LES PHLÉBOTOMES DE MADAGASCAR (DIPTERA : PSYCHODIDAE)
III - DESCRIPTION DE PHLEBOTOMUS (ANAPHLEBOTOMUS) FONTENILLEI N. SP.
DEPAQUIT J.*, LÉGER N.** & ROBERT V.***
Summary: PHLEBOTOMUS FROM MADAGASCAR (DIPTERA - PSYCHODIDAE).
III - DESCRIPTION OF PHLEBOTOMUS (ANAPHLEBOTOMUS) FONTENILLEI N. SP.
The male of Phlebotomus (Anaphlebotomus) fontenillei n. sp. is described from Namoroka area (Madagascar). Its belongs to the subgenus Anaphlebotomus style with four spines, coxite without basal process and paramere with two branches. It shares with P. berentiensis an original and exclusive antennal formula: 2/lll-XII which distinguishes them from P. fertei. P. fontenillei n. sp. differs mainly from P. berentiensis by about 4 0 setae in tuft on the ventral face of the coxite, the length of the genital ducts and the position of the spines on the style. Sequence of the second internal transcribed spacer (ITS2) of the ribosomal D N A (rDNA) is very informative: the male of P. fontenillei n. sp. cannot be linked to the female of P. huberti (male unknown) regarding the size of amplified D N A fragment (459 b p versus 6 0 0 respectively) and the high degree of variability. There are few differences
(10 mutations) between the sequences of P. fontenillei n. sp. and P. berentiensis which are closely related species.
Résumé :
Le môle de Phlebotomus (Anaphlebotomus/ fonlenillei n. sp. esl décrit de la réserve de Namoroka (Madagascar!. Son rattachement au sous-genre Anaphlebotomus repose sur la présence de quatre épines sur le style, l'absence de lobe basai sur le coxite et un paramère bilobe. La diagnose différentielle avec P. berentiensis et P. fertei est discutée et une clé de détermination des Anaphlebotomus mâles de Madagascar est proposée, le séquençage du second espace interne transcrit (ITS 2) de l'ADN ribosomique vient confirmer l'observation de différences morphologiques importantes existant entre P. fertei, P. huberti et P. fonlenillei n. sp. et la proche parenté entre P. berentiensis et P. fonlenillei n. sp.
MOTS CLES :
phlébotome, Anaphlebotomus, Madagascar, taxinomie morphologique et moléculaire.KEY WORDS : phlebotomine sandfly, Anaphlebotomus. Madagascar, morphological and molecular taxonomy.
INTRODUCTION
A
c e jour, la faune de Madagascar c o m p o r t e trois e s p è c e s appartenant au sous-genre Anaphlebo-tomus T h e o d o r , 1 9 4 8 : Phlebotomus berentien- sis (Léger & Rodhain, 1 9 7 8 ) (statut révisé par D e p a - quit et al., 2 0 0 4 ) , P. fertei Depaquit, Léger & Robert, 2001 et P. huberti Depaquit. Léger & Robert, 2 0 0 1 . Ces trois e s p è c e s sont e n d é m i q u e s de Madagascar. D e s p r o s p e c t i o n s m e n é e s dans l'ouest du pays ont permis la capture d'un exemplaire mâle d'une quatrième e s p è c e appartenant au m ê m e sous-genre.
MATÉRIEL ET MÉTHODES
L
e x e m p l a i r e e x a m i n é provient d e la province d e Mahajanga, réserve s p é c i a l e d e N a m o r o k a , forêt d ' A m b o v o n a m b y située à 2 6 kilomètres au nord-* Faculté de pharmacie. Université de Reims Champagne-Ardennes, 51. rue Cognacq Jay. 51096 Reims Cedex. France.
** 63. avenue Pierre Sémart, 94210 La Varenne Saint-Hilaire, France.
*** IRD/Institut Pasteur de Madagascar. BP 1274 Antananarivo 101, Madagascar.
Correspondance : Jérôme Depaquit.
Tél.: 33 (0)3 26 91 37 23 - Fax : 33 (0)3 26 91 35 97.
E-mail : jerome.depaquit@univ-reims.fr
ouest d'Andranomavo. C o o r d o n n é e : 16° 28,2' S et 45°
2 0 , 9 ' E. Altitude : 2 0 0 mètres. Il a é t é capturé à l'aide d'un p i è g e lumineux CDC miniature a v e c lampe ultra- violette, p o s é le 10 o c t o b r e 2002 à proximité de grottes.
