ﻢﻴﺣﺮﻟﺍ ﻥﺎﻤﺣﺮﻟﺍ ﷲﺍ ﻢﺴﺑ
ﺎﻨﺘﻤﻠﻋ ﺎﻣ ﻻﺇ ﺎﻨﻟ ﻢﻠﻋ ﻻ ﻚﻧﺎﺤﺒﺳ
ﻢﻴﻜﺤﻟﺍ ﻢﻴﻠﻌﻟﺍ ﺖﻧﺃ ﻚﻧﺇ
ﺓﺮﻘﺒﻟﺍ ﺓﺭﻮﺳ ﺔﻳﻵﺍ 31MOHAMMED V DE RABAT
FACULTE DE MEDECINE ET DE PHARMACIE - RABAT
DOYENS HONORAIRES :
1962 – 1969 : Professeur Abdelmalek FARAJ 1969 – 1974 : Professeur Abdellatif BERBICH 1974 – 1981 : Professeur Bachir LAZRAK 1981 – 1989 : Professeur Taieb CHKILI
1989 – 1997 : Professeur Mohamed Tahar ALAOUI 1997 – 2003 : Professeur Abdelmajid BELMAHI 2003 - 2013 : Professeur Najia HAJJAJ – HASSOUNI
ADMINISTRATION :
DoyenProfesseur Mohamed ADNAOUI
Vice-Doyen chargé des Affaires Académiques et estudiantines Professeur Brahim LEKEHAL
Vice-Doyen chargé de la Recherche et de la Coopération Professeur Toufiq DAKKA
Vice-Doyen chargé des Affaires Spécifiques à la Pharmacie Professeur Jamal TAOUFIK
Secrétaire Général
1 - ENSEIGNANTS-CHERCHEURS MEDECINS ET PHARMACIENS
PROFESSEURS :
DECEMBRE 1984
Pr. MAAOUNI Abdelaziz Médecine Interne – Clinique Royale
Pr. MAAZOUZI Ahmed Wajdi Anesthésie -Réanimation
Pr. SETTAF Abdellatif Pathologie Chirurgicale
NOVEMBRE ET DECEMBRE 1985
Pr. BENSAID Younes Pathologie Chirurgicale
JANVIER, FEVRIER ET DECEMBRE 1987
Pr. LACHKAR Hassan Médecine Interne
Pr. YAHYAOUI Mohamed Neurologie
DECEMBRE 1989
Pr. ADNAOUI Mohamed Médecine Interne –Doyen de la FMPR
Pr. OUAZZANI Taïbi Mohamed Réda Neurologie
JANVIER ET NOVEMBRE 1990
Pr. HACHIM Mohammed* Médecine-Interne
Pr. KHARBACH Aîcha Gynécologie -Obstétrique
Pr. TAZI Saoud Anas Anesthésie Réanimation
FEVRIER AVRIL JUILLET ET DECEMBRE 1991 Pr. AZZOUZI Abderrahim Anesthésie Réanimation- Doyen de FMPO
Pr. BAYAHIA Rabéa Néphrologie
Pr. BELKOUCHI Abdelkader Chirurgie Générale
Pr. BENCHEKROUN Belabbes Abdellatif Chirurgie Générale
Pr. BENSOUDA Yahia Pharmacie galénique
Pr. BERRAHO Amina Ophtalmologie
Pr. BEZAD Rachid Gynécologie Obstétrique Méd. Chef Maternité des
Orangers
Pr. CHERRAH Yahia Pharmacologie
Pr. CHOKAIRI Omar Histologie Embryologie
Pr. KHATTAB Mohamed Pédiatrie
Pr. SOULAYMANI Rachida Pharmacologie- Dir. du Centre National PV Rabat Pr. TAOUFIK Jamal Chimie thérapeutique V.D à la pharmacie+Dir. du CEDOC +
DECEMBRE 1992
Pr. AHALLAT Mohamed Chirurgie Générale Doyen de FMPT
Pr. BENSOUDA Adil Anesthésie Réanimation
Pr. CHAHED OUAZZANI Laaziza Gastro-Entérologie
Pr. CHRAIBI Chafiq Gynécologie Obstétrique
Pr. EL OUAHABI Abdessamad Neurochirurgie
Pr. FELLAT Rokaya Cardiologie
Pr. GHAFIR Driss* Médecine Interne
Pr. JIDDANE Mohamed Anatomie
Pr. TAGHY Ahmed Chirurgie Générale
Pr. ZOUHDI Mimoun Microbiologie
MARS 1994
Pr. BENJAAFAR Noureddine Radiothérapie
Pr. BEN RAIS Nozha Biophysique
Pr. CAOUI Malika Biophysique
Pr. CHRAIBI Abdelmjid
Endocrinologie et Maladies Métaboliques Doyen de la
FMPA
Pr. EL AMRANI Sabah Gynécologie Obstétrique Pr. EL BARDOUNI Ahmed Traumato-Orthopédie Pr. EL HASSANI My Rachid Radiologie
Pr. ERROUGANI Abdelkader Chirurgie Générale – Directeur du CHIS-Rabat
Pr. ESSAKALI Malika Immunologie
Pr. ETTAYEBI Fouad Chirurgie Pédiatrique
Pr. HASSAM Badredine Dermatologie
Pr. IFRINE Lahssan Chirurgie Générale
Pr. MAHFOUD Mustapha Traumatologie – Orthopédie
Pr. RHRAB Brahim Gynécologie –Obstétrique
Pr. SENOUCI Karima Dermatologie
MARS 1994
Pr. ABBAR Mohamed* Urologie Directeur Hôpital My Ismail Meknès Pr. ABDELHAK M’barek Chirurgie – Pédiatrique
Pr. BENTAHILA Abdelali Pédiatrie
Pr. BENYAHIA Mohammed Ali Gynécologie – Obstétrique Pr. BERRADA Mohamed Saleh Traumatologie – Orthopédie Pr. CHERKAOUI Lalla Ouafae Ophtalmologie
Pr. LAKHDAR Amina Gynécologie Obstétrique
Pr. MOUANE Nezha Pédiatrie
MARS 1995
Pr. ABOUQUAL Redouane Réanimation Médicale
Pr. AMRAOUI Mohamed Chirurgie Générale
Pr. BARGACH Samir Gynécologie Obstétrique Pr. DRISSI KAMILI Med Nordine* Anesthésie Réanimation Pr. EL MESNAOUI Abbes Chirurgie Générale Pr. ESSAKALI HOUSSYNI Leila Oto-Rhino-Laryngologie
Pr. HDA Abdelhamid* Cardiologie Inspecteur du Service de Santé des FAR Pr. IBEN ATTYA ANDALOUSSI Ahmed Urologie
Pr. OUAZZANI CHAHDI Bahia Ophtalmologie
Pr. SEFIANI Abdelaziz Génétique
Pr. ZEGGWAGH Amine Ali Réanimation Médicale
DECEMBRE 1996
Pr. AMIL Touriya* Radiologie
Pr. BELKACEM Rachid Chirurgie Pédiatrie Pr. BOULANOUAR Abdelkrim Ophtalmologie Pr. EL ALAMI EL FARICHA EL Hassan Chirurgie Générale
Pr. GAOUZI Ahmed Pédiatrie
Pr. MAHFOUDI M’barek* Radiologie
Pr. OUZEDDOUN Naima Néphrologie
Pr. ZBIR EL Mehdi* Cardiologie DirecteurHôp.Mil. d’Instruction Med V Rabat
NOVEMBRE 1997
Pr. ALAMI Mohamed Hassan Gynécologie-Obstétrique
Pr. BEN SLIMANE Lounis Urologie
Pr. BIROUK Nazha Neurologie
Pr. ERREIMI Naima Pédiatrie
Pr. FELLAT Nadia Cardiologie
Pr. KADDOURI Noureddine Chirurgie Pédiatrique
Pr. KOUTANI Abdellatif Urologie
Pr. LAHLOU Mohamed Khalid Chirurgie Générale
Pr. MAHRAOUI CHAFIQ Pédiatrie
Pr. TOUFIQ Jallal Psychiatrie Directeur Hôp.Ar-razi Salé
Pr. YOUSFI MALKI Mounia Gynécologie Obstétrique
NOVEMBRE 1998
Pr. BENOMAR ALI Neurologie Doyen de la FMP Abulcassis Pr. BOUGTAB Abdesslam Chirurgie Générale
Pr. ER RIHANI Hassan Oncologie Médicale
Pr. BENKIRANE Majid* Hématologie
JANVIER 2000
Pr. ABID Ahmed* Pneumo-phtisiologie
Pr. AIT OUAMAR Hassan Pédiatrie
Pr. BENJELLOUN Dakhama Badr.Sououd Pédiatrie
Pr. BOURKADI Jamal-Eddine Pneumo-phtisiologie Directeur Hôp. My Youssef Pr. CHARIF CHEFCHAOUNI Al Montacer Chirurgie Générale
Pr. ECHARRAB El Mahjoub Chirurgie Générale Pr. EL FTOUH Mustapha Pneumo-phtisiologie
Pr. EL MOSTARCHID Brahim* Neurochirurgie
Pr. MAHMOUDI Abdelkrim* Anesthésie-Réanimation Pr. TACHINANTE Rajae Anesthésie-Réanimation Pr. TAZI MEZALEK Zoubida Médecine Interne
NOVEMBRE 2000
Pr. AIDI Saadia Neurologie
