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Submitted on 5 Jun 2020
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Etude de la maturation des embryons somatiques de Douglas (Pseudotsuga menziesii)
Luis Octavio Portillo Lemus
To cite this version:
Luis Octavio Portillo Lemus. Etude de la maturation des embryons somatiques de Douglas (Pseudot- suga menziesii). 2016, 1 p. �hal-01269494�
0 250 500 750 1000 1250 1500 1750 2000 2250 2500 2750 3000 3250 3500
Luis Portillo
Stage MASTER 1 Forêt et Agrosystèmes 2015-2016 encadré par Dr Marie-Anne Lelu-Walter
Centre Val de Loire site Orléans
Etude de la maturation des embryons somatiques de Douglas (Pseudotsuga menziesii)
En France, le sapin de Douglas (Pseudotsuga menziesii) est une espèce d’importance économique avec 400 000 hectares de plantation (2èmeespèce de reboisement) Des méthodes de multiplication végétative ont été développées, la plus performante étant l’embryogénèse somatique: grand nombre de plants produits et possibilité de congeler les cultures/lignées embryogènes garantissant la sauvegarde (conservation des ressources génétiques) et la disponibilité de matériel juvénile (Klimaszewska et al. 2015). Chez le douglas l’embryogenèse somatique n’est pas encore maîtrisée (Gupta et al. 1995).
Objectif :Étudier le potentiel embryogène de cultures embryogènes de douglas: aptitude à produire des embryons somatiques cotylédonaires (maturation).
9 semaines
Introduction
Matériel et Méthodes
Références bibliographiques:
Gupta PK, Timmis R, Timmis KA, Carlson WC, et Welty EDE (1995) Somatic embryogenesis in Douglas-fir (Pseudotsuga menziesii). Dans: Somatic embryogenesis in woody plants, vol.3, Chap 19, Jain S, Gupta P, Newton R (éds), Kluwer academics publishers, Dordrecht The Netherland, pp303-313.
Klimaszewska K, Hargreaves C, Lelu-Walter M-A, Trontin J-F (2015)Advances in conifer somatic embryogenesis since year 2000. Dans: In vitro Plant embryogenesis in Higher plants, Chap. 7, Germanà MA, Lambardi M (éds), Methods in Molecular Biology, Springer Science+Business Media, New York, doi:10.1007/978-1-4939-3061-6_8, pp.131-162.
Park Y-S (2002) Implementation of conifer somatic embryogenesis in clonal forestry: technical requirements and deployment considerations. Ann. For. Sci. 59, 651-656.
Multiplication Maturation
(ABA)
Germination
7 jours
2 3 4
1 Graines Matériel végétale:
Statistiques: Analyse du potentiel embryogène par Intervalles de confiance, Modèle Linéaire (potentiel embryogène ~ génotype + répétition + quantité de matériel/mg MF), ANOVA (De type "I" , et "III")
Résultats et conclusions
Embryon somatique immature
Lignées embryogènes (15 génotypes) Cultures embryogènes
Embryon somatique cotylédonaire
Embryon somatique + racine Embryon somatique + racine +partie aérienne
Plante
5
Facteurs étudiés: Potentiel embryogène =
Nb ES g-1MF
Lignées embryogènes Croissement contrôlé Famille/Génotypes
A X E FA4, FA41, FA42, FA44, FA46, FA47
B X F FB17, FB171, FB173
C X G FC15, FC151, FC152
D X H FD1, FD12
0 250 500 750 1000 1250 1500 1750 2000 2250 2500 2750 3000
FB FA FC FD
% ES germés
Potentiel embryogène (Nb ES g-1MF)
Lignées embryogènes
% de germination (ES + racine)
Figure 2: Potentiel embryogène (Nb ES g-1MF) de différentes lignées embryogènes de Douglas (Pseudotsuga menziesii):effet inter-famille Barres d’erreur = IC 95%
Figure 3 : Potentiel embryogène (Nb ES g-1MF) de différentes lignées embryogènes de Douglas (Pseudotsuga menziesii):effet intra-famille.
Barres d’erreur = IC 95%
Figure 4: Germination (%) des embryons somatiques chez différentes lignées embryogènes de Douglas (Pseudotsuga menziesii) après 1 semaine de culture.
Figure 1: Etapes de l’embryogénèse somatique de Douglas (Pseudotsuga menziesii) et les facteurs étudiés; entouré de rouge les étapes vues pendant le stage.
Résultats : Différences significatives du potentiel embryogène entre les familles (Figure 2) qui varie de 143 à 2766 ES g-1MF.
Lignées embryogènes 0
10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
FB17 FC15 FC151 FD1 FD12
Potentiel embryogène (Nb ES g-1MF)
Résultats : Il existe des différences significatives du potentiel embryogène entre les lignées d’une même famille sauf pour la famille FD (Figure 3).
Résultats : Bonne germination pour les lignées testées (varie de 72 à 92 %, Figure 4).
Conclusions/maturation :des telles variations sur le potentiel embryogène ont été déjà observées chez d’autres conifères et ont été attribuées à un effet génétique (Park 2002).
Pour renforcer les observations, un modèle linéaire a été formulée (lm (potentiel embryogène ~ génotype + répétition + quantité de matériel/mg MF)) avec une analyse de variance de type « I » et « III ». Les éléments pris en compte expliquent 77,83 % de la variabilité totale, ce qui est très bien, et la partie de variation expliquée uniquement par le génotype est 60,30% . Ceci nous permet de conclure que les variations observées sont dues au génotype.
Conclusions/germination:le bon pourcentage de germination signifie que les embryons somatiques matures étaient mis dans de bonnes conditions culture (T°, milieu) et surtout qu’ils ont un méristème racinaire fonctionnel. Cependant ce sont des résultats préliminaires (après une semaine), il est nécessaire d’attendre jusqu’à 3 semaines pour que la germination soit finie (Gupta et al. 1995) et aussi faire plus de répétitions et de tester un plus grand nombre de lignées pour tirer des conclusions.
