Influence des microparticules sur la fonction vasculaire lors de pathologies hypoxiques

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Influence des microparticules sur la fonction vasculaire lors de pathologies hypoxiques

Simon Tual-Chalot

To cite this version:

Simon Tual-Chalot. Influence des microparticules sur la fonction vasculaire lors de pathologies hypox- iques. Médecine humaine et pathologie. Université d’Angers, 2011. Français. �tel-00978657�

Année 2011 1ƒG¶RUGUH : 1174

Influ e n ce d es mi c roparti c ul es s ur la fon c tion va sc ulair e lor s d e pathologi es hypoxiqu es

Thèse de Doctorat

Spécialité : Physiologie & Physiopathologie Humaine Ecole doctorale Biologie Santé

Présentée et soutenue publiquement Le 12 octobre 2011, à Angers

Par

Simon TUAL-CHALOT

Devant le jury ci-dessous:

Pr Patrick LEVY Rapporteur PU-PH, Université de Grenoble Pr Roger MARTHAN Rapporteur PU-PH, Université de Bordeaux Pr Patrick SAULNIER Examinateur PU, Univ HUVLWpG¶$QJHUV

Directeur de thèse:

Docteur Maria Del Carmen MARTINEZ

INSERM U694

!"

SO M M A I R E

#"

SO M M A I R E ... 1

R E M E R C I E M E N TS ... 6

L IST E D ES PU B L I C A T I O NS & C O M M U N I C A T I O NS ... 11

A B B R E V I A T I O NS ... 14

L IST E D ES F I G U R ES & T A B L E A U X ... 19

A V A N T-PR O P OS ... 22

C H A PI T R E 1 - D O N N E ES B I B L I O G R A P H I Q U ES ... 25

I. Le système vasculaire et ses fonctions ... 26

1. La circulation sanguine ... 26

1.1. Organisation et rôles ... 26

1.1.1. La circulation systémique ou grande circulation ... 26

1.1.2. La circulation pulmonaire ou petite circulation ... 27

1.1.3. Morphologie et histologie de la paroi artérielle ... 28

1.2. Mécanismes de régulation de la vasomotricité... 30

1.2.1. Contraction des cellules musculaires lisses ... 30

1.2.2. Relaxation des cellules musculaires lisses ... 32

2. 3K\VLRORJLHGHO¶HQGRWKpOLXP ... 35

2.1. +pWpURJpQpLWpVWUXFWXUHOOHHWIRQFWLRQQHOOHGHO¶HQGRWKpOLXP ... 35

2.2. )DFWHXUVYDVRDFWLIVSURGXLWVSDUO¶HQGRWKpOLXP ... 35

2.2.1. )DFWHXUVUHOD[DQWVGpULYpGHO¶HQGRWKpOLXP ... 35

2.2.2. )DFWHXUVFRQWUDFWDQWVGpULYpVGHO¶HQGRWKpOLXP ... 41

2.2.3. Les autres médiateurs ... 43

2.3. La dysfonction endothéliale ... 45

II. Les microparticules circulantes ... 46

1. Découverte et définition ... 46

2. Formation des microparticules ... 46

/¶DFWLYDWLRQFHOOXODLUH ... 47

/¶DSRSWRVH ... 49

2.3. Autres mécanismes de formation ... 49

$"

3. Composition et contenu des microparticules ... 50

3.1. Contenu protéique ... 50

3.2. Contenu lipidique ... 51

4. Interaction entre les microparticules et les cellules cibles ... 51

4.1. Interaction ligand-récepteur ... 52

4.2. Transfert de composants ... 53

4.3. Fusion et internalisation ... 53

5. Les microparticules : biomarqueurs et effecteurs dans les pathologies cardio-vasculaires ... 54

5.1. Effets des microparticules sur la fonction vasculaire ... 54

5.2. Angiogenèse et microparticules ... 55

6. Modulation et action thérapeutique des microparticules ... 57

,,,3K\VLRSDWKRORJLHGHO¶HQGRWKpOLXP O¶H[HPSOHGHGHX[SDWKRORJLHV hypoxiques... 59

1. Les pathologies pulmonaires ... 59

/¶K\SHUWHQVLRQDUWpULHOOHSXOPRQDLUH ... 59

2.1. Classification clinique des hypertensions pulmonaires ... 59

2.2. Manifestations cliniques et diagnostic ... 61

2.3. Pathogénèse globale ... 61

2.4. Stratégie thérapeutique ... 63

2.5. Modèles animaux ... 64

/HV\QGURPHG¶DSQpHREVWUXFWLYHGX sommeil ... 65

3.1. Manifestations cliniques et diagnostic ... 65

3.2. Pathogénèse globale ... 66

3.3. Stratégie thérapeutique ... 69

O BJ E C T I FS D ES T R A V A U X ... 70

C H A PI T R E 2 - R ESU L T A TS ... 72

Partie I : Les microparticules circulantes issues de rats hypoxiques chroniques entraînent une dysfonction endothéliale ... 73

,%XWGHO¶pWXGH ... 74

%"

II. Matériel et méthodes... 75

1. Matériel biologique ... 75

0LFURSDUWLFXOHVLVVXHVG¶XQPRGqOHDQLPDO : le rat hypoxique ... 75

1.2. Cellules endothél LDOHVG¶DRUWHHWG¶DUWqUHSXOPRQDLUHGHUDWV ... 78

2. Cytométrie en flux ... 79

3. Western blot ... 80

4. Dosage des radicaux libres par résonnance paramagnétique électronique ... 82

'RVDJHGHO¶DFWLYLWpGHOD[DQWKLQHR[\GDVH ... 83

6. Réactivité vasculaire ... 83

7. Analyse statistique ... 84

III. Résultats ... 85

IV. Discussion ... 95

Partie II 0LFURSDUWLFXOHVLVVXHVGHSDWLHQWVV\QGURPHG¶DSQpHVREVWUXFWLYHVGXVRPPHLOHW hyperréactivité vasculaire U{OHGHO¶HQGRWKpOLXP ... 102

,%XWGHO¶pWXGH ... 103

II. Matériel et méthodes... 104

1. Matériel biologique ... 104

2. Cytométrie en flux ... 105

3. Réactivité vasculaire ... 105

4. Western blot ... 106

'RVDJHGXPRQR[\GHG¶D]RWH ... 106

6. Dosage des divers prostanoïdes ... 107

7. Analyse statistique des résultats ... 107

III. Résultats ... 108

IV. Discussion ... 122

Partie III 0LFURSDUWLFXOHVLVVXHVGHSDWLHQWVV\QGURPHG¶DSQpHVREVWUXFWLYHVGXVRPPHLOHW angiogenèse ... 127

,%XWGHO¶pWXGH ... 128

II. Matériel et méthodes... 129

&"

1. Matériel biologique ... 129

2. Mesure du taux de VEGF ... 129

3. Western blot ... 130

4. Prolifération cellulaire ... 130

5. Mesure de la formation de capillaire sur Matrigel ... 131

6. Analyse statistique des résultats ... 131

III. Résultats ... 132

IV. Discussion ... 137

C H A PI T R E 3 - C O N C L USI O N & P E RSP E C T I V ES ... 141

A N N E X ES ... 145

B I B L I O G R A P H I E ... 148

PU B L I C A T I O NS & M A N USC R I T ... 167

R e vu es : Microvesicles: intercellular vector of biological messages Tual-Chalot S, Leonetti D, Andriantsitohaina R, MartinezMC. Molecular Interventions, 2011 ... 168

Microparticles: targets and tools in cardiovascular disease MartinezMC, Tual-Chalot S, Leonetti D, Andriantsitohaina R. Trends in Pharmacological Sciences, 2011 ... 176

Publi c ation s : Circulating microparticles from pulmonary hypertensive rats induce endothelial dysfunction Tual-Chalot S American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine, 2010 ... 184

Nocturnal release of leukocyte-derived microparticles in males with obstructive sleep apnea Trzepizur W, Priou P, Paris A, Nardi J, Tual-Chalot S, Meslier N, Urban T, Andriantsitohaina R, Martinez MC, Gagnadoux F. European Respiratory Journal, 2011 ... 193

M anu sc rit :

Sleep apnea syndrome microparticles enhance vascular contraction: mandatory role of the

endothelium

Tual-Chalot S, Fatoumata K, Priou P, Trzepizur W, Contreras C, Prieto D, Martinez MC,

Gagnadoux F, Andriantsitohaina R ... 197

'"

R E M E R C I E M E N TS

("

-HWLHQVjH[SULPHUPDUHFRQQDLVVDQFHDX'RFWHXU&DUPHQ0DUWLQH]TXLP¶DDFFXHLOOL et guidé depuis mon master 2. Merci vivement de ton soutien constant, de ta grande dispon LELOLWp HW GH WD JHQWLOOHVVH -¶HVSqUH TXH WX WURXYHUDV LFL O¶H[SUHVVLRQ GH PD reconnaissance.

&HWUDYDLOQ¶DXUDLWpJDOHPHQWSDVSXVHIDLUHVDQVODYRORQWpHWO¶HIILFDFLWpGX'RFWHXU Ramaroson Andriantsitohaina. Je le remercie vivement pour nos échanges scientifiques que nous avons pu avoir tous ensemble, notamment le lundi matin.