Il a été traité pour être exploité en morphologie et en bio- logie moléculaire selon la méthodologie suivie par Depa- quit et al. (2004). Après dissection, la tête, le génitalia et
L I N E aile de l'holotype ont été observés et montés clans
la g o m m e au chloral. axant d'avoir été démontés, déshy- dratés dans des bains successifs d'éthanol de titre crois- sant, puis dans la créosote du hêtre, avant d'être remontés de manière définitive dans le baume du Canada. Le reste du corps (thorax, pattes et a b d o m e n ) a servi à la mise en œuvre de méthodes moléculaires (extraction d'ADN, amplification génique par PCR et séquençage).
DESCRIPTION
DE PHLEBOTOMUS FONTENILLEI N. SP.
G e n r e Phlebotomus Rondani et Berté, in Rondani, 1840.
Sous-genre Anaphlebotomus T h e o d o r , 1 9 4 8 . E s p è c e Phlebotomus fontenillei n. sp.
Un e x e m p l a i r e mâle e x a m i n é . F e m e l l e i n c o n n u e .
Parasite. 2 0 0 4 . / / . 2 6 1 - 2 6 5
M é m o i r e 261
Article available athttp://www.parasite-journal.orgorhttp://dx.doi.org/10.1051/parasite/2004113261
DEPAQUIT J.. LEGER N. & ROBERT V.
• T ê t e (figure 1)
Suture interoculaire incomplète.
Cibarium armé d'une dizaine de dents e n position pos- térieure et d'une trentaine d e denticules antérieurs.
Pharynx rétréci au niveau de l'armature c o m p o s é e d'ondulations bien m a r q u é e s a v e c p r é s e n c e de quel- q u e s dents latérales antérieures.
Formule palpale : 1, 4, ( 3 , 2 ) . 5. Épines de Newstead plus souvent l a n c é o l é e s qu'ovales.
Formule antennaire : 2/III-XII, avec d e s ascoïdes longs, n'atteignant p a s l'interligne articulaire suivant. Sur les s e g m e n t s XIII à X V I . il existe d e s formations s'appa- rentant à d e s sensilles.
A III = 235 um. A IV = A V = 110-115 um.
A III légèrement supérieur à A IV + A V.
Epipharynx = 2 1 0 um. A III, E = 1,12.
• T h o r a x
Vestiture du m é s a n é p i m è r e et du m é s a n é p i s t e r n e n o n e x a m i n é e .
Aile (figure 1) : longueur = 1720 pm; largeur = 6 0 0 um;
a = 4 1 0 p m ; ß = 2 8 0 u m ; indice alaire = 1,46; ô = 7 0 pm ( c o u r t ) ; y = + 2 4 4 p m ; n = + 100 pm. Largeur de l'aile .y = 2 . 4 5 .
• Armature génitale (figure 2 )
Le c o x i t e est long de 2 4 0 à 2 6 0 pm, portant u n e touffe proximale de 4 0 à 4 5 longues et fortes soies sur sa face interne.
Le style mesure 140 pm de long. Il est étroit et porte quatre é p i n e s implantées à d e s niveaux grossièrement équidistants : d e u x m é d i a n e s nettement d é c a l é e s l'une par rapport à l'autre (la plus proximale assez p r o c h e de l'articulation) et d e u x distales très d é c a l é e s l'une par rapport à l'autre (la plus terminale est portée par un long p é d o n c u l e ) .
Le paramère est bifurqué a v e c un l o b e aminci et légè- rement c r o c h u , sclérifié sur sa partie dorsale, nu (à l'exception d'un g r o u p e de quatre ou cinq soies au niveau d e l'élargissement), et l'autre, plus long, n o n sclérifié et garni de courtes soies drues clans sa moitié distale arrondie à s o n extrémité.
Les surstyles sont longs de 2 4 0 pm. de longueurs sensi- blement égales à celles des coxites. Une formation basale fortement sclérifiée s'observe sur leur face dorsale.
Les valves p é n i e n n e s sont longues de 9 0 pm, droites, pointues o u légèrement arrondies à leur extrémité dis- tale, plus sciérifiées sur leur face e x t e r n e q u e sur leur face interne. À la b a s e , on o b s e r v e u n e forte épine lar- g e m e n t implantée.
