Modèles murins avec dérégulation de NF-κB : impact sur la lymphomagenèse B. 83

Il existe différents types de modèles murins pour étudier l’implication de NF-κB dans

la lymphomagenèse. Ces modèles peuvent être des modèles présentant des activations ou

des inactivations de la voie de signalisation de NF-κB. Ces différents modèles vont permettre

une meilleure compréhension du rôle de NF-κB dans les mécanismes de lymphomagenèse B.

I.2.7.1. Modèles murins invalidés pour les sous-unités de NF-κB.

L’invalidation du gène nfkb1 codant la protéine p105/p50 (Ghosh et al., 1990; Kieran

et al., 1990) entraîne une diminution des cellules B dans la zone marginale et des cellules B

péritonéales (Cariappa et al., 2000; Pohl et al., 2002). La prolifération BCR-dépendante est

normale dans ces souris mais les cellules B ne prolifèrent pas après une stimulation du TLR4

(Sha et al., 1995). De plus, bien que le nombre de cellules B folliculaires soit normal dans les

souris nfkb1

, cette population de cellules B se renouvelle plus rapidement que chez les souris

sauvages (Grumont et al., 1998). Cette constatation est cohérente avec un taux anormalement

rapide de mort spontanée des cellules B nfkb1

. Les cellules B ont également un blocage

partiel du passage de la phase G1 à S dans le cycle cellulaire (Grumont et al., 1998).

Les souris déficientes pour le gène nfkb2, codant p100/p52 (Bours et al., 1990, 1992),

montrent une réduction marquée du compartiment B dans la rate, la moelle osseuse et les

ganglions lymphatiques. En outre, la rate et les ganglions lymphatiques des souris mutantes

présentent une architecture altérée, caractérisée par des zones de cellules B diffuses et

irrégulières et une absence de zones marginales et de manteau périfolliculaire. La formation

de centres germinatifs secondaires dans la rate est également altérée. La prolifération des

cellules B déficitaires en p100/p52 est modérément réduite en réponse au lipopolysaccharide

et au CD40. Cependant la maturation des cellules B et la commutation de classe des

immunoglobulines sont normales. Les souris mutantes pour nfkb2 ont également une

diminution des cellules B circulantes. (Caamaño et al., 1998; Franzoso et al., 1998). En outre,

ces souris présentent une déficience dans l’expression de chimiokines indispensables dans

l’organogenèse lymphoïde (Bonizzi et al., 2004; Poljak et al., 1999).

Dans les souris c-rel

(Chen et al., 1983), les cellules B ne répondent plus au stimuli

mitogéniques et ont une diminution de leur prolifération (Köntgen et al., 1995). Les cellules B

des souris c-rel

ont une diminution de la prolifération et un blocage de la transition G1/S du

cycle cellulaire (Grumont et al., 1998). Bien que le développement précoce des lymphocytes

B soit normal chez les souris c-rel

, il y a moins de cellules B présentant un phénotype de B

mémoire (IgM

/IgD

). Lors de l'immunisation, les souris c-rel

génèrent moins de cellules B

avec un phénotype de centre germinatif (Tumang et al., 1998).

L'absence de RelA (Schmid et al., 1991) chez les souris KO conduit à la mort

embryonnaire des souris entre 15 à 16 jours du à la mort des hépatocytes fœtaux. La mort de

ces hépatocytes fœtaux rela

provient de leur sensibilité accrue aux effets cytotoxiques du

TNF-α, comme en témoigne l'observation selon laquelle l'absence de cette cytokine sauve les

souris rela

de la létalité embryonnaire (Beg et al., 1995a; Doi et al., 1999). La génération de

lymphocytes B fœtaux est drastiquement diminuée dans le foie fœtal (Prendes et al., 2003).

Les souris dépourvues de RelB (Ryseck et al., 1992), comme les souris nfkb1

et nfkb2

-/-

, présentent des défauts dans les structures des organes lymphoïdes secondaires. Les souris

relb

ne développent pas de plaques de Peyer et ne parviennent pas à former des centres

germinatifs et de réseaux avec les cellules dendritiques en réponse à un antigène. La fonction

de RelB dans les cellules dendritiques est également nécessaire pour l'activation des

lymphocytes T (Zanetti et al., 2003). RelB est également impliqué dans l'organisation de la

zone marginale (Weih et al., 2001; Yilmaz et al., 2003). Comme les défauts de l'organogenèse

lymphoïde qui se produisent dans les souris nfkb2

, ceux observés dans les souris c-rel

sont

associées à une déficience de l'expression de chimiokines dépendante de p52/RelB régulées

par la signalisation LTβ (Bonizzi et al., 2004).