Je remercie monsieur le Professeur Patrick Lévy et monsieur le Professeur Roger 0DUWKDQG¶DYRLUDFFHSWpG¶rWUHOHVUDSSRUWHXUVGHPHVWUDYDX[GHWKqVH-HOHXUH[SULPHWRXWH ma g UDWLWXGHSRXUO¶KRQQHXUTX¶LOVPHIRQWHQMXJHDQWFHWUDYDLO

-HUHPHUFLHpJDOHPHQWPRQVLHXUOH3URIHVVHXU3DWULFN6DXOQLHUG¶DYRLUDFFHSWpGHPH

IDLUHO¶KRQQHXUGHSDUWLFLSHUjFHMXU\

)"

Un remerciement très particulier au Dr Christelle Guib HUWGHO¶,16(508SRXU VRQWUDYDLOVXUO¶REWHQWLRQGHV03VK\SR[LTXH s, son accueil lors de ma visite et les échanges VFLHQWLILTXHVTXLP¶RQWSHUPLVGHUpDOLVHUFHWUDYDLO

0HUFL pJDOHPHQW j O¶pTXLSH GX VHUYLFH GH 3QHXPRORJLH GX &+8 G¶$QJHUV HW SOXV particulièrement le Professeur Frédéric Gagnadoux, et les Docteur Pascaline Priou et Wojciech Trzepizur pour les MPs, les discussions et la bonne humeur toujours présente !

Je tiens également à remercier le GRRC et la SFP de donner la possibilité aux jeunes FKHUFKHXUVGHV¶H[SULPHUHWGHSDUWLFLSHUjODFRPPXQDXWpVFLHQWLILTXHDLQVLTXHSRXUOHXUV soirées de folies !!!!

Je souhaite remercier chaleureusement Carmen et Naina qui sont beaucoup plus que des encadrants, et qui nous permettent de nous sentir vraiment bien au sein du laboratoire.

Vous avez placé la barre très haute pour mes futurs laboratoires !

-¶DLPHUDLpJDOHPHQWUHPHUFLHUWRXWHVOHVSHUVRQQHVSDUWDJHDQWDXTXRWLGLHQODYLHGX laboratoire et qui rendent les conditions de travail si agréable, Matthieu un vrai collègue et vrai ami, Lucie même si on ne joue plus dans la même catégorie et Raffa membre indispensable GHO¶pTXLSH0DUWLQH]

Je tiens à remercier également les anciens et actuels mem EUHV GH O¶pTXLSH 1DLQD - Martinez, Angela, Daniela (partenaire attitrée de myographie), Francesco et Mariele, Carmina, Christina et Vannina, Ahmed, Abdel et Tarek, Alexis, Françoise, Nicolas et 6pEDVWLHQTXLP¶RQWDFFRPSDJQpHW ont participé à ma formation tout au long de ces derniers années. Merci également à Céline qui a contribué à ma grande passion pour les DQLPDOHULHV«0HUFLHQILQj)DWRX+HQU\HW$QJpOLTXHSRXUOHXUFRQWULEXWLRQDSSRUWp e a ce travail. Merci à vous pour votre gentillesse et vos précieux conseils.

-¶DL commencé FHWUDYDLOGDQVO¶805&156 -INSERM 771 du Docteur Daniel Henrion. Emilie, Anne-Laure, Kévin, Bertrand, Jennifer, Lamine, Kahena et Emmanuelle Maire, je les remercie. Ma dernière année a débuté par un grand déménagement (dans des supers locaux HW V¶HVW HIIHFWXpH GDQV O¶8 GLULJp SD r le Professeur Yves Malthiéry.

Audrey, Delphine, Jihane, Luisa (et les poissons obèses !); Aziz, Caroline, Emilie, Ghaceb

(bon courage avec Lucie !), Jacques; Amine (dernière année !) et Mireille (super intendante),

à tous merci GH P¶DYRLU DSSRUWp XQH DLG e parfois précieuse dans la réalisation de mes

*"

expériences, et dans la réponse à toutes les questions pratiques, techniques et administratives auxquelles un étudiant en thèse se retrouve forcément confrontés.

Une petite pensée pour nos rivaux-a PLVGHO¶,%7 toujours prêts pour une pétanque à OLOOHRXDLOOHXUVHWPHPEUHVGX/D\RQ¶V&OXE

Archidelaballe, toujours partant pour tout, dattebayo!!!

La famille Bastiat- 3LQLHU *XLOODXPH O¶KRPPH OH SOXV IRUW GX PRQGH FDSDEOH GH soulever un stade à lui tout seul et Maud P, Dr ! , femme la plus forte du monde pour supporter son homme.

Elisa, ma petite espagnole support de star, bon courage avec tes monkeys Florian, mélodicien de talent, aussi étourdi que moi, ça me fait bien plaisir!!!

Marie Morille, organisatrice de t RXUQRLPDLVGpWHVWHSHUGUH«

0DXG*SDULVLHQQHGHWDOHQWIHPPHFKRFRODW«

Matt, que de bons moments à la piscine, au golf, au travail aussi!!!

/XFLH SHUWXUEDWULFH GH WRXV OHV LQVWDQWV UHLQH GH O¶R[\JUDSKLH ERQ FRXUDJH SRXU OD GHUQLqUHOLJQHGURLWH«

Raff D WX DV OH F°XU VXU OD PDLQ MH Q¶RXEOLHUDL SDV TXH F¶HVW WRXMRXUV PLHX[ TXDQG 5DIIDHVWOj«

,DFFRLWDOLHQMXVTX¶DXERXWGHVRQJOHVDYHFWRXWFHTXHFHODLPSOLTXH«

Welsh le pub, Welsh la bière et Welsh le chat 0HUFLG¶rWUHOjjWRXVOHVLQVWDQWVGHODY ie

$WRXVFHX[TXHMHQ¶DLSDVPHQWLRQQpHWTXLRQWFRQWULEXpGHSUqVRXGHORLQjrWUHFH que je suis, tous les Lasséens, à O¶DYHQLU«

Je voudrais également remercier la très grande famille Roger-Maubert-Naulet de Vieil

%DXJp DLQVL TX¶(PLOLH XQH GH VHV S lus folle représentante (désolé mais mes derniers remerciements ne seront pas pour toi!)

Je voudrais enfin remercier ma famille, notamment mes parents, Yves et Patricia, qui P¶RQWVRXWHQXWRXWDXORQJGHPHVELHQVORQJXHVpWXGHVPHVSHWLWVIUqUHVHWV°XU Matthieu, Pierre et Camille.

0RQGHUQLHUUHPHUFLHPHQWVHUDSRXUWRL0DWKLOGHTXLP¶DRXYHUWODYRLHPHUFLG¶rWUH

Oj-HQHVXLVSDVLQTXLHWSRXUQRWUHDYHQLUQRQSOXVHWWXVDLVSRXUTXRL«

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L IST E D ES PU B L I C A T I O NS

& C O M M U N I C A T I O NS

!#"

A R T I C L ES PU B L I ES

Martinez MC, T ual-C halot S, Leonetti D, Andriantsitohaina R. Microparticles: targets and tools in cardiovascular disease. Trend s Pharmacol Sci. (Sous presse).

T ual-C halot S, Leonetti D, Andriantsitohaina R, Martinez MC. Microvesicles: intercellular vectors of biological messages. Mol In t e r 2011;11:88-94.

Trzepizur W, Priou P, Paris A, Nardi J, T ual-C halot S, Meslier N, Urban T, Andriantsitohaina R, Martinez MC, Gagnadoux F. Nocturnal release of leukocyte-derived microparticles in males with obstructive sleep apnoea. Eur Re s pir J 2011;37:1293-1295.

Benameur T, T ual-C halot S, Andriantsitohaina R, Martinez MC. PPARalpha is essential for microparticle-induced differentiation of bone marrow- derived endothelial progenitor cell and angiogenesis. Plo s One 2010;5.

T ual-C halot S, Guibert C, Muller B, Savineau JP, Andriantsitohaina R, Martinez MC.

Circulating microparticles from pulmonary hypertensive rats induce endothelial dysfunction.

Am J Re s pir Cri t Care Med 2010;182:261-268.

A R T I C L ES SO U M IS O U E N PR E P A R A T I O N

T ual-C halot S, Fatoumata K, Priou P, Trzepizur W, Contreras C, Prieto D, Martinez MC, Gagnadoux F, Andriantsitohaina R. Sleep apnea syndrome microparticles enhance vascular contraction: mandatory role of the endothelium. Soumi s .

Rottner M, T ual-C halot S, Mostefai HA, Andriantsitohaina R, Freyssinet JM, Martinez MC.

Increased oxidative stress induces apoptosis in cystic fibrosis cells. Soumi s à Plo s One.

Lopez-Andres N, Tesse A, Regnault V, Huguette L, Cattan V, Thornton S, labat C, Kakou A, T ual-C halot S, Faure S, Challande P, Osborne-Pellegrin M, Martinez MC, Lacolley P, Andriantsitohaina R. Increased microparticle production and impaires microvascular endothelial function in aldosterone-salt-treated rats. Protective effects of Polyphenols. Soumi s à Bri t i s h Journal o f Pharmacology.

C O M M U N I C A T I O NS

T ual-C halot S, Fatoumata K, Priou P, Trzepizur W, Contreras C, Prieto D, Martinez MC, Gagnadoux F, Andriantsitohaina R. Micoparticles from OSA patients induce hyper-reactivity through up-regulation of pro-inflammatory proteins. Congrè s du GRRC, Lyon, 2011.

Communi ca t ion a ff ichée . Prix de la communica t ion a ff ichée . Archive s o f Cardiova s cular di s ea s e s , 2011; 2 :1-91.

Jeanneteau J, Martinez MC, T ual-C halot S, Tamareille S, Furber A, Andriantsitohaina R, Prunier F. Microparticle release in remote ischemic postconditioning mechanism. Congrè s du

GRRC , Lyon, 2011. Communica t ion a ff ichée. Archive s o f Cardiova s cular di s ea s e s , 2011;

2 :1-91.

