Quelques résultats préliminaires
d ’études de laboratoire visant à
améliorer l ’état sanitaire des
élevages de H. armigera.
E. PATHINVO, P. PRUDENT, R. KOUKE & A.
DJIHINTO
Introduction
Des essais pour désinfecter les oeufs
Des essais pour traiter les chenilles
INTRODUCTION
Dans le milieu naturel, sur culture de cotonniers, les
virus sont un moyen de lutte biologique peu efficaces.
Par contre, dans les élevages, ils représente un des
principaux facteurs limitant la productivité des
laboratoires en termes de capacité de recherche.
Il est donc nécessaire d ’améliorer les méthodes de
lutte mise en œuvre dans les élevages pour limiter cette
nuisance.
ESSAIS DE DÉSINFECTION DES OEUFS
Souche : BK77
Les produits (solutions mères ) :
Eau de Javel à 12° chlorimétriques
= concentration en hypochlorite de
sodium équivalente à 3,6 % de
chlore actif
Formol : 35 % de formaldéhyde
Source d ’UV à 254 nm
(avec lavage
préalable avec 1 solution de formol à 15 %
durant 20 mn)
Liste des objets des tests
VOIR LISTE
Liste des objets % Prd Mn T01 T02 T03 T04 T05 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 20 30 20 30 10+10 20+20 30+30 0 5 10 15 5 10 15 20 30 40 Eau Jav For UV X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X
Effet de la Javel sur les œufs.
Résultats du test T01 :
Analyse du dispositif complet comme un factoriel à 8 répétitions, 4 dosages de javel 0, 5, 10 et 15 % et trois durées de trempage 10, 20, 30 minutes
Résultats des tests T01, T03, T04 et T05 :
Les résultats cumulés pour chaque test (cumul des 8 répétitions par test) sont considérés chaque fois comme une répétition. L ’analyse se fait alors comme pour un factoriel à 4 répétitions (4 tests), 3 dosages de javel 0, 5, et 15 % et deux durées de trempage 20 et 30 minutes
0 5 10 15
20 15,08 Rendement global (%) : récolte x éclosion
5,35 4,81 4,46 8,2 6,45 7,62 16,1 12,24 16,89 5,06 5,95 5,06 6,02 2,84 5,56 5,64 4,77 2,97 0 20 40 60 80 100 120 Taux de récolte (%) 0 10 20 30 40 50 Taux d ’éclosion (%)
Effet de l ’eau de Javel sur la récolte, l ’éclosion et le rendement global en œufs dans le test T01.
15,08 23,79 31,34 27,1 21,69 24,46 26,83 16,1 12,24 16,89 23,21 18,56 29,61 22,94 31,48 39,6 24,53 35,56 21,22 100 30,99 49,64 39,7 38,88 100 100 100 36,58 33,3 23,09 36,36 15,28 11,83 25,62 13,67 17,15 21,15 18,81 % Javel 0 5 10 15 Durée mn 10 20 30 LOG C.V. % = 13,3 Fdose = 82,16 P=0,0000 Fdurée = 8,83 P=0,0004 Finter = 3,54 P=0,0039 Fbloc = 0,74 P=0,6375 RAC C.V. % = 13,3 Fdose = 2,75 P=0,0475 Fdurée = 0,75 P=0,4799 Finter = 1,21 P=0,3094 Fbloc = 4,00 P=0,0009 A C C B B A A A B B B C D B C D C D B C C D D A B B A A A A B B B A ASIN C.V. % = 13,3 Fdose = 16,70 P=0,0000 Fdurée = 0,51 P=0,6096 Finter = 0,60 P=0,7328 Fbloc = 4,09 P=0,0008 20 30 100 0 0 105 205 530 1010 2010 1030 1510 1520 3015 F
0 5 10 15 20 25
30 Rendement global (%) : récolte x éclosion
0 10 20 30 40 50 Taux d ’éclosion (%) 0 20 40 60 80 100 120 100 Taux de récolte (%) 29,99 20,02 53,7 46,31 100 100 37,12 22,86 23,98 16,06 23,11 34,96 33,4 27,32 33,65 21,54 24,67 29,03 40,88 31,4 35,4 23,11 9,28 6,48 13,14 12,77 21,54 24,67 10,45 8,11 7,42 5,54 C.V. % = 12,5 Fdose = 389,1 P=0,0000 Fdurée = 8,39 P=0,0107 Finter = 2,61 P=0,1048 Fbloc = 0,89 P=0,4707 LOG C.V. % = 35,0 Fdose = 3,94 P=0,0415 Fdurée = 1,71 P=0,2086 Finter = 0,24 P=0,7899 Fbloc = 5,58 P=0,0090 LOG C.V. % = 27,3 Fdose = 144,8 P=0,0000 Fdurée = 4,19 P=0,0562 Finter = 5,30 P=0,0180 Fbloc = 32,30 P=0,0000 % Javel 0 5 15 Durée mn 20 30 200 300 205 305 2015 3015
Effet de l ’eau de Javel sur la récolte, l ’éclosion et le rendement global en œufs dans les test T01, 03, 04 & 05. A C B A B A A A C B A A A C B C D F
Effet du formaldéhyde sur les œufs.
