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Chapitre 5 Discussion

5.8 L’activité des aminopeptidases

L’augmentation des activités peptidolytique et protéolytique d’un ferment pourrait permettre d’améliorer l’affinage de certains fromages et ainsi de modifier leur saveur et leur flaveur.

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Au niveau des ferments, on n’a pas constaté de différence significative dans les taux d’aminopeptidases. Le taux des aminopeptidases Pep N reste à des niveaux faibles par rapport au PepX. Pour les PepX, le ferment [81-82-83] a le taux le plus élevé. En substituant 93 par la souche 102 dans le ferment [91-92-93] on a obtenu une baisse de l’activité des PepX, dans ce cas, soit il y a une inhibition de l’une des trois souches productrices de PepX, soit une inhibition de PepX par un acide aminé produit en excès par l’une des trois souches. La régulation du système protéolytique se fait grâce à l’action des dipeptides contenant la valine, isoleucine et leucine (Figure 6). Ces acides aminés sont issus de la dégradation des peptides issus des caséines sous l’action des différents aminopeptidases et exercent leur rôle après l’entrée dans la cellule.

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Conclusion

À travers cette étude, une contribution à certaines problématiques auxquelles font face les producteurs de fromage Cheddar a été apportée. Dans un premier temps, ce travail a débuté par la simulation des conditions de fabrication du fromage par le test de Pearce, un test qui met les 19 souches de Lactococcus lactis ssp.cremoris dans un environnement stressant à savoir une variation de température et l’ajout de NaCl.

La mesure des activités enzymatiques est faite sur des extraits cellulaires obtenus après le test de Pearce; dans le cas des souches pures, une grande variation dans les résultats est constaté, qui a été expliquée par une instabilité des enzymes aux conditions du test ou bien sa perte lors des lavages. Par contre chez les souches en mélange, la variation est moins importante, il semblerait y’avoir des facteurs qui contribuent à la stabilité de l’enzyme ou la protection des cellules jusqu’à la lyse de la cellule.

Les essais réalisés ont montré que 18 des souches testées sont des protéases positives, que seule la souche 201 est une protéase négative et que la majorité des souches industrielle sont des protéases de type PI. Le taux des aminopeptidases varie beaucoup d’une souche à une autre et le taux des PepX est supérieur à celui PepN. De même, les nivaux de l’activité autolytique a montré de grandes variations parmi les souches testées. Enfin, les résultats obtenus en testant les souches en culture pure, étaient une base pour proposer de nouveaux ferments puis d’évaluer à nouveau les trois activités, proteolytique, autolytique et aminopeptidasique pour en choisir les bons candidats à la fabrication du Cheddar.

À la lumière de cette étude, il apparaît clairement que l’usage des méthodes d’analyses utilisées représente une analyse discriminatoire assez puissante pour trier et élire la ou les souches les plus performantes parmi un ensemble de souches montrant des profils d’intérêts technologiques différents.

Néanmoins, les résultats de cette étude qui a ciblé un volet essentiel de la fabrication des fromages à savoir la protéolyse et l’autolyse faites par des méthodes classiques et qui

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restent d’actualité, gagneraient à notre sens à être consolidées par l’entremise d’investigations complémentaires par des méthodes génomiques plus précises. L’utilisation de la modélisation est aussi une perspective intéressante pour l’étude des différentes interactions qui s’établissent entre les souches dépendamment des conditions de fabrication du fromage.

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