pollution chimique

Utilisation des indicateurs écotoxicologiques pour le diagnostic et la surveillance de la

pollution chimique

T. Burgeot, O. Geffard, W. Sanchez

Développement des biomarqueurs & bioessais

Développement des biomarqueurs et bioessais pour l’étude des effets biologiques depuis une vingtaine d’années

Évolution vers une démarche intégrée chimie-biologie et réglementation (1) la surveillance du milieu aquatique (DCSMM-DCE)

(2) l’évaluation du risque chimique (REACH)

Point fort : une évaluation dynamique et intégrative en milieu naturel Point faible : une interprétation peu standardisée

Développement méthodologique structuré sur la base d’un consensus européen

en milieu marin (OSPAR/DCSMM)

C. Janssen & P. Roose, 2011

Enjeu d’une approche intégrée en chimie-biologie

• DCSMM (Directive 2008/56/CE) 17 juin 2008 Délimitation en 4 sous régions marines

Eaux métropolitaines côtières jusqu’à 200 milles

DCE WFD

Droit de la mer UNCLOS DCSMM

MSFD

- Manche Mer du Nord - Mers celtiques - Golfe de Gascogne - Méditerranée occidentale

Cadre réglementaire

Descripteurs Chef de file Définition du BEE

1 Diversité biologique MNHN Qualitative notion de résilience du milieu 2 Espèces invasives MNHN Qualitative Limitation d ’ introduction et de

prolifération 3 Espèces exploitées Ifremer Partiellement

Quantitative

4 Réseau trophique CNRS Qualitative

Compartiments cl é s Dynamiques abondance, Fertilité, diversité génétique

5 Eutrophisation Ifremer Qualitative

Quantitative

Combinaison de grilles de classification existantes

6 ^{Int é grit é} des fonds et

benthos BRGM Qualitative Emprise des activités et impacts

7 Conditions hydrographiques SHOM Qualitative

8 Contaminants/milieu Ifremer Quantitative Seuils définis dans des cadres existants

9 Contaminants/aliments ANSES Quantitative Seuils réglementaires

10 Déchets marins Ifremer Qualitative Impacts des produits de d é composition des déchets

11

Introduction d’énergie : - 11a bruit

- 11b autres sources d’énergie

SHOM Ifremer

Qualitative Impact sur espèces marines

11 descripteurs marins (DCSMM)

8.1 Contaminants

8.2 Effets

Un arrêté Français: Indicateurs d’effets de pollution sur les composants de l'écosystème

Descripteur 8

TYPE D'EFFET BIOLOGIQUE NOM DE L'EFFET

1. Indice de stress général chez la moule et le

poisson Stabilité de la membrane lysosomale

2. Génotoxicité chez la moule et le poisson Induction de micronoyaux et altérations de l'ADN (test comet)

3. Embryotoxicité chez l'huître creuse et reprotoxicité des poissons

Anomalies des larves d'huîtres et des gonades de poissons

4. Imposex des gastéropodes Index VDS (Vas Deferens Sequence)

5. Pathologies poissons Indice de pathologies hépatiques et de pathologies externes

Arrêté du Ministère de l’Écologie et du Développement Durable et de l’Énergie 17 Décembre 2012 relatif à la définition du Bon État Écologique des eaux marines

BIOMARQUEURS & BIOESSAIS

Programme de surveillance CEMP:

- Analyses des contaminants et effets suivant des séries à long terme

- Validation des méthodologies sur des sites ateliers de la façade Atlantique Nord-Est

- Définir des critères d’évaluation :

- Seuils : EAC

(Evaluation Assessment Criteria) - Assurance qualité

- Méthodes de référence

CIEM

Conseil international pour l’exploration de la mer

Groupes d’experts

- Effets biologiques des contaminants chimiques (WGBEC, SGIMC..) - Contaminants chimiques

Structuration européenne : convention OSPAR

Niveau de réponse

Biomarqueur

/espèce/site Niveau de base

Mois/Années

Stress

Critères d’interprétation:

Seuils avec effets (EAC) et sans effets BAC

BAC

EAC

OSPAR: Seuils pour 19 biomarqueurs et 4 bioessais

D avies I.M., and A.D., Vethaak (2012). Integrated marine environmental monitoring of chemicals and their effects. ICES Cooperative Research Report N° 315. 277p

Vitellogénine poisson Intersex poisson

Reprotoxicité anguille EROD poisson

Métabolites PAHs poisson Adduits ADN poisson et moule Micronuclei poisson et moule Comet poisson et moule

Métallothionéines poisson et moule Stabilité lysosomale poisson et moule Acéthylcholinestérase poisson et moule

Stress sur stress moule Lésions externes poisson Lésions hépatiques poisson Néoplasmes hépatiques poisson Histologie moules

Imposex gastéropodes

Biomarqueurs Bioessais

- Bioessais sédiment:

Corophium, Arenicole DR Luc,

- Bioessais eau:

Embryotoxicité Huître moule

Croissance oursin

Seuils EAC et BAC pour 19 Biomarqueurs et 4 Bioessais (OSPAR)

Biomarqueurs & Bioessais Espèces BAC EAC Vitellogénine

Intersexe Imposex

EROD

Métabolites PAHs

Adduits ADN Micronuclei

Comet

Stabilité lysosomale Stress / stress

AChE

Pathologies externes Histopathologie hépatique

Néoplasmes hépatiques Bilan énergétique (Scope for growth)

Bioessais sédiment Bioessais eau

Flet- cabillaud

Limande Nucella lapilus

Limande-Flet-rouget- dragonet

Limande-cabillaud-flet

Limande-flet-cabillaud

Limande-flet-rouget-moule Limande-cabillaud-moule

Moule

Moule

Limande-flet-rouget-moule

Limande Limande Limande Moule

Corophium-Arenicola

Copépodes-

embryons huîtres&moules oursins

0,23-0,13 5

Critères Ospar

147-24- 208-202

16-21-16 1-1-1,6

0,5-0,3-0,32,5 5-5-10

120

10

150-235-155-30

FDI Mâle et Femelle FDI<2

FDI<2 15 30-10

10 20 10

Critères Ospar

6-6-6

50

5

105-165-109-5

FDI M et F FDI>2 FDI=2

5 6-60

50

50

50

DES OUTILS SONT ÉGALEMENT OPÉRATIONNELS EN MILIEU

CONTINENTAL

E ^{XEMPLE DE L} ’ ^OUTIL G ^AMMARE :

INDICATEURS DE LA CONTAMINATION CHIMIQUE ET DE LA TOXICITÉ DES MILIEUX

A. C ^HAUMOT , M. C ^{OQUERY ET} O. G ^EFFARD

Pourquoi avoir développé une approche basée sur l’encagement d’organismes : intérêt pour la DCE

In situ system exposure 320 ml

e.p

p.c.c net cap

In situ system exposure 320 ml

e.p

p.c.c net cap

In situ system exposure 320 ml

e.p

p.c.c net cap

In situ system exposure 320 ml

e.p

p.c.c net cap

Etudier l’ensemble des systèmes aquatiques (petits et grands)

Utiliser des organismes contrôles/calibrés : interprétation fiable des mesures

Utiliser en plus des biomarqueurs, les traits de vie (ex : reproduction, alimentation) comme marqueurs de toxicité : entrées des modèles de dynamique de populations

Définir une référence universelle et des indicateurs intégrant la variabilité naturelle pour chaque marqueur :

- relier les effets observés directement à la contamination chimique du milieu

- proposer des indicateurs de contamination biodisponible et de toxicité à partir d’une seule exposition :

1. suivi des tendances de la contamination, classement des sites, polluants problématiques

2. impact toxique des milieux

Utiliser une espèce ubiquiste et jouant un rôle important

13

Ni 0.8

Cd 0.3

Pb 0.4

Hg 0.07

Métaux (µg/g dw)

Co 0.5

2,4' DDE 1.9

4, 4' DDE + Dieldrine 4.8

4, 4' DDD 3.9

2, 4' DDT 1.6

DDTs (ng/g dw)

