Microperfusion in vitro

La microdissection des CCD destinée à la microperfusion a été réalisée sur coupe de rein frais immédiatement après le sacrifice. Les CCD ont été reconnus par leur morphologie sous loupe binoculaire. Pour chaque mesure un unique CCD est choisi puis transféré dans la chambre de microperfusion. La perfusion de la lumière tubulaire a été réalisée à un débit de 2 nl/min et le débit du bain péritubulaire était de 12 ml/min pour maintenir la température constante à 37°C et le renouvellement du bain. Les CCD ont été perfusés dans des conditions symétriques avec un même bain luminal et péri tubulaire contenant (en mM) : 121 NaCl, 23 NaHCO3, 1.2MgSO4, 2 K2HPO4, 2 calcium lactate, 1 sodium citrate, 5.5 glucose, 5 alanine, et

9.

Statistiques

Les comparaisons entre groupes ont été réalisées par le test t de Student (comparaison de 2 groupes) ou par analyse de variance suivie d’un test PLSD de Fischer (comparaison multi groupes).

Les valeurs sont exprimées en moyenne +/- SEM (standard Error of the Mean). La significativité statistique des résultats de qPCR a été déterminée par un test paramétrique t de Student. La significativité statistique des autres résultats a été déterminée par le test one-way ANOVA, suivi d’un post-test de Tukey-Kramer. Une valeur de P inférieure à 0,05 étant considérée comme statistiquement significative avec : *P<0.05, **P<0.01 et ***P<0.001.

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