Pr. AJANA Fatima Zohra Gastro-Entérologie
Pr. BENAMR Said Chirurgie Générale
Pr. CHERTI Mohammed Cardiologie
Pr. ECH-CHERIF EL KETTANI Selma Anesthésie-Réanimation
Pr. EL HASSANI Amine Pédiatrie - Directeur Hôp.Cheikh Zaid
Pr. EL KHADER Khalid Urologie
Pr. EL MAGHRAOUI Abdellah* Rhumatologie
Pr. GHARBI Mohamed El Hassan Endocrinologie et Maladies Métaboliques
Pr. MDAGHRI ALAOUI Asmae Pédiatrie
Pr. ROUIMI Abdelhadi* Neurologie
DECEMBRE 2000
Pr.ZOHAIR ABDELLAH * ORL
Pr. BALKHI Hicham* Anesthésie-Réanimation
Pr. BENABDELJLIL Maria Neurologie
Pr. BENAMAR Loubna Néphrologie
Pr. BENAMOR Jouda Pneumo-phtisiologie
Pr. BENELBARHDADI Imane Gastro-Entérologie
Pr. BENNANI Rajae Cardiologie
Pr. BENOUACHANE Thami Pédiatrie
Pr. BEZZA Ahmed* Rhumatologie
Pr. BOUCHIKHI IDRISSI Med Larbi Anatomie Pr. BOUMDIN El Hassane* Radiologie
Pr. CHAT Latifa Radiologie
Pr. DAALI Mustapha* Chirurgie Générale
Pr. DRISSI Sidi Mourad* Radiologie
Pr. EL HIJRI Ahmed Anesthésie-Réanimation
Pr. EL MAAQILI Moulay Rachid Neuro-Chirurgie
Pr. EL MADHI Tarik Chirurgie-Pédiatrique
Pr. EL OUNANI Mohamed Chirurgie Générale
Pr. ETTAIR Said Pédiatrie - Directeur Hôp. d’EnfantsRabat
Pr. GAZZAZ Miloudi* Neuro-Chirurgie
Pr. HRORA Abdelmalek Chirurgie Générale
Pr. KABIRI EL Hassane* Chirurgie Thoracique Pr. LAMRANI Moulay Omar Traumatologie Orthopédie
Pr. LEKEHAL Brahim Chirurgie Vasculaire Périphérique Pr. MAHASSIN Fattouma* Médecine Interne
Pr. MEDARHRI Jalil Chirurgie Générale
Pr. MIKDAME Mohammed* Hématologie Clinique
Pr. MOHSINE Raouf Chirurgie Générale
Pr. NOUINI Yassine Urologie - Directeur Hôpital Ibn Sina
Pr. SABBAH Farid Chirurgie Générale
Pr. SEFIANI Yasser Chirurgie Vasculaire Périphérique Pr. TAOUFIQ BENCHEKROUN Soumia Pédiatrie
DECEMBRE 2002
Pr. AL BOUZIDI Abderrahmane* Anatomie Pathologique
Pr. AMEUR Ahmed * Urologie
Pr. AMRI Rachida Cardiologie
Pr. AOURARH Aziz* Gastro-Entérologie
Pr. BAMOU Youssef * Biochimie-Chimie
Pr. BELMEJDOUB Ghizlene* Endocrinologie et Maladies Métaboliques
Pr. BENZEKRI Laila Dermatologie
Pr. BENZZOUBEIR Nadia Gastro-Entérologie Pr. BERNOUSSI Zakiya Anatomie Pathologique Pr. BICHRA Mohamed Zakariya* Psychiatrie
Pr. CHOHO Abdelkrim * Chirurgie Générale
Pr. CHKIRATE Bouchra Pédiatrie
Pr. EL ALAMI EL Fellous Sidi Zouhair Chirurgie Pédiatrique Pr. EL HAOURI Mohamed * Dermatologie
Pr. FILALI ADIB Abdelhai Gynécologie Obstétrique
Pr. HAJJI Zakia Ophtalmologie
Pr. IKEN Ali Urologie
Pr. JAAFAR Abdeloihab* Traumatologie Orthopédie
Pr. KRIOUILE Yamina Pédiatrie
Pr. MABROUK Hfid* Traumatologie Orthopédie
Pr. MOUSSAOUI RAHALI Driss* Gynécologie Obstétrique Pr. OUJILAL Abdelilah Oto-Rhino-Laryngologie Pr. RACHID Khalid * Traumatologie Orthopédie
Pr. RAISS Mohamed Chirurgie Générale
Pr. RGUIBI IDRISSI Sidi Mustapha* Pneumo-phtisiologie
Pr. RHOU Hakima Néphrologie
Pr. SIAH Samir * Anesthésie Réanimation
Pr. THIMOU Amal Pédiatrie
JANVIER 2004
Pr. ABDELLAH El Hassan Ophtalmologie
Pr. AMRANI Mariam Anatomie Pathologique
Pr. BENBOUZID Mohammed Anas Oto-Rhino-Laryngologie Pr. BENKIRANE Ahmed* Gastro-Entérologie
Pr. BOULAADAS Malik Stomatologie et Chirurgie Maxillo-faciale
Pr. BOURAZZA Ahmed* Neurologie
Pr. CHAGAR Belkacem* Traumatologie Orthopédie
Pr. CHERRADI Nadia Anatomie Pathologique
Pr. EL FENNI Jamal* Radiologie
Pr. EL HANCHI ZAKI Gynécologie Obstétrique
Pr. EL KHORASSANI Mohamed Pédiatrie Pr. EL YOUNASSI Badreddine* Cardiologie
Pr. HACHI Hafid Chirurgie Générale
Pr. JABOUIRIK Fatima Pédiatrie
Pr. KHARMAZ Mohamed Traumatologie Orthopédie Pr. MOUGHIL Said Chirurgie Cardio-Vasculaire Pr. OUBAAZ Abdelbarre * Ophtalmologie
Pr. TARIB Abdelilah* Pharmacie Clinique
Pr. TIJAMI Fouad Chirurgie Générale
Pr. ZARZUR Jamila Cardiologie
JANVIER 2005
Pr. ABBASSI Abdellah Chirurgie Réparatrice et Plastique Pr. AL KANDRY Sif Eddine* Chirurgie Générale
Pr. ALLALI Fadoua Rhumatologie
Pr. AMAZOUZI Abdellah Ophtalmologie
Pr. AZIZ Noureddine* Radiologie
Pr. BAHIRI Rachid Rhumatologie Directeur Hôp. Al Ayachi Salé
Pr. BARKAT Amina Pédiatrie
Pr. BENYASS Aatif Cardiologie
Pr. DOUDOUH Abderrahim* Biophysique
Pr. EL HAMZAOUI Sakina * Microbiologie
Pr. HAJJI Leila Cardiologie (mise en disponibilité
Pr. HESSISSEN Leila Pédiatrie
Pr. JIDAL Mohamed* Radiologie
Pr. LAAROUSSI Mohamed Chirurgie Cardio-vasculaire
Pr. LYAGOUBI Mohammed Parasitologie
Pr. RAGALA Abdelhak Gynécologie Obstétrique
Pr. SBIHI Souad Histo-Embryologie Cytogénétique
AVRIL 2006
Pr. ACHEMLAL Lahsen* Rhumatologie
Pr. AKJOUJ Said* Radiologie
Pr. BELMEKKI Abdelkader* Hématologie
Pr. BENCHEIKH Razika O.R.L
Pr. BIYI Abdelhamid* Biophysique
Pr. BOUHAFS Mohamed El Amine Chirurgie - Pédiatrique
Pr. BOULAHYA Abdellatif* Chirurgie Cardio – Vasculaire. Pr. CHENGUETI ANSARI Anas Gynécologie Obstétrique
Pr. DOGHMI Nawal Cardiologie
Pr. FELLAT Ibtissam Cardiologie
Pr. FAROUDY Mamoun Anesthésie Réanimation
Pr. HARMOUCHE Hicham Médecine Interne
Pr. HANAFI Sidi Mohamed* Anesthésie Réanimation Pr. IDRISS LAHLOU Amine* Microbiologie
Pr. JROUNDI Laila Radiologie
Pr. KARMOUNI Tariq Urologie
Pr. KILI Amina Pédiatrie
Pr. KISRA Hassan Psychiatrie
Pr. KISRA Mounir Chirurgie – Pédiatrique
Pr. LAATIRIS Abdelkader* Pharmacie Galénique Pr. LMIMOUNI Badreddine* Parasitologie
Pr. MANSOURI Hamid* Radiothérapie
Pr. OUANASS Abderrazzak Psychiatrie
Pr. SAFI Soumaya* Endocrinologie
Pr. SEKKAT Fatima Zahra Psychiatrie
Pr. SOUALHI Mouna Pneumo – Phtisiologie
Pr. TELLAL Saida* Biochimie
Pr. ZAHRAOUI Rachida Pneumo – Phtisiologie
DECEMBRE 2006
Pr SAIR Khalid Chirurgie générale Dir. Hôp.Av.Marrakech
OCTOBRE 2007