4, 4' DDT 2.8

Anthracene 1.5

Fluoranthene 3.5

Benzo (b,k,j) fluoranthène 3.8

Benzo(a)pyrène 1.3

Indeno (1,2,3-cd) pyrene 1.7

Benzo (g,h,i) perylene 1.3

Benzo(a)anthracene 2.2

Benzo(e)pyrene 1.3

Triphene+chrysene 2.6

HAPs (ng/g dw)

Perylene 0.3

50 + 28 3.5

138 8.3

153 11.5

PCBs (ng/g dw)

180 3.3

Ni 0.8

Cd 0.3

Pb 0.4

Hg 0.07

Métaux (µg/g dw)

Co 0.5

2,4' DDE 1.9

4, 4' DDE + Dieldrine 4.8

4, 4' DDD 3.9

2, 4' DDT 1.6

DDTs (ng/g dw)

4, 4' DDT 2.8

Anthracene 1.5

Fluoranthene 3.5

Benzo (b,k,j) fluoranthène 3.8

Benzo(a)pyrène 1.3

Indeno (1,2,3-cd) pyrene 1.7

Benzo (g,h,i) perylene 1.3

Benzo(a)anthracene 2.2

Benzo(e)pyrene 1.3

Triphene+chrysene 2.6

HAPs (ng/g dw)

Perylene 0.3

50 + 28 3.5

138 8.3

153 11.5

PCBs (ng/g dw)

180 3.3

Exemple de valeurs seuils

Couvercle percé avec tamis

Tamis (maille 500 µm)

Pot en PP de 180 ml

Fond percé avec tamis (maille 1 mm)

Pot en PP de 1000 ml

‘Fenêtres’ de tamis (maille 300 µm) Couvercle percé avec tamis

Couvercle percé avec tamis

Tamis (maille 500 µm)

Pot en PP de 180 ml

Fond percé avec tamis (maille 1 mm) Fond percé avec tamis (maille 1 mm)

Pot en PP de 1000 ml Pot en PP de 1000 ml

‘Fenêtres’ de tamis (maille 300 µm)

A B

- 20 mâles (15 –20 mg)/chambre - nourriture ad libitum : aulne

- exposition 1 semaine

Analyse chimique des teneurs en contaminants

- 6 à 8 chambres /site

Indicateur de la contamination chimique

biodisponible

14

Ni 0.8

Cd 0.3

Pb 0.4

Hg 0.07

Métaux (µg/g dw)

Co 0.5

2,4' DDE 1.9

4, 4' DDE + Dieldrine 4.8

4, 4' DDD 3.9

2, 4' DDT 1.6

DDTs (ng/g dw)

4, 4' DDT 2.8

Anthracene 1.5

Fluoranthene 3.5

Benzo (b,k,j) fluoranthène 3.8

Benzo(a)pyrène 1.3

Indeno (1,2,3-cd) pyrene 1.7

Benzo (g,h,i) perylene 1.3

Benzo(a)anthracene 2.2

Benzo(e)pyrene 1.3

Triphene+chrysene 2.6

HAPs (ng/g dw)

Perylene 0.3

50 + 28 3.5

138 8.3

153 11.5

PCBs (ng/g dw)

180 3.3

Ni 0.8

Cd 0.3

Pb 0.4

Hg 0.07

Métaux (µg/g dw)

Co 0.5

2,4' DDE 1.9

4, 4' DDE + Dieldrine 4.8

4, 4' DDD 3.9

2, 4' DDT 1.6

DDTs (ng/g dw)

4, 4' DDT 2.8

Anthracene 1.5

Fluoranthene 3.5

Benzo (b,k,j) fluoranthène 3.8

Benzo(a)pyrène 1.3

Indeno (1,2,3-cd) pyrene 1.7

Benzo (g,h,i) perylene 1.3

Benzo(a)anthracene 2.2

Benzo(e)pyrene 1.3

Triphene+chrysene 2.6

HAPs (ng/g dw)

Perylene 0.3

50 + 28 3.5

138 8.3

153 11.5

PCBs (ng/g dw)

180 3.3

Exemple de valeurs seuils

Couvercle percé avec tamis

Tamis (maille 500 µm)

