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une forme dégradée de MBP Figure 28 L

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Academic year: 2021

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.

.

.

Conditions de culture tind

tinc

[nisine]

[bactéries](

A

Figure 27 délai entre l’

de l’induction ([bactéries]), E.

une forme dégradée de MBP Conditions de culture

ind(h): 1

inc(h): 5 [nisine]

[bactéries](

A

D

Antigènepurifié

Figure 27 délai entre l’

de l’induction ([bactéries]), E.

une forme dégradée de MBP

Figure 28 L. plantarum ProDer

passage des bactéries recombinantes au Cell Disrupter. Un équivalent de 8×10

plantarum chargé sur gel.

Conditions de culture (h): 1

(h): 5

[nisine] (ng/mL) : 25 [bactéries](

D

AntigènepurifiéAntigènepurifié

Figure 27 délai entre l’

de l’induction ([bactéries]), E.

une forme dégradée de MBP

Figure 28 L. plantarum ProDer

passage des bactéries recombinantes au Cell Disrupter. Un équivalent de 8×10

plantarum chargé sur gel.

Conditions de culture (h): 1

(ng/mL) : 25 [bactéries](DO

37

Figure 27.Optimisation de la production de MBP délai entre l’étape d’

de l’induction ([bactéries]), E.

une forme dégradée de MBP

Figure 28 L. plantarum

ProDer p 1 purifié est comparée à un lysat total obtenu par passage des bactéries recombinantes au Cell Disrupter. Un équivalent de 8×10

plantarum chargé sur gel.

1 T (°C) Conditions de culture

(ng/mL) : 25 DO600 nm

0 37

Optimisation de la production de MBP étape d’

de l’induction (tinc

([bactéries]), E. La forme entière de une forme dégradée de MBP

Figure 28.Dosage de la production de MBP

L. plantarum[pMEC240]. Une gamme de dilution de MBP p 1 purifié est comparée à un lysat total obtenu par passage des bactéries recombinantes au Cell Disrupter. Un équivalent de 8×10

plantarum[pMEC240] produisant MBP chargé sur gel.

MBP (°C) Conditions de culture

(ng/mL) : 25

600 nm): 0,15

1 30

Optimisation de la production de MBP étape d’inoculation de la culture et

inc), C

La forme entière de une forme dégradée de MBP

Dosage de la production de MBP

[pMEC240]. Une gamme de dilution de MBP p 1 purifié est comparée à un lysat total obtenu par passage des bactéries recombinantes au Cell Disrupter. Un équivalent de 8×10

[pMEC240] produisant MBP chargé sur gel.

0,8 MBP

: 0,15

30

Optimisation de la production de MBP inoculation de la culture et

), C ; la concentration en inducteur ([nisine]), D La forme entière de

une forme dégradée de MBP

Dosage de la production de MBP

[pMEC240]. Une gamme de dilution de MBP p 1 purifié est comparée à un lysat total obtenu par passage des bactéries recombinantes au Cell Disrupter. Un équivalent de 8×10

[pMEC240] produisant MBP 0,8

MBP-ProDer p 1 purifié (µg) : 0,15

Conditions de culture

2,5

Optimisation de la production de MBP inoculation de la culture et

; la concentration en inducteur ([nisine]), D La forme entière de

une forme dégradée de MBP-ProDer p 1.

Dosage de la production de MBP

[pMEC240]. Une gamme de dilution de MBP p 1 purifié est comparée à un lysat total obtenu par passage des bactéries recombinantes au Cell Disrupter. Un équivalent de 8×107

[pMEC240] produisant MBP 0,6

ProDer p 1 purifié (µg) Conditions de culture

T (°C) tind(h) tinc(h): 3 [bactéries](

[nisine]

Optimisation de la production de MBP inoculation de la culture et

; la concentration en inducteur ([nisine]), D La forme entière de

ProDer p 1.