Pr. ABIDI Khalid Réanimation médicale
Pr. ACHACHI Leila Pneumo phtisiologie
Pr. ACHOUR Abdessamad* Chirurgie générale
Pr. AIT HOUSSA Mahdi * Chirurgie cardio vasculaire Pr. AMHAJJI Larbi * Traumatologie orthopédie
Pr. AOUFI Sarra Parasitologie
Pr. BAITE Abdelouahed * Anesthésie réanimation Directeur ERSSM Pr. BALOUCH Lhousaine * Biochimie-chimie
Pr. BOUTIMZINE Nourdine Ophtalmologie Pr. CHERKAOUI Naoual * Pharmacie galénique Pr. EHIRCHIOU Abdelkader * Chirurgie générale
Pr. EL BEKKALI Youssef * Chirurgie cardio-vasculaire Pr. EL ABSI Mohamed Chirurgie générale
Pr. EL MOUSSAOUI Rachid Anesthésie réanimation
Pr. EL OMARI Fatima Psychiatrie
Pr. GHARIB Noureddine Chirurgie plastique et réparatrice
Pr. HADADI Khalid * Radiothérapie
Pr. ICHOU Mohamed * Oncologie médicale
Pr. ISMAILI Nadia Dermatologie
Pr. KEBDANI Tayeb Radiothérapie
Pr. LALAOUI SALIM Jaafar * Anesthésie réanimation
Pr. LOUZI Lhoussain * Microbiologie
Pr. MADANI Naoufel Réanimation médicale
Pr. MAHI Mohamed * Radiologie
Pr. MARC Karima Pneumo phtisiologie
Pr. MASRAR Azlarab Hématologie biologique
Pr. MRANI Saad * Virologie
Pr. OUZZIF Ez zohra * Biochimie-chimie
Pr. RABHI Monsef * Médecine interne
Pr. RADOUANE Bouchaib* Radiologie
Pr. SEFFAR Myriame Microbiologie
Pr. SEKHSOKH Yessine * Microbiologie
Pr. SIFAT Hassan * Radiothérapie
Pr. TABERKANET Mustafa * Chirurgie vasculaire périphérique
Pr. TACHFOUTI Samira Ophtalmologie
Pr. TAJDINE Mohammed Tariq* Chirurgie générale Pr. TANANE Mansour * Traumatologie-orthopédie
Pr. TLIGUI Houssain Parasitologie
Pr. TOUATI Zakia Cardiologie
DECEMBRE 2008
Pr TAHIRI My El Hassan* Chirurgie Générale
MARS 2009
Pr. ABOUZAHIR Ali * Médecine interne
Pr. AGADR Aomar * Pédiatrie
Pr. AIT ALI Abdelmounaim * Chirurgie Générale Pr. AIT BENHADDOU El Hachmia Neurologie
Pr. AKHADDAR Ali * Neuro-chirurgie
Pr. ALLALI Nazik Radiologie
Pr. ARKHA Yassir Neuro-chirurgie Directeur Hôp.des Spécialités Pr. BELYAMANI Lahcen* Anesthésie Réanimation
Pr. BJIJOU Younes Anatomie
Pr. BOUHSAIN Sanae * Biochimie-chimie
Pr. BOUI Mohammed * Dermatologie
Pr. BOUNAIM Ahmed * Chirurgie Générale
Pr. BOUSSOUGA Mostapha * Traumatologie-orthopédie
Pr. CHTATA Hassan Toufik * Chirurgie Vasculaire Périphérique Pr. DOGHMI Kamal * Hématologie clinique
Pr. EL MALKI Hadj Omar Chirurgie Générale Pr. EL OUENNASS Mostapha* Microbiologie
Pr. ENNIBI Khalid * Médecine interne
Pr. FATHI Khalid Gynécologie obstétrique
Pr. HASSIKOU Hasna * Rhumatologie
Pr. KABBAJ Nawal Gastro-entérologie
Pr. KABIRI Meryem Pédiatrie
Pr. KARBOUBI Lamya Pédiatrie
Pr. LAMSAOURI Jamal * Chimie Thérapeutique Pr. MARMADE Lahcen Chirurgie Cardio-vasculaire
Pr. MESKINI Toufik Pédiatrie
Pr. MESSAOUDI Nezha * Hématologie biologique
Pr. MSSROURI Rahal Chirurgie Générale
Pr. NASSAR Ittimade Radiologie
Pr. OUKERRAJ Latifa Cardiologie
Pr. RHORFI Ismail Abderrahmani * Pneumo-Phtisiologie
OCTOBRE 2010
Pr. ALILOU Mustapha Anesthésie réanimation
Pr. AMEZIANE Taoufiq* Médecine Interne
Pr. BELAGUID Abdelaziz Physiologie
Pr. CHADLI Mariama* Microbiologie
Pr. CHEMSI Mohamed* Médecine Aéronautique
Pr. DAMI Abdellah* Biochimie- Chimie
Pr. DARBI Abdellatif* Radiologie
Pr. DENDANE Mohammed Anouar Chirurgie Pédiatrique
Pr. EL HAFIDI Naima Pédiatrie
Pr. EL KHARRAS Abdennasser* Radiologie
Pr. EL MAZOUZ Samir Chirurgie Plastique et Réparatrice
Pr. EL SAYEGH Hachem Urologie
Pr. ERRABIH Ikram Gastro-Entérologie
Pr. LAMALMI Najat Anatomie Pathologique
Pr. MOSADIK Ahlam Anesthésie Réanimation
Pr. MOUJAHID Mountassir* Chirurgie Générale
Pr. NAZIH Mouna* Hématologie
DECEMBRE 2010
Pr.ZNATI Kaoutar Anatomie Pathologique
MAI 2012
Pr. AMRANI Abdelouahed Chirurgie pédiatrique Pr. ABOUELALAA Khalil * Anesthésie Réanimation Pr. BENCHEBBA Driss * Traumatologie-orthopédie Pr. DRISSI Mohamed * Anesthésie Réanimation Pr. EL ALAOUI MHAMDI Mouna Chirurgie Générale Pr. EL KHATTABI Abdessadek * Médecine Interne Pr. EL OUAZZANI Hanane * Pneumophtisiologie
Pr. ER-RAJI Mounir Chirurgie Pédiatrique
Pr. JAHID Ahmed Anatomie Pathologique
Pr. MEHSSANI Jamal * Psychiatrie
Pr. RAISSOUNI Maha * Cardiologie
* Enseignants Militaires FEVRIER 2013
Pr.AHID Samir Pharmacologie
Pr.AIT EL CADI Mina Toxicologie
Pr.AMRANI HANCHI Laila Gastro-Entérologie
Pr.AMOR Mourad Anesthésie Réanimation
Pr.AWAB Almahdi Anesthésie Réanimation
Pr.BELAYACHI Jihane Réanimation Médicale
Pr.BELKHADIR Zakaria Houssain Anesthésie Réanimation
Pr.BENCHEKROUN Laila Biochimie-Chimie
Pr.BENKIRANE Souad Hématologie
Pr.BENNANA Ahmed* Informatique Pharmaceutique Pr.BENSGHIR Mustapha * Anesthésie Réanimation
Pr.BENYAHIA Mohammed * Néphrologie
Pr.BOUATIA Mustapha Chimie Analytique et Bromatologie Pr.BOUABID Ahmed Salim* Traumatologie orthopédie
Pr BOUTARBOUCH Mahjouba Anatomie
Pr.CHAIB Ali * Cardiologie
Pr.DENDANE Tarek Réanimation Médicale
Pr.DINI Nouzha * Pédiatrie
Pr.ECH-CHERIF EL KETTANI Mohamed Ali Anesthésie Réanimation Pr.ECH-CHERIF EL KETTANI Najwa Radiologie
Pr.EL FATEMI NIZARE Neuro-chirurgie
Pr.EL GUERROUJ Hasnae Médecine Nucléaire
Pr.EL JAOUDI Rachid * Toxicologie
Pr.EL KABABRI Maria Pédiatrie
Pr.EL KHANNOUSSI Basma Anatomie Pathologique
Pr.EL KHLOUFI Samir Anatomie
Pr.EL KORAICHI Alae Anesthésie Réanimation
Pr.EN-NOUALI Hassane * Radiologie
Pr.ERRGUIG Laila Physiologie
Pr.FIKRI Meryem Radiologie
Pr.GHFIR Imade Médecine Nucléaire
Pr.IMANE Zineb Pédiatrie
Pr.IRAQI Hind Endocrinologie et maladies métaboliques
Pr.KABBAJ Hakima Microbiologie
Pr.KADIRI Mohamed * Psychiatrie
Pr.MAAMAR Mouna Fatima Zahra Médecine Interne
Pr.MEDDAH Bouchra Pharmacologie
Pr.MELHAOUI Adyl Neuro-chirurgie
