hélicase, elle n’est peut-être pas suffisante pour permettre la séparation complète du double brin.
Une publication très récente révèle qu’il est possible de suivre une activité hélicase incomplète en
utilisant les propriétés de l’intercalant fluorescent de l’ADN « SYBR Green I » [173]. Cet intercalant
est spécifique des substrats double brin, sa fluorescence décroit fortement en présence d’un ADN
simple brin. Comme la fluorescence est maximale en début de réaction, une activité hélicase partielle
pourra quand même être observée par une décroissance de la fluorescence. Cette approche pourrait
être testée afin d’estimer si le complexe H-P d’EBV possède une faible activité hélicase, de plus elle
est peu couteuse et facilement réalisable. Il faudrait aussi poursuivre les tests hélicases en affinant
encore les conditions car les hélicases ont besoin de conditions très strictes pour être actives.
L’absence d’un seul composant ou une concentration non adaptée peut bloquer l’activité hélicase du
complexe.
176
Partie V :
177
Conclusion :
Le travail réalisé au cours de ma thèse a permis de produire le complexe H-P d’EBV sous
forme soluble et de pouvoir débuter des analyses structurales et enzymatiques. L’avancement actuel
du projet permet d’étudier la structure et les activités du complexe. Les résultats à venir
contribueront à la description et la compréhension du rôle du complexe H-P d’EBV. Ce futur permet
aussi d’envisager des informations complémentaires pour le mécanisme de réplication des
herpèsvirus en ayant les caractéristiques d’un complexe H-P d’un γ-herpès virus qui pourront être
directement comparées à celles déjà connues pour les α-herpèsvirus. Personnellement je suis déçu
de ne pas pouvoir poursuivre les investigations sur le complexe H-P d’EBV. Mais le travail que j’ai
réalisé durant ma thèse pose les bases de l’expression et de la purification du complexe facilitant les
investigations structurales et enzymatiques du complexe H-P d’EBV.
178
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Dans le document
Etudes fonctionnelles et structurales des complexes Hélicase-Primase du virus Epstein-Barr
(Page 192-198)