Dosage de la production de MBP

[pMEC240]. Une gamme de dilution de MBP p 1 purifié est comparée à un lysat total obtenu par passage des bactéries recombinantes au Cell Disrupter. Un

CFU de la souche [pMEC240] produisant MBP

0,4 ProDer p 1 purifié (µg)

Antigènepurifié

Conditions de culture

°C): 37 (h): 0 (h): 3 bactéries](

B

5 nisine]

Optimisation de la production de MBP inoculation de la culture et

; la concentration en inducteur ([nisine]), D La forme entière de MBP

ProDer p 1.

Dosage de la production de MBP

[pMEC240]. Une gamme de dilution de MBP p 1 purifié est comparée à un lysat total obtenu par passage des bactéries recombinantes au Cell Disrupter. Un

CFU de la souche [pMEC240] produisant MBP

0,4 ProDer p 1 purifié (µg)

Antigènepurifié

Conditions de culture : 37

: 0 (h): 3 bactéries](DO

B

10 nisine] (ng/mL)

Optimisation de la production de MBP inoculation de la culture et

; la concentration en inducteur ([nisine]), D MBP-

ProDer p 1. Antigène purifié

Dosage de la production de MBP

[pMEC240]. Une gamme de dilution de MBP p 1 purifié est comparée à un lysat total obtenu par passage des bactéries recombinantes au Cell Disrupter. Un

CFU de la souche [pMEC240] produisant MBP

0,2 ProDer p 1 purifié (µg)

0

Conditions de culture

DO600 nm

10 (ng/mL)

Optimisation de la production de MBP inoculation de la culture et

; la concentration en inducteur ([nisine]), D ProDer p 1

Antigène purifié

Dosage de la production de MBP

[pMEC240]. Une gamme de dilution de MBP p 1 purifié est comparée à un lysat total obtenu par passage des bactéries recombinantes au Cell Disrupter. Un

CFU de la souche [pMEC240] produisant MBP-ProDer p 1 est

0,2 ProDer p 1 purifié (µg)

0

Conditions de culture

600 nm): 0,15

25 (ng/mL)

Optimisation de la production de MBP

inoculation de la culture et le moment où

; la concentration en inducteur ([nisine]), D ProDer p 1

Antigène purifié

Conditions de culture

Dosage de la production de MBP-ProDer p 1 par [pMEC240]. Une gamme de dilution de MBP p 1 purifié est comparée à un lysat total obtenu par passage des bactéries recombinantes au Cell Disrupter. Un

CFU de la souche ProDer p 1 est

0,1 1

Conditions de culture

: 0,15

25

Optimisation de la production de MBP-ProDer p 1.

le moment où

; la concentration en inducteur ([nisine]), D

ProDer p 1 est désignée par une flèche.

Antigène purifié

Conditions de culture T (°C)

tinc(h): 5 [nisine]

[bactéries](DO

ProDer p 1 par [pMEC240]. Une gamme de dilution de MBP p 1 purifié est comparée à un lysat total obtenu par passage des bactéries recombinantes au Cell Disrupter. Un

CFU de la souche ProDer p 1 est

L.plantarum[pMEC240]

: 0,15

50

ProDer p 1.

le moment où

; la concentration en inducteur ([nisine]), D

est désignée par une flèche.

Antigène purifié : MBP Conditions de culture

(°C): 37 (h): 5 [nisine]

[bactéries](DO

ProDer p 1 par [pMEC240]. Une gamme de dilution de MBP p 1 purifié est comparée à un lysat total obtenu par passage des bactéries recombinantes au Cell Disrupter. Un

CFU de la souche ProDer p 1 est

L.plantarum[pMEC240]

tind

2

50 100

ProDer p 1.

le moment où la production

; la concentration en inducteur ([nisine]), D

est désignée par une flèche.

: MBP Conditions de culture

: 37 (h): 5

[nisine] (ng/mL) : 25 [bactéries](DO

ProDer p 1 par [pMEC240]. Une gamme de dilution de MBP- p 1 purifié est comparée à un lysat total obtenu par passage des bactéries recombinantes au Cell Disrupter. Un

CFU de la souche L.

