IV. Résultats et discussion
IV.2. Evaluation de quelques performances de la culture
IV.3.2. L’auto-agrégation et la co-agrégation
IV.3.1.2. La tolérance aux sels biliaires : La résistance aux sels biliaires est généralement considérée comme une propriété essentielle pour les souches probiotiques pour survivre aux conditions de
l'intestin grêle, également elle est le deuxième critère de sélection des probiotiques.
Les résultats obtenus pour la tolérance à la bile sont illustrés par les figures 28, 29 et 30. Après 4h d’incubation, nous pouvons noter qu’il y à une variabilité de la viabilité de la souche ré-isolée des différents matrices alimentaires.
Les résultats de la figure 28, montrent que la présence de 0.3% de sels biliaires dans le milieu affecte le pourcentage de survie de L.plantarum ré-isolée des différentes matrices d’origine bovine. Cela dit, après 4 h d’incubation et en présence de 0.3% de sels biliaires, il apparait que la survie et le nombre de cellules sont meilleurs avec la souche ré-isolée du bouillon MRS avec un nombre de cellules viables de 9×1012/ml, correspondant à une survie supérieure à 60%. Cependant, une bonne résistance aux sels biliaires est remarquable avec la souche ré-isolée du beurre fermenté de vache, ou nous constatons que survie est de 66.02%, correspondante à un nombre de cellules viable sur ce milieu hostile de 7×1012/ml.
Avec la même espèce ré- isolée du lait entier fermenté, il apparait que le taux de survie sur le milieu au SB dépasse les 60%. En revanche, il y à perte de 50% de cellules sur le même milieu hostile lorsque la souche est ré-isolée de lait écrémé fermenté.
Figure 29. Effet des sels biliaires sur la croissance de L. plantarum S10 ré-isolée des laits entier
fermenté, écrémé fermenté, beurre fermenté de vache et du bouillon MRS.
Cependant, l’application du test sur la souche ré-isolée des différentes matrices d’origine caprine a montré que le lait entier fermenté a agit en faveur d’une bonne résistance de la souche sur le milieu à 0.3% de sels biliaires, le pourcentage de survie est 89.76%, correspondant à un nombre de cellules de
0 10 20 30 40 50 60 70
lait entier lait écrémé beurre bouillon MRS
Su rv ie ( % ) C e llu le s× 10 12/ml
3× 1012/ml. Cependant, la survie était comparable pour la souche ré-isolée du lait écrémé fermenté, du beurre fermenté et du bouillon MRS, le pourcentage étant en moyenne de 66%.
Comparativement aux résultats trouvés avec les matrices d’origine bovine, le lait de chèvre entier fermenté agit en faveur d’une bonne résistance aux sels biliaires.
Figure 30. Effet des sels biliaires sur la croissance de L. plantarum S10 ré-isolée des laits entier fermenté, écrémé fermenté, beurre fermenté de chèvre et du bouillon MRS.
Figure 31. Effet des sels biliaires sur la croissance de L. plantarum S10 ré-isolée des laits entier
fermenté, écrémé fermenté, beurre fermenté de chamelle et du bouillon MRS.
Par ailleurs et contrairement aux résultats déjà cités en haut, la souche ré-isolée de la crème fermentée et du lait entier fermenté de chamelle, a montré une excellente résistance aux sels biliaire pour laquelle, le pourcentage de la survie est aux alentours de 87%, correspondant à un nombre de cellules viable compris entre 8 et 10× 1012/ ml. De même, la souche ré-isolée du lait écrémé fermenté a montré une bonne survie sur le milieu hostile, le pourcentage était de 76.20% (4× 1012 cellules/ml).
0 20 40 60 80 100
lait entier lait écrémé beurre bouillon MRS
Su rv ie '% ) C e llu le s× 10 12/ml ) Matrices et bouillon MRS
%de survie nombre de cellules en présence de sel nombre de cellules en absance de sel
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
lait entier lait écrémé beurre bouillon MRS
Su rv ie ( % ) C e llu le s× 10 12/ml ) Matrices et bouillon MRS
A travers ces résultats, les produits à base de lait de chamelle, le lait entier de chèvre fermenté sont les meilleures matrices, ayant permis à la souche de montrer une bonne survie sur un tel milieu hostile.
Notre souche a pu se développer sur le milieu à 0.3% de sels biliaires, donc elle est dotée d’une
aptitude probiotique, cela se confirme par ce qui a été rapporté par Šuškovi et al. (2000), ces auteurs
ont mentionné qu’il est nécessaire pour une bactérie, caractérisée de probiotique de se développer
dans un milieu aux concentrations de sels biliaires allant de 0,15 à 0,30% (p / v).
Nos résultats vont également et ceux de l’étude menée par Kalui et al. (2009), ces auteurs ont trouvé
que 18 des 19 L. plantarum testés ont pu croitre dans du bouillon additionné de 0,3% de sels biliaires.
D’après Sieladie et al. (2011), l'activité hydrolytique des sels biliaires (BSH) par les lactobacilles
probiotiques est un des mécanismes permettant la résistance à la toxicité des sels biliaires conjugués dans le duodénum.
Le nombre de preuves sur les avantages des probiotiques pour la santé a fait qu’il y à eu un développement considérable du marché mondial des ingrédients probiotiques.
Les résultats des différentes parties de la présente étude ont montré, que la souche L.plantarum S10 s’est comportée différemment sur les milieux aux sources de matières grasses, elle a une aptitude lipolytique in vitro sur la gélose blanche au tween. De même, les résultats de l’activité lipolytique dans les beurres de trois différentes origines a montré d’après les chromatogrammes, l’apparition des acides gras de type Omega-3, oléique et arachidonique. Ces résultats ouvrent une autre piste de recherche.
Dans une deuxième partie expérimentale, L. plantarum S10 a montré de bonnes aptitudes technologiques, elle est bonne acidifiante, avec des aptitudes techno fonctionnelles sur les laits de vache, chèvre et chamelle, ce qui laisse supposer son utilisation possible pour la production de lait fermentés.
Dans une troisième partie, le ré-isolement de la souche des matrices fermentées et l’évaluation de ses principales aptitudes probiotiques a montré qu’in vitro, L.plantatum a une bonne résistance aux conditions hostiles à savoir les bas pH et la présence de sels biliaires, elle a des surfaces hydrophiles donc une affinité pour des solvants bien déterminés, enfin, elle a une forte capacité d’adhésion au tissu épithéliale et mucus, ce qui nous laisse déduire l’absence d’une corrélation entre l’hydrophobicité et l’adhésion. Cependant, le lait de chèvre entier est la matrice alimentaire la plus adéquate pour véhiculer notre souche.
Les résultats de notre recherche permettent d’ouvrir de nouvelles perspectives. Donc pour compléter ce travail, nous proposons :
Compléter l’étude sur l’activité lipolytique et faire appel aux techniques de biologie moléculaire pour une meilleure caractérisation des gènes qui codent pour les enzymes lipolytiques ;
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