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T ual-C halot S, Fatoumata K, Priou P, Trzepizur W, Contreras C, Prieto D, Martinez MC, Gagnadoux F, Andriantsitohaina R. Congrè s de la Socié t é F rançai s e de Pharmacologie e t de Thérapeu t ique, Grenoble, 2011. Communica t ion a ff ichée. Fundam Clin. Pharmacol. , 2011 ; 25 ( s uppl 1) : 112-125.

T ual-C halot S, Guibert C, Savineau JP, Andriantsitohaina R, Martinez MC. Circulating microparticles from pulmonary hypertensive rats induce endothelial dysfunction. Journée s de Recher che Re s pira t oire, Nan t e s , 2010. Communica t ion a ff ichée. Rev Mal Re s pir Ac t ual, 2010 ; 2 : 3-58.

T ual-C halot S, Guibert C, Savineau JP, Andriantsitohaina R, Martinez MC. Circulating microparticles from pulmonary hypertensive rats are vectors of oxidative stress. 5ème journée GHO¶,)5$YULO&RPPXQLFDWLRQRUDOH

T ual-C halot S, Guibert C, Savineau JP, Andriantsitohaina R, Martinez MC. Circulating microparticles from pulmonary hypertensive rats are vectors of oxidative stress. Congrè s du GRRC , Nan t e s , 2010. Communica t ion a ff ichée. Archive s o f Cardiova s cular di s ea s e s , 2010;

17 ( s uppl 2).

T ual-C halot S, Rottner M, Mostefai HA, Andriantsitohaina R, Freyssinet JM, Martinez MC.

Increased oxidative stress induces apoptosis in cystic fibrosis cells. qPH MRXUQpH GH O¶,)5 132, D écembre 2009. Communica t ion orale.

Benameur T, T ual-C halot S, Andriantsitohaina R, Martinez MC PPARalpha is essential for microparticle-induced differentiation of bone marrow- derived endothelial progenitor cell and in vi t ro angiogenesis. EuropeanCounc il f or Cardiova s cular Re s earch, Nice, 2009.

Communi ca t ion orale . Hyper t en s ion, 54 (5):1169-9.

T ual-C halot S, Guibert C, Savineau JP, Andriantsitohaina R, Martinez MC. Circulating microparticles induce endothelial dysfunction in a rat model of pulmonary hypertension. 3ème MRXUQpHGHO¶,)50DL&RPPXQLFDWLRQRUDOH

T ual-C halot S, Guibert C, Savineau JP, Andriantsitohaina R, Martinez MC. Circulating microparticles induce endothelial dysfunction in a rat model of pulmonary hypertension.

Congrè s de la Socié t é F rançai s e de Pharmacologie e t de Thérapeu t ique , Mar s eille , 2009.

Prix de la communica t ion orale . Fundam Clin. Pharmacol. , 2009 ; 23 ( s uppl 1) : 1-112.

Benameur T, T ual-C halot S, Andriantsitohaina R, Martinez MC. PPARalpha is essential for microparticle-induced differentiation of bone marrow- derived endothelial progenitor cell and in vi t ro angiogenesis. Congrè s de la Soc ié t é F rançai s e de Pharmacologie e t de Thérapeu t ique, Mar s eille, 2009. Communica t ion oral e. Fundam Clin. Pharma col . , 2009; 23 ( s uppl 1) : 1-112.

T ual-C halot S, Guibert C, Savineau JP, Andriantsitohaina R, Martinez MC. Circulating microparticles induce endothelial dysfunction in a rat model of pulmonary hypertension.

Congrè s du GRRC , Nancy, 2009. Communica t ion orale. Archive s o f Cardiova s cular di s ea s e s , 2009; 102 ( s uppl 1).

Benameur T, T ual-C halot S, Andriantsitohaina R, Martinez MC PPARalpha is essential for

microparticle-induced differentiation of bone marrow- derived endothelial progenitor cell and

in vi t ro angiogenesis. Congrè s du GRRC , Nancy, 2009. Communica t ion orale. Archive s o f

Cardiova s cular di s ea s e s , 2009; 102 ( s uppl 1).

!%"

A B B R E V I A T I O NS

!&"

5-H T Sérotonine

A A Acide arachidonique

A c -L D L Lipoprotéines de basse densité acétylées A c tD Actinomycine D

A M P c Adénosine- ¶¶ -monophosphate cyclique A N O V A Analyse globale de la variance

A R Nm Acide ribonucléique messager A T P Adénosine- ¶ - triphosphate BSA Albumine sérique bovine C E s Cellules endothéliales

C M H 1-hydroxy-3methoxycarbonyle 2,2,5,5-tetramethylpyrrolidine C M L Cellules musculaires lisses

C O X Cyclooxygénase

C O X-1 Cyclooxygénase constitutive C O X-2 Cyclooxygénase inductible

C X C R4 Co-récepteur à chémokine de type 4 D A G Diacylglycérol

D E T C Diéthyldithiocarbamate

D M E M Dulbecco's modified eagle's medium E B M-2 Endothelial basal cell medium-2

E D H F Facteurs hyperpolarisants dépendants GHO¶HQGRWKpOLXP E max Effet maximal

E M P s Microparticules endothéliales

e N OS 0RQR[\GHG¶D]RWHV\QWKDVHHQGRWKpOLDOH E R O (VSqFHVUpDFWLYHVGpULYpHVGHO¶R[\JqQH E T Endothéline

E T

Récepteurs endoth pOLDX[jO¶HQGRWKpOLQH

!'"

F e (D E T C)

Diethyldithiocarbamate de fer F I T C Isothiocyanate de fluorescéine G C s Guanylate cyclase soluble

G M P c Guanosine- ¶¶ -monophosphate cyclique G T P Guanosine- ¶ -triphosphate

H T A P Hypertension artérielle pulmonaire I A H ,QGH[G¶DSQpHV -hypopnées

I C A M-1 Inter-cellular adhesion molecule 1

I D O ,QGH[GHGpVDWXUDWLRQGHO¶R[\KpPRJORELQH iN OS 0RQR[\GHG¶D]RWHV\QWKDVHLQGXFWLEOH IP

Inositol triphosphate

L PS Lipopolysaccharide

M A P K Mitogen-activated protein kinase mi A R N Micro acide ribonucléique messager M L C Chaîne légère de la myosine

M L C K Kinase des chaînes légères de la myosine M L C P Phosphatase de la chaîne légère de la myosine M M P s Métalloprotéinases

M P s Microparticules

M V2 Endothelial cell growth medium

N A DP H Nicotinamide adénine dinucléotide phosphate N F- ț% Nuclear factor kappa B

nN OS 0RQR[\GHG¶D]RWHV\QWKDVHQHXURQDOH N O 0RQR[\GHG¶D]RWH

N OS 0RQR[\GHG¶D]RWHV\QWKDVH

!("

O

Dioxygène

O

Anions superoxydes O N N O

Peroxynitrites

P A P Pression artérielle pulmonaire PBS Phosphate buffer saline

P G D

Prostaglandine D

P G E

Prostaglandine E

P G F

Prostaglandine F

P G I

Prostacycline P H A Phytohémagglutine

PI3 K Phosphatidyl-inositol 3 kinase PIP

Phosphatidyl-inositol biphosphate P K Protéine kinase

P K G s Protéines kinases guanosine- ¶¶ -monophosphate cyclique -dépendantes P L C Phospholipase C

P M A Phorbol-myristate-acétate P M P s Microparticules plaquettaires

33$5Į Peroxysome proliferator-activated receptor Į PP C Pression positive continue

PPP Plasma pauvre en plaquettes

R IP

5pFHSWHXUFDQDOjO¶LQRVLWROWULSKRVSKDWH R O C Receptor-operated channel

R O C K Rho-associated protein kinase

RP E Résonnance paramagnétique électronique RyR Récepteur canal sensible à la ryanodine Sa O

Saturation artérielle en oxygène

SA OS 6\QGURPHG¶DSQpHVREVWUXFWLYHVGXVRPPHLO SE M Erreur standard de la moyenne

SE R C A Sarco endoplasmic reticulum ATPases

SV F 6pUXPGHYHDXI°WDO

!)"