ProDer p 1 est

ind(h)

100

ProDer p 1. Les la production

; la concentration en inducteur ([nisine]), D

est désignée par une flèche.

: MBP-ProDer p 1 purifiée à 350 ng Conditions de culture

(ng/mL) : 25 [bactéries](DO600 nm

ProDer p 1 par - p 1 purifié est comparée à un lysat total obtenu par passage des bactéries recombinantes au Cell Disrupter. Un L.

ProDer p 1 est (h)

3

es paramètres suivants la production

; la concentration en inducteur ([nisine]), D

est désignée par une flèche.

ProDer p 1 purifiée à 350 ng Conditions de culture

(ng/mL) : 25

600 nm): 0,

Figure 29.

Un lysat cellulaire de la bactérie recombinante plantarum

fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une phase insoluble. Les fractions recueillies

Western Blot au moyen d’un séra polyclonal anti 4

paramètres suivants la production

; la densité bactérienne à laquelle la culture est désignée par une flèche.

ProDer p 1 purifiée à 350 ng Conditions de culture

(ng/mL) : 25 ): 0,15

Figure 29.

Un lysat cellulaire de la bactérie recombinante plantarum

fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une phase insoluble. Les fractions recueillies

Western Blot au moyen d’un séra polyclonal anti 5

paramètres suivants la production de la

; la densité bactérienne à laquelle la culture est désignée par une flèche.

ProDer p 1 purifiée à 350 ng 15

Figure 29.

Un lysat cellulaire de la bactérie recombinante plantarum

fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une phase insoluble. Les fractions recueillies

Western Blot au moyen d’un séra polyclonal anti Nisine

5

E

Antigènepurifié

paramètres suivants

la protéine recombinante

; la densité bactérienne à laquelle la culture

est désignée par une flèche. La bande de poids moléculaire inférieur représente ProDer p 1 purifiée à 350 ng

Figure 29.Localisation intracellulaire de MBP Un lysat cellulaire de la bactérie recombinante plantarum[pMEC240] produisant MBP

fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une phase insoluble. Les fractions recueillies

Western Blot au moyen d’un séra polyclonal anti Nisine

6

0,

paramètres suivants

protéine recombinante

; la densité bactérienne à laquelle la culture

La bande de poids moléculaire inférieur représente ProDer p 1 purifiée à 350 ng

Localisation intracellulaire de MBP Un lysat cellulaire de la bactérie recombinante

[pMEC240] produisant MBP

fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une phase insoluble. Les fractions recueillies

Western Blot au moyen d’un séra polyclonal anti -M

BP-ProDerp1purifié

0,1

paramètres suivants ont été analysés protéine recombinante

; la densité bactérienne à laquelle la culture

La bande de poids moléculaire inférieur représente ProDer p 1 purifiée à 350 ng

Localisation intracellulaire de MBP Un lysat cellulaire de la bactérie recombinante

[pMEC240] produisant MBP

fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une phase insoluble. Les fractions recueillies

Western Blot au moyen d’un séra polyclonal anti -M

BP-ProDerp1purifié

[bactéries](

Conditions de culture

0,

ont été analysés protéine recombinante

; la densité bactérienne à laquelle la culture

La bande de poids moléculaire inférieur représente ProDer p 1 purifiée à 350 ng.

Localisation intracellulaire de MBP Un lysat cellulaire de la bactérie recombinante

[pMEC240] produisant MBP

fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une phase insoluble. Les fractions recueillies

Western Blot au moyen d’un séra polyclonal anti -

Fractiontotale

bactéries](

Conditions de culture T (°C)

tind

tinc

[nisine]

Antigènepurifié

Conditions de culture C

0,25

ont été analysés protéine recombinante

; la densité bactérienne à laquelle la culture

La bande de poids moléculaire inférieur représente

Localisation intracellulaire de MBP Un lysat cellulaire de la bactérie recombinante

[pMEC240] produisant MBP

fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une phase insoluble. Les fractions recueillies

Western Blot au moyen d’un séra polyclonal anti

Fractiontotale

bactéries](D.O.

