L’étude de la réplication chez les Amphibiens
On étudie le cycle cellulaire chez le Xénope (Xenopus laevis) au cours des premiers stades de développement. On rappelle que l’œuf fécondé subit une phase de prolifération intense appelée segmentation.
A partir de l’analyse des documents et de vos connaissances, vous expliquerez quelles sont les phases du cycle cellulaire dans les premiers stades de développement du Xénope, puis vous décrirez les modalités de la réplication au sein de ces cellules.
Document 1 : Détermination de la quantité d’ADN au cours du cycle cellulaire On suit l’évolution de la quantité d’ADN dans une cellule au cours de la segmentation.
Document 2 : Photographie du matériel génétique en microscopie électronique
On réalise ensuite une préparation de chromosomes des cellules de Xénope et on observe les préparations en microscopique électronique à transmission.
Document 3 :Expérience d’incorporation de BrdU dans les chromosomes La BrdU (bromodésoxyuridine) est un nucléotide modifié où
le groupe méthyle en 5 est remplacé par un atome de brome. Et qui peut être utilisé par la cellule à la place d’un nucléotide à thymine (thymidine). Des cellules de Xénope ont été cultivées pendant 2 cycles cellulaires et de façon synchrone dans un milieu contenant du BrdU. Les cellules sont prélevées pendant la métaphase de la deuxième division cellulaire puis les chromosomes sont colorés à l’acridine organe et observés en microscopie optique à fluorescence. Les chromatides qui contiennent du BrdU dans un seul des 2 brins de la molécule d’ADN apparaissent jaune tandis que les chromatides dont la totalité de la double hélice d’ADN contient de la BrdU apparaissent très orangées.
