ROM 2. RAM

Embora a medicina popular informações referentes a atividades biológicas, permtindo identificar e caracterizar princípios ativos, o uso popular de uma espécie não é um condicionante para afirmar a ausência de efeitos tóxicos, sendo necessária uma avaliação farmacológica. Um exemplo desta situação são os efeitos tóxicos do óleo de copaíba (Copaifera langsdorfii Desf.) observados em camundongos, em detrimento do amplo uso do mesmo na medicina tradicional para o tratamento de processos inflamatórios (LOURENÇO et al., 2009).

A isto deve ser somado o uso indiscriminado de associações de diversas plantas medicinais em preparações artesanais, havendo portanto necessidade de determinar os efeitos tóxicos de plantas utilizadas pela medicina popular para garantir a segurança no uso dessas espécies para fins medicinais, e, ainda, prover dados visando a descoberta de novos fármacos.

Neste contexto, foi avaliada a toxicidade aguda dos extratos de folhas de

L. tomentosa, L. rigida, C. impressa, Spondias mombin × Spondias tuberosa e Turnera ulmifolia Linn. var. elegans, de acordo com o Acute Toxic Class Method (1997) para teste de dose aguda tóxica (Guideline 423), em ratos Wistar, fêmeas e machos através da estimativa da DL50. Um aspecto a ser

destacado é o fato desta avaliação não ter seguido as normas brasileiras quanto ao número de animais, face à limitação estabelecida no uso de animais em experimentos (ISBRUCKER et al., 2011).

Os resultados experimentais com os extratos de folhas de L. tomentosa,

L. rigida, C. impressa, Spondias mombin × Spondias tuberosa e Turnera ulmifolia Linn. var. elegans não indicaram nenhuma alteração bioquímica,

hematológica e comportamental nos animais.

Na bioprospecção de fitoterápicos, as doses a serem utilizadas em experimentos com animais devem ser suficientes para se observar um possível efeito adverso e estimar a DL50. O uso de uma dose limite de 2000 mg/kg é suficiente para estimar a DL50 e classificar o produto conforme a GHS

(Globally Harmonised System). Em relação à toxicidade oral aguda dos extratos em estudo, os animais receberam doses de 300 mg/kg e 2000 mg/kg, não exibindo nenhum sinal de efeito adverso após 14 dias de observação. De acordo com a GHS, os extratos foram calssificados como de classe 5.

O screening hipocrático é um ensaio de triagem prévia útil para avaliar as atividades fármaco-toxicológicas. Através deste teste, os animais não apresentaram alterações na atividade geral, consciência e, sensibilidade. A necropsia dos animais não evidenciou alterações macroscópicas que justificasse um estudo histopatológico dos órgãos. Uma idêntica situação foi observada quanto às avaliações bioquímicas.

A análise dos parâmetros hematológicos e bioquímicos apresentaram resultados dentro dos limites normais após o tratamento. Isto indicou que os extratos não provocaram nenhum efeito toxico detectável. Assim, a administração oral dos extratos nas diferentes doses não apresentou danos nos órgãos envolvidos na farmacocinética de drogas, o qual foi evidenciado através das análises referentes à função hepática (AST, ALT, GGT, bilirrubinas e proteínas), principal órgão de biotransformação, e à função renal (creatinina e ureia), principal órgão excretor, assim como nas análises do metabolismo basal (glicose, triglicerídeos e amilase). Os resultados experimentais estão em consonância com a teoria dos órgãos alvo da toxicidade, quanto à biotransformação de espécies químicas no fígado e na excreção de metabólitos pelos rins (MAPHOSA, MASIKA & MOYO, 2010).

As avaliações in vitro e in vivo são capazes de predizer efeitos adversos em humanos expostos às espécies químicas, sendo importantes ferramentas em estudos toxicológicos. Esta etapa, denominada ensaio de toxicidade pré- clínica, representa ganhos na segurança do uso, e econômicos no desenvolvimento de novos fármacos (OLSON et al., 2000; FUCHS et al., 2012;).

Estudos de atividade farmacológica têm evidenciado o potencial terapêutico de diversas espécies (BRITO et al., 2012; NETO et al., 2013; FEITOSA, XAVIER E RANDAU, 2012; SILVA, G. A. et al., 2012; SILVA, J. B. N.

