Résultats de l’effet du plomb sur les souches bactériennes isolées

V.2.1. Résultats de l’effet du plomb sur les souches bactériennes isolées sur milieu liquide La croissance des souches bactériennes isolées qui est réalisée sur bouillon nutritif en présence de différentes concentrations est présentée dans Tableau (annexe III).

Les résultats de la FTAM, E. coli, streptocoques et les deux souches des entérobactéries sont présentés respectivement dans les figures 15-19.

Figure 06: Croissance de la FTAM sur milieu liquide en présence de plusieurs concentrations des nitrates de plomb après 24 heures.

Figure 07: Croissance d’E.coli sur milieu liquide en présence de plusieurs concentrations des nitrates du plomb après 24 heures.

Figure 08: Croissance de streptocoque sur milieu liquide en présence de plusieurs concentrations de nitrates de plomb après 24 heures.

Figure 09: Croissance de la souche 1

d’entérobactéries sur milieu liquide en présence de plusieurs concentrations de nitrates de plomb après 24 heures.

Figure 10: Croissance de la souche 2 des entérobactéries sur milieu liquide en présence de plusieurs concentrations de nitrates de plomb après 24 heures.

0 0,2 0,4 0,6 0,8 0 5 10 30 100 300

DO

Pb(NO₃)₂(mM) 0 0,2 0,4 0,6 0,8 0 5 10 30 100 300

DO

Pb(NO₃)₂(mM) 0 0,2 0,4 0,6 0 5 10 30 100 300

DO

Pb(NO₃)₂(mM) 0 0,2 0,4 0,6 0 5 10 30 100 300 DO Pb(NO₃)₂(mM) 0 0,5 1 0 5 10 30 100 300

DO

Pb(NO₃)₂(mM)

Chapitre V: Résultats et discussion

33

Les figures 15, 16, 17, 18 et 19 montrent que la croissance des souches bactériennes isolées varie en fonction de différentes concentrations des nitrates de plomb. Cette croissance est plus élevée en absence du plomb où on a mesuré une turbidité de 0.4 chez la souche 1 d’entérobactéries, et des turbidités variant entre 0.54 et 0.6 chez les autres souches. Une bonne croissance de toutes les bactéries est remarquable aussi lors du traitement par les concentrations 5, 10 et 30 mM, où on a mesuré des densités optiques proches à celles obtenues chez les témoins (DO entre 0.26 et 0.50), par contre, une croissance négligeable des bactéries (DO entre 0.023 et 0.1717) est notée lors d’un traitement par les concentrations 100 et 300 mM, alors que la très faible valeur est enregistrée chez

E. coli sous la concentration 300mM (DO = 0.0037) et la forte valeur est enregistrée chez la souche des streptocoquessous la même concentration (DO = 0.0037).

D’une manière générale, les résultats montrent bien que toutes les bactéries isolées à partir des eaux usées du complexe Bellara et traitées par les différentes concentrations du plomb, offrent une bonne résistance vis- à-vis de ce polluant. On peut expliquer ce résultat par le fait que les bactéries des eaux usées peuvent accumuler les métaux lourds (Belliveau et al., 1987 ; Valls et Lorenzo, 2002 ), ces résultats sont en accord avec ceux obtenus par Aiking et al. (1985) qui ont prouvé que Klebsiella aerogenes isolée à partir des eaux usées est capable de résister au Pb par bioaccumulation. Mitra et

al. (1975) ont montré qu’E. coli exposée au Cd ²⁺ est capable de l’accumuler et de le tolérer, elle réagit contre la toxicité de ce polluant par la prolongation de la phase de latence. De même,

Congeevaram et al. (2007) ont indiqué que Micrococcus sp isolée d’eaux usées d’origines industrielles est capable de résister vis-à-vis des métaux lourds tels que le chrome et le nickel et d’autres métaux lourds.

La résistance au plomb par les bactéries isolées à partir des eaux usées a été déjà étudiée par Leung et al., (2000) sur une boue dans un égout local à Hong Kong, cette étude a mis en évidence l'isolement de deux souches accumulatrices du plomb Pseudomonas pseudoalcaligenes et

Micrococcus luteus. Une autre étude réalisée par Ansari et Malik ( 2007) en Inde,a permis d’isoler plusieurs souches bactériennes capables de résister au plomb, E.coli, Pseudomonas et plusieurs souches des entérobactéries.

