Etude de L’effet d’Allium sativum sur la viabilité de la larve hydatique Echinococcus granulosus

(1)

MtNlstïtrnB

IDE L'DNSEIGNEMENT

StntrruEUn

EilIDD I"A REICEERCm

SCmTTIFIaus

T'NIVDRSTT.E

AKLI

MOHAND

OI'LAAIN

_-

BOT'IRA

TACIITTE IDES SCIENCES IDD

II\

NATI'RD ET DE

L/\

YIE ET DDS SCIf,NCES IDD I"A T]ERRE

DEPARTDDIENT

I'E

BIOIIrcIn

ii..-. éi;

T

MEMOIRE

DE

FIN

D'ETT]DES

EN

VI]E

DE

L'OBTENTION

DU

DIPLOME I{ASTER

IDomeine

:

SIIV

Filière

:

Sciences

Biologiques

Spéchlité

:

Biochimie

Appliquée

Présenté

per:

BELtlOUWET.Nadjet &

KASMI

Amina

..:.,- ,....a.,. .:

Etude

de

L'effet

d|Allûttn

sotivtn

sur

Ia

viabilité

de

la

lawe

hydatiq

ae

Echinococc

us

gron ttlos tts

Soutcnu Ie : 0d 0T

m9

NundMwm

Iuf

Beïoudil.K

M

htelliaR

M.Djwa,hra..dj MLbedirt

I)event

le

jury

composé

de :

Cùadc

h{cB

MCB MAA MAA Univ. de Bouira Univ. de Bouira Urriv. de Bouira Univ. de Bouùra Prësiderrt Pronotrice Co-pronotrice

Exnni@ew

ôadtvTe

Année

Universiteire

z

20lEy'il/û.l9

(2)

..'.

SOMMAIRE

Remerciement

Liste des figures

q-. Liste des tableaux al

Liste des abréviations

Introduction...

01

Chapitre

I:

loail

(Allium

sativum) I. Les plantes médicinales

L

l.Définition

d'une plante médicinale,

II.

Présentation des plantes étudiées... U. 1. Utilisation traditionnelle ...

tr .2.Laclassification taxonomique (classique). ' ' ' '

II.3. Classification phylogénétique' .. tr.3.Répartition ...

tr.4.Sous-espèces et variétés.. IL5.Description botanique...

...'..

tr.6. Composition biochimique

d'4.

Sativum.. . . .'

Chapitre

II

: Echinococcus granulosus

I.Définition II.L'agent causal

Itr.La taxonomie d'Echinococcus' granulosus .

IV.La situation épidémiologique de I'hydatidose' ' ' V. le cycle évolutife de _Parasite

VI. Les caractéristiques morphologiques et biologiques d' Echinococcus' Granulosus

Vll.Diagnostic de l'hydatidose-..'.. ...

VII.

l.Le

diagnostic clinique

1,' 02 02 02 02

02

I 03 03 03 03 04 04 08 08 08 09 11

t7

YA..ZLe diagnostic radiologique ... ...

c.

(3)

il

tl a â * i t I

VII.3.Le Diagnostic

biologique

...

...:...

f8

VII.4.Le diagnostic

sérologique

19

VItr.

Traitement

ZA a)Traitement

médical

20 L. b) Traitement

chiffigical

20

c)LaP.A.IR...

20 d) La Prophylæ<ie

...

22 t trF

Chapitre

III

:

Matériel

et

méthodes

i

L1.Matérie1...

23

Ll.l.Matériel

biologique... ...

...

... ... ...

... 23

i

I.l.2.Matériel non

biologique

26

I.2.Méthodes...

28

:

tr.l.

Screening

photochimiques...

30

Itr.l.Extraction

des

protéines...

32 _|

fr..2.Ertractron

des

poly-phéno1s...

32

Itr.2.l.Extraction par

soxtrlet...

... ...

.{.

i

32

W.Détermination des rendements

...

34

V.l.Dosage des protéines par la méthode de

Bradford

35

V.2. Evaluation de I'activité des

antio:rydants

35

V.2.l.Dosage des phénols

totaux...

35

V.2.2.Dosage des flavonoides

...

36

V. 2. 3.Evaluaton de l' activité anti-oxydante. . . .

V.2.3.1.Mesure de pouvoir de piégeage du radical

DPPH...