F. et al., 2012; SZEWCZYK E ZIDORN, 2014). Contudo, poucos são aqueles mostrando o potencial toxicológico. (NETO et al., 2013; SILVA et al., 2014; SZEWCZYK E ZIDORN, 2014).

Neste sentido, destaca-se a avaliação da letalidade frente a A. salina do extrato de folhas de Spondias mombin×Spondias tuberosa, o qual não indicou toxicidade nas condições experimentais, conforme descrito por Silva et al. (2012). Diferentemente, as folhas de L. rigida estão associadas a efeitos tóxicos observados em ruminantes (SCHONS et al., 2012). Todavia, não há ensaios toxicológicos padronizados para as espécies em estudo, os quais possibilitem a segurança do uso dessas espécies.

A avaliação da toxicidade deve ser determinada para garantir a segurança no uso medicinal das espécies em estudo, face ao indiscriminado emprego pela medicina popular. Para isto, há necessidade de estabelecer a identidade química de qualquer espécie.

Assim, para determinar a toxicidade, os extratos foram estudados quanto a sua fitocomposição através da quantificação de fenólicos totais e a identificação e quantificação do composto majoritário. Esta análise estabeleceu os extratos como fontes de compostos fenólicos, ácido gálico, o composto majoritário presente no extrato de C. impressa Prance, e flavonoides-3-O- glicosilados, como a rutina presente no extrato de S. mombin×S. tuberosa, além de flavonoides não identificados nos extratos deT. ulmifolia Linn. var.

elegans, L. tomentosa e L. rigida. Diversos estudos já indicaram a presença de

compostos fenólicos e flavonoides nesses extratos, bem como a sua relação com a atividade farmacológica, que é atribuída a essas espécies pelo uso popular (BRITO et al., 2012; FEITOSA, XAVIER & RANDAU, 2012; SILVA, G. A. et al., 2012; SILVA, J. B. N. F. et al., 2012; SZEWCZYK E ZIDORN, 2014).

Portanto, a avaliação de toxicidade aguda é necessária para verificar e classificar as substâncias quanto a sua capacidade de provocar danos agudos aos organismos vivos, em altas doses, especialmente no que se refere a injúrias anátomo-patológicas e letalidade. Isto pode oferecer uma contribuição para estabelecer parâmetros de segurança - juntamente com outros dados de

toxicidade - para a saúde humana (PAIXÃO MAIOLI, 2014). Quanto a vegetais, esta avaliaçao é útil para identificar a toxicidade que uma planta possa apresentar para minimizar o equívoco popular em acreditar que produtos naturais são desprovidos de efeitos tóxicos ou adversos.

As espécies estudadas neste trabalho são amplamente utilizadas pela população, havendo avaliações armacológicas escassas no referente aos riscos da administração por via oral. A estimativa da segurança dos medicamentos e de produtos vegetais por via oral é realizada em modelo animal, mimetizando uma situação de uso e/ou exposição humana. Uma ótima correlação tem estabelecida entre roedores (ratos ou camundongos) e o homem, pois a administração de doses elevadas ou limites, assim como aquelas próximas, às de uso humano em animais experimentais fornece resultados válidos na investigação de efeitos agudos tóxicos (TUROLLA & NASCIMENTO, 2006).

7 CONSIDERAÇÕES FINAIS

Com base nos resultados experimentais quanto à fitocomposição, atividades biológicas in vitro e ex vivo, e a avaliação da toxicidade aguda pode-se concluir que:

1. A rutina foi caracterizada como o composto majoritário nos extratos e fração rica em flavonoides de Spondias mombin×Spondias tuberosa;

2. O ácido gálico foi identificado como composto majoritário no extrato de C.

impressa, primeiro relato de identificação de composto químico descrito

para este gênero;

3. Os flavonóis-3-O-glicosilados foram caracterizados como a classe de compostos majoritários em L. tomentosa, L. rigida e Turnera ulmifolia Linn. var. elegans;

4. O método análitico desenvolvido e validado se mostrou eficaz na determinação dos componentes majoritários dos extratos de L. tomentosa,

