Niveau : spé
Effet de l’insuline et du glucagon sur le foie lavé
- Achat de foie (de veau, génisse ou porc)
PREPARATION AU LABORATOIRE
- Préparer du liquide de RINGER : 500 ml par classe (10 postes)
* NaCl 6.5 g
* KCl 0.14 g
* CaCl2 (cristallisé) 0.12 g
* NaHCO3 0.20 g
* Eau distillée 1 000 mL
- Préparer dans 5 soucoupes environs 90 g de foie( par paillasse) suivant le professeur
MATERIEL PROFESSEURS
- Les bandelettes de keto-diastix
- Un plateau avec les soucoupes de 20 g de foie suivant le professeur - 200 mL de Ringer (secours)
MATERIEL ELEVES
- Une balance
- Un bain marie et un thermomètre - Une demi boite de Pétri en verre - Deux béchers de 50 mL
- Une éprouvette de 25 mL
- Une pipette de 5 mL avec une propipette - Deux agitateurs en verre
- Un feutre - Un ciseau fort - 2 passoires
- Un flacon avec 100 mL liquide de Ringer
- Un support en mousse pour ependorf (5 jaunes, 5 violets) - 2 demis boite de Pétri
- 5postes aves témoin et glucagon : 5 ependorfs avec 2 mL de glucagon
- 5 postes avec témoin et insuline + glucagon : 5 ependorfs avec 2 mL de glucagon, 5 ependorfs avec 2 mL d’insuline
- Un bécher de 50 mL avec 12 bandelettes de Keto-diastix
PROTOCOLE 1 - Brancher le bain marie à 37 °C
2 - Mettre dans 2 béchers 20 mL de liquide de Ringer avec l’éprouvette et les placer immédiatement à 37 °C 3 - Prélever 2 fragments de foie de 20 g chacun (balance, ciseau, demi boite de Pétri)
4 - Découper les fragments de foie de chaque lot en petit morceaux
5 - Rincer l’un après l’autre, sous l’eau du robinet, les 2 lots de foie placés dans des passoires. Il faut au moins 5 minutes pour éliminer le glucose présent.
6 - Placer ces fragments dans les deux béchers clairement identifiés (au crayon indélébile : bécher témoin, bécher avec hormones) ; Vérifier très rapidement s’il n’y a plus de glucose grâce aux bandelettes, sinon vider les béchers et recommencer les étapes 2, 5 et 6.
7 – Pour 5 postes :
Dans un pot ajouter 2 mL d’eau distillée à l’aide de la pipette de 5 mL et la propipette, puis 2 mL de glucagon
4 mL d’eau distillée à l’aide la pipette de 5 mL et la propipette dans le pot (témoin) 8 - Pour 5 postes :
Dans un pot ajouter 2 mL de glucagon, puis 2 mL d’insuline
4 mL d’eau distillée à l’aide la pipette de 5 mL et la propipette dans le pot (témoin) Mesurer, grâce aux bandelettes, la concentration de glucose dans les béchers à 0,10 ,20,30 minutes.