T P Récepteurs au thromboxane A

T R A I L Tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand T X A

Thromboxane A

V E G F Vascular endothelial growth factor

V O C Voltage-operated channel

!*"

L IST E D ES F I G U R ES

& T A B L E A U X

#+"

F igur e 1 Représentation schématique de la circulation systémique et pulmonaire ... 27 F igur e 2 Représentation schématique de la paroi vasculaire ... 29 F igur e 3 Voies de signalisations intracellulaires de la contraction des cellules musculaires lisses ... 31 F igur e 4 Voies de signalisations intracellulaires de la relaxation des cellules musculaires lisses ... 34 F igur e 5 Facteurs YDVRUHOD[DQWVV\QWKpWLVpVSDUO¶HQGRWKpOLXP ... 36 F igur e 6 Réaction catalysée par les NOS ... 37 F igur e 7 0pFDQLVPHGHSURGXFWLRQGH12SDUO¶H126 ... 38 F igur e 8 Effets multiples du NO endothélial ... 39 F igur e 9 0pWDEROLVPHGHO¶DFLGHDUDFKLGRQLTXH ... 40 F igur e 10 Représ HQWDWLRQVFKpPDWLTXHGHVGLYHUVHVHVSqFHVUpDFWLYHVGHO¶R[\JqQHHWGHV réactions chimiques impliquées ... 43 F igur e 11 6RXUFHG¶DQLRQVVXSHUR[\GHVGDQVOHVFHOOXOHVHQGRWKpOLDOHV ... 44 F igur e 12 0pFDQLVPHVLPSOLTXpVGDQVO¶DSSDULWLRQGHODG\VIRQFWLRQHQGRWKpOLD le ... 45 F igur e 13 Voies de signalisations connues pour être impliquées dans la formation des microparticules ... 47 F igur e 14 0pFDQLVPHVG¶LQWHUDFWLRQVHQWUHVOHVPLFURSDUWLFXOHVHWOHXU s cellules cibles . 52 F igur e 15 Les différentes étapes du processus angiogénique ... 56 F igur e 16 Utilisation de microparticules comme outil thérapeutique ... 58 F igur e 17 5{OHGHODG\VIRQFWLRQHQGRWKpOLDOHGDQVO¶+7$3 ... 62 F igur e 18 &RUUpODWLRQSRVLWLYHHQWUHODVpYpULWpGHO¶+7$3HWOHWDX[GH microparticules G¶RULJLQHHQGRWKpOLDOH ... 63 F igur e 19 Mécanisme de la dysfonction endothéliale observée dans le SAOS ... 67 F igur e 20 Corrélation entre le taux de microparticules leucocytaires et la production de PRQR[\GHG¶D]RWHSDUOHVFHOOXOHVHQGRWKpOLDOHVKXPDLQHV(DK\ ... 68 F igur e 21 Effet de trois VHPDLQHV G¶K\SR[LH FKURQLTXH FKH] OH UDW VXU OHV YDOHXUV GH pression artérielle pulmonaire moyenne, du rapport de Fulton et de O¶KpPDWRFULWH ... 77 F igur e 22 Taux circulants de microparticules chez les rats normoxiques et hypoxiques 87 F igur e 23 Les microparticules issues des rats hypoxiques diminuent la production de NO GDQVOHVFHOOXOHVHQGRWKpOLDOHVG¶DRUWH ... 88 F igur e 24 Les microparticules issues des rats hypoxiques diminuent la production de NO GDQVOHVFHOOXOHVHQGRWKpOLDOHVG¶DUWqUHSXOPRQDLUH ... 89 F igur e 25 Les microparticules GH UDWV K\SR[LTXHV GLPLQXHQW OD SURGXFWLRQ G¶2

XQLTXHPHQWGDQVOHVFHOOXOHVHQGRWKpOLDOHVG¶DUWqUHSXOPRQDLUHV ... 90

#!"

F igur e 26 Les microparticules hypoxiques diminuent la relaxation dépendante de O¶HQGRWKpOLXP ... 92 F igur e 27 Réactivité vasculaire chez les rats normoxiques et injectés par les microparticules hypoxiques ... 94 F igur e 28 Mécanismes impliqués dans la dysfonction endothéliale induite par les microparticules K\SR[LTXHVGDQVO¶+7$3 ... 101 F igur e 29 &RUUpODWLRQ HQWUH O¶LQGH[ G¶DSQpHV -hypopnées (IAH) et le nombre de microparticules issues des leucocytes activées (CD62L

) ... 110 F igur e 30 Les microparticules SAOS augmentent la réponse contractile aux différents agents vasoconstricteurs ... 112 F igur e 31 Implication de la voie du NO GDQV O¶K\SH rréactivité induite par les microparticules SAOS ... 114 F igur e 32 'pUpJXODWLRQGHO¶H126GDQVO¶K\SHUUpDFWLYLWpLQGXLWHSDUOHV microparticules SAOS ... 115 F igur e 33 ,PSOLFDWLRQ GHV PpWDEROLWHV GHV &2; GDQV O¶K\SHUUpDFWLYLWp LQGXLWH SDU OHV microparticules SAOS ... 117 F igur e 34 Microparticules SAOS et métabolites des COX ... 118 F igur e 35 (IIHWGHO¶DQWDJRQLVWHGXWKURPER[DQH$

GDQVO¶K\SHUUpDFWLYLWpLQGXLWHSDUOHV microparticules SAOS ... 119 F igur e 36 Interaction entre les voies du NO et des COX ... 121 F igur e 37 Mécanismes impliquées dans la dysfonction vasculaire induite par les microparticules SAOS ... 126 F igur e 38 Taux plasmatique de VEGF... 132 F igur e 39 Expression du VEGF dans les microparticules SAOS ... 134 F igur e 40 /¶DXJPHQWDWLRQGHODIRUPDWLRQGHVFDSLOODLUHVSDUOHV microparticules SAOS HVWSUpYHQXHSDUO¶DQWDJRQLVWHGXUpFHSWHXUjO¶HQGRWKpOLQH -1 ... 136 F igur e 41 Implication des microparticules SAOS dans le processus angiogénique ... 138

"

T abl e au 1 Classification clinique des hypertensions pulmonaires ... 60

T abl e au 2 Caractéristiques cliniques des patients ... 109

T abl e au 3 Taux de microparticules circulantes ... 110

T abl e au 4 Caractéristiques cliniques des patients ... 133

T abl e au 5 Anticorps utilisés en Western Blot ... 146

T abl e au 6 Composition des solutions salines de Krebs et hyperpotassique ... 147

##"

A V A N T PR O P OS

#$"

Les maladies cardio-vasculaires constituent un ensemble de troubles affectant le système circulatoire. Ces maladies VRQWG¶LPSRUWDQFHPDMHXUHHQVDQWpSXEOLTXHFDUHOOHVFRQVWLWXHQW O¶XQHGHVSUHPLqUHVFDXVHVGHPRUWDOLWpG ans les pays industrialisés. Cependant, la complexité GH O¶pWLRORJLH GH FHV SDWKRORJLHV HW O¶LPSOLFDWLRQ GH QRPEUHX[ IDFWHXUV UHQGHQW OHXU compréhension délicate.

Parmi ces facteurs, les microparticules (MPs) sont des microvésicules membranaires libérées par des cellules activées ou apoptotiques, détectables dans le sang en dehors de toutes situations pathologiques, mais GRQWO¶DOWpUDWLRQGX taux et du phénotype semble très souvent FRUUpOpjODVpYpULWpG¶XQHSDWKRORJLH Longtemps considérées comme des débris cellulaires, il est reconnu maintenant que les MPs constituent des effecteurs cellulaires susceptibles de moduler de nombreuses fonctions biologiques. (QHIIHWF¶ est dans le cadre de leurs diverses interactions que les MPs provoquent des modifications phénotypiques et fonctionnelles, physiologiques ou pathologiques, notamment au niveau de la paroi vasculaire et en particulier GH O¶HQGRWKpOLXP pouvant ainsi participer à la dysfonction endothéliale. La dysfonction endothéliale, caractérisée par une altération de la production, de la biodisponibilité et de la VLJQDOLVDWLRQGHPpGLDWHXUVVpFUpWpVHWRXUpJXOpVSDUO¶HQGRWKpOLXPYDVFXODLUH , constitue un SKpQRW\SHFRPSOH[HREVHUYpWUqVSUpFRFHPHQWDYDQWPrPHO¶DSSDULWLRQGHVPDQLIHVWDWLRQV cliniques des pathologies cardio-vasculaires. Les MPs pourraient alors être des marqueurs précoces GHO¶DWWHLQWHHQGRWKpOLDOHGDQVGHQRPEUHXVHVSDWKRORJLHV

&HVGHUQLqUHVDQQpHVQRWUHODERUDWRLUHV¶HVW ainsi intéressé de très près aux effets vasculaires des MPs. Les résu OWDWVGHFHVWUDYDX[RQWIDLWO¶REMHWGH nombreuses publications et ont permis de mettre en évidence la participation des MPs in vi t ro et ex vivo dans la régulation de la YDVRPRWULFLWp GH GLIIpUHQWV WHUULWRLUHV YDVFXODLUHV SDU O¶HQGRWKpOLXP ORUV GH SDWKROR gies cardio-vasculaires. &HWUDYDLOV¶HVWLQVFULWGDQVODSRXUVXLWHGHFHWD[HGHUHFKHUFKH , et cette WKqVH D FRQVLVWp j pWXGLHU O¶LQIOXHQFH GHV 03V VXU OD G\VIRQFWLRQ YDVFXODLUH REVHUYp e dans deux pathologies, O¶K\SHUWHQVLRQ DUWpULHOOH SXOPRQDLUH +7$3 et le V\QGURPH G¶DSQpHV obstructive du sommeil (SAOS) SUpVHQWDQWO¶K\SR[LH et une dysfonction endothéliale comme caractéristiques communes.

Ce travail est subdivisé en trois grands chapitres. Dans le premier chapitre, nous présenterons

une étude bibliographique détaillant le rôle FRPSOH[HGHO¶HQGRWKpOLXPVXUOD régulation de la

#%"

fonction vasculaire, les MPs en tant que vecteur biologique, et nous présenterons également

les deux pathologies hypoxiques étudiées. Le deuxième chapitre de ce manuscrit sera

cons DFUp j O¶ exposition de la méthodologie suivie, aux résultats expérimentaux et aux

commentaires apportés. Nous déterminerons si les MPs participent à la dysfonction

HQGRWKpOLDOH REVHUYpH GDQV O¶+7$3 1RXV pWXGLHURQV HQVXLWH O¶LQIOXHQFH GHV 03V GDQV

O¶DOWpUD tion de la réactivité vasculaire présente dans le SAOS. Dans un troisième temps, nous

pYDOXHURQV OHV PpFDQLVPHV SDU OHVTXHOV OHV 03V SRXUUDLHQW DJLU ORUV GH O¶DQJLRJHQqVH

observée dans le SAOS. Enfin, le troisième chapitre sera consacré à une synthèse de nos

résultats les plus significatifs et à la présentation des perspectives de notre travail.