37

VI.lTest

de ferfilité de liquide

hydatique

... ..:

...

37

W.2..Test de viabilité des protoscolex

...

37

Vll.l.L'effet

anti hydatique de I'infusé

d'Allium

sativum...

38

VII.2.L'effet

d'extrait protéique et des poly-phénols sur la viabilité des protoscolex... ...

...

38

Vltr.Etude histologique...

...

38

Vltr.l.

Recoupe des

prélèvements...

38

Vltr.z. Mse

en culture des fragments

kystiques

38

VItr.3. La fixation des pièces tissulaires dans le formaldéhyde

4Yo...

39

VItr.4.

Déshydratation et

éclaircissement

40

l,

ili JI ti fi Ir

.#

(4)

li

Y

Vltr.S.Inclusion

...

:.

4t

VItr.6.

La réalisation des coupes histologiques ...

...

42

VIIL7.

Etalement, collage et

séchage..

42

VItr.8.

Déparaffinage et réhydratation

...

43

t:.

t;

Vltr.g.

Coloration..I...

43

Yltr.lo.

Montage...

.. 43

[,

Vltr.llDeshydratation...

43 i

.#

Vltr.l2.

Observation microscopiques des coupes histologiques...

...

44

Chapitre

IV:

résultats et discussion

I.

l.Screening

phytochimique...

45 '

.'

tr.Determination

du

rendement

d'extraction

48

tr.

l.dosage des

protéines

49

tr.

2.dosage des poly-phénols

totaux

50 tr.3. Dosage des flavonoides

...

...;..

ï

5l

tr.4.Evaluation de

l'activité

anti-oxydante

52

Itr.Test de fertilité de liquide

hydatique

53

IV.Test de viabilité des

protoscolex...

54

V.l.L'effet

de l'infusé sur la viabilité des protoscolex

...

55

Y.2.L'effet

d'extrait des polyphenols sur la viabilité des protoscolex

...

56

V.3.L'effet

d'extrait protéique sur la viabilité des protoscolex ... 58

Vl.l'effet

des extrait protéiques et polyphénoliques sur la viabilité des

protoscolex...

59

VILÉtude Histologique de la membrane laminaire de kyste hydatique de foie fertile traité

par les différents

extraits

6l

Conclusion

64

Les références bibliographiques

Les annexes Résumé

f''

i .l; _I :l .l t! I I I ! f,

I

,ça

(5)

Résumé

La chinrgie est le meillern

ôoix

dc tnait€m€nt

&

I'hyddidce hrmaine. C€p€ndmt I'inftctim

smdairc

est I'rm des

ptim

finau dc b chftrqgic dms le traitcmcm dc lih;ddidcc qui Ésulæ de la

p$ecim

de prcæælex dms

h

cavité

ffitÉle.

De nombrrerur aguts scolicid€s

û3

Aé utilisés

pou

inaclivcr.le

omûanu

ô

kJËûG, mais la _lrryartd'anûc crx sqrt associés à dcs cftæ socqrdaircs ind6irablc. Ccrtaincs éûdcs

mt

indiqrÉ qrn les plmtes traditimelles pclrrai€ût arroir rme

qlicuio

potentidle dms la péventim des inftctims poc@aæofues.

Dms oetc éudc, nans ryrrrs Gxanriné

l'€ft

scolicide _{û'Allhat tuivrot, et lerrs 1merits}

('infrsé

l'èÉait éftmoliçrc,

I'etait

potdfqræ)

sr

les poûGaold

tE

grûulæus et aussi

sr

lr

membrme de kyse hydatique de foie fcrtile d'cigine humaine. L'adivité scolicide tAlllum satvm a êé mmtrée €t

pflrait

dmc êtne rIile dms

tr

chirûgie

fu

kyste hydaiçe. De pût scs activié mtibact&ime et dicmo&orse, AÛhon

frtvron pqnmit oosûihrr un poûentid

rcryerriEre

imprtm dils

&

le dévelqement de stratQies de

taitement dc

l'échinmcce

ky*içe.

