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3 Chapitre : Étude de la digestibilité in vivo des farines de larves de mouches soldats noires

3.8 Discussion générale

3.8.1 Essais in vitro et in vivo

L’un des points de discussion le plus fréquent dans les études sur la digestibilité des farines des insectes en général et celle de la mouche soldats noire en particulier reste l’impact de la présence de la chitine sur la digestibilité des nutriments (Fisher et al., 2020). La chitine est un polymère à longue chaine d’une N-acétylglucosamine qui se trouve au niveau de l’exosquelettes et l’endosquelette de tous les insectes (Finke, 2007). En effet, des niveaux de chitine entre 3,35 et 5,89% ont été à maintes reprises pointés comme un facteur prépondérant pour expliquer la faible digestibilité des nutriments chez les poissons (Kroeckel et al., 2012 Karlsen et al., 2017, Renna et al., 2017, Dumas et al., 2018, Terova et al., 2019, Fisher et al., 2020). Dans cette étude les niveaux de chitine sont de l’ordre de 3,3 à 5,8%. De plus cette composante s’est avérée indigestible chez la truite arc-en-ciel.

Les traitements thermiques élevés ont été utilisés pour pouvoir éliminer la charge microbienne et dénaturer l’action d’antiprotéases chez les farines de mouches soldats noires. L’utilisation des traitements comme l’ébouillantage à 100°C pendant 4 min suivi d’un séchage à 60°C au four et un traitement à 130°C pendant 20 min ont pu éliminer complétement l’inhibition des protéases des farines de larves.

Toutefois, cela ne s’est pas traduit par une augmentation de la digestibilité des protéines in vivo chez la truite arc-en-ciel. En effet, nos résultats avec l’essai in vivo n’ont pas montré une digestibilité accrue des larves LS et LE comparé aux LB. Cela pourrait probablement s’expliquer par la présence de la chitine.

Conclusion générale

Dans le présent travail, les traitements thermiques à basses températures n’ont pas eu d’effet sur l’activité des antiprotéases des farines de larves. Cependant, les traitements thermiques ≥100 degrés ont pu éliminer complètement l’activité des anti-protéases chez la truite arc-en-ciel.

En ce qui a trait à l’essai in vivo de digestibilité, les procédés de transformation n’ont pas influencé les CDA de des protéines réelles, lipides bruts, énergie, matières sèches, cendres. De plus, une grande variabilité a été ces nutriments quel que soit le traitement avec la méthode (AIA). Les larves stérilisées ont obtenu des CDA inférieurs aux deux autres traitements (LB et LE) pour certains acides aminés, et acides gras. Les minéraux tels que : le phosphore, le calcium se sont montrés indigeste quel que soit le procédé de transformation. La chitine reste une composante indigeste pour les traitements chez la truite arc-en-ciel. Malgré que les résultats obtenus avec la méthode de dosage de la silice par fluorescence à dispersion d’énergie, ils n’ont pas été discutés en raison de l’incapacité à les comparer avec d’autres études de digestibilité. Cette méthode a montré des CDA plus élevés et moins variables quel que soit le procédé de transformation.

Nos résultats suggèrent qu’il faut d’autres études sur l’évaluation in vitro de l’inhibition des activités des anti-protéases dans les farines de larves de mouches soldats noire chez la truite arc-en-ciel. Pour ce faire, il faut des études plus poussées comme l’électrophorèse pour pouvoir identifier les anti-protéases présentes dans les farines de larves de mouches soldats noires.