Pot en PP de 180 ml

Fond percé avec tamis (maille 1 mm)

Pot en PP de 1000 ml

‘Fenêtres’ de tamis (maille 300 µm) Couvercle percé avec tamis

Couvercle percé avec tamis

Tamis (maille 500 µm)

Pot en PP de 180 ml

Fond percé avec tamis (maille 1 mm) Fond percé avec tamis (maille 1 mm)

Pot en PP de 1000 ml Pot en PP de 1000 ml

‘Fenêtres’ de tamis (maille 300 µm)

A B

- 20 mâles (15 –20 mg)/chambre - nourriture ad libitum : aulne

- exposition 1 semaine

Analyse chimique des teneurs en contaminants

Suivi des tendances, qualification chimique des sites Identifier les composés problématiques

- 6 à 8 chambres /site

Indicateur de la contamination chimique biodisponible

Substances

^{1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27}

Cd 0,83 1,31 1,27 0,18 0,15 0,15 0,17 0,23 0,23 0,22 0,63 0,2 0,45 0,33 0,21 0,19 0,12 0,15 0,28 0,24 0,3 0,91 0,21 0,14 0,2 0,2 0,35

Pb < LQ 0,17 0,31 0,22 0,16 0,14 0,14 0,43 0,19 0,27 0,46 0,85< LQ 0,4 0,27 0,2 0,24 0,17 0,28 1,39 0,82 0,89 0,95 0,29 0,46 0,18 0,92

Hg 0,05 0,05 0,05 0,04 0,04 0,04 0,04 0,05 0,06 0,05 0,05 0,04 0,06 0,05 0,05 0,05 0,04 0,05 0,11 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05

Ni 0,53 1,28 0,43 0,6 0,68 0,33 0,26 <LQ <LQ 0,5 0,35 0,45 0,48 1,27 0,37 0,37 0,34 0,59 0,88 0,45 <LQ <LQ 1,01 0,69 0,58 0,4 0,36

