TP Spécialité TS
Chromatographie sur couche mince
Principe de la chromatographie sur couche mince
La chromatographie est une méthode physique de séparation axée sur les différences d'affinité des substances à analyser à l'égard de deux phases, l'une stationnaire ou fixe, l'autre mobile. La séparation des composants entraînés par la phase mobile résulte de leur adsorption et de leur désorption successive sur la phase stationnaire et de leur solubilité différente dans chaque phase.
On dépose une goutte d'un mélange à 1 cm du bas d'une bandelette de papier ou d'une plaque de silice. Quelques millimètres de ce support trempent dans un éluant (non réactif avec les constituants du mélange). Par capillarité l'éluant s'élève et entraîne les constituants du mélange, certains constituants étant plus solubles que d'autres dans l'éluant ils vont être entraînés plus longtemps par ce dernier assurant ainsi la séparation des constituants.
Lorsque l'éluant est arrivé à environ 1 cm du haut du support on arrête l'analyse et, si les taches ne sont pas colorées, on procède à la révélation en utilisant une lampe UV ou en trempant la plaque dans une solution révélatrice (par exemple permanganate de potassium). On marque le front du solvant et la position des taches après élution.
Ensuite, on détermine pour chaque substance le rapport frontal.
Le Rf (de "Retarding Factor" que l'on pourrait traduire par "rapport frontal") est défini par le rapport suivant : Rf = dsubst
deolv
• Rf est caractéristique d'une substance donnée pour un éluant déterminé sur un support donné ;
• Rf est le même que le constituant soit pur ou dans un mélange ;
• Rf ne dépend pas de concentration du constituant dans le mélange.
La chromatographie comporte 3 phases :
- le dépôt des taches (précédé de la préparation de la cuve à chromatographie) - l'élution (phase la plus longue)
- la révélation suivie du repérage des taches en vue de la détermination du rapport frontal.
La chromatographie est donc une technique qui permet : - de vérifier qu'une substance est pure ;
- d'analyser un mélange ;
- de reconnaître les constituants d'un mélange par comparaison.
plaque
d'origine plaque
rélévée
front du solvant dsolv
dsubst
tache initiale
tache après migration
CHROMATOGRAPHIE SUR COUCHE MINCE DU BENZALDEHYDE EXTRAIT DU SIROP D ’ ORANGE
!
" #
$ %
& %
! '( ) *+ #
! , ! * # -
% . /
"
0 !
1 2 3
+
4 5
"
% /
)