Les filaments génitaux mesurent 4 3 5 pm. Isodiamétri- q u e s dans leur partie proximale ( 3 8 0 p m ) , leur longue ouverture ( 5 5 p m ) offre un aspect e n biseau se termi- nant e n pointe a c é r é e .
La p o m p e génitale mesure 170 pm de long (dont 135 pour le seul piston). Rapport longueur d e s filaments génitaux sur p o m p e génitale = 2 , 5 6 .
N u m é r o d'accession G e n b a n k du fragment amplifié ( 4 5 9 paires de b a s e s ) incluant la s é q u e n c e d e l'ITS 2 de P. fontenillei n. sp. : A Y 7 0 0 6 7 6 .
Derivatio nominis. Nous d é d i o n s cette e s p è c e à notre collègue Didier Fontenille, éminent spécialiste des Dip- tères africains et ma lg a c he s. L'holotype est d é p o s é au Laboratoire d'Entomologie du Muséum National d'His- toire Naturelle de Paris.
DISCUSSION
L
E RATTACHEMENT D'UNE E S P È C E AU SOUS-GENRE Ana-pblebotomus REPOSE SUR LES CARACTÈRES OBSERVÉS CHEZ LES MÂLES (THEODOR, 1 9 4 8 ; DEPAQUIT et al., 2 0 0 4 ) . L'INCLUSION DE P. fontenillei N. S P . DANS CE SOUS- GENRE S E JUSTIFIE AISÉMENT PAR LE PARTAGE D E S CARACTÈRES D'INCLUSION SUIVANTS : STYLE PORTEUR D E QUATRE É P I N E S , ABSENCE D E LOBE BASAI SUR LE COXITE ET PRÉSENCE D'UN PARAMÈRE BILOBÉ.
SA FORMULE ANTENNAIRE ORIGINALE DISTINGUE P. fontenillei
N. S P . D E TOUTES LES AUTRES E S P È C E S D ' A n a p b l e b o t o m u s À L'EXCEPTION D E P. berentiensis, QUI P O S S È D E LE M Ê M E ÉTAT DE CARACTÈRE.
P. fontenillei N. S P . SE DISTINGUE D E P. fertei, OUTRE LA FORMULE ANTENNAIRE 2 / I I I - X I I , PAR UN A III PLUS COURT DE LA MOITIÉ, UN CIBARIUM ARMÉ. LINE ARMATURE P H A - RYNGIENNE PLUS D É V E L O P P É E , LA PRÉSENCE D'UNE TOUFFE DE SOIES FOURNIE SUR LE COXITE, DES FILAMENTS GÉNITAUX PLUS COURTS ET NON RÉTRÉCIS À LEUR TIERS DISTAL. D E S NIVEAUX D'IMPLANTATION DIFFÉRENTS D E S É P I N E S DU STYLE, ET LA PRÉSENCE D E FORMATIONS CHITINISÉES SUR LES FACES DORSALES DES SURSTYLES.
P. fontenillei N. S P . SE DISTINGUE D E P. berentiensis PAR LA PRÉSENCE D'UNE TOUFFE D E SOIES IMPORTANTE SUR LE COXITE, LA LONGUEUR ET L'EXTRÉMITÉ DES FILAMENTS GÉNI- TAUX, LA POSITION SUR UN LONG PÉDONCULE D E L'ÉPINE LA PLUS DISTALE DU STYLE, DES NIVEAUX D'IMPLANTATION DIF- FÉRENTS DES É P I N E S DU STYLE, ET LA PRÉSENCE D E FORMA- TIONS CHITINISÉES SUR LES FACES DORSALES D E S SURSTYLES.