Mot

clés:

Echinoooæus

grrnrbûus

_,Pnotæolex,

Al[um

srtivum, Hydetiilæe,

rgenûs

solicideexûdt

poûéhue,entrdt

éthanolique,

Abstrat

Srrgeryisûebest chtfæ futreainghmmhyddid dfuease. IIoqrcver secmdryinfectim is

oeof

ûre final points of sngery in tre ûeûnent of hydatidæis that results

ûqr

ûre pojeotiut of prcæoolor into the p€ritmeal cavity. I}lmy scolicidal agsnb har'e

b6

us€d to inactirde lhe omt€G ofthe cyst

hf

most oflùem

û€

associded with undesirable sidÊ €fr€cûs. Sme stdies have indicded thd traditimal

plffi

may have

pdential

_rylicdim

in ùe pevenlim ofpocCoperæire inftctims"

In

ôis

sûrd5r, we investigûod'ûe sælicidal e,ftct of Allftm

sdinm

md their _foùrcts(infiË€{,

eftmolic ortract, prdcin €rcract) on E proûosolex. granulmrs and also an the hydæid clrt mernbrme of fertile

liverofhumm aigin- Ihesodicidal aoivityofAllium

sainimhasba

Swn

mdoûldûerrefûebeus€ftIin hyddid cynt wgEry.

Bmæ

of

ie

dibacterial md

dicms

activity, Allirm satiyum

sild

mstihtûe

m

inpatun ûeræeutic pdertial in ûe denelopnant of

@ies

for the trednent of cystic echinocoocæis.

Key words:

Echinooccuc$mrbsûs,

notcolex,

Allium

srtiwm,

hydatid disease ,

mtcftlelr$nts,

pmûein

Gtrlct,

ethenolic

etrrîrcf.

UniL

,/ irLiti ll e.r-r-Jl gS .ç-f -cf t v-3,. tt o.+lJl ûsa g'l&) Jt+ J.à,jÎ ,î iit L=-Jl

JDtz^t

_{æ è.ij+}

_rt.i-.!t

_.jr*rl

_o.+-(-Jl

rl.r

_sLc

,,ê

b.t{#.rajl{,..rry|

_{y r:tt}

.#Jj+.;+Jt Li+r+ijt si ilqXi_rjt->+

if,

.- r,i+lll orJ-rjz Ja1.1jiJ iJI:-tl

ol;-r(Jl

-|:l-rc lt

rrr-ll

plt:'i-"t.:

(ri -Jl cr[-irl;r !1 6ur]

.:-1

ui .r-is .tr*i çr;_p r+è i+St? ot -f-3ï:.

L!

iJ+

r*{ I

ê Ért

_{,lirlJll û,r i4lJJ-ll yJ}

_J-.Lir:r

_.!+-+Jâ-J

l, I

_ùJ.S+

J-i

i-Jr

_!r

Fi

ll .!j-

_1-l|: '

itl

r+Jl

'

Allfum sAivum

-J

ia.rs'ilrJr

rrl.;rl-r-Jl J+jii

i-l-l-t

l-iÀt . i-olJ.r-Jl oir ,-t

le

4+.!-làlr

.E.

pdoeolex ,r-fs (û+iJ r+ll rlali4r . JJjq) t . 0âl-i-4!l )

_{F+jl ?-!i}

-,

=

_{I'l-Li p)s F .;14i1}

.j-i ty .g-Jl +s-Jl ip ',il - ll o.+lll .l-l.ê .-t- t.'_i.

bt->z ê tjf r.

ûaS+

,li uS+J eJlr rl rJ .

Allirm sdivum

-.t

i-grliir-Jr

ot.)r5,-r.-Jl

JSâ{ oi

ùS-^-l

.

ùLbJ,,.-LJ

rUr-qg t-r++S+f-l :l-i. ll lrLlÀi"jt-

-.-!r.rl

or+:ill

ot3rl-rjl

e

l.r gls slrl!il

rj-sl

_J-J.lrtLj

j

t^a.

i+?fu crLjl<..1 Allirm

sg]ivtm

i'4fl

:ltr'Èr+-tl

ËF-rt

r|r

e Allfium

sltivum.

sF{t$-ir.l$

.Dcùinoooocus

gruddp

;IpEir$

'',[.r(q driÉtyl sâtÂ3.s . _drtfuUrll

sd$lr

3