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1.1. Cadre institutionnel
L’Ecole Polytechnique d’Abomey Calavi est issue du CPU créé en février 1977 pour répondre à un besoin de formation technique au niveau de l’enseignement supérieur. A l’époque, la mission assignée au CPU (collège polytechnique universitaire) est de former des techniciens supérieurs capables de satisfaire les attentes liées à l’objectif de développement économique de la nation. Les évolutions de l’environnement notamment les progrès en matière technologique ont amené les Autorités à engager des réformes en vue de prendre en compte ces avancées et faciliter l’actualisation des enseignements dispensés. Dans ce cadre, la dénomination a été modifiée : le Collège Polytechnique Universitaire est devenu Ecole Polytechnique d’Abomey Calavi (EPAC). Les enseignements à l’EPAC sont organisés en deux secteurs : le secteur industriel et le secteur biologique.
Le secteur industriel comprend :
• Génie civil ;
• Génie Informatique et Télécommunication ;
• Génie Mécanique et Energétique ;
• Génie Electrique ;
Le secteur biologique comprend:
• Le Génie de Biologie Humaine
• Le Génie d’Imagerie Médicale et Radiologie
• Le Génie de l’environnement
• La Production Santé Animale
• Le Génie de Technologie Alimentaire
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1.2 Cadre technique
Nous avons réalisé notre stage à l’hôpital de Zone Ouidah Kpomassè-Tori-bossito plus précisément dans le service de laboratoire. L’hôpital de zone de Ouidah Kpomassè-Tori-Bossito est le premier niveau de référence des soins pour les centres de santé de la zone sanitaires OKT. Il est implanté dans le 2ème Arrondissement de la Commune de Ouidah et partage le même espace que le siège de la Coordination de la Zone Sanitaire. Il a la responsabilité de toute la population des trois communes (Ouidah, Kpomassè, Tori-Bossito qui selon le recensement général de la population et de l’habitat (RGPH) 2014, est estimée à 262.935 habitants.
L’hôpital de Zone est composé de services repartis en deux groupes : partie administrative et partie technique composée des services suivants : Service Médecine (dispensaire et hospitalisation) ; Service Pédiatrie ; Service chirurgie (bloc opératoire et post- opéré) ; Service gynéco-obstétrique (maternité, salles d’accouchement, suites de couches); Service Imagerie Médicale ; Service Ophtalmologie ; Service Stomatologie ; Service d’urgence ; Service d’appui et technique (Cuisine, Garage, caisse, service social, morgue, …) et Service Laboratoire.
Présentation du laboratoire
Sous la direction de Mme DJOSSOU AMOUSSOU HOUNYOVI Judith Rosemonde, le laboratoire est situé dans le bloc technique qui fait face à la pharmacie. Il est en face du service de la radiologie et fait dos au service commun des urgences. Les différentes analyses effectuées dans ce laboratoire se déroulent
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et l’autre pour celles hématologique, Immuno-hématologique et parasitologique.
La paillasse d’Hématologie, Immuno-Hématologie et Parasitologie
Sur cette paillasse sont faites les analyses suivantes : Numération Formule Sanguine (NFS), Vitesse de Sédimentation (VS), Test d’Emmel (TE), Temps de Coagulation (TC), Temps de Saignement(TS), Groupage sanguin(ABO) et facteur Rhésus, Goutte Epaisse et Densité Parasitaire (GE-DP), Examen Cytobactériologique du LCR et des Urines, Glycosurie, AKOP, Hémoglobinurie, Protéinurie.
La paillasse de Biochimie et de Sérologie
Sur cette paillasse, les différents examens effectués se répartissent comme suit :
• La Sérologie
Les examens effectués dans ce secteur sont : CRP (Protéine C Réactive), VDRL, TPHA, Recherche d’anticorps anti Hépatite virale B et C, Sérologie HIV, ASLO, Sérodiagnostic de Widal et Félix.