Les études de comparaisons des différents indicateurs indigestes pour l’estimation de la digestibilité apparente des farines de larves de mouches soldats noires traitées à haute température sont nécessaires. Des essais sur les performances de croissance le sont également avec des farines de larves mouches. La chitine est une composante indigeste chez la truite arc-en-ciel, l’ajout des enzymes exogènes comme la chitinase dans la moulée pourrait être une solution pour pallier ce problème. Bien que les résultats obtenus avec la méthode dosage de la silice par fluorescence à X à dispersion d’énergie n’ont pas été discutés dans cette étude, toutefois, l’utilisation de cette méthode par spectrométrie d’EDXRF est plus sûre, non, plus

rapide et potentiellement plus précise qui permet de déterminer le silicium, mais aussi d’autres minéraux dans les échantillons tels que le phosphore, calcium, zinc et fer. De plus, les valeurs de digestibilités obtenues avec cette méthode se sont montrées plus élevés que la méthode standard (AIA). En vue de comparaison dans le futur, il faudrait donc utiliser cette méthode par fluorescence à X à dispersion d’énergie pour doser les marqueurs indigestes.

Annexes

Figure 3-5: Évolution des paramètres physico-chimiques du régime Gainesville observés

pendant l’évolution des stades larvaires

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 0 5 10 15 20 25 30 35 40 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 pH T em per at ur e Jour temperature pH

Tableau 3-13: Coefficients de digestibilité apparente (CDA, % MS) des nutriments des diètes avec 30% d’inclusion de farines

de MSN ayant subies différents de séchages chez la truite arc-en-ciel avec la méthode de cendre insoluble à l'acide (AIA) et la méthode de dosage de la silice par fluorescence à X à dispersion d’énergie (EDXFR).

Nutriments Méthodes CDA (%, MS) ANOVA(trait) ANOVAs (met et trait) R LB LE LS p-trait p-met p-trait p-(trait*met) Matières sèches AIA 55,9 ± 2,9 50,8 ± 3,5 51,4 ± 2,6 46,3 ± 5,7 0,098 <0,001 0,02 0,611 EDXRF 60,9 ± 1,4 57,7 ± 0,6 58,5 ± 2,5 55,8 ± 0,3 0,232 Protéines réelles AIA 84,47 ± 0,6a 79,8 ± 2,7ab 80,7 ± 2,2ab 77,7 ± 0,4b 0,010 <0,001 <0,001 0,756 EDXRF 86,5 ± 0,2 84,2 ± 0,9 84,0 ± 2,8 82,8 ± 1,6 0,023

Lipides bruts AIA 57,8 ± 5,0 52,53 ± 2,4 58,7 ± 4,5 51,7 ± 6,8 0,273 0,001 0,05 0,833 EDXRF 62,6 ± 3,5 59,4 ± 2,4 64,7 ± 3,7 60,3 ± 1,4 0,163 Énergie AIA 61,1 ± 2,5 b 56,0 ± 2,7ab 55,5 ± 3,3ab 48,7 ± 5,5a 0,022 <0,001 <0,001 0,593 EDXRF 65,5 ± 1,5 62,1± 0,8 62,1 ± 3,0 57,8 ± 0,5 0,005 Cendres AIA 25,4 ± 5,7 23,8 ± 3,8 21,7 ± 2,9 17,1 ± 10,3 0,453 <0,001 0,275 0,73 EDXRF 33,9 ± 3,4 34,8 ± 2,2 33,2 ± 1,9 31,8 ± 1,7 0,619 Chitine AIA 0 0 0 0 EDXRF 0 0 0 0

1 R : moulées de références LB : larves séchées 12h/60°C, LE : larves ébouillantées 6h/60°C, LS : larves séchées 20min/130°C ;

2 Les valeurs représentent les moyennes ± écarts types en base sèche, n = 3 ; le niveau de signification p˂0,05, le test de Tukey a été utilisée pour les comparaisons multiples, les lettres a, b, c sont utilisées pour montrer les différences significative

Tableau 3-14:Coefficients de digestibilité apparente (CDA, % MS) des acides gras saturés des diètes avec 30% d’inclusion de farines de MSN ayant subies différents de séchages chez la truite arc-en-ciel avec la méthode de cendre insoluble à l'acide (AIA) et la méthode de dosage de la silice par fluorescence à X à dispersion d’énergie (EDXFR).