L. rigida, C. impressa, Spondias mombin × Spondias tuberosa e Turnera ulmifolia Linn. var. elegans;

5. Os extratos aquoso, etanólico e metanólico, e suas frações obtidos de folhas de L. tomentosa, L. rigida, C. impressa, Spondias mombin×Spondias

tuberosa e Turnera ulmifolia Linn. var. elegans, ricos em compostos

fenolicos, apresentaram uma eficiente capacidade antioxidante, demonstrada pelo sequestro do radical DPPH•;

6. A FRF de Spondias mombin×Spondias tuberosa apresentou uma ótima ação antihemolítica e antioxidante e ao inibir a peroxidação lipídica e aumentar o conteúdo da GSH e apresentar alto poder redutor;

7. A atividade antioxidante observada com a FRF de Spondias mombin×Spondias tuberosa deve ser resultado da ação direta da

quercetina e seus glicosilados presentes nesa fração;

8. Os extratos e as frações de Spondias mombin×Spondias tuberosa apresentaram atividade antimicrobiana moderada;

9. Todos os extratos metanólicos de folhas das plantas em estudo não apresentaram toxicidade oral aguda em ratos fêmeas e machos.

REFERÊNCIAS

AGRA, Maria de Fátima et al. Medicinal and poisonous diversity of the flora of ―Cariri Paraibano‖, Brazil. Journal of Ethnopharmacology, v. 111, n. 2, p. 383-395, 2007.

AGUIAR, Francisco Léo Nascimento de. Avaliação do Potencial Antifúngico de Produtos de plantas em cepas de Candida Albicans e Microsporum Canis isoladas de Cães d Gatos: Um Destaque para Moringa Oleifera e Vernonia sp. Dissertação. Programa de Pós- Graduação em Ciências Veterinárias da Faculdade de Veterinária da Universidade Estadual do Ceará. 2010.

ALARCON-AGUILARA, F. J. et al. Study of the anti-hyperglycemic effect of plants used as antidiabetics. Journal of Ethnopharmacology, v. 61, n. 2, p. 101-110, 1998.

ALOTHMAN, M.; BHAT, Rajeev; KARIM, A. A. Antioxidant capacity and phenolic content of selected tropical fruits from Malaysia, extracted with different solvents. Food Chemistry, v. 115, n. 3, p. 785-788, 2009.

ANDRADE, Sanderley Emanuel Oliveira et al. Estudo etnobotânico de plantas medicinais na comunidade Várzea Comprida dos Oliveiras, Pombal, Paraíba, Brasil. Revista Verde de Agroecologia e Desenvolvimento Sustentável, v. 7, n. 3, p. 46-52, 2012.

ANTONIO, M. A.; BRITO, ARM Souza. Oral anti-inflammatory and anti-ulcerogenic activities of a hydroalcoholic extract and partitioned fractions of Turnera ulmifolia (Turneraceae). Journal of Ethnopharmacology, v. 61, n. 3, p. 215-228, 1998.

ANVISA, Agência Nacional de Vigilância Sanitária. Resolução no. 88 de 16 de março de 2004. Dispõe sobre a Lista de referências bibliográficas para avaliação de segurança e eficácia de fitoterápicos. DOU. Poder Executivo, Brasília, DF, 2004.

ANVISA, Agência Nacional de Vigilância Sanitária. Resolução R.E. Nº 899, de 29 de Maio de 2003. Diário Oficial da República Federativa do Brasil, Brasília DOU de, v. 2, n. 06, 2003.

ARBO, M. M. Turneraceae (Turnera Family). Em: Smith et al.(Eds.) Flowering Plants of Neotropics, 2004.

ARLETTI, R. et al. Stimulating property of Turnera diffusa and Pfaffia paniculata extracts on the sexual behavior of male rats.Psychopharmacology, v. 143, n. 1, p. 15-19, 1999. ASSIS, Tales S. et al. Intoxicações por plantas em ruminantes e equídeos no Sertão Paraibano. Pesqui. vet. bras, v. 29, n. 11, p. 919-924, 2009.

AZNAR, Òscar et al. Determination of polyphenols in wines by liquid chromatography with UV spectrophotometric detection. Journal of separation science, v. 34, n. 5, p. 527-535, 2011.

BARDON, Léa et al. Origin and evolution of Chrysobalanaceae: insights into the evolution of plants in the Neotropics. Botanical Journal of the Linnean Society, v. 171, n. 1, p. 19- 37, 2013.