Pr.MRABTI Hind Oncologie Médicale
Pr.NEJJARI Rachid Pharmacognosie
Pr.OUBEJJA Houda Chirugie Pédiatrique
Pr.OUKABLI Mohamed * Anatomie Pathologique
Pr.RAHALI Younes Pharmacie Galénique
Pr.RATBI Ilham Génétique
Pr.RAHMANI Mounia Neurologie
Pr.REDA Karim * Ophtalmologie
Pr.REGRAGUI Wafa Neurologie
Pr.RKAIN Hanan Physiologie
Pr.ROSTOM Samira Rhumatologie
Pr.ROUAS Lamiaa Anatomie Pathologique
Pr.ROUIBAA Fedoua * Gastro-Entérologie
Pr SALIHOUN Mouna Gastro-Entérologie
Pr.SAYAH Rochde Chirurgie Cardio-Vasculaire
Pr.SEDDIK Hassan * Gastro-Entérologie
Pr.ZERHOUNI Hicham Chirurgie Pédiatrique
AVRIL 2013
Pr.EL KHATIB MOHAMED KARIM * Stomatologie et Chirurgie Maxillo-faciale
MAI 2013
Pr.BOUSLIMAN Yassir Toxicologie
MARS 2014
Pr. ACHIR Abdellah Chirurgie Thoracique
Pr.BENCHAKROUN Mohammed * Traumatologie- Orthopédie
Pr.BOUCHIKH Mohammed Chirurgie Thoracique
Pr. EL KABBAJ Driss * Néphrologie
Pr. EL MACHTANI IDRISSI Samira * Biochimie-Chimie
Pr. HARDIZI Houyam Histologie- Embryologie-Cytogénétique
Pr. HASSANI Amale * Pédiatrie
Pr. HERRAK Laila Pneumologie
Pr. JANANE Abdellah * Urologie
Pr. JEAIDI Anass * Hématologie Biologique
Pr. KOUACH Jaouad* Gynécologie-Obstétrique
Pr. LEMNOUER Abdelhay* Microbiologie
Pr. MAKRAM Sanaa * Pharmacologie
Pr. OULAHYANE Rachid* Chirurgie Pédiatrique
Pr. RHISSASSI Mohamed Jaafar CCV
Pr. SABRY Mohamed* Cardiologie
Pr. SEKKACH Youssef* Médecine Interne
Pr. TAZI MOUKHA Zakia Gynécologie-Obstétrique
AVRIL 2014
PROFESSEURS AGREGES : DECEMBRE 2014
Pr. ABILKASSEM Rachid* Pédiatrie
Pr. AIT BOUGHIMA Fadila Médecine Légale
Pr. BEKKALI Hicham * Anesthésie-Réanimation
Pr. BENAZZOU Salma Chirurgie Maxillo-Faciale
Pr. BOUABDELLAH Mounya Biochimie-Chimie
Pr. BOUCHRIK Mourad* Parasitologie
Pr. DERRAJI Soufiane* Pharmacie Clinique
Pr. DOBLALI Taoufik* Microbiologie
Pr. EL AYOUBI EL IDRISSI Ali Anatomie
Pr. EL GHADBANE Abdedaim Hatim* Anesthésie-Réanimation
Pr. EL MARJANY Mohammed* Radiothérapie
Pr. FEJJAL Nawfal Chirurgie Réparatrice et Plastique
Pr. JAHIDI Mohamed* O.R.L
Pr. LAKHAL Zouhair* Cardiologie
Pr. OUDGHIRI NEZHA Anesthésie-Réanimation
Pr. RAMI Mohamed Chirurgie Pédiatrique
Pr. SABIR Maria Psychiatrie
Pr. SBAI IDRISSI Karim* Médecine préventive, santé publique et Hyg.
AOUT 2015
Pr. MEZIANE Meryem Dermatologie
Pr. TAHRI Latifa Rhumatologie
JANVIER 2016
Pr. BENKABBOU Amine Chirurgie Générale
Pr. EL ASRI Fouad* Ophtalmologie
Pr. ERRAMI Noureddine* O.R.L
Pr. NITASSI Sophia O.R.L
JUIN 2017
Pr. ABI Rachid* Microbiologie
Pr. ASFALOU Ilyasse* Cardiologie
Pr. BOUAYTI El Arbi* Médecine préventive, santé publique et Hyg.
Pr. BOUTAYEB Saber Oncologie Médicale
Pr. EL GHISSASSI Ibrahim Oncologie Médicale
Pr. OURAINI Saloua* O.R.L
Pr. RAZINE Rachid Médecine préventive, santé publique et Hyg.
Pr. ZRARA Abdelhamid* Immunologie
2 - ENSEIGNANTS-CHERCHEURS SCIENTIFIQUES
PROFESSEURS/Prs. HABILITES
Pr. ABOUDRAR Saadia Physiologie
Pr. ALAMI OUHABI Naima Biochimie-chimie
Pr. ALAOUI KATIM Pharmacologie
Pr. ALAOUI SLIMANI Lalla Naïma Histologie-Embryologie
Pr. ANSAR M’hammed Chimie Organique et Pharmacie Chimique
Pr .BARKIYOU Malika Histologie-Embryologie
Pr. BOUHOUCHE Ahmed Génétique Humaine
Pr. BOUKLOUZE Abdelaziz Applications Pharmaceutiques Pr. CHAHED OUAZZANI Lalla Chadia Biochimie-chimie
Pr. DAKKA Taoufiq Physiologie
Pr. FAOUZI Moulay El Abbes Pharmacologie
Pr. IBRAHIMI Azeddine Biologie moléculaire/Biotechnologie
Pr. KHANFRI Jamal Eddine Biologie
Pr. OULAD BOUYAHYA IDRISSI Med Chimie Organique
Pr. REDHA Ahlam Chimie
Pr. TOUATI Driss Pharmacognosie
Pr. ZAHIDI Ahmed Pharmacologie
Mise à jour le 10/10/2018 Khaled Abdellah
A ceux qui se sont investis corps et âme pour m’aider et m’encourager à aller
de l’avant
A ceux qui m'ont encouragé et soutenu dans les moments les plus difficiles
A ceux à qui je dois tant.
Mes Parents
Je n’oublierai jamais les sacrifices que vous avez fais pour moi ainsi que
tous les efforts que vous avez consentis pour mon éducation et ma
formation.
A ma famille
Un grand merci à mon frère, mes oncles, mes tantes et surtout mes deux
grands-mères, pour vos prières et l’amour exceptionnel que vous portez pour
moi depuis mon enfance. J'espère que votre bénédiction m'accompagnera
pour toujours.
A mes amis
Je dédie ce travail à toute la 29éme promotion de pharmacie. Merci pour
tous les bons moments passés ensemble, je les espère encore nombreux.
Merci de rendre ce travail une source d’épanouissement.
A mon maître et Président de thèse
Monsieur Rachid EL JAOUDI
Professeur de Toxicologie
En présidant ce jury, vous nous faites un grand honneur. Votre compétence,
votre rigueur et vos qualités humaines exemplaires, ont toujours suscité
notre admiration. Veuillez trouver, cher maître, dans ce modeste travail,
A mon maître et Rapporteur de thèse
Monsieur Yassir BOUSLIMAN
Professeur de Toxicologie
Monsieur BOUSLIMAN
, je ne vous remercierai jamais assez de
m’avoir confié ce travail tant intéressant, de m’avoir guidé à chaque étape
de sa réalisation et ce, malgré vos nombreuses obligations professionnelles.
Merci pour la qualité de votre encadrement, pour votre exigence afin que ce
travail soit de la meilleure qualité possible et pour vos encouragements qui
me poussaient à donner le meilleure de moi-même. Veuillez agréer,
A mon maître et juge de thèse
Monsieur Jaouad ELHARTI
Professeur de Chimie Thérapeutique
Je voudrai vous remercier monsieur pour l’honneur que vous nous faites en
acceptant de faire partie de notre jury et nous consacrer avec beaucoup
d’amabilité́ une partie de votre temps précieux.