D’après les résultats obtenus, on constante que, plus la concentration du métal augmente plus le taux des souches sensibles est important. Cette conclusion est confirmée par Rajbanshi (2008) ; Ahemad et Malik, (2012).

Filali et al. (2000) ont montré que Ps. fluorescens et K. pneumoniae isolées à partir des eaux usées d’une zone industrielle de Casablanca au Maroc et soumises à un traitement par différentes

Chapitre V: Résultats et discussion

34

concentration du plomb, sont capables de résister à une forte concentration allant jusqu’à 500µg/ml.

V.2.2. Résultats de l’effet du plomb sur les souches bactériennes isolées sur milieu solide Les résultats ont montré que les souches isolées résistent les faibles concentrations du plomb (5, 10 et 30 mM). Par contre aucune croissance n’est remarquée en présence des concentrations 100 et 300 mM (annexe III). Ces résultats sont en accord avec ceux obtenus par Mills et Colwell (1977); Karbasizaed et al. (2003), qui ont indiqué que plusieurs souches bactériennes sont sensibles en présence de fortes concentrations du plomb et ont montré des CMI de 3200 µg/ml pour, le plomb, aussi Giller et al. (1998) ont prouvé que les microorganismes sont les premiers organismes influencés par la toxicité des métaux lourds.

Harnett et Gyles, (1984) ont découvert que plusieurs souches bactériennes ont résisté à 1 mM de nitrate de plomb mais sont restées sensibles à 10 mM, et ont testé la résistance de souches d’E. coli

et de Bacillus au plomb et à d’autres métaux. Ces auteurs ont remarqué que les souches d’E. coli

étaient capables de croitre à des concentrations de plomb atteignant 8 ppm.

D’après Sandaa et al. (1999) et Habi (2009), le plomb et les autres métaux lourds provoquent divers effets nuisibles aux bactéries, tels que l’allongement de la phase de latence, l’inhibition des activités enzymatiques, l’altération de la structure de l’ADN, la modification de la composition et de la structure des populations microbiennes

Conclusion

35

Les métaux représentent l’un des polluants les plus persistants dans l’eau, qui s’accumulent le long de la chaîne alimentaire et peuvent provoquer des risques à la fois écologiques et sanitaires, comme ils peuvent avoir des effets néfastes sur les organismes même à de très faibles concentrations, leurs effets toxiques apparait comme un enjeu majeur de la société et nécessite la mise en place par les pouvoirs publics et les sociétés privées de traitements appropriés à l’échelle locale et internationale.

Pour survivre dans des environnements contaminés en métaux, les bactéries ont développé une mécanique complexe de résistance vis-à-vis de ces métaux. La compréhension de ces mécanismes de résistance bactérienne aux métaux est importante afin de développer des processus de bioremédiation et pour comprendre et exploiter le rôle joué par les bactéries dans la tolérance et l’accumulation des métaux chez les organismes supérieurs (mollusques bivalves, spongiaires…).

Notre travail qui a été destiné à l’isolement des bactéries à partir des eaux usées du complexe sidérurgique de Bellara et l’étude de leur résistance vis- à- vis de différentes concentrations de nitrates de plomb a permis d’apporter les résultats suivants :

 Isolement de 4 souches bactériennes (E. coli, une souche de streptocoques et deux souches d’entérobactéries) en plus de la flore totale.

 une relation réflexive entre la concentration du plomb et le taux de croissance bactérienne, quand la concentration du plomb augmente ; la croissance bactérienne diminue.

 Les bactéries isolées des eaux usées du complexe sidérurgique de Bellara sont résistantes vis-à-vis des faibles concentrations de nitrates du plomb (5 mM, 10 mM et 30 mM), avec une croissance négligeable lors du traitement par les fortes concentrations (100mM et 300 mM).

 La bactérie la plus sensible est E. coli

 Les streptocoques sont les plus résistants car ils peuvent aussi se développer en présence de la forte concentration de plomb (300mM).

Finalement, ce travail ouvre des perspectives sur l'utilisation des microorganismes dans la bioremédiation de l'environnement pollué par les métaux lourds.