#&"

D O N N E ES B I B L I O G R A P H I Q U ES

#'"

I . L e s y s t è m e va sc ulair e e t ses fon c tion s

1 . L a c ir c ulation s anguin e

Décrit pour la première fois en 1628 par William Harvey dans son ouvrage Exerci t a t io Ana t omi ca de Mo t u Cordi s e t Sanguini s in animalibu s , le système vasculaire comprend le F°XUTXLSURSXOVHOHVDQJGDQVXQUpVHDXFRPSRVpGHVDUWqUHVGHVDUWpULROHVGHVFDSLOODLUHV des veines et des veinules. Ce système constitue le premier organe qui se met en place durant O¶HPEU\RJHQqVH HW IRUPH OH SOXV JUDQG UpVHDX GX FRUSV KXPDLQ >@ ,O HVW RUJDQLVp HQ XQ UpVHDXEUDQFKpHWKLpUDUFKLVpGRQWODIRQFWLRQSULPDLUHHVWG¶DFKHPLQHUSDUOHVDQJO¶R[\JqQH et les nutriments indispensab OHVDXIRQFWLRQQHPHQWGHVWLVVXVHWG¶pOLPLQHUOHVGpFKHWVHQOHV transportant au niveau des reins ou des poumons. Ce système forme également un réseau de FRQWU{OH SHUPHWWDQW OH WUDQVSRUW HW OD VpFUpWLRQ G¶KRUPRQHV SDUWLFLSH j OD GpIHQVH GH O¶RUJDQLVPH SDU O¶LQWHUPpGLDLUH GHV FHOOXOHV LPPXQLWDLUHV HW SDUWLFLSH j OD WKHUPRUpJXODWLRQ FRUSRUHOOHHQWUDQVSRUWDQWODFKDOHXUSURGXLWHSDUOHVRUJDQHVMXVTX¶jODSHDX

1 . 1 . O rgani s ation e t rôl es

/H F°XU FRPSRUWH GHX[ SRPSHV IRQFWLRQQDQW HQ SDUDOOqOH OH F°XU JDXFKH assurant la FLUFXODWLRQ V\VWpPLTXH YHUV OHV RUJDQHV HW OH F°XU GURLW DVVXUDQW OD FLUFXODWLRQ SXOPRQDLUH (Figure 1).

1 . 1 . 1 . L a c ir c ulation s y s t é miqu e ou grand e c ir c ulation

Dans la circulation systémique, le sang sort du ventricule gauche du F°XU SDU O aorte pour

acheminer le sang vers les principales artères élastiques. Le sang progresse ensuite dans les

artères musculaires qui irriguent tous les organes et tissus de l'organisme. À proximité des

organes, les artères musculaires se ramifient en artérioles puis à l'intérieur même de l'organe,

les artérioles se ramifient en capillaires. /H VDQJ UHMRLQW HQVXLWH O¶RUHLOOHWWH JDXFKH SDU

O¶LQWHUPpGLDLUHGHVFDSLOODLUHVGHVYHLQXOHVHWGHVYHLQHV Ce circuit parcourt l'organisme en

entier; c'est pourquoi on parle de la grande circulation. Son rôle est essentiel étant donné qu'il

permet aux cellules d'être en contact avec les capillaires au niveau desquels les échanges sont

possibles.

#("

F igur e 1 : R e pr ése ntation sc h é matiqu e d e la c ir c ulation s y s t é miqu e e t pulmonair e .

1 . 1 . 2 . L a c ir c ulation pulmonair e ou p e tit e c ir c ulation

La circulation pulmonaire amène le sang veineux, pauvre en oxygène au contact des alvéoles SXOPRQDLUHVDILQG¶DVVXUHUXQHUpR[\JpQDWLRQGXVDQJ$LQVLSUHVTXHWRXWOHVDQJHPSUXQWH O¶DUWqUHSXOPRQDLU e, issue du ventricule droit, pour atteindre le lit capillaire pulmonaire où les pFKDQJHV JD]HX[ VRQW DVVXUpV DYDQW G¶rWUH UDPHQp j O¶RUHLOOHWWH JDXFKH via les veines pulmonaires (Figure 1). Les capillaires formés autour des alvéoles se raccordent aux veines EURQFKLTXHVSHUPHWWDQWO¶LUULJDWLRQQXWULWLRQQHOOHGHVEURQFKHVHWGXWLVVXEURQFKLTXH

/D SUHVVLRQ DUWpULHOOH SXOPRQDLUH PR\HQQH HVW G¶HQYLURQ j PP+J FRQWUH j PP+JGDQVODFLUFXODWLRQV\VWpPLTXH&¶HVWXQV\VWqPHjKDXWGpELWIDLEOHUpVL stance, basse SUHVVLRQHWTXLHVWWUqVVHQVLEOHjO¶R[\JqQH/HGpELWVDQJXLQSXOPRQDLUHHVWLQIOXHQFpjOD fois par des facteurs actifs (vasomotricité) et passifs (pression artérielle pulmonaire). Les

O2

O2

CO2

CO2

Veines Veine cave

Ventricule droit

Ventricule gauche

Artérioles Artères Aorte

Artère pulmonaire

Veines pulmonaires

Muscle squelettique Capillaires systémique

Capillaires pulmonaires

#)"

vaisseaux pulmonaires ont une abondante innervation autonome, et la stimulation des ganglions orthosympathiques peut diminuer de 30 % le débit sanguin pulmonaire. Ces vaisseaux répondent également aux divers agents humoraux [2].

&RQWUDLUHPHQWjODFLUFXODWLRQV\VWpPLTXHODFLUFXODWLRQSXOPRQDLUHUpSRQGjO¶ hypoxie par XQHYDVRFRQVWULFWLRQ/¶DMXVWHPHQWGHODSHUIXVLRQjODYHQWLODWLRQHVWGpWHUPLQpORFDOHPHQW par la quantité de dioxygène (O

) présente. Ce système permettant de détecter la diminution RXO¶DXJPHQWDWLRQG¶2

est constitué par les muscles lisses des petites artères pulmonaires qui FRQWLHQQHQW GHV FDQDX[ FDOFLTXHV VHQVLEOHV j O¶2

. Ces canaux sont responsables de la YDVRFRQVWULFWLRQGpFOHQFKpHSDUO¶K\SR[LHDILQGHGpWRXUQHUOHVDQJGHVUpJLRQVK\SR[LTXHVHW G¶DXJPHQWHUODSUHVVLRQDUWpULHOOHV\VW émique. Il en va autrement pour les artères systémiques, qui contiennent des canaux potassiques activés par O¶D dénosine- ¶ - triphosphate (ATP), en cas G¶K\SR[LHFHVFDQDX[ODLVVHQWVRUWLUXQHSOXVJUDQGHTXDQWLWpG¶LRQVSRWDVVLTXHVTXLFDXVHXQH vasodilatation.

1 . 1 . 3 . Morphologi e e t hi s tologi e d e la paroi art é ri e ll e

Le système vasculaire est complexe, non homogène et compartimenté en trois tuniques concentriques distinctes. Cependant, les parois vasculaires possèdent toutes un modèle G¶RUJDQLVDWLRQ FRPPXQ SHUPHWWDQW GH VLWXHU GH OD OXPLqUH YHUV OD SpULSKpULH O¶ in t ima, la media HWO¶DGYHQWLFHTXLSUpVHQWHQWFKDFXQHGHVFDUDFWpULVWLTXHVIRQFWLRQQHOOHVHWVWUXFWXUDOHV spécifiques (Figure 2).

/¶ in t ima est la tunique la plus interne et la plus fine. Elle est en contact direct avec la

FLUFXODWLRQVDQJXLQHDVVXUDQWDLQVLO¶LQWHUIDFHHQWUHOHVDQJFLUFXODQWHWOHWLVVXDUWpULHO(OOH

est constituée par une monocouche de cellules endothéliales. Cet endothélium représente ainsi

la partie de la paroi vasculaire la plus exposée aux forces mécaniques mais également aux

QRPEUHX[IDFWHXUVFLUFXODQWV'HSDUWFHWWHSRVLWLRQVWUDWpJLTXHO¶HQGRWKpOLXPSDUWLFLSHjGH

nombreuses fonctions physiologiques fondamentales telles que le contrôle du tonus

vasomoteur, le trafic des cellules sanguines, la balance hémostatique, la perméabilité

YDVFXODLUH OD SUROLIpUDWLRQ O¶LQIODPPDWLRQ O¶DQJLRJHQqVH RX HQFRUH OD VXUYLH FHOOXODLUH

/¶ in t ima est séparée de la media par la limitante élastique interne.

#*"

F igur e 2 : R e pr ése ntation sc h é matiqu e d e la paroi va sc ulair e ( G¶DSUqV Sanofi s -A v e nti s® )

La media HVWODFRXFKHODSOXVpSDLVVHFRQVWLWXDQWSULQFLSDOGHO¶DUWqUHHWHVWFRPSRVpHGH cellules musculaires lisses (CML) arrangées de manière circulaire en couche dans une matrice FRPSRVpHG¶pODVWLQH et de fibres de collagènes. Le nombre de ces couches varient suivant le W\SHG¶DUWqUHVG¶XQHFRXFKHSRXUOHVDUWpULROHVjSOXVLHXUVFRXFKHVSRXUOHVDUWqUHVpODVWLTXHV Les CML perçoivent différents signaux et leur état contractile définit le tonus vasomoteur contrôlant le diamètre, modifie la distribution du débit sanguin et permet la répartition du flux HQIRQFWLRQGHVGLIIpUHQWVEHVRLQVGHO¶RUJDQLVPH/D media HVWVpSDUpHGHO¶DGYHQWLFHSDUOD OLPLWDQWH pODVWLTXH H[WHUQH &HWWH OLPLWDQWH Q¶HVW SUpVHQWH que dans les vaisseaux de gros calibres.