Je tiens à vous remercier également d’avoir si gentillement accépter de faire
partie du jury de ma thèse. Veuillez agréer, monsieur, l’expression de ma
A mon maître et juge de thèse
Monsieur Mustapha BOUATIA
Professeur de Chimie Analytique et Bromatologie
Je voudrai vous remercier monsieur pour l’honneur que vous nous faites en
acceptant de faire partie de notre jury et nous consacrer avec beaucoup
d’amabilité́ une partie de votre temps précieux. Je vous remercie également
pour votre relecture minutieuse et pour l’intérêt que vous avez accordé à
mon sujet. Veillez trouver ici, Monsieur, l’expression de ma haute
Liste
ADN : Acide désoxyribonucléique
AMM : Autorisation de mise sur le marché
ICH : International conference of harmonisation
IgE : Immunoglobulibe type E
HPLC : High performance liquid chromatography
IGF : Insulin-like growth factor
MCB : Master cell bank
PCR : Polymerase chain reaction
WCB : Work cell bank
GM-CSF : Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor
UI : Unité internationale
OMS : Organisation mondiale de santé
CTD : Common Technical Document
hGH : Human growth factor
GH-RH : Growth hormone-releasing hormone
IGF : Insulin-like growth factor
MCJ : Maladie de Creutzfeld-Jakob
rhGH : Recomabinat human growth factor
IL-1 : Interleukine-1
TNF : Tumor necrosis factor
IFN : Interferon
CD : Clusters of differentiation
FDA : Food and drug administration PEG : Nolyéthylène glycol
BHE : Barrière hémato-encéphalique
EPO : Erythropoïétine
HIF : Hypoxia Inductible Factor
ASE : Agents stimulant l’érythropoïèse
CHO : Chinese Hamster Ovary
G-CSF : Granulocyte colony-stimulating factor
CSP : Cellules souches progénitrices
ACM : Anticorps monoclonal
CDR : Complementarity determining region
EMA : European Medicines Agency
PD : Pharmacodynamique
PK : Pharmacocinétique
AUC : Aire sous la courbe
Vd : Volume de distribution
HS : Hypersensibilité
PGR : Plan de gestion de risque
Liste
Liste des figures
Figure 1: Les dates clés des biotechnologies médicales. ... 10 Figure 2: la composante génétique de certaines maladies ... 11 Figure 3: Choix du système hôte pour la production d'une protéine recombinante ... 14 Figure 4: système de banques cellulaires ... 15 Figure 5: Tube de la banque cellulaire de travail congelé ... 16 Figure 6: Etapes de purification de produits recombinants ... 19 Figure 7: Facteurs d'influence de la stabilité de la protéine ... 21 Figure 8: Hétérogénéité du mélange produit ... 24 Figure 9: Principaux paramètres à évaluer et exemples de méthodes utilisées pour la caractérisation des produits biologiques ... 31 Figure 10: Place des guidelines ICH dans le procédé de fabrication ... 37 Figure 11: Production d’insuline par technique d’ADN recombinant ... 41 Figure 12: Structure primaire et formules des principaux analogues de l’insuline humaine ... 44 Figure 13: mécanisme d’action de GH ... 45 Figure 14: Anomalies provoquées par différents taux d’hormones de croissance... 47 Figure 15: Effet redondance et effet pléiotropie ... 48 Figure 16: Cibles des biothérapies anti-inflammatoires ... 51 Figure 17: structure primaire de l’EPO humaine ... 55 Figure 18: action de l’EPO ... 56 Figure 19: fabrication de l’EPO ... 57 Figure 20: Principaux effets indésirables ... 58 Figure 21: Représentation schématique d’une molécule d’anticorps (Type IgG) ... 62 Figure 22: Procédé de production d’Ac monoclonaux spécifiques d’un antigène donné, selon G. Köhler et C. Milstein. ... 64 Figure 23: Les syllabes renseignant sur l’origine des anticorps monoclonaux. ... 65 Figure 24: Les syllabes renseignant sur la cible thérapeutique ... 66 Figure 25: ACM murins... 68 Figure 26: ACM chimériques ... 68
Figure 27: ACM humanisés ... 69 Figure 28: ACM humains ... 70 Figure 29: Types des ACM ... 70 Figure 30: Mécanisme d’action d’un anticorps monoclonal... 72 Figure 31: Date d'expiration des brevets de certains biomédicaments ... 79 Figure 32: Illustration du nombre de cas de PRCA de 1989 à 2007 ... 81 Figure 33: Exemple de variabilité entre un médicament biosimilaire et le médicament de référence ... 82 Figure 34: Comparaison des données requises pour l’approbation d’un médicament biosimilaire... 83 Figure 35: Étude de liaison au récepteur ... 85 Figure 36: chromatogramme à échange d’ion pour NIVESTIM® (A) NEUPOGEN®(B), le produit de référence. ... 86 Figure 37: parametres PK et PD d’un biosimilaire en developpement et son réferent ... 89 Figure 38: Pharmacocinétique et pharmacodynamique pour Zarzio® et Neupogen® ... 90 Figure 39: caractéristiques d'un essai d'équivalence ... 91 Figure 40: caractéristiques d'un essai de non-inferiorité ... 92 Figure 41: Facteurs influencant l’immunognicité des proteines therapeutiques ... 94 Figure 42: Plan de gestion des risques : nouvelle conception de l’évaluation des bénéfices et des risques acceptables ... 96 Figure 43: biomédicaments commercialisé par aire therapeutique ... 102 Figure 44: biosimilaire commercialisé au Maroc ... 105 Figure 45: Top 10 des médicaments biologiques aux états unis ... 106 Figure 46: Les dix premières thérapies vendues dans le monde (en milliard USD) ... 107
Liste des tableaux
Tableau 1: Différences entre le biosimilaire et le générique ... 80 Tableau 2: Critères de comparabilité physico-chimiques entre Binocrit® et son comparateu . 85 Tableau 3: Etudes nécessaires pour la comparabilité pré clinique ... 87
Introduction ...4 Définitions ...6
1. Médicament biologique ...7 2. Médicament biologique de référence ...7
Histoire des médicaments biologiques ...8
1. Le contexte d'apparition des médicaments biologiques : ... 10 2. La nouvelle médecine : ... 11
Développement et production des médicaments biologiques ... 12
A. Développement d’une lignée cellulaire :... 13 B. Culture cellulaire ou upstream process : ... 16 C. Purification ou downstream process : ... 17 1. Récolte : ... 17 2. Purification ... 18 3. Analyse de la protéine recombinante : ... 19 D. Formulation : ... 20 1. Défis de formulation à haute concentration : ... 20 2. Choix d'une formulation liquide ou lyophilisée : ... 20 3. Conditionnement pharmaceutique :... 21
Contrôle des médicaments biologiques ... 23
A. Contrôle des matières premières :... 25 B. Cellule hôte et vecteur d’expression : ... 26 C. Contrôle des milieux de culture et autres matières premières ... 27 D. Contrôle du procédé de fabrication : ... 27 1. Contrôle en ligne ou in situ/in-line monitoring : ... 27 2. Contrôle hors-ligne ou off-line monitoring : ... 28 E. Contrôle de la substance active biologique et du produit fini : ... 29 1. Caractérisation : ... 29
Réglementation des médicaments biologiques ... 32
A. Lignes directrices internationales ICH : ... 33
Principales classes des biomédicaments ... 40
2
1. L’insuline : ... 41 2. L’hormone de croissance humaine : somatotropine ... 45 B. Les cytokines : ... 47 1. Interleukines : ... 48 2. Interférons : ... 52 C. Les facteurs de croissance : ... 54 1. Erythropoïétine : ... 54 2. Le granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF): ... 59 D. Les anticorps monoclonaux : ... 61 1. Structure des ACM ... 61 2. Obtention des anticorps monoclonaux : ... 62 2.1. Obtention et sélection des hybridomes : ... 62 3. Production des anticorps monoclonaux : ... 63 4. Nomenclature des ACM : ... 65 4.1. La cible : ... 66 4.2. La nomenclature finale : ... 66 5. Classification des ACM : ... 67 5.1. Les anticorps monoclonaux murins :... 67 5.2. Les anticorps monoclonaux chimériques : ... 68 5.3. Anticorps monoclonaux humanisés : ... 69 5.4. Les anticorps monoclonaux humains : ... 69 6. Mécanisme d’action : ... 71 7. Les nouveaux formats d’ACM : ... 73
Biosimilaires ... 77
A. Définition internationale : ... 78 1. Pour l’organisation mondiale de la santé (OMS): ... 78 2. Pour l’agence européenne du médicament (EMA) : ... 78 3. Pour la Food and Drug Administration (FDA) : ... 78 4. Pour le Maroc : ... 78 B. Naissance du concept de biosimilaires : ... 81 C. Principes généraux de la législation du médicament biosimilaire : ... 82
1. Comparabilité au niveau de la qualité : ... 84 1.1. Choix du produit de référence :... 84 1.2. Caractérisation du produit de référence : ... 84 1.3. Comparabilité physico-chimique : ... 84 1.4. Comparabilité biologique : ... 85 1.5. Impuretés: ... 86 2. Comparabilité Pré Clinique : ... 87 3. Comparabilité Clinique :... 88 3.1. Etude clinique de pharmacocinétique et de pharmacodynamique : ... 88 3.2. Etude clinique d’efficacité: ... 90 3.3. Sécurité d’emploi: ... 93 3.4. Immunogénicité : ... 93 4. Plan de gestion des risques et pharmacovigilance : ... 94 D. Interchangeabilité, permutation et substitution : ... 96 E. Extrapolation des études d’efficacité et de sécurité d’une indication thérapeutique à une autre : ... 97 1. Critères d’extrapolation : ... 98 1.1. Mécanisme d’action : ... 98 1.2. Population de l’étude visée : ... 98 1.3. Extrapolation des données de sécurité :... 98 1.4. Extrapolation des données d’immunogénicité : ... 99
Marche des biomedicaments et biosemilaires : ... 100 Rôle du pharmacien d’officine ... 108
1. Prévention des effets indésirables exemple : le syndrome mains-pieds ... 109 2. Conseils associés au moment de la délivrance d’EPO : ... 110
Conclusion ... 112 Résumés
4
La biotechnologie moderne a permis de développer de nombreuses thérapies innovantes utilisées dans le traitement de pathologies lourdes et chroniques comme le cancer, la sclérose en plaques ou la polyarthrite rhumatoïde. Aujourd'hui, les médicaments biologiques occupent une part importante du marché global des médicaments. Les chutes de nombreux brevets de biomédicaments innovants dans le domaine public, à l'origine d'un chiffre d'affaires conséquent et attractif, ont entraîné le développement de versions non innovantes appelées biosimilaires. De plus, cette croissance des biosimilaires est motivée d'une part par les pressions des pays développés pour réduire les dépenses de santé et d'autre part par les pays émergents, comme l'Inde, pour faciliter l'accès aux soins à leur population souvent pauvre et non couverte par un régime de sécurité sociale. Les biosimilaires sont définis comme des produits similaires, mais pas identiques, à un médicament biologique de référence déjà approuvé par les autorités, dont le brevet de protection a expiré. Les biosimilaires, de par leur nature intrinsèque, la complexité de leur production, de leurs contrôles de qualité et de leur évaluation réglementaire, ne peuvent pas être considérés comme des génériques de médicaments biologiques.