Acides gras saturés Méthodes CDA (%, MS) ANOVA (trait) ANOVAs (met et trait)

R LB LE LS p-trait p-met p-trait p-(met*trait)

C8:0 AIA 54,7 ± 0,9 60,4 ± 4,8 63,2 ± 8,6 56,9 ± 6,4 0,365 0,081 0,051 0,424 EDXRF 59,8 ± 1,3 65,9 ± 2,7 68,7 ± 6,7 64,4 ± 5,7 0,206 C10:0 AIA 58,1 ± 6,4 a 66,2 ± 4,1ab 70,0 ± 1,9a 65,3 ± 3,6ab 0,051 0,006 <0,001 0,776 EDXRF 62,9 ± 5,0a 71,0 ± 0,3b 74,4 ± 2,2b 71,4 ± 0,3b 0,005 C12:0 AIA 62,4 ± 2,1 c 41,8 ± 5,0a 53,3 ± 2,0bc 47,1 ± 5,4bc 0,001 <0,001 <0,001 0,951 EDXRF 66,7 ± 0,9c 49,9 ± 0,5a 60,1 ± 2,6b 56,4 ± 0,5b <0,001 C14:0 AIA 55,5 ± 3,5 b 46,0 ± 3,9ab 48,9 ± 2,4ab 42,4 ± 6,1a 0,029 <0,001 <0,001 0,747 EDXRF 60,6 ± 2,1b 53,5 ± 0,5a 56,3 ± 2,5b 52,6 ± 0,4b 0,005 C15:0 AIA 54,2 ± 3,2 b 40,7 ± 4,6a 50,5 ± 2,9ab 44,4 ± 6,2ab 0,023 <0,001 <0,001 0,75 EDXRF 59,5 ± 1,7c 48,9 ± 0,3a 57,8 ± 2,8bc 54,2 ± 0,3b <0,001 C16:0 AIA 51,0 ± 3,0 b 38,0 ± 4,6a 44,9 ± 2,7b 40,0 ± 6,2ab 0,027 <0,001 <0,001 0.074 EDXRF 56,6 ± 1,5c 46,6 ± 0,5a 53,0 ± 2,5bc 50,6 ± 0,2b <0,001 C17:0 AIA 48,6 ± 5,0 b 32,2 ± 4,2b 49,5 ± 1,5ab 40,0 ± 7,8a 0,01 <0,001 <0,001 0,593 EDXRF 54,4 ± 3,5b 41,6 ± 1,5b 56,9 ± 1,1ab 50,6 ± 3,5a <0,001 C18:0 AIA 47,0 ± 2,6 a 29,1 ± 5,5a 39,1 ± 3,5ab 36,8 ± 6,7ab 0,012 <0,001 <0,001 0,076 EDXRF 53,0 ± 1,3b 39,0 ± 0,9a 48,9 ± 2,9b 48,0 ± 0,1b <0,001 C20 :0 AIA 54,5 ± 1,8 ab 58,5 ± 2,9b 50,8 ± 3,2ab 45,0 ± 5,6a 0,011 <0,001 0,001 0,234 EDXRF 59,6 ± 0,7b 64,3 ± 0,4c 58,0 ± 2,7ab 54,7 ± 1,2a <0,001

2Les valeurs représentent les moyennes ± écarts types en base sèche, n = 3 ; le niveau de signification p˂0,05, le test de Tukey a été utilisée pour les comparaisons multiples, les lettres a, b, c sont utilisées pour montrer les différences significatives.

Tableau 3-15 :Coefficients de digestibilité apparente (CDA, % MS) des acides gras mono et polyinsaturés des diètes avec 30% d’inclusion

de farines de MSN ayant subies différents de séchages chez la truite arc-en-ciel avec la méthode de cendre insoluble à l'acide (AIA) et la méthode de dosage de la silice par fluorescence à X à dispersion d’énergie (EDXFR).

acides gras mono et polyinsaturés Méthodes CDA (%, MS) ANOVA (trait) ANOVAs (met et trait)

R LB LE LS p-trait p-met p-trait p-(met*trait)

