par passage des bactéries recombinantes au Cell Disrupter. Un
CFU de la souche L.
ProDer p 1 est
ind(h)
100
ProDer p 1. Les la production
; la concentration en inducteur ([nisine]), D
est désignée par une flèche.
: MBP-ProDer p 1 purifiée à 350 ng Conditions de culture
(ng/mL) : 25 [bactéries](DO600 nm
ProDer p 1 par - p 1 purifié est comparée à un lysat total obtenu par passage des bactéries recombinantes au Cell Disrupter. Un L.
ProDer p 1 est (h)
3
es paramètres suivants la production
; la concentration en inducteur ([nisine]), D
est désignée par une flèche.
ProDer p 1 purifiée à 350 ng Conditions de culture
(ng/mL) : 25
600 nm): 0,
Figure 29.
Un lysat cellulaire de la bactérie recombinante plantarum
fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une phase insoluble. Les fractions recueillies
Western Blot au moyen d’un séra polyclonal anti 4
paramètres suivants la production
; la densité bactérienne à laquelle la culture est désignée par une flèche.
ProDer p 1 purifiée à 350 ng Conditions de culture
(ng/mL) : 25 ): 0,15
Figure 29.
Un lysat cellulaire de la bactérie recombinante plantarum
fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une phase insoluble. Les fractions recueillies
Western Blot au moyen d’un séra polyclonal anti 5
paramètres suivants la production de la
; la densité bactérienne à laquelle la culture est désignée par une flèche.
ProDer p 1 purifiée à 350 ng 15
Figure 29.
Un lysat cellulaire de la bactérie recombinante plantarum
fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une phase insoluble. Les fractions recueillies
Western Blot au moyen d’un séra polyclonal anti Nisine
5
E
Antigènepurifié
paramètres suivants
la protéine recombinante
; la densité bactérienne à laquelle la culture
est désignée par une flèche. La bande de poids moléculaire inférieur représente ProDer p 1 purifiée à 350 ng
Figure 29.Localisation intracellulaire de MBP Un lysat cellulaire de la bactérie recombinante plantarum[pMEC240] produisant MBP
fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une phase insoluble. Les fractions recueillies
Western Blot au moyen d’un séra polyclonal anti Nisine
6
0,
paramètres suivants
protéine recombinante
; la densité bactérienne à laquelle la culture
La bande de poids moléculaire inférieur représente ProDer p 1 purifiée à 350 ng
Localisation intracellulaire de MBP Un lysat cellulaire de la bactérie recombinante
[pMEC240] produisant MBP
fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une phase insoluble. Les fractions recueillies
Western Blot au moyen d’un séra polyclonal anti -M
BP-ProDerp1purifié
0,1
paramètres suivants ont été analysés protéine recombinante
; la densité bactérienne à laquelle la culture
La bande de poids moléculaire inférieur représente ProDer p 1 purifiée à 350 ng
Localisation intracellulaire de MBP Un lysat cellulaire de la bactérie recombinante
[pMEC240] produisant MBP
fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une phase insoluble. Les fractions recueillies
Western Blot au moyen d’un séra polyclonal anti -M
BP-ProDerp1purifié
[bactéries](
Conditions de culture
0,
ont été analysés protéine recombinante
; la densité bactérienne à laquelle la culture
La bande de poids moléculaire inférieur représente ProDer p 1 purifiée à 350 ng.
Localisation intracellulaire de MBP Un lysat cellulaire de la bactérie recombinante
[pMEC240] produisant MBP
fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une phase insoluble. Les fractions recueillies
Western Blot au moyen d’un séra polyclonal anti -
Fractiontotale
bactéries](
Conditions de culture T (°C)
tind
tinc
[nisine]
Antigènepurifié
Conditions de culture C
0,25
ont été analysés protéine recombinante
; la densité bactérienne à laquelle la culture
La bande de poids moléculaire inférieur représente
Localisation intracellulaire de MBP Un lysat cellulaire de la bactérie recombinante
[pMEC240] produisant MBP
fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une phase insoluble. Les fractions recueillies
Western Blot au moyen d’un séra polyclonal anti
Fractiontotale
bactéries](D.O.