Dans ce travail nous souhaitons définir le médicament biologique, en le comparant au médicament issu de la chimie de synthèse, et en soulignant leurs différences. Nous mettrons également en avant leurs intérêts thérapeutiques.
Dans un premier temps nous allons caractériser le biomédicament par rapport au médicamentchimique classique, ensuite nous présenterons rapidement les grandes familles de cette classe et nous insisterons sur l’une des majeurs particularités de cette classe qui est la production par biotechnologie. On s’intéressera finalement à la démarche générique appliquée aux médicaments biologiques lorsque les brevets tombent dans le domaine public appelé biosimilarité . Puis et dans une deuxième partie cette thèse decrira le concept de biosimilarité ainsi que la place des biomédicaments et des biosimilaires dans le marché international.
6
1. Médicament biologique
Un médicament biologique est définit comme un produit dont la substance active est produite à partir d'une source biologique, ou en est extraite, et dont la caractérisation et la détermination de la qualité nécessitent une combinaison d'essais physico-chimiques et biologiques, ainsi que la connaissance de son procédé de fabrication et de son contrôle.[1]
2. Médicament biologique de référence
Un médicament biologique de référence est un médicament biologique pour lequel une autorisation de mise sur le marché a été délivrée au vu d’un dossier d’enregistrement totalement original et complet de demande comportant, dans des conditions fixées par voie réglementaire, l’ensemble des données nécessaires et suffisantes à elles seules pour l’évaluation des données de qualité, d’efficacité et de sécurité.[2]
8
Histoire des médicaments
biologiques
L’utilisation des biotechnologies par l’homme remonte à l’antiquité (Brassage de la bière, Tannage). Cependant, le terme « biotechnologie » n’est apparu qu’en 1919 en Europe [3]pour décrire l’utilisation de nouvelles techniques appliquées à la biologie pour la fabrication industrielle de composés biologiques ou chimiques.
Le début de l’utilisation médicinale des procédés de biotechnologie a été marqué par la découverte fortuite de la pénicilline par Alexandre Flemming en 1928. Cet antibiotique est un champignon naturellement synthétisé par la moisissure Penicillium Notanum. Cependant, la quantité synthétisée directement par cette moisissure dans des conditions normales était largement insuffisante pour permettre de traiter des infections.
De nombreuses recherches débutèrent afin de mettre au point des techniques plus performantes pour accroitre la production de pénicilline : criblage, sélection de nouvelles souches, changement des milieux de culture et construction d'un nouveau type de fermentateur… Ces recherches sont aujourd’hui considérées comme le point de départ des biotechnologies à visée médicinale. [4]
En parallèle, de nombreux travaux de la fin du 19éme siècle (notamment ceux de Louis Pasteur, Robert Koch et Gregor Mendel) ont permis d’aboutir à des progrès spectaculaires dans la connaissance de la génétique et de la microbiologie.
Ces progrès ont été accompagnés de la découverte de la structure de l’ADN (par Boyer en 1974) ; ils ont donné naissance à la biotechnologie moderne telle que définie aujourd’hui.[5]
L’Allemand Georges Köhler et l’Anglais César Milstein ont publié une technique de production d’anticorps monoclonaux en 1975 et en 1977 l’Américain biochimiste et physicien Walter Gilbert et le biochimiste Anglais Frederick Sanger développent parallèlement deux méthodes pour permettre le décodage du code génétique.[6]
La première substance à avoir été entièrement synthétisée par les techniques de biotechnologie est l’insuline. Initialement, cette hormone était produite par extraction à partir du pancréas de porc ou de bœuf puis purifiée avant d’être administrée aux patients diabétiques. Rapidement, deux questions se sont posées : Comment accroître la production
10
pour faire face à des besoins mondiaux en pleine expansion ? Quel sera l’effet d’un traitement à long terme par une hormone animale ? La recherche d’un procédé plus rentable et permettant de produire des protéines moins allergisantes a ainsi débuté. En 1978, H. Boyer réussit à appliquer les techniques de biotechnologies modernes en transformant l’insuline porcine en insuline humaine et en la faisant produire par une bactérie E.coli. Ces deux insulines différant par un seul acide aminé, il a remplacé l’acide aminé en question en utilisant un processus de catalyse enzymatique. Puis, par réintroduction de cette séquence d’ADN dans le génome de la bactérie, celle-ci a commencé à produire de l’insuline humaine.[7]
Figure 1: Les dates clés des biotechnologies médicales.[8]
1. Le contexte d'apparition des médicaments biologiques :
Les pathologies humaines : deux catégories Les maladies génétiques héréditaires : 6 000. 50 d’entre elles représentent 80% des malades.
Ex. : myopathie, …
Les maladies non héréditaires (acquises), dues à l’environnement (beaucoup plus fréquentes).
Ex. : maladies cardiovasculaires, infectieuses, cancer … Génétique et maladie:
La plupart des maladies sont favorisées (prévenues) par des variations dans la séquence d’ADN de gènes déterminés.
Figure 2: la composante génétique de certaines maladies[9]
L’importance de la génétique dans la médecine du futur, un exemple : les approches nouvelles du cancer :
Prévention :
- Identification des gènes de prédisposition au cancer. Traitement :
- cartes génétiques de la tumeur et de ses métastases. - cartes génétiques du patient.
- approche personnalisée de la maladie.
2. La nouvelle médecine :
L’ingénierie moléculaire : protéines recombinantes, hormones, etc La cellule (bactéries, virus, levures, etc) devient une usine de production de molécules complexes. Largement utilisée actuellement et dans certains cas depuis longtemps (ex : insuline, hormone de croissance).
Pathologies éligibles : diabète (insuline), nanisme (hormone de croissance), cancers (anticorps monoclonaux), sclérose en plaques (interféron).[9]
12
Développement et production
des médicaments biologiques
Le procédé de fabrication représente une étape critique dans le développement d’un médicament biologique puisqu’il impacte le profil de pureté du produit fini. Le développement du médicament doit être conforme au guide des « Bonnes Pratiques de Fabrication » des produits pharmaceutiques, qui nous donne la définition d’une étape critique: « phase pouvant entrainer des variations dans la qualité du produit fini » [10]
A. Développement d’une lignée cellulaire :
La production d’une protéine recombinante fait appel à la technique de l’ADN recombinant. Cette étape consiste à isoler et transférer le gène d’intérêt doté d’un potentiel thérapeutique dans un organisme hôte, le plus souvent une bactérie, une levure ou une cellule d’origine animale, qui assurera la synthèse de la protéine par transcription et traduction de l’ADN. Le gène d’intérêt issu de l’ADN humain est isolé et inséré dans un vecteur d’expression. Le vecteur d’expression est un système qui sert de "véhicule" pour le clonage génétique, il a la capacité de transférer un gène et de le faire exprimer dans une cellule hôte.