C14:1 AIA 69,7 ± 1,0 b 72,2 ± 2,6a 69,7 ± 3,2a 66,1 ± 3,4a 0,029 <0,001 <0,001 0,115 EDXRF 73,1± 1,6 76,1 ± 0,2 74,1 ± 2,7 72,1 ± 1,5 0,119 C16:1 AIA 69,1 ± 3,1 b 70,2 ± 1,6b 64,6 ± 3,5ab 58,6 ± 4,7a 0,012 <0,001 <0,001 0,534 EDXRF 72,6 ± 2,1b 74,3 ± 0,7b 69,7 ± 3,3ab 66,0 ± 0,5a 0,004 C18:1c9 AIA 65,1 ± 2,6 b 61,6 ± 2,5ab 60,6 ± 3,4ab 55,3 ± 4,8a 0,049 <0,001 0,003 0,345 EDXRF 69,1 ± 1,7 66,9 ± 0,6 66,3 ± 3,2 63,2 ± 0,3 0,121 C18:1c11 AIA 59,4 ± 3,1 b 52,4 ± 3,1b 52,4 ± 3,3ab 45,9 ± 5,9a 0,022 <0,001 <0,001 0,395 EDXRF 64,0 ± 2,0b 59,0 ± 0,8a 59,3 ± 3,0ab 55,5 ± 0,4a 0,003 C18:2n6 (LA) AIA 78,0 ± 1,8 b 69,1 ± 2,3a 73,1 ± 2,4ab 68,1 ± 3,1a 0,004 0,009 <0,001 0,868 EDXRF 80,5 ± 1,0b 73,4 ± 0,3a 77,0 ± 2,6ab 73,7 ± 0,5a <0,001 C18:3n6 AIA 63,6 ± 3,0 58,1 ± 4,9 60,1 ± 1,5 62,0 ± 5,0 0,398 <0,001 0,005 0,395 EDXRF 67,8 ± 1,7ab 64,0 ± 1,4a 65,9 ± 1,3ab 68,7 ± 1,8b 0,024 C18 :3n3 (ALA) AIA 80,2 ± 1,7b 72,0 ± 2,1a 75,8 ± 2,7ab 70,8 ± 3,1a 0,006 0,003 <0,001 0,644 EDXRF 82,5 ± 1,0b 75,9 ± 0,7b 79,3 ± 2,8ab 76,0 ± 0,5a 0,002 C20 :1n11 AIA 55,9 ± 4,0 b 59,3 ± 2,6b 54,1 ± 3,5b 42,1 ± 6,0a 0,005 <0,001 <0,001 0,005 EDXRF 60,9 ± 2,6b 64,8 ± 3,7b 60,8 ± 3,0b 52,3 ± 1,0a 0,003

1 R : moulées de références LB : larves séchées 12h/60°C, LE : larves ébouillantées 6h/60°C, LS : larves séchées 20min/130°C ;

2Les valeurs représentent les moyennes ± écarts types en base sèche, n = 3 ; le niveau de signification p˂0,05, le test de Tukey a été utilisée pour les comparaisons multiples, les lettres a, b, c sont utilisées pour montrer les différences significatives

Tableau 3-16 :Coefficients de digestibilité apparente (CDA, % MS) des minéraux des diètes avec 30% d’inclusion de farines de MSN ayant subies différents de séchages chez la truite arc-en-ciel avec la méthode de cendre insoluble à l'acide (AIA) et la méthode de dosage de la silice par fluorescence à X à dispersion d’énergie (EDXFR).