Conditions de culture (°C): 37
ind(h): 0
inc(h): 3 [nisine]
Antigènepurifié
Conditions de culture T (°C)
tind(h): 0 [nisine]
[bactéries](DO C
0,5
ont été analysés protéine recombinante
; la densité bactérienne à laquelle la culture
La bande de poids moléculaire inférieur représente
Localisation intracellulaire de MBP Un lysat cellulaire de la bactérie recombinante
[pMEC240] produisant MBP
fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une phase insoluble. Les fractions recueillies
Western Blot au moyen d’un séra polyclonal anti +
Fractiontotale
D.O.
Conditions de culture (°C): 37
(h): 0 (h): 3 [nisine] (ng/mL)
3
Conditions de culture (°C): 37
(h): 0 [nisine]
[bactéries](DO
0,5
ont été analysés : la température (T), A est induite
; la densité bactérienne à laquelle la culture
La bande de poids moléculaire inférieur représente
Localisation intracellulaire de MBP Un lysat cellulaire de la bactérie recombinante
[pMEC240] produisant MBP
fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une phase insoluble. Les fractions recueillies
Western Blot au moyen d’un séra polyclonal anti +
Fractionsoluble
D.O.600 nm
Conditions de culture
(ng/mL) 3
Conditions de culture : 37
(h): 0
[nisine] (ng/mL) : 25 [bactéries](DO
0,75
: la température (T), A est induite
; la densité bactérienne à laquelle la culture
La bande de poids moléculaire inférieur représente
Localisation intracellulaire de MBP Un lysat cellulaire de la bactérie recombinante
[pMEC240] produisant MBP-
fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une phase insoluble. Les fractions recueillies
Western Blot au moyen d’un séra polyclonal anti +
Fractionsoluble
600 nm) tinc(h)
Conditions de culture
(ng/mL): 50 4 Conditions de culture
(ng/mL) : 25 [bactéries](DO600 nm
0,75
: la température (T), A est induite (t
; la densité bactérienne à laquelle la culture
La bande de poids moléculaire inférieur représente
Localisation intracellulaire de MBP Un lysat cellulaire de la bactérie recombinante
-ProDer p 1 a été fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une ont été analysée par Western Blot au moyen d’un séra polyclonal anti
+
Fractioninsoluble
(h)
Conditions de culture
50 Conditions de culture
(ng/mL) : 25
600 nm): 0,15
1
: la température (T), A (tind), B;
; la densité bactérienne à laquelle la culture est inoculée La bande de poids moléculaire inférieur représente
Localisation intracellulaire de MBP-ProDer p 1.
Un lysat cellulaire de la bactérie recombinante ProDer p 1 a été fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une ont été analysée par Western Blot au moyen d’un séra polyclonal anti-ProDer p 1.
5 Conditions de culture
(ng/mL) : 25 ): 0,15
: la température (T), A , B; la est inoculée La bande de poids moléculaire inférieur représente
ProDer p 1.
Un lysat cellulaire de la bactérie recombinante ProDer p 1 a été fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une ont été analysée par ProDer p 1.
): 0,15
: la température (T), A la durée est inoculée La bande de poids moléculaire inférieur représente
ProDer p 1.
Un lysat cellulaire de la bactérie recombinante ProDer p 1 a été fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une ont été analysée par ProDer p 1.
; le durée est inoculée La bande de poids moléculaire inférieur représente
ProDer p 1.
Un lysat cellulaire de la bactérie recombinante L.
ProDer p 1 a été fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une ont été analysée par ProDer p 1.
le durée est inoculée La bande de poids moléculaire inférieur représente
ProDer p 1.
L.
ProDer p 1 a été fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une ont été analysée par