BEUTLER, E.; KELLY, Barbara M. The effect of sodium nitrite on red cell GSH. Experientia, v. 19, n. 2, p. 96-97, 1963.

BONA, Karine Santos et al. Protective effect of gallic acid and Syzygium cumini extract against oxidative stress-induced cellular injury in human lymphocytes. Drug and Chemical Toxicology, n. ahead-of-print, p. 1-8, 2015.

BRAND-WILLIAMS, W.; CUVELIER, M. E.; BERSET, C. L. W. T. Use of a free radical method to evaluate antioxidant activity. LWT-Food Science and Technology, v. 28, n. 1, p. 25-30, 1995.

BRASIL 2006b. Presidência da República. Decreto no. 5813 de 22 de junho de 2006. Aprova a Política Nacional de Plantas Medicinais e Fitoterápicos. DOU. Poder Executivo, Brasília, DF, 2006b.

BRASIL. Ministério da Saúde. Portaria no. 971, de 03 de maio de 2006. Aprova a Política Nacional de Práticas Integrativas e Complementares (PNPIC) no Sistema Único de Saúde. DOU. Poder Executivo, Brasília, DF, 2006a.

CAO, Guohua; SOFIC, Emin; PRIOR, Ronald L. Antioxidant and prooxidant behavior of flavonoids: structure-activity relationships. Free Radical Biology and Medicine, v. 22, n. 5, p. 749-760, 1997.

CASTILHO, Rachel O. et al. A survey of chemistry and biological activities of Chrysobalanaceae. Anais da Academia Brasileira de Ciências, v. 72, n. 2, p. 292-293, 2000.

CASTILHO, Rachel O.; OLIVEIRA, Rodrigo R.; KAPLAN, Maria AC. Licanolide, a new triterpene lactone from Licania tomentosa. Fitoterapia, v. 76, n. 6, p. 562-566, 2005. CASTILHO, Rachel Oliveira; KAPLAN, Maria Auxiliadora Coelho. Chemical constituents of

Licania tomentosa Benth. (Chrysobalanaceae). Química Nova, v. 31, n. 1, p. 66-69, 2008.

CHAFFAUD, M.; EMBERGER, L. 1960. Traité de Botanique Systematique Vol. II. Paris: Masson, p. 1338-1340.

CHAVES, E. M. F.; BARROS, R. F. M. Diversidade e uso de recursos medicinais do carrasco na APA da Serra da Ibiapaba, Piauí, Nordeste do Brasil. Revista Brasileira de Plantas Medicinais, v. 14, p. 476-486, 2012.

CHISTÉ, Renan C. et al. Carotenoids are effective inhibitors of in vitro hemolysis of human erythrocytes, as determined by a practical and optimized cellular antioxidant assay. Journal of food science, v. 79, n. 9, p. H1841-H1847, 2014.

CORADIN, Lidio; GIANNASI, David E.; PRANCE, Ghillean T. Chemosystematic studies in the Chrysobalanaceae. I. Flavonoids in Parinari.Brittonia, v. 37, n. 2, p. 169-178, 1985. CRAGG, Gordon M.; NEWMAN, David J. Natural products: a continuing source of novel drug leads. Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-General Subjects, v. 1830, n. 6, p. 3670-3695, 2013.

CRISTEA, Daniela; BAREAU, Isabelle; VILAREM, Gerard. Identification and quantitative HPLC analysis of the main flavonoids present in weld (Reseda luteola L.). Dyes and Pigments, v. 57, n. 3, p. 267-272, 2003.

DANTAS, V. S. et al. Análise das garrafadas indicadas pelos raizeiros na cidade de campina grande PB. Revista de Biologia e Farmácia, v. 3, n. 1, 2008.

DIAS, Daniel A.; URBAN, Sylvia; ROESSNER, Ute. A historical overview of natural products in drug discovery. Metabolites, v. 2, n. 2, p. 303-336, 2012.

DRÖGE, Wulf; SCHIPPER, Hyman M. Oxidative stress and aberrant signaling in aging and cognitive decline. Aging cell, v. 6, n. 3, p. 361-370, 2007.