Les modèles murins KO des sous-unités de NF-κB ont permis de décrire les rôles in vivo

des différentes sous-unités dans l’organogenèse, l’architecture des organes lymphoïdes ainsi

que dans la prolifération et la survie des cellules B. RelA est particulièrement important dans

la régulation de l’apoptose et RelB joue un rôle prépondérant dans la réponse immune en

permettant l’activation des cellules T via les cellules dendritiques. Ces modèles murins ne

développent pas de lymphomes B mais au contraire ont une diminution du compartiment B

de façon directe ou à cause du microenvironnement. Cependant, NF-κB a un rôle en faveur de

la prolifération des cellules B.

I.2.7.2. Modèles murins de surexpression et de sur-activation des sous-unités NF-κB.

Un modèle murin affectant le gène nfkb1 a été développé, dans ce modèle la partie

C-terminale a été délétée ainsi la protéine a perdu ses répétitions ankyrine qui permettaient sa

séquestration dans le cytoplasme en masquant la séquence de localisation nucléaire. Ce

modèle nfkb1

présente une splénomégalie, des gros ganglions et des infiltrations de

cellules lymphoïdes dans divers organes. La prolifération des cellules B est augmentée in vivo

et le nombre de cellules B dans la rate est augmenté. L’activité NF-κB est également accrue

dans les cellules B de ce modèle (Ishikawa et al., 1998).

Sur le même principe, un modèle présentant la délétion de la partie C-terminale de

p100 a permis d’observer une hyperkératinisation de la rate, une infiltration de cellules

lymphoïdes dans divers organes et de gros ganglions (Ishikawa et al., 1997). Les

hyperprolifération observées sont compatibles avec l'induction de dimères contenant p52

régulés par une multitude de ligands de la famille des TNFR (BAFF, RANK) (Beinke and Ley,

2004). Les tissus affectés des souris nfkb2

n'expriment pas des niveaux de dimère p52

supérieurs à la normale mais ont une augmentation de l'expression de certains gènes connus

comme cibles de la signalisation NF-κB. L’augmentation de la prolifération des cellules B chez

les souris nfkb2

souligne l'importance de la régulation de la prolifération cellulaire via

les dimères p52 (Ishikawa et al., 1997). Le rôle de p52 dans la promotion de la prolifération

cellulaire est en accord avec la découverte que certains lymphomes humains (MM et LLC) ont

des altérations de gène nfκb2 proches de la suppression de la partie C-terminale créée dans

les souris nfkb2

(pour revue : (Courtois and Gilmore, 2006)).

Un modèle de souris v-Rel place le gène v-rel sous le contrôle du promoteur murin

proximal de lck permettant ainsi une expression spécifique dans les thymocytes (Allen et al.,

1992). Ces souris décèdentavant 10 mois et développent des lymphomes et des leucémies T.

Ces tumeurs sont constituées de cellules CD4

CD8

ou CD4

CD8

. V-Rel induit la tumorigenèse

en s’associant avec p50 ou en homodimère (Carrasco et al., 1996). Une autre étude de cette

équipe a constitué en un croisement des souris v-Rel avec un autre modèle de souris

sur-exprimant IκBα. Ces souris présentent une lymphomagenèse retardée (Carrasco et al., 1997).

Ces résultats appuient la notion selon laquelle l'expression dérégulée de c-Rel est

oncogénique. Pourtant, il s'est avéré difficile d'établir des modèles de souris dans lesquels

c-Rel fonctionne comme un oncogène (pour revue : (Gilmore et al., 2004)). Il est à noter que la

génération de souris transgéniques avec c-rel sous le contrôle d'un promoteur spécifique des

cellules B n’a pu être réalisée, suggérant que la surexpression de c-Rel peut être toxique à

certains stades du développement des cellules B (Gerondakis et al., 2006; Gilmore and

Gerondakis, 2011).

Encore une fois, les modèles murins avec une activation constitutive de NF-κB

(nfkb1

et nfkb2

) n’ont pas développé de lymphome B. Une activation seule des

voies de signalisation de NF-κB ne suffit pas pour être oncogénique pour les cellules B.

I.2.7.3. Modèles murins invalidés pour les inhibiteurs de NF-κB.