Le transfert dans une bactérie s’appelle transformation tandis que celui dans une cellule de mammifère est appelé transfection.[11]
14
Figure 3: Choix du système hôte pour la production d'une protéine recombinante[12]
La banque cellulaire maîtresse est créée à partir de la mise en culture du clone recombinant sélectionné. La population ainsi obtenue est répartie en une centaine de fractions aliquotes (environ 106 cellules par tube) et cryo-conservée dans de l’azote liquide généralement. La banque cellulaire de travail est ensuite préparée à partir de cette MCB. Un
ou plusieurs tubes de la MCB sont amplifiés par sous culture en série puis cryo-conservés. Chaque lot de production sera initié à partir d’un tube de cette banque cellulaire de travail. Puis quand la WCB commence à être épuisée, il suffit de recommencer ces étapes à partir de la banque cellulaire maîtresse pour créer une nouvelle WCB et initier la production à partir de la même cellule génétiquement modifiée. Grâce à ce système de banques cellulaires, la production des différents lots de protéines recombinantes sera toujours initiée à partir du même clone recombinant sélectionné, ce qui contribue grandement à la reproductibilité du procédé.[13]
16
B. Culture cellulaire ou upstream process :
La bioproduction sur cellules animales suit toujours le même protocole. Elle démarre par une phase d'upstream où la molécule d'intérêt est produite dans un bioréacteur, puis d'une phase de downstream consistant à isoler et purifier la biomolécule. La bioproduction s'achève par une mise en forme pharmaceutique. Ces trois étapes clés doivent s'enchaîner dans des temps relativement courts, de l'ordre de trois semaines. En effet, les protéines thérapeutiques et les anticorps monoclonaux ont des durées de vie limitées qui imposent d'aller rapidement jusqu'à la formulation pour les stabiliser.
L'étape upstream démarre par une préparation du milieu de culture avec une phase de montée en échelle pour atteindre une concentration cellulaire optimale à innoculer dans le bioréacteur final. Pour cela, l'industriel puise un échantillon cellulaire dans sa « working cell bank » (WCB), constituée à partir d'une « master cell bank » (MCB). Ces réserves cellulaires, conçues pour couvrir plusieurs dizaines d'années de production, sont conservées dans plusieurs endroits distincts, ultra sécurisés. La perte de la « master cell bank » conduirait à un arrêt définitif de la production et de la commercialisation de la biomolécule.
La production d’un lot à l’échelle industrielle commence à cette étape. Un tube de la banque cellulaire de travail est décongelé et mis en culture dans un milieu de culture approprié contenant des nutriments essentiels.[15]
La première étape de la culture cellulaire correspond à une étape appelée expansion cellulaire ou scale up. Il s’agit d’amplifier la culture cellulaire par des passages successifs dans des contenants ou des bioréacteurs de taille croissante. Une fois la concentration cellulaire optimale obtenue, la culture est inoculée dans un bioréacteur dit industriel généralement en inox pour assurer la production à l’échelle industrielle.
Il existe trois modes de culture dans les bioréacteurs, le batch (ou culture discontinue), le fed-batch (ou culture semi-continue alimentée) et la perfusion (ou culture continue). Les deux modes les plus couramment utilisés dans l’industrie pharmaceutique pour la production des protéines recombinantes sont les modes fed-batch et perfusion.
Dans l’industrie pharmaceutique, le mode fed-batch est préféré au mode continu en raison de ses nombreux avantages comme sa simplicité d’utilisation et son rendement élevé. Un des seuls inconvénients relevés par rapport à la perfusion est la taille très importante du bioréacteur industriel. Bien que la perfusion offre d’autres avantages intéressants, elle présente un risque d’engendrer des modifications post-traductionnelles et glycosylations variables du fait du changement continu du milieu et de la durée importante de la culture.[16]
C. Purification ou downstream process :
La partie dowstream a pour objectif de réaliser une purification complète de la biomolécule.
Le downstream process consiste à récolter la protéine d’intérêt puis à la purifier grâce à diverses étapes de chromatographies afin d’éliminer les impuretés potentiellement dangereuses qu’elle contient et de proposer un produit pur et sûr pour le patient.[17]
1. Récolte :
Les techniques de récolte dépendent du type de système d’expression de la protéine. Dans le cas d’un système d’expression intracellulaire, la protéine se trouve à l’intérieur de la cellule. Il faut alors séparer les cellules du milieu de culture afin de les récupérer, puis les lyser par choc osmotique par exemple, pour libérer la protéine. Dans le cas d’un système d’expression extracellulaire, la protéine est sécrétée à l’extérieur de la cellule dans le milieu de culture. Les cellules sont donc éliminées et le milieu de culture qui contient la protéine est
18
recueilli. La récolte s’effectue généralement par filtration et/ou centrifugation pour séparer la protéine d’intérêt des différents constituants indésirables tels que le milieu et les débris cellulaires. De plus, les fabricants cherchent fréquemment à concentrer le mélange contenant la protéine afin de réduire le volume à purifier.
2. Purification
Après l'expression réussie de protéines recombinantes, la protéine se retrouve mélangée à de nombreuses impuretés, il est donc nécessaire d’avoir recours à différentes étapes de purification pour éliminer ces impuretés et obtenir une protéine d’une pureté optimale pour la commercialisation.
Figure 6: Etapes de purification de produits recombinants
3. Analyse de la protéine recombinante :
Une protéine thérapeutique doit être fonctionnelle pour avoir l’effet escompté chez le malade, si une ou plusieurs zones diffèrent de la protéine de référence, l’organisme pourra se défendre et diriger des anticorps contre cette protéine pour cela les industriels peuvent avoir recours à des modifications post-traductionnelles (la glycosylation ou la phosphorylation) qui assurent la stabilité du repliement des structures, l’ancrage dans les membranes, la solubilité…
20
D. Formulation :
La formulation d’un médicament consiste en l’association de la substance active à des excipients dans une forme galénique appropriée. Dans le cas des protéines, il est en général impossible de les administrer par voie orale, la forme galénique utilisée est alors une préparation liquide ou une préparation cryo-desséchée.
Cette étape est très importante car elle concerne directement la stabilité de la protéine au niveau de la structure et de l’activité biologique. Cela va permettre au produit de lui conférer sa forme galénique optimale. A l’issue de cette étape, le produit, doté de sa composition et de sa concentration finale est prêt à être conditionné.
La diversité structurelle des protéines appelle le développement d’une formulation unique et spécifique pour chaque produit.[18]
1. Défis de formulation à haute concentration :
L’administration sous-cutanée simple et facile d'un médicament protéique nécessite le développement d'une formulation à concentration élevée en raison d'une grande quantité de médicament nécessaire à l'efficacité et de la tolérabilité limitée d'un volume d'injection important. Deux problèmes majeurs sont potentiellement associés aux formulations de protéines à haute concentration:
Une viscosité en solution élevée.
Une agrégation de protéines améliorée.
2. Choix d'une formulation liquide ou lyophilisée :
Les produits pharmaceutiques protéinés sont généralement commercialisés sous forme liquide ou lyophilisée, bien que d'autres formes avancées puissent être développées. La proportion relative de produits protéiques liquides par rapport aux produits lyophilisés est d’environ 2 :1.
Une forme posologique liquide est relativement facile à fabriquer et convient à l’administration du médicament, tandis que les produits lyophilisés sont mieux adaptés au transport et au stockage difficile plus longtemps. En général, un produit liquide est préféré si la stabilité de la protéine n’est pas un problème pendant le développement.
Le développement d'une formulation consiste à évaluer les principaux facteurs d'influence de la stabilité et à trouver une composition de formulation appropriée pour une stabilité maximale.
Les facteurs clés suivants peuvent être évalués de manière séquentielle: PH --- tampons --- forces ioniques --- excipients.[18]
Figure 7: Facteurs d'influence de la stabilité de la protéine
3. Conditionnement pharmaceutique :
L’étape de conditionnement du médicament est l’étape ultime dans la production d’un médicament avant sa mise sur le marché. Cette étape suit l’étape de fabrication et a comme rôles principaux l’identification et la protection du médicament.