/¶DGYHQWLFH HVW OD FRXFKH OD SOXV H[WHUQH GH OD SDURL YDVFXODLUH HQ FRQWDFW DYHF OH WLVVX environnant qui protège et ancre les artères aux structures avoisinantes. Son épaisseur varie selon le type vasculaire et l D ORFDOLVDWLRQ (OOH HVW FRQVWLWXpH G¶XQ WLVVX FRQMRQFWLI SHX organisé, riche en collagène et en fibres élastiques, et contenant des fibroblastes et des adipocytes. Grâce aux fibroblastes et aux fibres nerveuses qui rejoignent les fibres musculaires lisses de la media O¶DGYHQWLFHDODSURSULpWpGHV\QWKpWLVHUGHVIDFWHXUVYDVRDFWLIV qui participent au contrôle du calibre vasculaire et de la vasomotricité. Dans les vaisseaux de

Limitante élastique interne Tissus conjonctif

Endothélium /XPLqUHGHO¶DUWqUH Intima

Tissus conjonctif

Limitante élastique externe

Cellules musculaires lisses

Media Adventice

$+"

GLDPqWUHVLPSRUWDQWO¶DGYHQWLFHHVWSDUFRXUXSDUGHVYDLVVHDX[QRXUULFLHUVOHV va s a va s orum, TXLYRQWLUULJXHUO¶DGYHQWLFHHOOH -même et la partie externe de la media.

/HOLWYDVFXODLUHSXOPRQDLUHUHVVHPEOHDXOLWYDVFXODLUHV\VWpPLTXHH[FHSWpTXHO¶pSDLVVHXU GHODSDURLGHO¶DUWqUHSXOPRQDLUHHWGHVHVJURVVHVEUDQFKHVHVWjSHLQH équivalente à 30 % de FHOOHGHO¶DRUWHTXHODSURSRUWLRQGHFHOOXOHVPXVFXODLUHVHVWSOXVIDLEOHHWTXHOHVYDLVVHDX[

pulmonaires présentent une structure plus élastique que celle des vaisseaux systémiques [2].

1.2. M éc ani s m e d e r é gulation d e la va s omotri c it é

/¶pWDW GH FRQWUDFWLRQ HW GH UHOD[DWLRQ GH OD CML détermine le tonus vasomoteur et reflète O¶pTXLOLEUH HQWUH OHV GLIIpUHQWV IDFWHXUV YDVRFRQVWULFWHXUV HW YDVRGLODWDWHXUV &HW pWDW HVW contrôlé par des stimuli physiques ou chimiques.

1 . 2 . 1 . Contra c tion d es ce llul es mu sc ulair es li sses

Le taux de contraction des CML dépend de la concentration intracellulaire en calcium. La FRQFHQWUDWLRQHQFDOFLXPF\WRSODVPLTXHpWDQWWUqVIDLEOHjO¶pWDWEDVDOOHFDOFLXPQpFHVVDLUH provient soit des réserves du réticulum endoplasmique, soit du milieu extracellulaire. Deux voies conduisent ainsi à une augmentation rapide, importante et transitoire du calcium intracellulaire nécessaire à la contraction des CML : le couplage électromécanique et le couplage pharmacomécanique [3] (Figure 3).

Le couplage électromécanique consiste en une dépolarisation de la membrane cellulaire qui SURYRTXH O¶RXYHUWXUH GH FDQDX[ WUqV VpOHFWLIV GX FDOFLXP OHV © voltage-operated channel » (VOC) à travers lesquels le calcium entre dans la cellule pour initier la contraction.

/H FRXSODJH SKDUPDFRPpFDQLTXH UHSUpVHQWH OD OLDLVRQ G¶XQ DJRQLVWH j VRQ UpFHSWHXU membranaire conduisant à une augmentation du calcium intracellulaire, soit par activation de

« receptor-operated channel » (ROC), soit par libération du calcium à partir des réserves intracellulaires.

Les récepteurs des agonistes vasoconstricteurs sont couplés à une protéine G couplée à une

phospholipase C (PLC). La PLC hydrolyse le phosphatidyl-inositol biphosphate (PIP

) de la

bicouche phospholipidique en inositol triphosphate (IP

HWHQGLDF\OJO\FpURO'$*/¶,3

se

IL[H VXU OH UpFHSWHXU FDQDO j O¶,3

(RIP

) et permet la libération des réserves calciques du

$!"

réticulum endoplasmique vers le cytoplasme [4]. Parallèlement, cette hausse en calcium intracellulaire va activer le deuxième récepteur canal présent à la surface du réticulum endoplasmique, le récepteur canal sensible à la ryanodine (RyR) qui participe à O¶DXJPHQWDWLRQ JpQpUDOH GH FDOFLXP LQWUDFHOOXODLUH (QILQ XQ PpFDQLVPH GH OLEpUDWLRQ GH calcium induit par le calcium lui-même (« calcium-induced calcium release ») participe à O¶DPSOLILFDWLRQGHFHSKpQRPqQH

F igur e 3 : Voi es d e s ignali s ation s intra ce llulair es d e la c ontra c tion d es ce llul es mu sc ulair es li sses

.

VOC : voltage-operated channel; ROC : receptor-operated channel; PLC : phospholipase C; PiP2 : phosphatidyl- insositol biphosphate; DAG : diacyglycérol; IP3 : inositol triphosphate; RIP3 UpFHSWHXU FDQDO j O¶,33; RyR : récepteur canal sensible à la ryanodine; MLCK : kinase des chaînes légères de la myosine; MLC : chaîne légère de la myosine.

G G

Ca²⁺ Ca²⁺

Ca²⁺

Ca²⁺

Ca

Agoniste

Couplage électromécanique Couplage pharmacomécanique

Reticulum endoplasmique

PiP2

PLC

IP3

DAG ROC

VOC Dépolarisation

RIP3

RyR

MLC pMLC

MLCK Calmoduline - (Ca²⁺)4

Actine

CONTRACTION

Cellule musculaire lisse

$#"

/DIRUPDWLRQG¶XQFRPSOH[HFDOFLXPFDOPRGXOLQHVXLWHjO¶pOpYDWLRQGHODFRQFHQWUDWLRQHQ FDOFLXPOLEUHF\WRVROLTXHSHUPHWO¶DFWLYDWLRQGHODNLQDVHGHVFKDvQHVOpJqUHVGHODP\RVLQH (MLCK). Cette enzyme va phosphoryler la chaîne légère de la myosine (MLC), stimuler O¶DFWLYLWp $73DVLTXH GH OD P\RVLQH SHUPHWWDQW O¶LQWHUDFWLRQ DYHF O¶DFWLQH HW GRQF OD contraction de la CML.

&HSHQGDQW GHV pWXGHV RQW PRQWUp TX¶LO Q¶\ DYDLW SDV WRXMRXUV GH UHODWLRQ HQWUH OH WD ux de FDOFLXP LQWUDFHOOXODLUH HW OD FRQWUDFWLRQ VXJJpUDQW O¶H[LVWHQFH G¶XQ PpFDQLVPH DOWHUQDWLI SHUPHWWDQW G¶DXJPHQWHU OD SKRVSKRU\ODWLRQ GH OD 0/& &H PpFDQLVPH HVW GX j XQH augmentation de la sensibilité des protéines contractiles au calcium et implique O¶LQKLELWLRQGH la phosphatase de la chaîne légère de la myosine (MLCP) [5].

1 . 2 . 2 . R e laxation d es ce llul es mu sc ulair e li sses

Les mécanismes conduisant à une diminution de la sensibilité au calcium et à une diminution de sa concentration intracellulaire aboutis VHQWjXQHLQKLELWLRQGHO¶DFWLYLWpGH0/&.HWRXj une stimulation de la MLCP. La MLCP est très active dans les CML. Dès que la phosphorylation par la MLCK diminue, la MLCP déphosphoryle la myosine et ainsi inhibe les interactions myosine-actine. Si la ba LVVHGHO¶DFWLYDWLRQGHOD0/&.HVWFRQVpFXWLYHjOD diminution de calcium, le fonctionnement de la MLCP est indépendant du calcium. La baisse de la concentration en calcium se produit soit par expulsion du calcium intracellulaire vers O¶H[WpULHXU GH OD FH llule, soit par recaptage du calcium par les ATPases du reticulum sarcoplasmique, les « sarco endoplasmic reticulum ATPases » (SERCA). Trois voies interviennent dans la relaxation des CML : deux voies impliquant des nucléotides cycliques, la voie de la gua Q\ODWHF\FODVHHWODYRLHGHO¶DGpQ\ODWHF\FODVHHWXQHYRLHLPSOLTXDQWXQH hyperpolarisation des CML (Figure 4).