Co 0,33 0,23 0,27 0,33 0,13 0,14 0,14 0,47 0,27 0,31 0,33 0,39 0,46 0,32 0,28 0,27 0,29 0,26 0,96 0,24 0,43 0,44 0,5 0,39 0,36 0,23 0,34 Hexachlorobenzene 0,4 <LQ <LQ <LQ 0,4 0,5 <LQ <LQ <LQ 0,4 <LQ 0,9 < LQ < LQ < LQ < LQ < LQ < LQ10,0 < LQ < LQ < LQ < LQ 0,6 < LQ 0,6 0,5 Lindane 0,3 <LQ <LQ <LQ <LQ <LQ <LQ <LQ 0,4 <LQ <LQ <LQ 0,3 0,4 0,4 < LQ 0,4 < LQ 7,8 0,4 <LQ 0,4 1,4 <LQ 0,6 < LQ < LQ 2, 4' DDE <LQ <LQ <LQ <LQ <LQ <LQ <LQ <LQ <LQ <LQ <LQ 1,7 0,3 1,1 1,5 < LQ 0,6 0,3 10,6 < LQ < LQ 0,4 2,1 0,9 1,0 < LQ 0,7 4, 4' DDE+Dieldrin 2,4 2,9 2,6 2,5 3,2 2,3 2,4 1,9 2,3 2,3 3,9 3,4 4,2 4,2 3,3 3,1 3,6 3,5 37,0 3,9 3,9 6,9 5,5 5,1 3,4 10,4 62,9 4, 4' DDD 2,0 1,9 1,9 1,9 1,9 2,0 2,3 1,6 2,4 2,1 3,6 3,7 1,4 3,5 2,3 3,0 1,8 3,3 44,6 3,4 2,9 4,3 6,3 5,2 3,3 5,9 24,3 2, 4' DDT 1,0 1,0 1,0 1,0 1,1 0,8 0,9 0,6 0,8 0,7 0,9 1,3 2,2 1,3 3,1 2,9 2,3 2,6 59,2 2,3 2,3 2,4 2,3 1,9 1,5 1,2 2,8 4, 4' DDT <LQ <LQ <LQ <LQ <LQ <LQ <LQ <LQ <LQ <LQ <LQ <LQ 1,2 1,3 1,7 1,9 1,7 1,7 48,4 2,8 2,3 2,1 2,9 1,4 1,0 <LQ 12,5 Anthracene <LQ <LQ 0,7 <LQ 0,4 <LQ <LQ <LQ <LQ <LQ <LQ 1,7 <LQ <LQ 0,5 1,0 <LQ 0,3 <LQ 0,9 <LQ 0,7 3,7 9,1 0,4 0,3 1,2 Fluoranthene 0,9 0,7 1,4 1,7 1,6 1,0 0,8 1,2 <LQ 1,0 1,7 7,3 0,7 2,0 3,4 2,3 3,4 2,9 1,5 6,5 2,3 4,8 33,7 24,2 4,3 2,3 9,8 Benzo(b,k,j)fluoranthene 0,4 0,6 1,0 1,2 1,7 <LQ 0,6 1,4 0,6 1,6 1,5 5,6 0,8 1,7 3,2 2,1 2,8 2,0 1,0 4,7 3,2 3,7 19,4 7,8 3,1 1,9 8,7 Benzo(a)pyrene <LQ <LQ <LQ 0,5 <LQ <LQ <LQ 0,5 <LQ <LQ 0,3 0,6 <LQ 1,1 1,0 0,9 1,1 0,7 <LQ 1,2 1,1 1,2 3,0 3,3 0,3 0,6 2,8 Indeno(1,2,3-cd)pyrene <LQ <LQ <LQ 0,5 0,4 <LQ <LQ <LQ <LQ <LQ <LQ 1,4 <LQ 0,5 0,9 0,9 1,0 0,7 <LQ 0,9 1,3 1,1 4,8 1,7 0,7 0,6 1,8 Benzo(g,h,i)perylene <LQ <LQ <LQ 0,3 0,4 <LQ <LQ 0,6 <LQ <LQ <LQ 1,6 <LQ 0,5 0,9 0,6 0,7 0,6 0,1 0,9 1,0 1,1 3,8 2,2 0,9 0,9 2,1 Acenaphthylene 0,4 0,5 0,3 <LQ 0,7 0,4 0,3 <LQ <LQ 0,3 0,3 0,9 0,6 0,6 0,9 <LQ 1,0 0,7 1,1 