Minéraux Méthodes

CDA (%, MS) ANOVA

(trait) ANOVAs (met et trait)

R LB LE LS p-trait p-met p-trait p-

(trait*met) Fer AIA -29,2 ± 18,0 -21,3 ± 2,5 -14,1 ± 8,6 -37,8 ± 4,7 0,101 <0,001 0,013 0,149 EDXRF 26,3 ± 2,5b 16,8 ± 1,3ab 20,6 ± 1,8ab 10,0 ± 9,0a 0,019 Calcium AIA 46,2 ± 5,9 -45,9 ± 74,0 -3,5 ± 2,9 -49,7 ± 38,7 0,072 0,069 0,042 0,427 EDXRF -40,9 ± 10,2 -13,8 ± 10,0 -13,8 ± 10,0 19,7 ± 16,1 0,067 Zinc AIA 17,7 ± 2,2 a 27,1 ± 1,8b 13,3 ± 3,6b 24,9 ±1,4b <0,001 0,070 0,891 0,123 EDXRF 24,7 ± 1,1a 47,4 ± 1,5c 29,3 ± 3,1ab 34,5 ± 2,1b <0,001 Phosphore AIA 68,3 ± 2,9 31,4 ± 30,0 45,1 ± 2,2 31,0 ± 13,7 0,077 <0,001 0,195 0,218 EDXRF 38,3 ± 4,8a 46,4 ± 3,8ab 46,3 ± 1,0ab 48,9 ± 2,5b 0,024

1 R : moulées de références LB : larves séchées 12h/60°C, LE : larves ébouillantées 6h/60°C, LS : larves séchées 20min/130°C ;

2 Les valeurs représentent les moyennes ± écarts types en base sèche, n = 3 ; le niveau de signification p˂0,05, le test de Tukey a été utilisée pour les comparaisons multiples, les lettres a, b, c sont utilisées pour montrer les différences significatives.

Tableau 3-17: Coefficients de digestibilité apparente (CDA, % MS) des acides aminés essentiels des diètes avec 30%

d’inclusion de farines de MSN ayant subies différents de séchages chez la truite arc-en-ciel avec la méthode de cendre insoluble à l'acide (AIA) et la méthode de dosage de la silice par fluorescence à X à dispersion d’énergie (EDXFR).

Acides aminés essentiels

Méthodes CDA (%, MS)

ANOVA

(trait) ANOVAs 2 facteurs

R LB LE LS p-trait p-met p-trait p(trait*met)

Valine AIA 89,3 ± 9,2 782,5 ± 1,2 82,9 ± 6,4 b 83,8± 2,3 0,164 0,233 0,031 0,975 EDXRF 90,5 ± 8,2 84,9 ± 0,12 82,2 ± 2,2 82,9 ± 2,1 0,268 Leucine AIA 89,9 ± 8,8 82,2± 1,9 84,2 ± 2,1 81,4 ± 0,9 0,194 0,233 0,040 0,982 EDXRF 91,0 ± 7,8 84,7 ± 0,63 86,5 ± 2,1 84,5 ± 2,2 0,285 Isoleucine AIA 89,1 ± 9,4 81,9 ± 1,7 83,5 ± 2,3 78,8 ± 1,4 0,157 0,267 0,027 0,972 EDXRF 90,3 ± 8,3 84,4 ± 0,5 85,9 ± 2,4 82,3 ± 2,6 0,244 Thréonine AIA 92,03 ± 6,9 86,9 ± 1,6 85,8 ± 2,42 84,5 ± 2,1 0,179 0,242 0,035 0,980 EDXRF 92,8 ± 6,1 88,7 ± 0,5 87,8 ± 2,3 87,2 ± 2,4 0,272 Méthionine AIA 88,7 ± 9,9 87,0 ± 1,7 86,6 ± 3,9 86,4 ± 1,1 0,948 0,404 0,916 0,998 EDXRF 90,0 ± 8,7 88,8 ± 1,4 88,5 ± 3,6 88,7 ± 1,7 0,981 Phénylalanine AIA 89,3 ± 9,3 81,0 ± 2,0 82,4± 2,2 80,1 ± 1,4 0,178 0,234 0,03 0,982 EDXRF 90,5 ± 8,2 83,7 ± 0,9 84,9 ± 2,2 83,5 ± 2,4 0,255 Lysine AIA 92,9 ± 6,1 b 86,7 ± 2,4ab 89,0 ± 1,7ab 81,2 ± 1,5a 0,001 0,186 <0,001 0,909 EDXRF 93,7 ± 5,8b 88,6 ± 1,6ab 90,6 ± 1,7ab 84,4 ± 1,7a 0,030 Histidine AIA 86,4 ± 11,9 81,4 ± 1,0 84,4 ± 2,5 83,3 ± 1,7 0,783 0,455 0,63 0,993 EDXRF 87,9 ± 10,5 83,9 ± 0,8 86,7 ± 2,5 86,2 ± 1,7 0,849 Tyrosine AIA 90,9 ± 7,9 83,8 ± 2,1 84,6 ± 2,1 81,8 ± 1,7 0,100 0,158 0,014 0,952 EDXRF 91,6 ± 7,0 86,1 ± 1,1 86,8 ± 2,1 84,8 ± 2,4 0,207