• La Biochimie
La plupart des paramètres sont dosés dans le sérum sanguin humain. Les paramètres dosés dans cette section à l’hôpital de zone de Ouidah sont surtout : le glucose, la créatinine, l’urée sanguine, l’acide urique, les transaminases, les amylases, les cholestérols total et HDL, les triglycérides, les gamma-GT, les bilirubines totales et conjuguées principalement dosées chez les nouveaux nés, le calcium sanguin et le magnésium sanguin.
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2. MATERIEL
2.1 Matériel biologique et réactifs Matériel biologique
Sang veineux prélevé sur tubes secs Réactifs
Réactif de dosage du glucose : BIOLABO, Glucose GOD-PAP, méthode de trinder
Réactif de dosage du calcium : BIOLABO, Elitech, méthode à l’ARSENAZO III Matériel de prélèvement
Matériels pour le dosage de calcium et de glucose
• Spectrophotomètre
• Tubes secs en verre
• Tubes secs en plastique 2. Stabilité des réactifs
Il faut noter que le réactif du calcium est conservé à l’abri de l’air et de la lumière, dans le flacon d’origine bien bouché à 18-25°C. Celui de la glycémie est conservé à 5-8°C.
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3. Méthodes d’étude 3.1. Matériel d’étude
Les échantillons proviennent des patients adressés au laboratoire de l’hôpital de zone de Ouidah pour tout prélèvement sanguin.
3.2. Technique d’analyse
Il s’agit ici d’une étude comparative et prospective. Elle se fera en trois phases :
• La phase pré analytique ;
• La phase analytique ;
• La phase post analytique.
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3.2.1. La phase pré-analytique
Elle consiste à prélever du sang sur des patients et à conserver ces échantillons prélevés. Le prélèvement sanguin se fait à jeun dans un tube sec et dans un tube fluoré. Les échantillons ont été centrifugés pour obtention du sérum.
3.2.2. Phase analytique
Pour chaque prélèvement, il s’agit de doser le calcium et le glucose en tubes secs en verre (glucose) et en tubes secs en plastique (calcium).
3.2.3. Phase post-analytique
Il s’agira ici du rangement du matériel, de la désinfection de la paillasse et de la transcription des résultats sur les bulletins d’examens des patients qui ont ces examens.
3.3. Méthodes de dosage
Les dosages du calcium et de la glycémie utilisent la méthode colorimétrique.
3.3.1. Calcium
• Principe
L’Arsenazo III se lie spécifiquement au calcium pour former un complexe coloré à 660 nm
Ca2+ + Arsenazo III --- >> Complexe coloré bleu
La quantité de calcium présente dans l’échantillon est directement proportionnelle à l’intensité du complexe coloré formé.
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- Bien mélanger et incuber 5 minutes à température ambiante.
- Lire les absorbances à 660 nm contre le blanc réactif.
3-3-2 Dosage du glucose
Principe
IL est basé sur la méthode de Trinder. Le glucose est oxydé par la glucose-oxydase (GOD) en acide gluconique et en peroxyde d’hydrogène H2O2. En présence de la peroxydase le H2O2 formé réagit avec le chloro-4-phenol et le 4-amino antipyrine (4AAP) pour former un chromogène: la Quinonéimine de couleur rouge dont l’absorbance mesurée à 505 nm correspond à la concentration de l’échantillon en glucose.
Mesure dans des tubes dentifiés
Blanc Etalon Dosage
Réactif 1ml 1ml 1ml
Eau distillée 20µL
Etalon 20µL
Echantillon sérum
20µL
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Mode opératoire
Mesure dans les tubes identifiés
Blanc Etalon Dosage
Réactif 1000μl 1000μl 1000μl
Eau distillée 10μl --- ----
Etalon --- 10μl ---
Control préparé --- --- 10μl
Bien mélanger et incuber pendant 5 minutes à 37°C au bain marie. Lire les absorbances contre le blanc réactif.
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