Les protéines recombinantes sont sensibles à leur environnement. Leur conditionnement doit garantir la stabilité et l’intégrité du médicament.[19]
22
Contrôle des médicaments
biologiques
24
Afin de minimiser les risques liés à sa consommation et de protéger au maximum les patients des effets indésirables, le médicament biologique est soumis à des mesures de surveillance particulièrement importantes de la part des autorités sanitaires. Ceci concerne également, plus généralement, l’industrie du médicament. Ce processus de contrôle de la qualité et de la sécurité du produit a lieu à toutes les phases de la vie du médicament.[20]
Le contrôle de la qualité des produits biologiques est un exercice difficile. En effet, la substance active biologique n’est pas une simple entité chimique bien définie mais plutôt un ensemble hétérogène de molécules complexes. Cette complexité moléculaire est appelée micro-hétérogénéité intrinsèque. La substance active biologique contient la substance désirée mais aussi des isoformes et des variants ou produits de structure proche non éliminés lors de la purification, pouvant être dotés également d’une activité biologique équivalente ou proche du produit désiré. Elle contient également des impuretés de dégradation qui sont liées au produit et des impuretés liées au procédé de fabrication.[14]
La substance active biologique est soumise à des variabilités suivant le mode de production utilisé qui apporte des différences en termes de profil de pureté et d’impuretés d’un médicament biologique ou biosimilaire. Du fait de la production dans des systèmes vivants et selon la nature de la cellule hôte utilisée, la substance active subit des réactions biochimiques différentes. Ainsi, la séquence peptidique peut être soumise à des variations suite à diverses réactions.
La structure spatiale peut également faire l’objet de modifications de conformation ou bien les molécules peuvent s’agréger/se dissocier. De plus, les modifications post-traductionnelles apportées ne sont par exemple pas les mêmes entre les bactéries et les cellules de mammifères. Il existe différents types de modifications post-traductionnelles, comme les glycosylations, méthylations, acétylations, acylations, phosphorylations ou sulfatations, contribuant aussi à la variabilité de la substance active biologique.[14]
La principale mission du Contrôle Qualité est de vérifier que les médicaments fabriqués correspondent à ce qui est attendu et qu’ils sont conformes aux spécifications définies. Le contrôle de la qualité des médicaments biologiques et biosimilaires repose, comme pour tout médicament, sur les contrôles des matières premières, du procédé de fabrication, de la substance active et du produit fini.
Après une caractérisation extensive du produit biologique, qui permettra d’apporter des connaissances indispensables sur la façon de procéder, la qualité sera garantie par le contrôle de l’identité, de la pureté et de la sécurité.[21]
A. Contrôle des matières premières :
Le contrôle de la qualité des matières premières utilisées pour la fabrication des médicaments biologiques repose principalement sur les contrôles du vecteur d’expression, de la cellule hôte, des banques cellulaires et des milieux de culture.
26
B. Cellule hôte et vecteur d’expression :
La guideline ICH Q5D "Quality of Biotechnological Products: Derivation and Characterisation of Cell Substrates Used for Production of Biotechnological/Biological Products" définit trois principes clés pour le contrôle de la qualité des banques cellulaires que sont l’identité, la pureté et la stabilité. L’identité de la banque cellulaire maîtresse et de la banque cellulaire de travail est confirmée à partir de l’étude des caractéristiques phénotypiques et/ou génotypiques. De plus, il est nécessaire de s’assurer de l’expression de la protéine recombinante et/ou de la présence de la construction dans la cellule hôte.
Les banques cellulaires doivent être exemptes d’agents étrangers potentiellement oncogènes ou infectieux, une attention particulière doit être portée aux virus contaminant couramment les espèces dont est issue la lignée cellulaire. En effet, certaines lignées cellulaires contiennent des virus endogènes, par exemple des rétrovirus, ou peuvent faire l’objet d’une infection virale latente ou persistante (Herpesvirus) suite à l’utilisation d’animaux infectés. Les banques cellulaires peuvent également être contaminées accidentellement lors de la manipulation, de la fabrication ou de l’utilisation de réactifs contaminés et être vecteurs d’organismes exogènes (étrangers).
La sécurité virale des médicaments biologiques repose aujourd’hui sur deux éléments clés : la sélection des matières premières pour leur absence de virus et la capacité du procédé de production à éliminer et/ou inactiver les virus.[22]
L’étude de la stabilité des banques cellulaires consiste à évaluer la viabilité des cellules et déterminer une limite d’âge in vitro pour la production. Les tests effectués dépendent de la cellule hôte, du procédé de fabrication et du produit. Il est possible de vérifier l’intégrité de la séquence codant la protéine d’intérêt ainsi que d’analyser des caractéristiques spécifiques de la cellule telles que la morphologie, la croissance ou la productivité.[23, 24]
C. Contrôle des milieux de culture et autres matières premières
La qualité des milieux de culture utilisés en microbiologie au laboratoire est cruciale pour obtenir des résultats optimaux et fiables. Certains milieux de culture sont essentiels pour isoler certains microbes, il est donc impératif qu’ils fonctionnent comme prévu.
Les procédures de contrôle de qualité permettent de s’assurer que les milieux n’ont pas été contaminés avant leur utilisation et qu’ils permettent la croissance de l’organisme avec lequel ils ont été ensemencés.[25]
D. Contrôle du procédé de fabrication :
Le contrôle du procédé de fabrication d’une protéine recombinante consiste d’une part à surveiller in situ les paramètres liés au pilotage de la culture cellulaire tels que le pH, la température, la concentration en oxygène dissous et CO2 dissous ou l’agitation. Et d’autre part à réaliser des échantillonnages pour réaliser divers contrôles comme la concentration en produit, substrats et métabolites ou la densité cellulaire. Une perturbation, même légère, de ces paramètres peut avoir des conséquences négatives sur la productivité et la qualité du produit désiré. La croissance cellulaire et la viabilité des cellules sont des éléments clé de la productivité, il est donc primordial d’instaurer des contrôles en ligne (monitoring) et hors ligne (échantillonnage) pour maintenir des conditions optimales de production et vérifier le bon déroulement du procédé.
1. Contrôle en ligne ou in situ/in-line monitoring :
Le contrôle in situ implique l’utilisation de capteurs directement placés dans la cuve ou les lignes de flux périphériques pour la surveillance du procédé. Le pH d’une culture de cellules de mammifère se situe dans une gamme étroite, entre 6,8 et 7,4. Une faible perturbation du pH peut impacter la croissance cellulaire et être responsable d’une baisse du taux de production de la protéine ou même de mort cellulaire dans le cas de perturbation plus importante. La température doit être contrôlée car elle influence la multiplication cellulaire, elle se situe généralement autour de 37°C avec une marge de manœuvre étroite de +/- 0,5 °C voire moins pour les cellules de mammifères.[26]
28
Le pourcentage de saturation en oxygène dissous doit se situer entre 20 et 100 %, une baisse de celui-ci peut influencer la viabilité des cellules et perturber notamment la glycosylation.
Une concentration élevée en dioxyde de carbone dissous peut inhiber la croissance cellulaire, le métabolisme cellulaire et perturber la glycosylation de la protéine. Généralement le degré de saturation en dioxyde de carbone dissous est maintenu entre 5 % et 10 %. Contrairement aux bactéries, les cellules de mammifère sont très sensibles au cisaillement, un système d’agitation adapté à faible tour par minute (généralement 150 tour/minute maximum) est nécessaire pour éviter de les détruire. La formation de mousse peut également être problématique selon les cultures (due à l’introduction de gaz, la présence de protéines et l'agitation) et impose d’être contrôlée selon les besoins à l’aide d’ajout d’antimousse.[27]
2. Contrôle hors-ligne ou off-line monitoring :
En parallèle de ces contrôles en ligne, des échantillonnages sont réalisés quotidiennement pour vérifier le bon déroulement de la production. Les nutriments comme le glucose et la glutamine sont essentiels pour l’apport en énergie et la culture cellulaire. Les cellules produisent également des métabolites ou déchets tels que l’ammonium et le lactate qui peuvent avoir des impacts négatifs en termes d’inhibition de la culture cellulaire et de rendement. Les concentrations en nutriments et en métabolites doivent donc être surveillées via leur dosage à travers des techniques comme l’HPLC ou une immunoessai.
La densité cellulaire est un contrôle important car elle est également impliquée dans la croissance cellulaire et le rendement. Enfin, le dosage de la concentration en protéine produite est effectué pour contrôler le rendement de la production, celle-ci est déterminée par chromatographie à titre d’exemple. Par ailleurs, pour pallier aux inconvénients du contrôle hors-ligne qui est déconnecté du temps réel de la production (les résultats sont obtenus en retard car il est nécessaire de faire un prélèvement et de préparer l'échantillon pour l'analyse), il est possible grâce à des instruments innovants d’effectuer ces contrôles en ligne. Ces contrôles appelés également online monitoring consistent en une combinaison des systèmes in situ et hors-ligne : un échantillon in situ est prélevé automatiquement puis analysé par un capteur ex situ.[28]