1,4 0,9 1,1 1,2 2,7 1,0 0,5 0,8 Acenaphthene 1,5 1,5 1,9 0,8 1,7 1,4 1,3 1,0 0,9 1,3 0,9 5,6 1,7 1,3 1,9 1,2 1,5 1,5 2,2 2,5 1,4 1,6 3,1 2,9 1,9 1,5 2,2 Fluorene 1,2 1,2 2,7 0,7 1,9 1,4 0,7 0,7 <LQ 0,5 0,6 6,1 2,6 1,8 2,2 1,5 2,0 2,1 2,6 2,7 1,4 2,4 8,3 6,5 4,8 0,4 5,1 Phenanthrene 2,2 2,0 8,7 2,1 4,4 3,5 0,6 2,1 <LQ 1,6 0,7 17,2 4,2 3,0 6,3 2,6 4,1 5,5 4,8 3,3 0,4 5,3 39,9 37,8 12,5 <LQ 26,6 Pyrene 0,7 0,5 2,1 1,1 1,3 0,5 0,8 1,1 0,4 1,2 1,5 6,0 0,8 2,1 2,4 1,9 2,6 3,0 2,0 8,0 2,0 4,1 40,7 47,7 5,4 2,9 10,8 Benzo(a)anthracene 0,6 0,3 0,6 0,9 0,8 0,5 0,6 1,0 0,3 0,6 0,8 2,2 0,6 1,3 1,8 1,3 1,5 1,2 1,1 4,8 1,9 2,2 14,7 11,4 2,4 1,3 3,9 Benzo(e)pyrene <LQ <LQ <LQ 0,3 0,4 <LQ <LQ 0,3 <LQ 0,4 0,4 1,5 <LQ 0,4 0,7 0,6 0,8 0,5 <LQ 1,2 0,9 1,1 5,7 2,6 0,9 0,7 2,3 Triphene + Chrysene 0,6 0,6 1,1 1,5 1,5 0,7 0,6 1,2 0,6 1,5 1,6 4,1 0,7 1,7 2,4 1,8 2,1 2,0 1,4 6,0 2,4 4,0 23,8 13,4 4,6 2,8 9,1 Perylene <LQ <LQ <LQ 0,3 0,4 <LQ <LQ 0,3 <LQ 0,4 0,4 1,5 <LQ 0,3 0,3 0,7 0,5 0,3 <LQ <LQ 0,3 0,5 1,2 0,8 0,4 0,3 1,9 PCB 50+28 2,0 1,6 1,6 1,5 3,8 1,8 0,6 0,3 1,0 1,6 0,6 5,9 1,2 2,2 2,1 1,1 2,9 1,8 13,2 1,2 0,7 1,5 4,7 3,2 5,3 2,6 2,3 PCB 52 3,9 2,6 3,5 3,5 4,2 2,7 2,5 2,7 2,7 3,9 2,4 8,6 4,1 7,7 9,8 2,2 4,3 3,8 33,8 3,2 1,9 2,7 8,3 4,6 9,4 3,9 5,6 PCB 101 3,9 4,7 3,6 3,8 3,9 2,3 2,9 1,9 2,6 3,6 3,3 9,3 3,7 9,8 13,5 2,7 4,0 3,7 24,5 5,0 3,6 7,3 14,9 7,6 8,7 4,8 4,8 PCB 118 2,9 3,4 2,7 3,5 2,7 1,4 1,2 <LQ 1,0 2,7 2,8 13,5 3,7 11,0 16,3 3,9 4,0 3,8 20,7 1,8 2,0 5,7 8,7 3,6 7,1 2,9 4,0 PCB 138 5,3 6,1 6,6 7,4 6,6 3,4 4,1 3,3 3,4 4,9 5,8 10,6 6,0 14,0 16,6 5,3 6,1 5,8 45,5 9,9 5,1 23,5 31,8 12,9 12,0 10,8 6,5 PCB 153 6,8 8,4 8,2 8,9 8,0 4,6 5,4 4,1 4,9 6,9 7,5 10,6 7,6 16,7 16,5 6,5 7,4 6,8 50,8 12,1 5,7 30,8 36,6 16,7 13,7 16,7 7,6 PCB 180 1,6 1,6 2,3 2,6 2,5 2,0 1,9 1,7 2,0 2,2 2,8 2,4 1,6 3,8 4,1 1,8 1,4 1,3 16,6 3,0 1,4 9,1 14,2 4,9 3,8 3,5 2,1