La voie de la guanylate cyclase soluble (GCs)-guanosine- ¶¶ -monophosphate cyclique (GMPc) est une des voies majeures impliquée dans la relaxation du tonus vasculaire. Le PRQR[\GHG¶D]RWH12HVWXQHPROpFXOHJD]HXVHJpQpUpHSDUOD12V\QWKDVH126TXL diffuse dans les CML pour stimuler la GCs, enzyme clef de la régulation cardio-vasculaire. La fixation du NO sur le fer du noyau héminique ac WLYH O¶HQ]\PH HW SHUPHW OD FRQYHUVLRQ GX guanosine- ¶ -triphosphate (GTP) en GMPc [6]. Une seconde voie de synthèse du GMPc consiste en la fixation des peptides natriurétiques sur le récepteur membranaire de la GCs.

/¶DFWLRQ GX *03F pWDQW OLPLWpH VSDWLDOHPHQW HW WHPSRUHOOHPHQW SDU O¶DFWLRQ GH

$$"

phosphodiésterases le dégradant, il va donc agir rapidement comme second messager. Le GMPc interagit avec trois différents types de récepteurs intracellulaires : les protéines kinases GMPc-dépendantes (PKGs), les canaux ioniques régulés par le GMPc et les phosphodiésterases régulées par le GMPc, même si la plupart des effets du GMPc semblent médiés par les PKGs [7]. Les PKGs vont pouvoir réduire la teneur en calcium intracellulaire par différents mécanismes [8]. Ces méca QLVPHVLQFOXHQWODSKRVSKRU\ODWLRQG¶XQHSURWpLQHGX reticulum endoplasmique, le phospholambane qui désinhibe la SERCA [9], la stimulation de la pompe Na

/Ca

[10 @HWO¶LQKLELWLRQGHVFDQDX[FDOFLTXHVGHW\SH/> 1]. De plus, il a été GpPRQWUpTXHO¶HQWUp e de calcium était plus fortement activée lorsque le taux de GMPc était bas, et inversement [12]. Le GMPc inhibe également la libération des stocks intracellulaires de calcium [13 @HWODIRUPDWLRQG¶,3

[14]. Par ailleurs, la GMPc peut directement activer les canaux potassiques, et inhiber certaines phosphodiestérases, augmentant ainsi sa clairance.

/D VHFRQGH YRLH HVW FHOOH GH O¶ adénosine- ¶¶ -monophosphate cyclique (AMPc). Des récepteurs couplés aux protéines G présents à la surface des cellules activés par leurs ligands YRQWSHUPHWWUHODGLVVRFLDWLRQGHFHVSURWpLQHV*&HWWHGLVVRFLDWLRQDFWLYHO¶DGpQ\O ate cyclase localisée au niveau de la membrane, ce qui en résulte une augmentation de la formation G¶$03FjSDUWLUGHO¶$73/¶$03FSURGXLWDFWLYHODSURWpLQHNLQDVHGpSHQGDQWHGHO¶$03F OD 3.$ FDSDEOH G¶LQGXLUH OD UHOD[DWLRQ GHV &0/ SDU XQH GLPLQXWLRQ GH OD FRQFHQWUDWLRQ intracellulaire en calcium et/ou de la sensibilité au calcium par des mécanismes semblables à ceux de la PKGs [15].

La troisième voie HVWXQHYRLHGpSHQGDQWHGHO¶HQGRWKpOLXPDVVRFLpHjXQHK\SHUSRODULVDWLRQ

des CML [16 @ &HWWH K\SHUSRODULVDWLRQ D SRXU SULQFLSDO HIIHW G¶HPSrFKHU O¶DFWLYDWLRQ GHV

canaux calciques dépendant des CML entraînant une diminution de la concentration

cytosolique en calcium libre [17 @/¶K\SHUSRODULVDWLRQHVWUpVLVWDQWHDX[LQKLELWHXUVGHV126

ou des COX et non associés à une augmentation des nucléotides cycliques précédemment

FLWpV &HWWH YRLH LPSOLTXH GRQF O¶H[LVWHQFH GH IDFWHXUV K\SHUSRODULVDQWV GpSHQGDQWV GH

l ¶HQGRWKpOLXP('+)

$%"

Ca²⁺

Reticulum SERCA

Ca²⁺

PLB

pMLC MLC

MLCP

RELAXATION

3Na⁺

GCs Ac

GCs

GTP GMPc ATP AMPc

GTP

GMPc NO

PKA Ca²⁺L PKGs

Ca²⁺

K⁺

K⁺ EDHF

NP Agonistes,

PGI2,PGE2«

hyperpolarisation K⁺

Cellule

musculaire lisse "

F igur e 4 : Voi es d e s ignali s ation s intra ce llulair es d e la r e laxation d es ce llul es mu sc ulair es li sses

.

NP : peptide natriurétique; NO PRQR[\GH G¶D]RWH 3*,2 : prostacycline; PGE2 : prostaglandine; GCs : guanylate cyclase soluble; GTP : guanosine-¶-triphosphate; GMPc : guanosine-¶¶-monophosphate cyclique;

PKGs : protéines kinases GMPc-dépendantes; AC : adénylate cyclase; ATP : adénosine-¶- triphosphate;

AMPc : adénosine-¶¶-monophosphate cyclique; PKA : protéine kinase A; PLB : phospholambane; SERCA : sarco endoplasmic reticulum ATPases; EDHF IDFWHXUVK\SHUSRODULVDQWVGpSHQGDQWVGHO¶HQGRWKpOLXPMLCK : kinase des chaînes légères de la myosine; MLC : chaîne légère de la myosine.

$&"

2 . 3K\VLRORJLHGHO¶HQGRWKpOLXP

/¶HQGRWKpO ium vasculaire est considéré comme un organe à part entière et forme la barrière cellulaire intérieure qui limite les vaisseaux sanguins [18]. Dans des conditions pathologiques, O¶KRPpRVWDVLH UpJXOpH SDU O¶HQGRWKpOLXP HVW SHUWXUEpH RQ SDUOH DORUV GH G\VIR nction endothéliale.

2 . 1 . H é t é rog é n é it é s tru c tur e ll e HWIRQFWLRQQHOOHGHO¶HQGRWKpOLXP

Les cellules endothéliales (CEs) qui composent cette barrière varient selon leur localisation dans le système vasculaire impliquant une hétérogénéité structurelle et fonctionnelle de O¶HQGRWKpOLXP%LHQTXHSRVVpGDQWGHVFDUDFWpULVWLTXHVFRPPXQHVOHV&(VGHFKDTXHW\SHGH YDLVVHDX[DFTXLqUHQWGHVSURSULpWpVVSpFLILTXHVVHORQOHWHUULWRLUHDQDWRPLTXH$LQVLO¶pWXGH des vaisseaux sanguins de rats a montré que les CEs aortiques sont plutôt longues et étroites [—PDORUVTXHOHV&(VG¶DUWqUHVSXOPRQDLUHVVRQWSOXVODUJHVHWSOXVFRXUWHV[

—P SHUPHWWDQW XQH DGDSWDWLRQ IRQFWLRQQHOOH GH O¶HQGRWKpOLXP VHORQ OD IRQFWLRQ GHPDQGpH [19] /¶HQGRWKpOLXP H[HUFH DLQVL VHV GL fférents rôles en sécrétant différentes substances suivant les stimuli reçus par les CEs.

2 . 2 . )DFWHXUVYDVRDFWLIVSURGXLWVSDUO¶HQGRWKpOLXP

Le tonus vasculaire est régulé par de nombreux facteurs vasoconstricteurs et vasodilatateurs HQGRWKpOLDX[ /¶HQGRWKpOL um joue ainsi un rôle crucial en maintenant un équilibre entre vasoconstriction et vasodilatation [20].

2 . 2 . 1 . F DFWHXUVUHOD[DQWVGpULYpVGHO¶HQGRWKpOLXP

/HV WURLV SULQFLSDX[ IDFWHXUV YDVRUHOD[DQWV OLEpUpV SDU O¶HQGRWKpOLXP VRQW OH 12 OD

prostacycline (PGI

) HWO¶('+) (Figure 5).

$'"

RELAXATION

RELAXATION Hyperpolarisation

K⁺ PGI2 NO

eNOS COX

Acide

arachidonique L-arginine

GCs

Ac GMP

GMPc AMP

AMPc EDHF

Cellule endothéliale

Cellules musculaires lisses

"

F igur e 5 )DFWHXUVYDVRUHOD[DQWVV\QWKpWLVpVSDUO¶HQGRWKpOLXP

EDHF IDFWHXUV K\SHUSRODULVDQWV GpSHQGDQWV GH O¶HQGRWKpOLXP; COX : cyclooxygénase; PGI2 : prostacycline;

AC : adénylate cyclase; ATP : adénosine-¶- triphosphate; AMPc : adénosine-¶¶-monophosphate cyclique;

eNOS PRQR[\GH G¶D]RWH V\QWKDVH HQGRWKpOLDOH; NO PRQR[\GH G¶D]RWH; GCs : guanylate cyclase soluble;

GTP : guanosine-¶-triphosphate; GMPc : guanosine-¶¶-monophosphate cyclique.