EBERHARDT, Marian V.; LEE, Chang Yong; LIU, Rui Hai. Nutrition: antioxidant activity of fresh apples. Nature, v. 405, n. 6789, p. 903-904, 2000.

ELOY, Christinne Costa et al. Apropriação e proteção dos conhecimentos tradicionais no Brasil: a conservação da biodiversidade e os direitos das populações tradicionais. Revista Gaia Scientia, v. 8, n. 2, 2015.

ERLEJMAN, A. G. et al. The interaction of flavonoids with membranes: potential determinant of flavonoid antioxidant effects. Free radical research, v. 38, n. 12, p. 1311- 1320, 2004.

FARIAS, Davi Felipe et al. Antibacterial, antioxidant, and anticholinesterase activities of plant seed extracts from Brazilian semiarid region. BioMed research international, v. 2013, 2013.

FARMACOPÉIA BRASILEIRA. 5ª ed. São Paulo: Editora Atheneu, 2010.

FEITOSA, Evanilson Alves; XAVIER, Haroudo Satiro; RANDAU, Karina Perrelli. Chrysobalanaceae: traditional uses, phytochemistry and pharmacology. Revista Brasileira de Farmacognosia, v. 22, n. 5, p. 1181-1186, 2012.

FERNANDES, Janaina et al. Pentacyclic triterpenes from Chrysobalanaceae species: cytotoxicity on multidrug resistant and sensitive leukemia cell lines. Cancer letters, v. 190, n. 2, p. 165-169, 2003.

FERREIRA, Isabel CFR et al. Free-radical scavenging capacity and reducing power of wild edible mushrooms from northeast Portugal: Individual cap and stipe activity. Food Chemistry, v. 100, n. 4, p. 1511-1516, 2007.

FUCHS, Tobias Christian et al. Evaluation of novel acute urinary rat kidney toxicity biomarker for subacute toxicity studies in preclinical trials.Toxicologic pathology, v. 40, n. 7, p. 1031-1048, 2012.

GALVEZ, Julio et al. Intestinal antiinflammatory activity of a lyophilized infusion of Turnera

ulmifolia in TNBS rat colitis. Fitoterapia, v. 77, n. 7, p. 515-520, 2006.

GANESAN, P.; KUMAR, Chandini S.; BHASKAR, N. Antioxidant properties of methanol extract and its solvent fractions obtained from selected Indian red seaweeds. Bioresource Technology, v. 99, n. 8, p. 2717-2723, 2008.

GUERRA, Natan Medeiros et al. Usos locais de espécies vegetais nativas em uma comunidade rural no semiárido nordestino (São Mamede, Paraíba, Brasil). Biofar., Vol. Especial, p. 184-201, 2012.

HALLIWELL, B. H.; GUTTERIDGE, J. M. C. Free radicals in biology and medicine 4th edn. 2007.

HALLIWELL, Barry. Free radicals and antioxidants: updating a personal view.Nutrition reviews, v. 70, n. 5, p. 257-265, 2012.

HALLIWELL, Barry. The antioxidant paradox: less paradoxical now?. British journal of clinical pharmacology, v. 75, n. 3, p. 637-644, 2013.

HAMMER, Katherine A.; CARSON, C. F.; RILEY, T. V. Antimicrobial activity of essential oils and other plant extracts. Journal of applied microbiology, v. 86, n. 6, p. 985-990, 1999. HASSAN, Sherif TS; MASARČÍKOVÁ, Radka; BERCHOVÁ, Kateřina. Bioactive natural products with anti‐herpes simplex virus properties. Journal of Pharmacy and Pharmacology, 2015.

IBRAHIM, Darian M. Reduce, refine, replace: The failure of the three R's and the future of animal experimentation. In: University of Chicago Legal Forum. 2006. p. 06-17.

ISBRUCKER, Richard et al. Alternative methods and strategies to reduce, refine, and replace animal use for human vaccine post-licensing safety testing: state of the science and future directions. Procedia in Vaccinology, v. 5, p. 47-59, 2011.

JAKOBEK, L. Interactions of polyphenols with carbohydrates, lipids and proteins. Food Chemistry. v. 175, p. 556–567, 2015.

KITAGAWA, Shuji; SAKAMOTO, Hiromi; TANO, Hiromi. Inhibitory effects of flavonoids on free radical-induced hemolysis and their oxidative effects on hemoglobin. Chemical and pharmaceutical bulletin, v. 52, n. 8, p. 999-1001, 2004.