Résultats du test T02 :
Analyse du dispositif complet comme un factoriel à 8 répétitions, 4 dosages de formol 0, 5, 10 et 15 % et trois durées de trempage 10, 20, 30 minutes
Résultats des tests T02, T04 et T05 :
Les résultats cumulés pour chaque test (cumul des 8 répétitions par test) sont considérés chaque fois comme une répétition. L ’analyse se fait alors comme pour un factoriel à 3 répétitions (3 tests), 2 dosages de formol 0 et 20 % et deux durées de trempage 20 et 30 minutes
0 10 20 30 40 50
Taux d ’éclosion des œufs (%)
21,54 31,29 30,6632,6 28,6129,91 26,17 30,74 17,37 22,23 25,00 35,06 23,27 35,55 30,75 23,16 38,07 37,15 33,04 27,62 29,25 29,13 27,45 A A A A B % Formol 0 5 10 15 20 Durée mn 10 20 30 10 2030 20 15 10 5 0 0 0 5 5 10 10 15 15 20 20 20 10 30 10 20 30 10 2030 10 20 30
Effet du formaldéhyde sur le taux
d’éclosion des oeufs dans le test T02.
LOG C.V. % = 35,0 Fdose = 3,94 P=0,0415 Fdurée = 1,71 P=0,2086 Finter = 0,24 P=0,7899 Fbloc = 5,58 P=0,0090 F
0 5 10 15 20 25 30 Taux d ’éclosion (%) 24,5 26,39 24,48 26,41 23,13 25,88 25,84 26,95 % Formol 0 20 Durée mn 20 30 20 30 20 0 0 20 20 30
Effet du formaldéhyde sur le taux d’éclosion
des oeufs dans les tests T02, T04 et T05.
ASIN C.V. % = 35,0 Fdose = 1,34 P=0,2907 Fdurée = 1,40 P=0,2819 Finter = 0,26 P=0,6308 Fbloc = 2,87 P=0,2328 F
0 20 40 60 80 100 120 0 20 40 60 80 100 120
% de survie des larves jusqu ’à la nymphose avec les méthodes de désinfection des tests T04 et T05. mn % Prod T 0 20 01 T 0 30 02 Ja 5 20 03 Ja 5 30 04 Ja 15 20 05 Ja 15 30 06 Fo 20 20 07 20 30 Fo 08 30 20 Fo 09 30 30 Fo 10 40 20 Fo 11 40 30 Fo 12 UV 10 10 13 UV 20 20 14 UV 30 30 15 ASIN C.V. % 13,3 ; Fmét = 121,78 (p:0,0000) ; Fbloc = 2,91 (p:0,0083) 0 20 40 60 80 100 120
% REC essai T04ASIN C.V. % 18,4 ; Fmét = 5,77 (p:0,0013) ; Fbloc = 32,28 (p:0,0001) % REC essai T05ASIN C.V. % 18,4 ; Fmét = 5,77 (p:0,0013) ; Fbloc = 32,28 (p:0,0001) % REC Analyse du regroupement de T04 et T05
45,02 14,97 29,34 17,45 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 B B B A A A A A A A A A A A B 27,73 26,14 29,66 16,61 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 B B B A A A A A A A A A A A B 36,37 20,56 29,5 17,03 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 C B C A A A A A A A A A A A B F