SI LES MÂLE ET FEMELLE SONT DÉCRITS CHEZ P. berentiensis
ET P. fertei (DEPAQUIT et ai, 2 0 0 4 ) , LE MÂLE DE P. huberti
N'EST P A S CONNU À CE JOUR, D E M Ê M E Q U E LA FEMELLE D E
P. fontenillei N. S P . L E MÂLE DÉCRIT DANS LE PRÉSENT TRA- VAIL PEUT-IL APPARTENIR À L'ESPÈCE P. haberti? L E S CARAC- TÈRES MORPHOLOGIQUES NE PERMETTENT PAS D'EXCLURE D E MANIÈRE FORMELLE CETTE APPARTENANCE, M Ê M E SI LES FILA- MENTS GÉNITAUX D E P. fontenillei N. S P . SONT LÉGÈREMENT PLUS COURTS ( 4 3 5 P M ) Q U E LES CONDUITS DES SPERMATHÈ- QUES DE P. huberti ( 4 7 0 P M ) . E N REVANCHE, LES DONNÉES MOLÉCULAIRES SONT FORMELLES. LA TAILLE DES FRAGMENTS AMPLIFIÉS EST DE 4 5 9 PAIRES D E BASES CHEZ P. fontenillei
N. S P . ET DE 6 0 0 CHEZ P. huberti ( 4 6 1 CHEZ P. berentien- sis ET 4 9 8 À 5 0 9 CHEZ P. fertei). L'ALIGNEMENT DES SÉQUEN-
2 6 2 P a r a s i t e . 2 0 0 4 , 11. 2 6 1 - 2 6 5
M é m o i r e
PHLEBOTOMUS (ANAPHLEBOTOMUS) FONTENILLEI N. SP.
Fig. 1. - P. fontenillei n. s p . m â l e . A : p h a r y n x ; В : s e g m e n t s a n t e n n a i r e s III. I V . V. X I I I . X I V X V et X V I ; С : s e n s i l l e d e ГА X V ; D : p a l p e ; F : é p i n e d e N e w s t e a d ; F : c i b a r i u m ; G ; aile.
2 6 3 P a r a s i t e . 2 0 0 4 . 11, 2 6 1 - 2 6 5
M é m o i r e
DEPAQUIT J.. LÉGER N. & ROBERT V.
M é m o i r e P a r a s i t e , 2 0 0 4 , 11, 2 6 1 - 2 6 5 Fig. 2. - P. fontenillei n. s p . m â l e . A : g é n i t a l i a ; B : p o m p e g é n i t a l e ; C : p a r a m è r e ; D : s u r s t y l e s ; F : e x t r é m i t é d i s t a l e du filament g é n i t a l .
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c e s montre d e s différences m a r q u é e s a v e c P. buberti et P. fertei. P. berentiensis et P. fontenillei n. s p . sont des e s p è c e s proches qui diffèrent par 10 mutations ras- s e m b l é e s e n six sites (positions 2 4 5 , 2 5 5 à 257, 2 8 6 , 4 2 1 . 4 2 8 à 4 3 0 et 4 6 2 sur l'alignement p r o p o s é par Depaquit et al., 2 0 0 4 ) . Cette parenté s e vérifie égale- ment par la formule antennaire originale (2/III-XII) par- tagée exclusivement par les mâles d e c e s d e u x espèces.
Cette s é q u e n c e devrait permettre l'appariement d e la femelle d e manière certaine dans l'avenir.
• Clé simplifiée d'identification d e s Anaphlebotomus mâles d e Madagascar
1 - p r é s e n c e d'une touffe d e plus d e 4 0 soies sur le coxite P. fontenillei n. sp.
a b s e n c e d e touffe d e soies sur le coxite 2 2 - p r é s e n c e d'un cibarium armé P. berentiensis
a b s e n c e d'armature cibariale P. fertei
REMERCIEMENTS
L
es auteurs remercient le Dr Steve G o o d m a n ( W W F Madagascar et Field Museum d e C h i c a g o ) pour son soutien logistique sur le terrain. Ils sont aussi reconnaissants a u Ministère d e s E a u x et Forêts d e Madagascar et à l'Association Nationale pour la G e s - tion des Aires Protégées pour avoir a c c o r d é un permis de r e c h e r c h e dans le Parc National. Ce travail a b é n é - ficié d'un soutien financier d e l'Institut d e R e c h e r c h e pour le D é v e l o p p e m e n t . l'Institut Pasteur d e Mada- gascar, d e V o l k s w a g e n Stiftung et d e W W F .BIBLIOGRAPHIE
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9. 32V3.-U.
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de Madagascar (Diptera - Psychodidae). II - Description de la femelle de Phlebotomus (Anaphlebotomus) fertei Depa- quit. Léger (SL Robert. 2002; description du mâle et redes- cription de la femelle de Phlebotomus (Anaphlebotomus) berentiensis (Léger & Rodhain, 1978) comb. nov. Parasite.
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Reçu le 4 décembre 2003 Accepté le 30 janvier 2004
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PHLEBOTOMUS(ANAPHLEBOTOMUS) FONTENILLEI, S. SP.
