Techniques d'hybridation Genprobe :
Résumé et explication du test
Les Chlamydiae sont des bactéries intracellulaires strictes Gram négatif, non motiles, qui utilisent l’ATP produit par la cellule h te pour leur réplication. Les infections à Chlamydia sont connues depuis de nombreuses années. C. trachomatis est responsable d’environ 0 des cas d’urétrite non gonococcique. Les infections à Chlamydia trachomatis font partie des infections sexuellement transmissibles les plus fréquentes au monde. Aux États-Unis uniquement, on estime à 1 030 911 le nombre de nouveaux cas d’infection à Chlamydia
trachomatis en 2006. L’espèce Chlamydia trachomatis est composée de quinze sérotypes
responsables des pathologies humaines suivantes : trachome, conjonctivite à inclusions, lymphogranulomatose vénérienne et d’autres maladies sexuellement transmissibles. Les sérotypes de D à K représentent la cause principale d’urétrite non gonococcique chez l’homme. Les autres sympt mes cliniques provoqués par Chlamydia trachomatis chez l’homme comprennent l’épididymite, la rectite, la cervicite et la salpingite aigue. Outre la transmission sexuelle des infections chlamydiales, les nouveau-nés de mères infectées sont particulièrement exposés à la conjonctivite à inclusions et à la pneumonie chlamydiale. Historiquement, plusieurs méthodes de détection de Chlamydia trachomatis ont été utilisées au laboratoire clinique, notamment la culture de cellules, la réaction d’immunofluorescence et le test d’immunoenzymologie. Parmi les méthodologies plus récentes de détection de CT on peut citer les tests de sonde DNA directs et les tests d’amplification de l’acide nucléique (NAAT). La culture de cellules était autrefois considérée être la « méthode de référence » pour la détection de CT. En raison de sa moindre sensibilité clinique et de la variabilité de sa performance entre les laboratoires, la culture a été remplacée dans de nombreux laboratoires par les tests de sonde DNA directs et les NAAT.
Le système GEN-PROBE PACE Chlamydia trachomatis utilise la technique d’hybridation de l’acide nucléique pour identifier Chlamydia trachomatis directement à partir d’échantillons endocervicaux, urétraux mâles et conjonctivaux sur écouvillon.
Principes de la procédure
Les tests d’hybridation d’acide nucléique sont basés sur la capacité des brins complémentaires d’acide nucléique à s’aligner et s’associer de manière spécifique pour former des complexes bicaténaires stables. Le système GEN-PROBE PACE 2 utilise une sonde DNA monocaténaire marquée par chimioluminescence, complémentaire du RNA ribosomique du microorganisme cible. Quand le RNA ribosomique est libéré du microorganisme, la sonde DNA marquée
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s’associe avec le RNA ribosomique du microorganisme cible pour former un hybride DNA:RNA stable. L’hybride DNA:RNA marqué est séparé de la sonde non hybridée et mesuré dans un luminomètre LEADER GEN-PROBE. Le résultat du test est calculé par la différence entre la réponse de l’échantillon et la réponse moyenne des références négatives. [86]
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Annexe IV
Culture cellulaire :
La culture cellulaire, dite méthode de référence, a une spécificité de 100 % mais une sensibilité extrêmement variable d’un laboratoire à un autre en raison de l’impossibilité de standardiser toutes les étapes. Elle est dans les meilleurs cas de 80 à 90 % mais elle peut aussi être inférieure à 50 %.
Les prélèvements effectués par écouvillonnage des muqueuses (génitales, pharyngés, conjonctivales) déposés en milieu de transport permettant de garder la souche viable sont les plus adaptés à la culture cellulaire.
Certains prélèvements se révèlent inadéquats pour la culture comme le sperme, les urines et souvent les liquides péritonéaux et articulaires. Elle est de plus en plus délaissée au profit de techniques plus sensibles, notamment la biologie moléculaire.
Elle n’a actuellement plus sa place dans les explorations courantes de recherche de
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RESUME
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RESUME
Titre : Rôle du laboratoire dans le diagnostic de vaginite et de vaginose. Auteur : BOUICH Meryeme
Mots clés : lactobacillus, Gardnerella vaginalis, Mobiluncus, clue cells, vaginites
infectieuses, vaginose bactérienne,
La vaginite et la vaginose sont des infections génitales basses chez la femme relevant d’une altération de l’écosystème vaginal entrainant le remplacement de la flore normale _composée principalement par les lactobacilles _par d’autres espèces bactériennes endogènes tel que
Gardenerella vaginalis, Mycoplasma hominis et Mobiluncus ou exogènes comme Trichomonas vaginalis et Candida.
Les symptômes de ces anomalies dépendent de l'étiologie, ils sont normalement accompagnés de leucorrhées, d'une modification du pH et d’un prurit vaginal.
Le diagnostic ne sera confirmé que par un examen direct au microscope d’un échantillon des sécrétions vaginales, afin de détecter la présence de cellules caractéristiques dénommées "cellules cibles", qui indiquent la présence d'une vaginose bactérienne. Les sécrétions contenant des levures se caractérisent par des arborescences caractéristiques de la présence de candida. L’examen au microscope optique de la vaginite à trichomonas montre des parasites flagellés et mobiles, accompagnés de globules blancs témoignant de l'inflammation du col et du vagin.
En dehors du traitement, les infections génitales essentiellement la vaginose bactérienne peuvent aboutir à des complications impliquant le haut appareil génital : endométrite et salpingite. Chez la femme enceinte, leur r le dans les risques de chorioamniotite, d’infections intra-amniotiques et d’accouchements prématurés est établi.
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SUMMARY
Title: Role of the laboratory in the diagnosis of vaginitis and vaginosis. Author: BOUICH Meryeme.
Keywords: lactobacillus,Gardnerella vaginalis, Mobiluncus, clue cells, infectious vaginitis, bacterial vaginosis.
Vaginitis and vaginosis is an infection in the female lower genital within an alteration of the vaginal ecosystem, resulting on replacement of the normal flora composed mainly by the lactobacilli and other bacterial species such as endogenous
Gardnerella vaginalis, Mycoplasma hominis and Mobiluncus as exogenous ortrichomonas
vaginalis and Candida.
The symptoms of these anomalies depend on the etiology; they are normally accompanied by leukorrhea, analkaline pH and vaginal itching. The diagnosis is confirmed by a direct microscopic examination of a sample of vaginal fluid, to detect the presence of characteristic cells called "target cells", which indicate the presence of bacterial vaginosis. Secretions
containing yeast characteristic
candida. The light microscopic examination of trichomonas vaginitis shows parasites flagellate and mobile, along with white cells reflecting inflammation of the cervix and vagina.
Outside of treatment, genital infections mainly bacterial vaginosis can lead to complications involving the upper genital tract: endometritis and salpingitis.Pregnant women, risk chorioamnionitis, infection intra-amniotic and premature deliveries is established. Be wary of vaginitis and vaginosis can be the bed of AIDS.
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صخلم
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