1 R : moulées de références LB : larves séchées 12h/60°C, LE : larves ébouillantées 6h/60°C, LS : larves séchées 20min/130°C ;

2 Les valeurs représentent les moyennes ± écarts types en base sèche, n = 3 ; le niveau de signification p˂0,05, le test de Tukey a été utilisée pour les comparaisons multiples, les lettres a, b, c sont utilisées pour montrer les différences significative

Tableau 3-18: Coefficients de digestibilité apparente (CDA, % MS) des acides aminés non essentiels des diètes avec 30%

d’inclusion de farines de MSN ayant subies différents de séchages chez la truite arc-en-ciel avec la méthode de cendre insoluble à l'acide (AIA) et la méthode de dosage de la silice par fluorescence à X à dispersion d’énergie (EDXFR).

Acides aminés Méthodes CDA (%, MS)

ANOVA

(trait) ANOVAs 2 facteurs

R LB LE LS p-trait p-met p-trait p(trait*met)

Alanine AIA 89,7± 8,9 83,16 ± 2,07 83,7 ± 2,13 80,1 ± 0,7 0,167 0,229 0,031 0,979 EDXRF 90,8 ± 7,9 85,5 ± 0,6 86,1 ± 2,0 83,4 ± 2,3 0,262 Glycine AIA 86,8 ± 11,4 717,3± 2,7 75,0 ± 2,02 74,3 ± 0,8 0,11 0,202 0,001 0,976 EDXRF 88,8 ± 10,1 80,5 ± 0,75 78,6 ± 2,2 78,7 ± 2,9 0,168 Sérine AIA 92,6 ± 6,3 85,0 ± 5,7 82,3 ± 1,7 87,1 ± 1,5 0,101 0,409 0,007 0,99 EDXRF 93,4 ± 5,6 84,7 ± 0,79 85,3 ± 2,4 83,9 ± 2,9 0,09 Proline AIA 89,3 ± 9,3 82,2 ± 1,9 82,9 ±2,5 80,7 ± 1,4 0,234 0,248 0,06 0,985 EDXRF 90,5 ± 8,2 84,7 ± 0,7 85,3 ± 2,4 83,9 ± 2,9 0,348 Acide aspartique AIA 89,5 ± 9,1 82,8 ± 1,6 85,7 ± 2,5 77,4 ± 0,2 0,07 0,226 0,006 0,965 EDXRF 90,6 ± 8,1 85,2 ± 0,4 87,8 ± 2,3 81,3 ±2,2 0,136 Acide glutamique AIA 91,5 ± 7,3 85,7 ± 1,2 88,9 ± 2,3 81,2 ± 0,7 0,05 0,227 0,003 0,961 EDXRF 92,5 ± 6,5 87,7 ± 0,0 90,5 ± 2,1 84,4 ± 2,6 0,102

1 R : moulées de références LB : larves séchées 12h/60°C, LE : larves ébouillantées 6h/60°C, LS : larves séchées 20min/130°C ;

2 Les valeurs représentent les moyennes ± écarts types en base sèche, n = 3 ; le niveau de signification p˂0,05, le test de Tukey a été utilisée pour les comparaisons multiples, les lettres a, b, c sont utilisées pour montrer les différences significatives

Référence et bibliographie

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