Evaluation de l’effet cytoprotecteur de composés bioactifs à l’égard de la toxicité induite par les agents de chimiothérapie

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DAS

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LA

NATURE ET DE

LA YIE

ET

DES

SCIENCf,S DE

LA

TERRE

DnPARTnilmNT

DES SCTENCES

BTOLOGTQUtrS

MEMOIRE

DS

FII{

D'ETT'DES

E,N

VUE

DE

L'OBTTNTION

DU

DIPLOME MASTER

Domaine:

SNV

Filière

: Scicnces

Biologiques

Specialité

:

Biochimie Appliquée

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Evaluation

de

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de

composés

bioactifs

à

l'égard

de

la toxicité

induite pâr

les

agents de

chirniothérapie

Soutenu

le

z

O4107/2019

Ilevant

le

jury

composé

de

:

Nom

et

Mtom

M. KHERRAZKaTLn

M. BOURNINE Lamine

tnetr4r{fuIERl

Amal

M. RAI Abdelwahab

Grade

MAA

MCA

Doctorante

MCB

Univ.

de

Bouira

Univ.

de

Bouira

Univ.

de

Bo*ira

Univ.

de

Bouira

Président

Promoteur

Co-promotrice

Examinateur

Année

Univcrsitaire

: 2018/2{119

(2)

Résumé

Le c1rnoer représenle l'une iles principales causes tle mortalité dans 1e monde- De nombreux agents anticancér€ux sont conçus contre

cette pathotogie qui agissent avec différ€îrts mécanismes d'action. Malgré leur e{ficacité, ils provoquentplusieurs effets secondaires Oont i'angrniËedmioinduite. En offet ces alærations sont dues à la production excessive des espèces réactives de l'orygène {EROs)

via des mécanismes de cjrtotoxicite cellulaire.

Afin

d'explorer I'effet protecteur des antioxydants à savoir la quercetine (Q), la

catéchine

(C) et

I'acide gallique

(AG),

sur des globdès rouges (GRs) humains sonrnis

à

un

étd

de sbess induit

par

les

anticancéÀx:

16 paelitaxfi

(rxr-l

*

lecisplatine

(ôoop),

un ptotocole experimental a éte élaboré. Celui-ci consiste à évaluer Ia

turbidité celSilaire, le taux

d;

I'hémolyse en meswant ta quantité de la méthâmogl'obine ainsi que le dosage de I'hémoglobine

{l{b}

intracellulaire et liberee. Aussi l'évaltation du stress

"*ya"ttt

à travers le dosage des produits de la

peroxydation lipidiqtre, les

malondialdéhydes (MDA) et la rnise en évidence de I'oxydationde I'Hb ont été réalises. LÆs ré$ultats enregistrés ont monté que le

TXL à une cytotoxicité eès signifrcative (0,25* 0,005) par rapport au CDDP (1,15+ 0,02) ainsi que leur combinaissr IXL/CDDP

(0,43*0,01). i-es anticnrydants Q

*

C

o"t"rtrt

un effef cytoprotecteur q)ître le TXL, CDDP st TXL/CDDP avec des concentrations

àgifufuit"r qui sont r"sie"tivemient de 0,83*0,008 €t do

l,43l{,04

Les resultats du pourcentage de I'hernolyse confirment I'effet

protecteur

di

ces antioxydants qui ont réduit significativement le taux ile l'bénolyse

à

41,95L0,07% en co,mpilnrison avec I'agent

anticancércrx. Les résultats du iest de la peroxydation lipiilique ont démonùé que la Q (0,07+0,002), la C (0'07+0,003) et

fAG

(0,0610,001), exhibent

un eflet

inhibiteur contre

la

production des

1\D-{

induite par

le

TXL

(0,4110,01)

et

la

combinaison

iVCpOp'i0,320,01).

Aussi, les résultats de l'effet protecteur à t'égard de l'oxydation de

I'Hb

induite par le TXL _{{1,07r=0,003)'}

le CDDp 1f ,:'ZrO,O:i

i

de leur-combinaison (1,07*0,0à) montrent que la Q, C et

I'AG

cxercent un efiet protecÛew significdif avec des teneurs en Hb qui varient etrtre | ₂₅et I _A5.

A

I'avenir, i1 serait interessant de réaliser de nouveaux tests et de combiner plusieurs agents antioxyrtants, à ttifféientes conoentrations, avec les ag€nts de chimimlrérapie, dans le but de prévenir et tle traiter I'anémie

chimio-induite, ainsi que de minimiser les effets secondaires des anticancéreux.

Mots clés : Paclitaxel, cisplatine, globules rouges, hémoglobing antioxydants, cytoprotection, peroxydation lipidique.

Àbstract

Cancer is one

ofthe

leading causes ofdeath in the worlil. Many anli-cancer agents are designed against this disease that act with

different mechanisms ofactîon. Despite their effeotiveness, they cause several side effects including chemotherapy-induced

anemia-lndee4 these alterations are due to the excessive production ofreactive oxygen species (ROS) via cellular cytotoxicity mechanisms'

In order to explore the protective effect of antioxidants,

ie.

quercetin (Q), catechin (C) and gallic acid (GÀ), on human red blood cells (RBC) subjected

to

a state

of

stresÈ inducerl by anticancer drugs: paclitaxel

(fXL)

and cisplatin (CDDP), an experimental

protocol was developed. Tbis involves assessing cellular turbidity, hemolysis levels by measuring the amount of methemoglobin and

the amount of intracellular and releasect hemoglobin (I{b). Also the evaluation of oxidative stress through the determination of lipid

peroxidation products, malondialdehyde

(MDA)

and deûeotion

of Hb

oxidation were carried out. The results showed thal T)(L àxerted a.

very

sigaificant

cytotodcity

(0.25+ 0.005) compared

to

CDDP (1.15+ 0.02) and

their

combination TXLICDDP

(0.43+0.01). In ftctr antioxitlants Q and C have a cytoprotective effect against TXL, CDDP and TXL/CDDP with cell concentrations

values 0.g3+0.00g and 1.43È0.04 respectively. The results

of

the hemolysis percentage confirm the protective effect

ôf

these

antioxidants which significantly reduced the bemolysis rate to 41.9510.07a/o cofipûed with anticancer agent' The resulls

of

lipid

peroxidarion test shoied tfrat <i (o.oZro.002),

c

(0.07*0.003) and GA (0.06+0.001) have an inhibitory e{fect against TXLinduced

i"toA

production (0.41+0.01) and thc TXL/CDDp combination (0.32*0.01). In addition, the resulis of protective effect against

llb

oxidation induced by

TXL

1i.of+o.oo:;, CDDP (1.32t0.03) and tlreir combination (1.07+0.02) showed that Q' C and GA have a

significant protectivé etrect with Hb levels ranging from 1.25 to 1.45.In the frrture, it would be interesting to carry out new lests and

combine several antioxidant agents,

at

different concentrations,

with

chemotherapy agents

in

order

to

prevent and ûeat

chemotherapy-indused anemia, as well as to reduce the side effects ofanticancer drugs.

Keyrords:

Paclitrxel, cisplatin, red blcod cells, hemoglobin, antioxidants, c1'toprotection, lipid peroxidation'

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