KROES, B. H. et al. Anti-inflammatory activity of gallic acid. Planta medica, v. 58, n. 6, p. 499-504, 1992.

LEONTI, Marco; CASU, Laura. Traditional medicines and globalization: current and future perspectives in ethnopharmacology. Frontiers in pharmacology, v. 4, 2013.

LOURENÇO, A. et al. Óleo de copaíba (Copaifera langsdorfii Desf.) em padrões reprodutivos de camundongos e no desenvolvimento embriofetal. Rev. Bras. Pl. Med., v. 11, n. 4, p. 407–413, 2009.

MABRY, Tom J.; MARKHAM, Kenneth R.; THOMAS, Michael Barrie. The ultraviolet spectra of flavones and flavonols. Springer Berlin Heidelberg, 1970.

MACEDO, Elizabeth Valverde; GEMAL, Andre L. A produção de fitomedicamentos e a Política Nacional de Plantas Medicinais e Fitoterápicos.Rev. Bras. Farm, v. 90, n. 4, p. 290-297, 2009.

MACEDO, José Benilson Martins. Capacidade antioxidante in vitro e avaliação da toxicidade aguda in vivo de extratos de folhas de Licania rigida Benth., Licania tomentosa (Benth.) Fritsch e Couepia impressa Prance (Chrysobalanaceae). Dissertação. Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas da Universidade Federal do Rio Grande do Norte. 2011.

MACHADO, Roselis Ribeiro Barbosa et al. Árvores nativas para a arborização de Teresina, Piauí. Revista da Sociedade Brasileira de Arborização Urbana, v. 1, n. 1, p. 10-18, 2006.

MACIEL, M. A. M. et al. Plantas medicinais: a necessidade de estudos multidisciplinares. Química Nova, v. 25, n. 3, p. 429–438, 2002.

MAPHOSA, V.; MASIKA, P. J.; MOYO, B. Toxicity evaluation of the aqueous extract of the rhizome of Elephantorrhiza elephantina (Burch.) Skeels.(Fabaceae), in rats. Food and chemical toxicology, v. 48, n. 1, p. 196-201, 2010.

MATA, Élida Cleyse Gomes da. Avaliação de atividade antiretroviral de plantas amazônicas utilizando como modelo o vírus da imunodeficiência símia. 2011.

MEDA, Aline et al. Determination of the total phenolic, flavonoid and proline contents in Burkina Fasan honey, as well as their radical scavenging activity.Food chemistry, v. 91, n. 3, p. 571-577, 2005.

MEDEIROS, Fernando Antônio de et al. Licanol, a new flavanol, and other constituents from the Licania macrophylla Benth. Química Nova, v. 35, n. 6, p. 1179-1183, 2012.

MELO, Naama Jessica de Assis. Potencial tóxico, citotóxico e mutagênico de extratos aquosos de Licania rigida (Chrysobalanaceae) em células in vivo. Tese. Programa de Pós- Graduação em Produção animal da Universidade Federal do Rio Grande do Norte e Universidade Federal Rural do Semiárido. 2015.

MEYER, B. N. et al. Brine shrimp: a convenient general bioassay for active plant constituents. Planta medica, n. 45, p. 31-4, 1982.

MIRANDA, M. M. F. S. et al. Anti-herpes simplex virus effect of a seed extract from the tropical plant Licania tomentosa (Benth.) Fritsch (Chrysobalanaceae). Phytomedicine, v. 9, n. 7, p. 641-645, 2002.

MOLYNEUX, Philip. The use of the stable free radical diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for estimating antioxidant activity. Songklanakarin J Sci Technol, v. 26, n. 2, p. 211-219, 2004.

MONTEDORO, Gianfrancesco et al. Simple and hydrolyzable phenolic compounds in virgin olive oil. 1. Their extraction, separation, and quantitative and semiquantitative evaluation by HPLC. Journal of Agricultural and Food Chemistry, v. 40, n. 9, p. 1571-1576, 1992. NARAIN, Narendra; SOUSA GALVAO, Mércia; MADRUGA, Marta Suely. Volatile compounds captured through purge and trap technique in caja-umbu (Spondias sp.) fruits during maturation. Food Chemistry, v. 102, n. 3, p. 726-731, 2007.

