TP Hémostase
- TCK
- DOSAGE DU Fibrinogène
- Conduite à tenir devant un
allongement d’un TQ et ou /TCK
L’hémostase
• Phénomène physiologique permettant d’interrompre un saignement puis de rétablir une circulation sanguine normale
• Rôles : maintien du volume sanguin et de l’état liquide du sang (circulation)
• Equilibre dynamique entre facteurs pro et anti-coagulants
• 3 étapes intriquées: hémostase primaire, La coagulation et la fibrinolyse
Voies d’activation de la coagulation
• Thrombus blanc : hémostase imparfaite la plupart du temps
• Consolidation par un caillot supplémentaire plus résistant
PLAN TCK
I- Principe:
II- Echantillons et conditions de Prélèvement:
III- Matériels:
IV- Mode opératoire:
V- Résultats et Valeurs normales:
VI- Variations physiologiques:
Conclusion
• Principe:
C’est le temps de coagulation d’un plasma citraté en présence de céphaline et d’un activateur,lorsqu’on ajoute le CaCl2. C’est une méthode globale de l’exploration de la coagulation intrinsèque « voie endogène ».
• Echantillons et conditions de prélèvement :
- Sang veineux recueillit sur anticoagulant.
- Éviter la stase veineuse (un garrot prolongé ou trop serré) et l’aspiration à la seringue).
- Le prélèvement se fait sur citrate trisodique en respectant un rapport anticoagulant sang 1/9.
- Centrifugation à 3500 tr/min pendant 10 à 15 min pour obtenir un plasma pauvre en
plaquettes.
- Le test devra être effectuer dans un délai n’excédant pas 04 heures après le
prélèvement.
• Matériel:
- Tube citraté, tube sec.
- Micropipette, bain marie.
- Plasma pauvre en plaquettes obtenue après centrifugation à 3500 tr/min.
- Céphaline Kaolin (CK) lyophilisé.
La Céphaline: est une suspension de phospholipide.
Le Kaolin est l’activateur le plus utilisé d’où le nom de TCK
- CaCl2 à concentration [0.0025].
• Mode opératoire:
- Plasma témoin ou à tester………...………….……100µl.
- Céphaline + activateur (CK)………100µl.
- Incubation à 37° C (bain marie)……….……..2min.
- Déclenchement du chronomètre après ajout de CaCl2 calcique préalablement incubé à 37°C...100µl.
- Agiter en remuant le tube et noter le temps de la coagulation.
• Résultats et valeurs normales:
- les résultats s’exprime par rapport à un témoins qui varie entre 25 et 40 sec.
VN = Témoins + 10 secVN = Témoins + 10 sec
• Variations physiopathologiques:
Un TCA allongé oriente vers:
- Un déficit en facteurs de la voie endogène et commune.
- La présence d’acc anti (F VIII) ou de type lupique. . - CIVD, Une hypofibrinogénemie.
- Certains variantes de la maladie de Willebrand.
Dosage du Fg
Le fibrinogène est habituellement dosé selon la méthode chronométrique de Clauss. En
présence de concentrations élevées de thrombine et de concentrations faibles de fibrinogène, le
temps de coagulation est inversement
proportionnel au taux de fibrinogène.
• Matériel:
- Tube citraté, tube sec.
- Micropipette, bain marie.
- Plasma pauvre en plaquettes obtenue après centrifugation à 3500 tr/min.
- Tampon Owren-koller . - Solution de thrombine.
• Mode opératoire:
- Plasma témoin ou à tester dilué au 1/10…….….…200µl.
- Incubation à 37° C (bain marie)……….……..2min.
- Solution de thrombine………200µl.
- Déclenchement du chronomètre et Agiter en remuant le tube et noter le temps de la coagulation.
• Établissement de la courbe d’étalonnage:
- À partir d’un plasma humain standard citraté, dont la teneur en Fg est connue.
- On prépare une série de dilutions en solution
isotonique de chlorure de sodium (NaCl) à pH 7,2.
Pour chaque dilution déterminer le temps de coagulation de la même manière précité,
la courbe doit passer par au moins 03 points.
Pur [] ½ [] 1/3[] ¼[] 1/8[]
T1 T2 T3 T4 T5
en abscisse sur papier millimétré les
concentrations de fibrinogène en g/L de plasma et en ordonnée, les temps de coagulation obtenus.
• Résultats et valeurs normales:
- les résultats s’exprime en g/l.
VN = 2 – 4 g/lVN = 2 – 4 g/l
Les anomalies du fibrinogène peuvent être quantitatives ou qualitatives.
- Une hyperfibrinémie s'observe au cours des syndromes inflammatoires.
- une hypofibrinémie peut être congénitale ou acquise au cours des syndromes de défibrination, liée à une
coagulopathie de consommation ou à une fibrinolyse primitive.
Conclusion
Examens très demandé en pratique courante.
Qui ont bénéficiés des progrès technologiques, notamment l’automatisation, qui a permis
d'améliorer la reproductibilité et la précision des
mesures sous réserve d'un calibrage et d'un suivi
rigoureux des instruments.
Conduite à tenir devant des
allongements du TQ et ou TCK
Indice de Rosner (IR) =
Temps (Mélange)-Temps Témoin x 100 Temps malade
IR < 12 Correction (absence d’ ACC)
IR > 15 pas de Correction (présence d’ ACC)