"

/HPRQR[\GHG¶D]RWH

En 1980, Furchgott et Zawadzki ont réussi à démontrer que la relaxation des CML en réponse jO¶DFpW\OFKROLQHpWDLWGpSHQGDQWHGHO¶LQWpJULWpDQDWRPLTXHGHO¶HQGRWKpOLXP [21]. Ce facteur appelé facteur UHOD[DQW GpULYp GH O¶HQGRWKpOLXP D pWp LGHQWLILp SDU OD VXLWH comme étant le PRQR[\GHG¶D]RWH12SDUWURLVGLIIpUHQWV JURXSHV)XUFKJRWW> 2], Ignarro [23] et Palmer [24]. Cette découverte fondamentale dans la compréhension de la physiologie de O¶HQGRWKpOLXPVHUDFRXURQQpHSDUOHSUL[1REHOGHPpGHFLQHHQ

Le NO est une molécule gazeuse capable de diffuser rapidement à travers les membranes

FHOOXODLUHV HW G¶DJLU DX QLYHDX GHV &(V GHV &0/ GHV SODTXHWWHV GHV pU\WKURF\WHV RX GHV

FHOOXOHVGHO¶LQIODPPDWLRQ,OHVWDLQVLUHFRQQXFRPPHXQPHVVDJHULQWHUFHOOXODLUHM ouant un

U{OH IRQGDPHQWDO GDQV O¶KRPpRVWDVLH YDVFXODLUH 0DOJUp VD FRXUWH GHPL -vie, le NO est un

SXLVVDQWYDVRGLODWDWHXUV\QWKpWLVpSDUOHV&(VHQUpSRQVHjGLYHUVVWLPXOL0rPHVLF¶HVWHQ

très faible quantité, le NO est libéré de façon continue par les CEs car les forces de

cisaillement du flux sanguin laminaire constituent un puissant activateur de la transcription du

gène de la eNOS.

$("

/DV\QWKqVHGX12V¶HIIHFWXHjSDUWLUGHODWUDQVIRUPDWLRQGHOD/ -arginine en L-citrulline par la NO synthase (NOS) [25] (Figure 6). Les NOS sont des métalloenzymes dont trois isoformes ont été décrites dans la littérature. Deux isoformes sont constitutivement actives, les NOS endothéliale (eNOS) et neuronale (nNOS) et la troisième est une NOS inductible (iNOS). Généralement, les NOS constitutives possèdent une activation dépendante du calcium et ont donc une activité rapide, de courte durée avec une faible quantité de NO produite, alors que la iNOS voit son expression augmenter en réponse à divers stimuli afin de produire de forte quantité de NO sur une longue durée [27].

"

"

"

"

F igur e 6 5pDFWLRQFDWDO\VpHSDUOHV126G¶DSUqV A ld e rton et al

. [26]).

La eNOS est une protéine exprimée de manière importante dans les CEs de vaisseaux VDQJXLQV/¶DFWLYLWpHQ]\PDWLTXHGHODH126 peut être régulée au niveau de son expression PDLVpJDOHPHQWDXQLYHDXGHVRQDFWLYLWp,OH[LVWHGHX[PRGHVG¶DFWLYDWLRQGHODH126O¶XQ GpSHQGDQWGXFDOFLXPHWO¶DXWUHLQGpSHQGDQW)LJXUH'DQVOHV&(VODH126LQWHUDJLWDYHF la cavéoline-1, une protéine présente dans les cavéoles qui joue un rôle dynamique dans le trafic des protéines membranaires avec les compartiments intracellulaires. Cette protéine séquestre à la membrane la eNOS et la maintient dans un état de faible activité. Lorsque la CE est DFWLYpHO¶DXJPHQWDWLRQGHODFRQFHQWUDWLRQF\WRVROLTXHHQFDOFLXPYDSHUPHWWUHODOLDLVRQ GX FDOFLXP j OD FDOPRGXOLQH HW OD IRUPDWLRQ G¶XQ FRPSOH[H TXL YD GLVVRFLHU O¶LQWHUDFWLRQ eNOS-cavéoline-1. La eNOS libérée est alors accessible à différentes kinases qui vont SRXYRLUIDLUHYDULHUVRQpWDWG¶DFWLYDWLRQHWSHUPHWWUHODSURGXFWLRQGH12(QHIIHWO¶pWDWGH phosphorylation de la eNOS joue un rôle important dans la régulation de son activité : la phosphorylation du résidu sérine 1177 conduit à son activation alors que celle sur le résidu WKUpRQLQHHVWLQKLELWULFH8QVHFRQGPpFDQLVPHG¶DFWLYDWLRQHVWOLpHjODSKRVSKRU\ODWLRQ de résidus sérine par la voie phosphatidyl-inositol 3 kinase (PI3K)/Akt [29].

L-Arginine N^Ȧ-Hydroxy-L-Arginine L-Citrulline 0RQR[\GHG¶D]RWH

$)"

NO Ca²⁺

Cellule endothéliale eNOS

PI3K

Akt

eNOS eNOS

Cav-1 Cav-1

L-Arginine L-Citrulline

Ca

Calmoduline-Ca²⁺

Ca²⁺

Stimuli physique ou chimique

)LJXUH0pFDQLVPHGHSURGXFWLRQGH12SDUO¶H126G¶DSUqV Toda et al . [28]) .

PI3K : phosphatidyl-inositol 3 kinase; Cav-1 : cavéoline-1; eNOS PRQR[\GH G¶D]RWH V\QWKDVH HQGRWKpOLDOH NO PRQR[\GHG¶D]RWH

Dans le système cardio-vasculaire, les effets biologiques locaux du NO endothélial sont

multiples et lui confère un rôle vasculo-protecteur majeur (Figure 8). Une fois produit, il

diffuse très rapidement à la rencontre des CML, des macromolécules et des cellules

FLUFXODQWHV VDQJXLQHV ,O SDUWLFLSH DLQVL j OD UHOD[DWLRQ GpSHQGDQWH GH O¶HQGRWKpOLXP des

YDLVVHDX[VDQJXLQVHQGLIIXVDQWOLEUHPHQWMXVTX¶DX[&0/RSDUDFWLYDWLRQGHODYRLHGX

GMPc, il inhibe la contraction. Le NO peut également inhiber la migration, la prolifération et

la synthèse de protéines de la matrice extracellulaire, limitant ai QVL O¶pSDLVVLVVHPHQW GH

O¶ in t ima. Le NO exerce également des effets sur la CE où il est capable de moduler le

SURFHVVXV DQJLRJpQLTXH HQ DJLVVDQW VXU OD SUROLIpUDWLRQ OD PLJUDWLRQ HW O¶DSRSWRVH GH FHV

cellules.

$*"

F igur e 8 : E ff e t s multipl es du N O e ndoth é OLDOG¶DSUqV S c hini- K e rth [30]) .

L es pro s ta c y c lin es

6RXV O¶DFWLRQ GH OD SKRVSKROLSDVH $ O¶DFLGH DUDFKLGRQLTXH (AA) est libéré des SKRVSKROLSLGHV PHPEUDQDLUHV /¶$$ HVW HQVXLWH PpWDEROLVp VRXV O¶DFWLRQ GH GLIIpUHQWH s enzymes, telles que les cyclooxygénase (COX) dont il existe deux isoformes: la COX-1 constitutive et la COX-2 inductible, les lipooxygénases et des enzymes dépendantes du F\WRFKURPH 3 /¶$$ est ainsi le précurseur des eicosanoïdes, molécules lipidiques qui regroupent les leucotriènes et les prostanoïdes (Figure 9). Les prostanoïdes sont des médiateurs importants dans la modulation du tonus vasculaire dans les conditions physiologiques. Ces prostanoïdes regroupent la PGI

, les prostaglandines, telle la prostaglandine E

(PGE

), la prostaglandine D

(PGD

), la prostaglandine F

(PGF

) et le thromboxane A

(TXA

).

La PGI

a été découverte en 1976 par Bunting e t al. [31] et est un puissant agent YDVRGLODWDWHXU DLQVL TX¶XQ LQKLELWHXU GH O¶DJUpJDWLRQ HW GH O¶DGKpVLRQ SODTXHWWDLUH /D 3*,

inh LEHpJDOHPHQWO¶DGKpVLRQOHXFRF\WDLUHHWODSUROLIpUDWLRQGHV&0/> -34]. La production de PGI

HVWVWLPXOpHSDUGLYHUVVWLPXOLWHOVTXHO¶K\SR[LHOHVIRUFHVGHFLVDLOOHPHQWRXGLYHUV agonistes, et sa synthèse est dépendante de la concentration en calcium cytosolique [35]. Il est important de remarquer que la PGI

HVWV\QWKpWLVpHSDUO¶HQGRWKpOLXPHQUpSRQVHDX[PrPHV

Cellule endothéliale

Cellule musculaire lisse

NO

NO

Migration Contraction

Perméabilité Apoptose

Molécules G¶DGKpVLRQ

Agrégation plaquettaire

Adhésion des monocytes

Stress oxydant

Cytokines proinflammatoires

%+"

stimuli impliqués dans la libération du NO suggérant une action synergique sur les différentes cellules cibles [36,37]. La PGI

va diffuser librement et se fixer sur le récepteur à la PGI

présent sur les cellules cibles [38]. Ces récepteurs vont ensuite activer via ODSURWpLQH*ĮOD YRLH GH O¶DGpQ\ODWH F\FODVH - $03F GpFULWH SUpFpGHPPHQW '¶DXWUH SDUW OD 3*,

participe pJDOHPHQW j O¶RXYHUWXU e de différents canaux potassiques renforçant la relaxation des CML [39].

Phospholipides membranaires

Acide arachidonique

Voie enzymatique Phospholipase

Cyclooxygénase 5-Lipooxygénase

Prostaglandines Leucotriènes

Voie non enzymatique

8-isoprostane

PGI2 TXA₂

Métabolisme oxydatif

PGD₂ PGE₂

Vasodilatation

Vasodilatation Vasodilatation

Vasocontraction

Vasocontraction

F igur e 9 : 0pWDEROLVPHGHO¶DFLGHDUDFKLGRQLTXH

PGI2 : prostacycline; TXA2 : thromboxane A2; PGD2 : prostaglandine D2; PGE2 : prostaglandine E2.