Taux de récolte des œufs (%) avec les méthodes de désinfection des tests T04 et T05 et regroupement. ASIN C.V. % 13,3 ; Fmét = 121,78 (p:0,0000) ; Fbloc = 2,91 (p:0,0083) mn % Prod T 0 20 01 T 0 30 02 Ja 5 20 03 Ja 5 30 04 Ja 15 20 05 Ja 15 30 06 Fo 20 20 07 20 30 Fo 08 30 20 Fo 09 30 30 Fo 10 40 20 Fo 11 40 30 Fo 12 UV 10 10 13 UV 20 20 14 UV 30 30 15 0 20 40 60 80 100 120
% REC essai T04LOG C.V. % 7,8 ; Fmét = 75,11 (p:0,0000) ; Fbloc = 2,25 (p:0,0362)
0 20 40 60 80 100 120
% REC essai T05ASIN ; Fmét = 236,12 (p:0,0000) ; Finter = 1,55 (p:0,0971)
0 20 40 60 80 100 120
% REC Analyse du regroupement de T04 et T05
100 100 D C D B 100 100 B B C B 36,37 20,56 29,5 17,03 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 C C A A A A A A A A A A A B B 15 30 06 5 20 03 Ja 15 20 05 Ja 5 30 04 Ja Ja 45,02 14,97 29,34 17,45 100 100 100 100 100 100 100 100 100 A A A A A A A A A A A 27,73 26,14 29,66 16,61 100 100 100 100 100 100 100 100 100 A A A A A A A A A A A F
% ECLC Analyse du regroupement de T04 et T05 0 20 40 60 80 0 20 40 60 80 % ECL essai T05
Taux d ’éclosion (ECL %) des œufs récoltés avec les méthodes de désinfection des tests T04 et T05. RAC C.V. % 50,7 ; Fmét = 2,50 (p:0,0045) ; Fbloc =10,33 (p:0,0000) RAC C.V. % 44,1 ; Fmét = 2,80 (p:0,0016) ; Fbloc = 5,19 (p:0,0001) RAC ; Fmét = 3,91 (p:0,0080) ; Finter = 1,07 (p:0,3887) mn % Prod T 0 20 01 T 0 30 02 Ja 5 20 03 Ja 5 30 04 Ja 15 20 05 Ja 15 30 06 Fo 20 20 07 20 30 Fo 08 30 20 Fo 09 30 30 Fo 10 40 20 Fo 11 40 30 Fo 12 UV 10 10 13 UV 20 20 14 UV 30 30 15 % ECL essai T04 0 20 40 60 80 21,67 26,36 39,55 72,46 41,4 39,31 24,65 31,93 34,33 32,97 33,25 31,47 44,9 35,01 43,12 A B B B B B B B B B B B B B B 25,94 28,24 48,29 53,86 39,82 46,17 29,89 27,02 24,99 36,31 34,82 35,38 30,88 32,07 23,36 A B B A B A B A B BA B B A B A B A B A B A B B 23,8 27,3 43,92 63,16 A 40,61 42,74 27,27 29,47 29,66 34,64 34,03 33,42 37,89 33,54 33,24 B B B B B B B B B B B B B B F
% RDT Analyse du regroupement de T04 et T05 0 10 20 30 40 50
Taux de rendement global (récolte & éclosion) avec les méthodes de désinfection des tests T04 et T05. ASIN C.V. % 13,3 ; Fmét = 121,78 (p:0,0000) ; Fbloc = 2,91 (p:0,0083) ASIN C.V. % 18,4 ; Fmét = 5,77 (p:0,0013) ; Fbloc = 32,28 (p:0,0001) RAC ; Fmét = 12,68 (p:0,0000) ; Finter = 1,30 (p:0,2114) mn % Prod T 0 20 01 T 0 30 02 Ja 5 20 03 Ja 5 30 04 Ja 15 20 05 Ja 15 30 06 Fo 20 20 07 20 30 Fo 08 30 20 Fo 09 30 30 Fo 10 40 20 Fo 11 40 30 Fo 12 UV 10 10 13 UV 20 20 14 UV 30 30 15 % RDT essai T04 0 10 20 30 40 50 % RDT essai T05 0 