Références bibliographiques

36

A

Abou-Elela S.I., Kamel M.M. et Fawzy M.E. (2010), Biological treatment of saline wastewater using a salt-tolerant microorganism, Desalination, 250 :1–5.

Aggad H., Mahouz F., Ahmed Ammar Y. et Kihal M. (2009), Evaluation de la qualité hygiénique du lait dans l’ouest algérien, Revue, Medecine Veterinaire, 160 (12) :590-595.

Aguiza abai E., Ombolo A., Ngassoum M.B. et Mbawal A. (2014), Suivi de la qualité physico-chimique et bactériologique des eaux des cours d’eau de Ngaoundéré, au Cameroun, Afrique science, 10(4) :135 – 145.

Ahearn G.A., Mandal P.K. et Mandal A. (2004), Mechanisms of heavy-metals equestration and detoxification in crustaceans , Journal of Comparative Physiology, 174: 439–452.

Ahemad M. et Malik A. (2012), Bioaccumulation of Heavy metals by Zinc resistant bactria isolated from agricultural soils irrigated with wastewater, Bacteriologie Journal, 2( 1) : 12-21.

Ahluwalia S.S. et Goyal D.N (2007), Microbial and plant derived biomass for removal of heavy metals from wastewater,Bioresource Technology 98: 2243–2257.

Ahoussi-Edwige D., Philippe S., Valentine W. D., Boniface Y., Eunice K., Brice K., Mohamed S. et Dominique S. (2010), Mise au point d’une technologie de production d’une boisson locale : Africa drinkà base d’huiles essentielles de menthes verte et poivrée, Bulletin d’information de la SOACHIM, 007 : 39-53.

Aiking H., Govers H. et van't Riet J. (1985), Detoxification of mercury, cadmium and lead in

Klebsiella aerogenes NCTC 418 growing in continuous culture. Applied and Environmental Microbiology. 50:1262 - 1267.

Aires J. (2011), Les systèmes d’efflux actifs bactériens : caractérisation et modélisation pour quelles perspectives ?, communication, Bulletin de l'Académie vétérinaire de France, P267-268.

Amiard J.C. et Triquet C.A. (2008), les biomarqueurs dans l'évaluation de l'état écologique des milieux aquatiques, 1ére édition, Lavoisier, Paris, p25.

Ansari M.I. et Malik A. (2007), Biosorption of nickel and cadmium by metal resistant bacterial isolates from agricultural soil irrigated with industrial wastewater, Bioresource Technology, 98 :3149–3153.

Références bibliographiques

37

Arouya K. (2011), Pollution des eaux-Impact des eaux usées sur la qualité des eaux de surface ; 1^ére édition, P (26-30).

Atkins P.W., Jones L. et Laverman L. (2017), Principes de chimie, 4^émé édition, Freman and company, pp ( 18 ,762).

Augenstein W.M. (2018), Stable Isotope Forensics: Methods and Forensic Applications of Stable isotope analysis, John Wiley et sons lid, UK, 2^émé édition, pp (2-4).

B

Barnich L., Bellefroide M., Delnoy M. et Haenen V. (2003), Le permis d’environnement ,1ére

édition ; édition de la chambre de commerce et d’industrie SA, Liège, pp (240-241).

Baumont S., Camard J.P., Lefranc A. et Franconi A. (2004), Réutilisation des eaux usées épurées : considérations sanitaires et intérêts pour l’Île-de-France, Rapport ORS, p 220.

Belliveau B. H, Starodub M. E, Cotter C. et Trevors J. T. (1987), Metal resistance and accumulation in Bacteria, Biotechnology Advances. 5 : 101-127.

Biokar Diagnostics. (2012), Fiche technique Gélose Hektoen, F60002 Beauvais Cedex – France, Pp 1-2.

Briere F.G. (2012), Distribution et collecte des eaux, 3^émeédition, Presses international polytechnique, Canada, p6.

Bruins M.R, Kapil S. et Oehme F.W. (2000), Microbial resistance to metals in the environment.

Ecotoxicology and Environmental Safety.45 :198–207. C

Cassidy D., Holton G. et Rutherford J. (2002), Comprendre la physique, 1^ére édition, Presses polytechnique et universitaire romandes, Paris, p730.