NASCIMENTO, M. A. et al. Turnera ulmifolia L.(Turneraceae): preliminary study of its antioxidant activity. Bioresource technology, v. 97, n. 12, p. 1387-1391, 2006.

NETO, Fausto Carnevale et al. Chrysobalanaceae: secondary metabolites, ethnopharmacology and pharmacological potential. Phytochemistry reviews, v. 12, n. 1, p. 121-146, 2013.

NIKI, Etsuo et al. Oxidative hemolysis of erythrocytes and its inhibition by free radical scavengers. Journal of Biological Chemistry, v. 263, n. 36, p. 19809-19814, 1988.

NOGUEIRA, Renata Campos; CERQUEIRA, Harley Ferreira de; SOARES, Milena Botelho Pereira. Patenting bioactive molecules from biodiversity: the Brazilian experience. Expert opinion on therapeutic patents, v. 20, n. 2, p. 145-157, 2010.

NSIMBA, Robert Yawadio; KIKUZAKI, Hiroe; KONISHI, Yotaro. Antioxidant activity of various extracts and fractions of Chenopodium quinoa and Amaranthus spp. seeds. Food Chemistry, v. 106, n. 2, p. 760-766, 2008.

NUNES, Mauro Eugênio Medina et al. Atividade Antioxidante de Plantas Brasileiras em Modelo de Estresse Oxidativo in vitro. Anais do Salão Internacional de Ensino, Pesquisa e Extensão, v. 5, n. 2, 2013.

OLIVEIRA, Gilvânia Costa de. Plantas medicinais utilizadas em comunidades rurais do município de Alagoa Nova–PB. 2013.

OLSON, Harry et al. Concordance of the toxicity of pharmaceuticals in humans and in animals. Regulatory Toxicology and Pharmacology, v. 32, n. 1, p. 56-67, 2000.

OMS, Organização Mudial da Saúde. WHO monographs on selected medicinal plants. World Health Organization, 2002.

ORGANIZATION FOR ECONOMIC CO-OPERATION AND DEVELOPMENT (OECD). OECD Guideline for the testing of chemicals: Acute oral toxicity – Acute toxic class method. Paris: OECD, 1996. Guideline n. 423.

PAIXÃO MAIOLI, Maria Angélica. Análise crítica da legislação para registro de produtos biossimilares em países latino-americanos face às diretrizes da Organização Mundial da Saúde. JBES: Brazilian Journal of Health Economics/Jornal Brasileiro de Economia da Saúde, v. 6, n. 3, 2014.

PAPASTERGIADIS, Antonios et al. Malondialdehyde measurement in oxidized foods: evaluation of the spectrophotometric thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) test in various foods. Journal of agricultural and food chemistry, v. 60, n. 38, p. 9589-9594, 2012.

PEREIRA JR, Lécio Resende Pereira et al. Espécies da Caatinga como Alternativa para o Desenvolvimento de Novos Fitofármacos. Floresta e Ambiente, v. 21, n. 4, p. 509-520, 2014.

PINELO, Molina et al. Extraction of antioxidant phenolics from almond hulls (Prunus

amygdalus) and pine sawdust (Pinus pinaster). Food Chemistry, v. 85, n. 2, p. 267-273,

2004.

PIO-CORRÊA, M. Dicionário das Plantas Úteis do Brasil e das Exóticas Cultivadas Vol. 5. Rio de Janeiro, Brasil: Desenvolvimento Florestal, Ministério da Agricultura, 1974. RAI, Mahendra K. et al. (Ed.). Medicinal plants: biodiversity and drugs. CRC Press, 2012.

ROQUE, A. A.; ROCHA, R. M.; LOIOLA, M. I. B. Uso e diversidade de plantas medicinais da Caatinga na comunidade rural de Laginhas, município de Caicó, Rio Grande do Norte (Nordeste do Brasil). Revista Brasileira de Plantas Medicinais, v. 12, n. 1, p. 31-42, 2010.

ROSSATTO, Davi Rodrigo; TSUBOY, Marcela Stefanini Ferreira; FREI, Fernando. Arborização urbana na cidade de Assis-SP: uma abordagem quantitativa. Revista da