10 20 30 40 23,8 27,3 12,15 11,18 9,9 7,38 27,27 29,47 29,66 34,64 34,03 33,42 37,89 33,54 33,24 21,67 26,36 12,59 9,19 8,89 7,43 25,94 B B B B 24,65 31,92 34,33 32,97 33,25 31,47 44,9 35,01 43,12 A A A A A A A A A A A B C C C C 28,24 11,71 13,16 10,92 7,33 29,89 27,02 24,99 36,31 34,82 35,3830,8832,07 23,36 A B A A A AB A A A A A AB B B B B A A A A A A A A A A A 15 30 06 5 20 03 Ja 15 20 05 Ja 5 30 04 Ja Ja F
0 20 40 60 80 100 % de survie larvaire Javel % 0 5 15 Temps mn 20 30 20 30 20 30 20 30 15 5 0 0 5 15 39,59 72,04 81,12 60,18 68,32 40,09 39,1 62,58 81,51 77,89 84,34
Survie larvaire en fonction de la concentration en eau de
Javel et du temps de trempage des œufs (T01,T03,T04,T05).
ASIN C.V. % 27,3 Fdose = 31,38 (p:0,0000) Fdurée = 4,89 (p:0,0411) Finter = 1,56 (p:0,2419)
A
B
B
A
B
Fbloc = 8,58 (p:0,0016) F0 10 20 30 40 50 60 70
% de chrysalides bien formées
Effet de la désinfection des œufs avec du formol sur le %
de larves atteignant le stade de chrysalide (objets
communs aux tests T02, T04 & T05 = 3 réps).
Durée 20m 30m 20m 30m 20m 30m 20% 0% 0% 20% Formol 0% 20% 33,54 59,45 47,59 45,40 34,50 32,59 60,68 58,21 C.V.% : 19,8 Fdose = 23,84 P = 0,0031 Fdurée = 0,17 P = 0,6939 Finter = 0,00 P = 0,9591 A B Fbloc = 4,94 P = 0,0540 F
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 0 20 40 60 80 100 T T JA JA JA JA FO UV UV UV 0 0 5 5 15 15 20 20 30 30 40 40 10 20 30 20 30 20 30 20 30 20 30 20 30 20 30 10 20 30 mn % Prod FO FO FO FO FO % de survie 31,6 32,5 46,8 77,8 76,8 74,2 65,6 56,5 46,5 75,6 45,1 54,5 59,3 63,6 90,79
% de survie des larves jusqu ’à la nymphose avec
les méthodes de désinfection des tests T04 et T05.
ASIN C.V. % 18,4 ; Fmét = 5,77 (p:0,0013) ; Fbloc = 32,28 (p:0,0001) C BC A B C B A C B A C C BC B A B C B A B A C BC B A B A F
% de succès global 0 1 2 3 4 5 Javel % 0 5 15 Temps mn 20 30 20 30 20 30 20 30 15 5 0 0 5 15
% de succès global en fonction de la concentration en eau de Javel et du temps de trempage des œufs (T01,T03,T04,T05). C.V. % = 37,6 Fdose = 2,64 (p:0,1029) Fdurée = 0,17 (p:0,6837) Finter = 1,19 (p:0,3315) 3,28 2,63 2,13 2,77 2,59 3,10 3,46 2,54 2,72 2,66 1,59 Fbloc = 9,20 (p:0,0011) F
% de succès global 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18
Effet de la désinfection des œufs avec du formol sur le % de succès global de la collecte des œufs aux chrysalides (objets communs aux tests T02, T04 & T05 = 3 réps).