Cattoir V. (2004), Pompes d’efflux et résistance aux antibiotiques chez les bactéries Efflux-mediated antibiotics resistance in bacteria, Pathologie Biologie, 52 : 607–616.

Chanel O., Dollfus C., Haguenoer J.M. Hartemann P., Huel G., Larroque B., Lison D., Marret S., Lataillade G.P., Prémont J., Verneuil H. et Zmirou D. (2017), Plomb dans l’environnement : quels risques pour la santé ? Rapport de recherche, Institut national de la santé et de la recherche médicale (INSERM), pp (79, 99, 198).

Chang J.S., Law R. et Chang C.C. (1997), Biosorption of lead, copper and cadmium by biomasse of Pseudomonas aeruginosa PU21, Water Research, 31 (7) : 1651-1658.

Références bibliographiques

38

Chen Z., Pan X., Chen H., Guan X. et Lin Z. (2015), Biomineralization of Pb(II) into Pb-Hydroxyapatite Induced by Bacillus cereus 12-2 Isolated from Lead-Zinc Mine Tailings, Journal of Hazardous Materials, 1-27.

Chippaux J.P., Houssier S., Gross P., Bouvier C. et Brissaud F. (2002), Étude de la pollution de l’eau souterraine de la ville de Niamey, Niger, Le Bulletin de la Société de Pathologie Exotique, 94(2) : 119-123.

Congeevaram S., Dhanarani S., Park J., Dexilin M. et Thamaraiselvi K. (2007), Biosorption of chromium and nickel by heavy metal resistant fungal and bacterial isolates, Journal of Hazardous Materials, 146 : 270–277.

Coquery M., Pomies M, Martin-ruel S., Budzinski H., Miège C., Esperanza M., Soulier C. et Choubert J.M. (2011), Mesurer les micropolluants dans les eaux usées brutes et traitées. Protocoles et résultats pour l’analyse des concentrations et des flux, TSM numéro 1/2 - 106e

26 année.

Couillard D. (1978), Sources et caractéristiques des eaux usées issues des différents procédés de l'industrie des pâtes et papiers, The Science of the Total Environnent, 12 : 169-197.

Crini G. et Badot P. M. (2007), Traitement et épuration des eaux industrielle pollués, Procédés membranaire ; bioadsorption et oxydation chimique, 1^ére édition ; serlabo Technologie, France, pp (19-23-24).

D

Dada E.O., Njoku k.l.,Osuntoki A.A. et Akinola M.O. (2015), A review of current techniques of in situ physico-chemical and biological remediation of heavy metals polluted soil , Ethiopian Journal of Environmental Studies & Management , 8(5):606 – 615.

Delarras C., Trébaol B. et Durand J. (2010), Surveillance sanitaire et microbiologique des eaux, 2^éme édition, Lavoisier, Pp (65, 68, 73, 75, 89, 103, 104, 106).

Desaunay A. (2011), Etude et modélisation de la biosorption des métaux par les bactéries. Application au transfert du cadmium et du zinc, seuls ou en mélange par Escherichia coli et

Cupriavidus metallidurans en colonnes de sable d’Hostun, Thèse de doctorat, P 26.

Dixit R., Malik W., Malaviya D., Pandiyan K., Singh U.B, Sahu A., Shukla R., Singh B.P., Rai J.P., Sharma P.K., Lade H. et Paul D.(2015), Bioremediation of Heavy Metals from Soil and Aquatic Environment: An Overview of Principles and Criteria of Fundamental Processes, Sustainability 7(2): 2189-2212.

Références bibliographiques

39

Doillon D. (2010), Déterminants moléculaires de la tolérance au zinc des microorganismes eucaryotes. Thèse de Doctorat en biologie forestière.2010. Université Henri Poincaré, Nancy1.

E

El Hachemi O. (2012), Traitement des eaux usées par lagunage naturel en milieu désertique (oasis de figuig) : performances épuratoires et aspect phytoplanctonique, Thése de doctorats, p9.

Elkhawaga M.A. (2011), Morphological and Metabolic Response of Aspergillus nidulans and Fusarium oxysporum to Heavy Metal Stress. Journal of Applied Sciences Research, 7(11):1737 - 1745.