Sites d'étude

15

Indicateur de toxicité des milieux

Couvercle percé avec tamis

Tamis (maille 500 µm)

Pot en PP de 180 ml

Fond percé avec tamis (maille 1 mm)

Pot en PP de 1000 ml

‘Fenêtres’ de tamis (maille 300 µm) Couvercle percé avec tamis

Couvercle percé avec tamis

Tamis (maille 500 µm)

Pot en PP de 180 ml

Fond percé avec tamis (maille 1 mm) Fond percé avec tamis (maille 1 mm)

Pot en PP de 1000 ml Pot en PP de 1000 ml

‘Fenêtres’ de tamis (maille 300 µm)

A B - 20 mâles (15 –20 mg)/chambre

- nourriture ad libitum : aulne - exposition 2 à 4 semaines

Taux d’alimentation Reproduction

- 7 couples/chambre

Alder leaf disc Male gammarids

: 20 mm weight : 15 – 20mg

n : 20 n : 20

exposure

Leaf discs surface is scanned before experiment

5 replicates and 5 controls / site Survival rate is assessed after exposure Leaf discs surface is scanned after experiment

Feeding rate assessment

p.c.c net cap

p.c.c net cap

In situ exposure system

FD =

S _b *k–S _e n*t FD =

S _b *k–S _e n*t

Alder leaf disc Male gammarids

: 20 mm weight : 15 – 20mg

n : 20 n : 20

exposure

Leaf discs surface is scanned before experiment

5 replicates and 5 controls / site Survival rate is assessed after exposure Leaf discs surface is scanned after experiment

Feeding rate assessment

p.c.c net cap

p.c.c net cap

In situ exposure system

FD =

S _b *k–S _e n*t FD =

S _b *k–S _e n*t

Mesures simples : observations binoculaires, analyses d’image et spectrophotomètre

Marqueurs moléculaires

- neurotoxicité

- Métabolisme énergétique

Mesure des réponses biologiques sur les organismes

16

Acétylcholinestérase 7,4 nmol.min- ¹ Taux d’alimentation :

8°C 12°C 14°C 16°C 18°C

18 mm ² /jr/ind 25 mm ² /jr/ind 29 mm ² /jr/ind 32 mm ² /jr/ind 36 mm ² /jr/ind Reproduction :

Surface ovocyte Fertilité Fécondité

106 000µm ² 13,4 ovocytes 12,9 embryons

Indicateur de toxicité des milieux

Couvercle percé avec tamis

Tamis (maille 500 µm)

Pot en PP de 180 ml

Fond percé avec tamis (maille 1 mm)

Pot en PP de 1000 ml

‘Fenêtres’ de tamis (maille 300 µm) Couvercle percé avec tamis

Couvercle percé avec tamis

Tamis (maille 500 µm)

Pot en PP de 180 ml

Fond percé avec tamis (maille 1 mm) Fond percé avec tamis (maille 1 mm)

Pot en PP de 1000 ml Pot en PP de 1000 ml

‘Fenêtres’ de tamis (maille 300 µm)

A B - 20 mâles (15 –20 mg)/chambre

- nourriture ad libitum : aulne - exposition 2 à 4 semaines - 7 couples/chambre

Qualification toxique des sites Identifier le type d’effet

Exemple de valeurs seuils

Mesure des réponses biologiques sur les organismes

17

Transfert technologique et conclusions.

Objectifs des instituts de recherche publics (Carnot)

Demandes de plus en plus nombreuses des acteurs de l’eau publics et privés

Transfert technologique pour la proposition d’une offre de service :

BioMA–monitoring

Projet en incubation (G. Jubeaux, A. Chaumot, M. Coquery, O. Geffard et P. Boistard) .

 Outils disponibles pour le suivi des tendances de la contamination chimique (DCE) et le diagnostic de la toxicité des milieux.

 Etudier la possibilité d’utiliser cette approche pour répondre à la conformité des NQE- eau et NQE-biote :

modèles pour le changement de matrices (biote vs eau / biote vs biote)

Rapports ONEMA: Besse, J.P., Geffard, O., Coquery, M. - (2011)

Besse, J.P., Geffard, O., Lopes, C., Chaumot, A., Coquery, M. (2012)

Conclusions :

D’AUTRES APPROCHES SUR POISSONS SAUVAGES

A ^{PPLICATION À L} ’ INVESTIGATION

ENVIRONNEMENTALE

19

Bio

Transformat°

Info nerveuse Reproduction

Immunité

Info génétique Stress ox

VTG SPG Erod

GST

CYP 3A

AChE

Cassure primaire ADN

Phago

FO lyzo

stab

…

MMC

Osmorégulation ^Na/K

ATPase

RATE GONADES

FOIE

Perturbations autours d’un rejet industriel

61,5 km

70,8 km VTG (ng/mL)

0%

50%

100%

Site A

0%

50%

100%

Site B

Autres exemples…

 Rejet industriel potentiellement génotoxiques

 Perturbation des peuplements piscicoles

A venir : rivière Loue

Des outils utiles

Des approches opérationnelles

Des développement à poursuivre

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Besoin de validation

Séminaire biomarqueurs et bioessais INERIS, IFREMER, ONEMA 2010

Manque de

visibilité sur les outils en milieu continental

Approches intégrée chimie-biologie pour la gestion des

milieux

Un cadre réglementaire

(DCSMM) structurant en

milieu marin