Conditions de culture (°C): 37

ind(h): 0

inc(h): 3 [nisine]

Antigènepurifié

Conditions de culture T (°C)

tind(h): 0 [nisine]

[bactéries](DO C

0,5

ont été analysés protéine recombinante

; la densité bactérienne à laquelle la culture

La bande de poids moléculaire inférieur représente

Localisation intracellulaire de MBP Un lysat cellulaire de la bactérie recombinante

[pMEC240] produisant MBP

fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une phase insoluble. Les fractions recueillies

Western Blot au moyen d’un séra polyclonal anti +

Fractiontotale

D.O.

Conditions de culture (°C): 37

(h): 0 (h): 3 [nisine] (ng/mL)

3

Conditions de culture (°C): 37

(h): 0 [nisine]

[bactéries](DO

0,5

ont été analysés : la température (T), A est induite

; la densité bactérienne à laquelle la culture

La bande de poids moléculaire inférieur représente

Localisation intracellulaire de MBP Un lysat cellulaire de la bactérie recombinante

[pMEC240] produisant MBP

fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une phase insoluble. Les fractions recueillies

Western Blot au moyen d’un séra polyclonal anti +

Fractionsoluble

D.O.600 nm

Conditions de culture

(ng/mL) 3

Conditions de culture : 37

(h): 0

[nisine] (ng/mL) : 25 [bactéries](DO

0,75

: la température (T), A est induite

; la densité bactérienne à laquelle la culture

La bande de poids moléculaire inférieur représente

Localisation intracellulaire de MBP Un lysat cellulaire de la bactérie recombinante

[pMEC240] produisant MBP-

fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une phase insoluble. Les fractions recueillies

Western Blot au moyen d’un séra polyclonal anti +

Fractionsoluble

600 nm) tinc(h)

Conditions de culture

(ng/mL): 50 4 Conditions de culture

(ng/mL) : 25 [bactéries](DO600 nm

0,75

: la température (T), A est induite (t

; la densité bactérienne à laquelle la culture

La bande de poids moléculaire inférieur représente

Localisation intracellulaire de MBP Un lysat cellulaire de la bactérie recombinante

-ProDer p 1 a été fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une ont été analysée par Western Blot au moyen d’un séra polyclonal anti

+

Fractioninsoluble

(h)

Conditions de culture

50 Conditions de culture

(ng/mL) : 25

600 nm): 0,15

1

: la température (T), A (tind), B;

; la densité bactérienne à laquelle la culture est inoculée La bande de poids moléculaire inférieur représente

Localisation intracellulaire de MBP-ProDer p 1.

Un lysat cellulaire de la bactérie recombinante ProDer p 1 a été fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une ont été analysée par Western Blot au moyen d’un séra polyclonal anti-ProDer p 1.

5 Conditions de culture

(ng/mL) : 25 ): 0,15

: la température (T), A , B; la est inoculée La bande de poids moléculaire inférieur représente

ProDer p 1.

Un lysat cellulaire de la bactérie recombinante ProDer p 1 a été fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une ont été analysée par ProDer p 1.

): 0,15

: la température (T), A la durée est inoculée La bande de poids moléculaire inférieur représente

ProDer p 1.

Un lysat cellulaire de la bactérie recombinante ProDer p 1 a été fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une ont été analysée par ProDer p 1.

; le durée est inoculée La bande de poids moléculaire inférieur représente

ProDer p 1.

Un lysat cellulaire de la bactérie recombinante L.

ProDer p 1 a été fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une ont été analysée par ProDer p 1.

le durée est inoculée La bande de poids moléculaire inférieur représente

ProDer p 1.

L.

ProDer p 1 a été fractionné par ultracentrifugation en une phase soluble et une ont été analysée par

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