Durée 20m 30m 20m 30m 20m 30m 20% 0% 0% 20% Formol 0% 20% 7,97 15,64 C.V.% : 25,8 Fdose = 19,01 P = 0,0051 Fdurée = 0,05 P = 0,8176 Finter = 0,01 P = 0,9170 A B 11,60 12,01 7,67 8,26 15,53 15,76 Fbloc = 1,23 P = 0,3567 F
0 5 10 15 20 25 30 35 % de succès 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 T T JA JA JA JA FO UV UV UV 0 0 5 5 15 15 20 20 30 30 40 40 10 20 30 20 30 20 30 20 30 20 30 20 30 20 30 10 20 30 mn % Prod FO FO FO FO FO 6,52 8,56 5,07 7,68 6,45 4,69 16,13 15,28 12,33 23,56 14,39 16,96 20,65 19,93 28,95
% de succès des élevages de la collecte des œufs à la
nymphose dans les essais de désinfection T04 & T05
LOG C.V. % 32,6 ; Fmét = 6,19 (p:0,0009) ; Fbloc = 7,28 (p:0,0167) C B A B C B A C B A C C BC B A B C B A C BC B D D D D D D D D D C C A A D D A A F
ESSAIS DE DÉSINFECTION DES OEUFS
Matériel et méthodes :
Résultats :
Effet sur les oeufs
Effet sur les chenilles
Javel seule
Formol seul
Essais mixtes
Javel seule
Formol seul
Essais mixtes
Voir méthodes
Effet sur les stades prénymphaux
Javel seule
Formol seul
Essais mixtes
ESSAIS D ’UN ANTIVIRAL
Souche : BK77
Le produit : l ’aciclovir incorporé dans le
milieu nutritif à 4 doses + 1 témoin.
mg d ’aciclovir pour 2,5 Kg de milieu 0
mg d ’aciclovir pour 2,5 Kg de milieu 200
mg d ’aciclovir pour 2,5 Kg de milieu 400
mg d ’aciclovir pour 2,5 Kg de milieu 600
mg d ’aciclovir pour 2,5 Kg de milieu 800
Ingestion par les chenilles agées de 5 jours
de 5,375 10
5corps d ’inclusion viraux
4 répétitions, 30 chenilles par lot
RÉSULTATS DES TESTS D’EFFICACITÉ
DE L’ACYCLOVIR
Survie des chenilles 13 jours après
inoculation
Survie à l’émergence des adultes
Voir résultats
% de mortalité cumulée des chenilles à 13 jours
après l ’ingestion de la dose virale contaminante
0 200 400 600 800 0 20 40 60 80 100 % de mortalité 78,89 82,22 33,33 41,1 45,56 B B A A A C.V. % 18,7 ; Fdose = 13,92 (p:0,0014) ; Fbloc = 1,45 (p:0,2901)
X
OPTIMUM
F0 5 10 15 20 25 0 200 400 600 800 % de succès
mg d ’aciclovir pour 2,5 Kg de milieu
Effet de l ’aciclovir sur le succès des élevages de H. armigera jusqu ’à l ’émergence des adultes.
C.V. % 65,3; Asin ; Fdose = 3,95 (p:0,0468) ; Fbloc = 1,77 (p:0,2307)
5,56 10,00 13,33 22,22 3,33 AB AB AB B A X OPTIMUM F
ESSAIS DE TRAITEMENT DES LARVES
AVEC UN ANTIVIRAL
Matériel et méthodes :
Résultats :
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CONCLUSIONS
L ’eau de Javel affecte fortement le taux de succès de l ’étape « désinfection des œufs + éclosion » en détruisant de nombreux œufs.
Le formol n ’affecte par contre pas cette étape, donnant un rendement soit équivalent aux œufs témoins lavés à l ’eau, soit supérieur.
Le lavage à la Javel améliore très significativement le taux de survie larvaire, démontrant ainsi son efficacité comme méthode d ’élimination des virus présents sur les pontes. Par contre, la destruction des œufs est telle que le rendement global de l ’élevage est réduit, même par rapport aux témoins. Le formol seul ne suffit pas à désinfecter les œufs de façon satisfaisante. Par contre, une exposition aux UV durant 30+30
Le meilleur bilan sur toutes les étapes étudiées est obtenu avec un léger lavage au formol, suivi d ’une exposition de 30mn+30mn aux UV.
L’ajout d ’aciclovir dans le milieu nutritif a un effet positif significatif seulement à partir de 400 mg / 2,5 Kg de milieu. Les doses supérieures à celle-ci réduisent le taux de survie, elle est donc optimale.