F

Feachem R.G., Bradley D.J., Garelick H. et Mara D.D. (1983), Sanitation and disease health aspects of excreta and wastewater management, The World Bank, 1^ére édition, U.S.A, pp (6-12). Filali B.K., Taoufik J., Zeroual Y, Dzairi F.Z., Talbi M. et Blaghen M. (2000), Waste water bacterial isolates resistant to heavy metals and antibiotics, Current microbiology. 41 :151–156.

Flora G., Gupta D., Tiwari A. (2012), Toxicité of lead: A review with recent updates,

Interdisciplinary toxicology, 5(2): 47-58.

G

Gadd G.M. (1990), Heavy metal accumulation by bacteria and other microorganisms, Experientia, 46: 834-840.

Gardea-Torresdey J.L., Peralta-Videab J.R., de la Rosaa G. et Parsonsb J.G. (2005), Phytoremediation of heavy metals and study of the metal coordination by X-ray absorption spectroscopy, Coordination Chemistry Reviews, 249 :1797–1810.

Giller K.E, Witter E. et McGrath S. P. (1998), Toxicity of heavy metals to microorganisms and microbial processes in agricultural soils:.Soil Biology et Biochemistry, 30:1389–1414.

Guiraud J.P. (2003), Microbiologie alimentaire, 1 édition, Dunod, Paris, P 191-192.

Gutnick D.L. et Bach H. (2000), Engineering bacterial biopolymers for the biosorption of heavy metals; new products and novel formulations, Applied Microbiology Biotechnology, 54:451-460.

H

Habi S. (2009), Etude de la métallo résistance et de l’halo-tolérance des entérobactéries isolées des eaux de surface de la région de Sétif. Thèse de doctorat d’état en sciences de la nature et de la vie. Université Ferhat Abbas – Sétif, P 1.

Références bibliographiques

40

Hamsatou M.M.D. (2005), Les eaux résiduaires des tanneries et de la teinturerie - Caractéristiques physico-chimique, bactériologiques et impact sur les eaux de surface et les eaux souterraines, Thèse de doctorat, p27.

Harnett N. M et Gyles C. L. (1984), Resistance to Drugs and Heavy Metals, Colicin Production, and Biochemical Characteristics of Selected Bovine and Porcine Escherichia coli Strains, Applied and Environmental Microbiology, 48:930-935.

Herteman M. (2010), Evaluation des capacités bioremédiatrices d’une mangrove impactée par des eaux usées domestiques. Application au site pilote, Thèse de doctorat, page (14 -15).

Hussein H., Farag S. et Moawad H. (2004), Isolation and characterization of Pseudomonas resistant to heavy metals contaminants. Arab Journal of Biotechnology, 7:13–22.

Huynh T.D. (2009), Impacts des métaux lourds sur l’interaction plante/ ver de terre/microflore tellurique, Thèse de doctorat en écologie microbienne. Université Paris Est.

I

Ivanov I., Stefanov Y., Noncheva Z., Petrova M., Dobrev T., Mirkova L., Vermeersch R. et Demaerel J.P. (2000), Insoluble anodes used in hydrometallurgy Part I. Corrosion resistance of lead and lead alloy anodes, Hydrometallurgy, 57:109-124.

Iyer A., Mody K. et Jha B. (2005), Biosorption of heavy metals by a marine bacterium, Marine Pollution Bulletin, 50: 340–343.

J

Joffin C. et Joffin J.N. (2010), Microbiologie alimentaire, 6^éme édition, Pp (236, 257, 258). K

Kamnev A.A. et van der Lelie D. (2000), Chemical and Biological Parameters as Tools to Evaluate and Improve Heavy Metal Phytoremediation, Bioscience Reports, 20: 239-253.

Kapoor A., Viraraghvan. T. (1995), Fungal biosorption—An alternative treatment option for heavy metal bearing wastewater: A review. Bioresource Technology, 53:195–206.

Karbasizaed V., Badami N. et G. Emtiazi (2003), Antimicrobial, heavy metal resistance and plasmid profile of coliforms isolated from nosocomial infections in a hospital in Isfahan, Iran. Af.

Journal of Biotechnology. 2:379-383.

L Lagartette J.L.M. (2009), Vademecum de l’eau ,1ére

Références bibliographiques

41

Lefèvre D. et Andréassian V. (2016), L'eau en péril : Une ressource à préserver au quotidien, Académie de science , Quae, 1^ére édition .pp (83-84).

Leung W.C., Wong M-F., Chua H., Lo W., Yu P.H.F. et Leung C.K. (2000), Removal and recovery of heavy metals by bacteria isolated from activated sludge treating industrial effluents and municipal wastewater, Water Science and Technology , 41 (12) : 233–240.

M

Malik A. (2004), Metal bioremediation through growing cells, Environment International, 30: 261 – 278.

Mara D. et Nigel J. (1996), Horan Hand book of Water and Wastewater Microbiology, 1^ére edition, ACADEMIC PRESS, Elsevier, UK, pp (45, 58).

Marcoux E. et Bril H. (1986), Héritage et sources des métaux d'après la géochimie isotopique du plomb, Mineral Deposita, 21 : 35-43.

Mazzuoli L.S. (2012), La gestion durable de l’eau Ressource. Qualité. Organisation, 2éme édition. Pp (60, 61, 62, 63, 70, 71).

Mejáre M. et Bülow L. (2001), Metal-binding proteins and peptides in bioremediation and phytoremediation of heavy metals, Biotechnology, 19: 67-73.

Mills A.L. et Colwell R.R. (1977), Microbiological effects of metal ions in Chesapeake Bay and sediments. The Bulletin of Environmental Contamination and Toxicology ,18:99-103.

Mitra, R.S. et Bernstein I.A. (1978), Single-strand breakage in DNA of Escherichia coli exposed to Cd ²⁺. Journal of Bactériologie. 133:75 – 80.

Mizi A. (2012), Traitement des eaux de rejet d’une raffinerie -region de bejaia et valorisation de dechets oleicoles, Thèse de doctorats, pp105.

Morlot M. (1996), Aspect analytiques du plomb dans l’environnement, 1ére

édition, Lavoisier, Paris, pp (4, 5, 12, 13, 14, 23, 125, 127).

N

Naik M.M. et Dubey S.K. (2013), Lead resistant bacteria: Lead resistance mechanisms, their applications in lead bioremediation and biomonitoring, Ecotoxicology and Environmental Safety

98 : 1–7.

Navas-Acien A., Guallar E., Silbergeld E.K. et Rothenberg S.J. (2007), Lead exposure and cardiovascular disease -A systematic review.Environmental Health Perspectives, 6 : 472-482.

Références bibliographiques

42

O

Oragui J.I, Arridge H., Mara D.D, Pearson H.W et Silva S.A. (1995), Rotavirus removal in experimental waste stabilization pond systems with different geometries and configurations, Water Science and Technology, 31: 285-290.

Oudghiri F., Barroso M.R.R., Morales J.L.G. et El Moumni B. (2011), Décontamination des sédiments marins pollués en métaux lourds par extraction en milieu complexant, Conférence Méditerranéenne Côtière et Maritime, 4 : 375-379.

P

Popescu G. et Pasare L. (2006), Séparation des métaux lourds existants dans les eaux usées, Analele Universită Ńii din Bucuresti – Chimie, Anul XV (serie nouă), vol. II, page 7-14.

R

Rajbanshi A. (2008), Study on Heavy Metal Resistant Bacteria in Guheswori Sewage Treatment Plant, Our Nature, 6: 52-57.

Rodier J., Legube B. et Merlet N. (2009), L’Analyse de l’eau 9^éme, édition, Dunod, Paris. Pp (747,727)

S

Saffache P. (2001), Martinique et Guadeloupe : sanctuaires coralliens ou cimetières sous-marins, A ménagement et Nature, N°5 143-144 ; pp (77, 79, 80).

Sandaa R. A., Enger O. et Torsvik V. (1999), Abundance and Diversity of Archaea in Heavy-Metal-Contaminated Soils.Applied and Environmental Microbiology., 65:3293–3297.

Saou M. (2015), Le complèxe sidérurgique de Bellara officiellement lancé, Liberté.

Silver S. et Phung L.T. (1996), Bacterial heavy metal resistance: new surprises. Annual Review Of Microbiology, 50: 753-789.

Smaoui H., Amri J., Hajji N. et Kechrid A. (2009), Sensibilité aux antibiotiques et distribution des sérotypes des souches de Streptococcus pneumoniae isolées chez l’enfant à Tunis Antimicrobial susceptibility and serotype distribution of Streptococcus pneumoniae isolates in children in Tunis,

Archives de Pédiatrie , 16:220-226.

Srivastava N.K. et Majumder C.B, (2007), Novelbio filtration methods for the treatment of heavy metals from industrial wastewater, Technology,151: 1-8.

Srivastava S. (2003), Understanding Bacteria, 1^ére édition , KLUWER ACADEMIC PUBLISHERS, P 342.

Références bibliographiques

43

Stenge l.P. et Gelin S. (1998), Sol : interface fragile, 1ére édition, INRA, Paris, PP (78-89). T

Tajudina S.A.A., Martob A., Azmi M.A.M., Maduna A. et Zainal Abidina M.H. (2015), Utilization of sugarcane bagasse ash for stabilization / Solidification of lead contaminated soils,

Journal Technology(Sciences & Engineering), 77(11) :119–125.

Tong S., Schirnding Y.E.V. et Prapamontol T. (2000), Environmental lead exposure: a public health problem of global dimensions, Bulletin of the World Health Organization, 78 (9):1068-1076.

V

Valls M. et Lorenzo V. (2002), Exploiting the genetic and biochemical capacities of bacteria for the remediation of heavy metal pollution, FEMS Microbiology Reviews , 26 : 327 -338.

Velásquez L. et Dussan J. (2009), Biosorption and bioaccumulation of heavymetals on dead and living biomass of Bacillus sphaericus, Journal of Hazardous Materials 167:713–716.

Volk C. et Joret J. (1994). Paramètres prédictifs de l'apparition des coliformes dans les réseaux de distribution d'eau d'alimentation. Revue des sciences de l'eau, 7(2), 131–152.

W

Williams J.W. (1984), Bacterial resistance and detoxification of heavy metals,

Annexes

VIII

Annexe I

Les milieux de cultures utilisées 1-Gélose nutritive

Usage : milieu d’isolement courant dont la composition est très variable. Composition :  Extrait de viande……… 1.0 g.  Chlorure de sodium……….. ..5.0 g.  Extrait de levure ………..2.0 g.  Agar ……… ………..15.0 g.  Peptone………..…………5.0 g.  pH (7.4).

Préparation : 28 g/l. stérilisation à l’autoclave. 2-Milieu Gélose Plate Count Agar (PCA)

 Tryptone……… 5 g/l  Extrait autolytique de levure……… 2.5 g/l  Glucose………..1g/l  Agar agar………15g/l  pH du milieu prêt à l'emploi à 25°C: 7,0 +/- 0,2. 3- Chapman (gélose) :

Usage : isolement des Staphylococcus.

Composition:

 Peptone………. 10.0 g.  Mannitol ………10.0 g.  Extrait de viande de bœuf………1.0 g.  Rouge de phénol………. ….. 0.025 g.  Chlorure de sodium……… ….. 75.0 g.  Agar ……….15.0 g.  pH (7.4).

Préparation : 111 g/l de milieu. Stérilisation à l’autoclave classique.

Annexes

IX

Usage : Milieu de dénombrement des coliformes totaux (48 h à une température de 37°C). Composition :  Peptone ………10,0g  Lactose………. 10,0g  Bile déshydratée ………...……….20,0 ml  Vert brillant……….. 13,0 mg  (pH = 7,4)

Préparation : 40 g par litre d’eau distillée. Stérilisation à l’autoclave classique

5-King A

Usage : Le King A est un milieu de culture utilisé pour mettre en évidence de la pyocyanine de

Pseudomonas aeruginosa.

Composition :

 Peptone dite "A" :...20,0 g  Glycérol :...10,0 g  Sulfate de potassium :...10,0 g  Chlorure de magnésium :...1,4g  Agar purifié :...12,0g  (pH = 7,2)

Préparation : 45 g de poudre par litre d’eau distillée. Stérilisation classique. Ajouter 10 cm³ de

Dans le document Etude de la résistance au plomb des bactéries isolées à partir des eaux usées du complexe sidérurgique de Jijel Bellara. (Page 42-66)