TPL3BIO

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Les Travaux Pratiques à l’Université Oran1-Ahmed Ben Bella

Faculté des Sciences de la Nature et de la Vie

Département de Biologie

Licence L3 Biochimie Semestre1

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T.P. N°01

 Matière: Immunologie Moléculaire et Cellulaire

 Intitulé : L’expérimentation Animal : Sacrifice et repérage d’organe lymphoïde

 Protocole :

 Principe: Réalisation d’une expérimentation animal, sacrifice d’un rat Wistar, prélèvement du sang et repérage d’organes Lymphoïdes.

 Méthodologie (succincte):

1. Anesthésié le rat avec une solution de chloral à 3%. 2. Fixation de l’animal et ouverture au niveau de l’abdomen. 3. Prélèvement du sang de la veine abdominale.

4. Repérage d’organes lymphoïdes primaire et secondaire

Produits chimiques Consommable/Verrerie Petits Matériels

 Chlorale

 Nacl  Becher. Tubes à essai en verre,  Tube EDTA,

 Tube héparine.  Seringue 5ml.  Seringue d’insuline.  Tubes de type eppendorff  Matériels de dissection.  Coton, fils ….

 Balance.  Centrifugeuse.

T.P. N°02

 Matière: Immunologie Moléculaire et Cellulaire

 Intitulé : Réaction d’agglutination et test d’hémolyse (CRP, Toxoplasmose)

 Nombre d’étudiants pris en charge : 58

 Protocole :

 Principe: Les particules de Latex sont recouvertes par les Ag solubles de Toxoplasma

gondii , ainsi l’agglutination indique la présence des Ac anti-Toxoplasma dans le

sérum étudié.

 Les particules de Latex sont recouvertes par des AC anti-PCR , qui seront agglutinées par les particules PCR présentent dans les échantillons étudiés

 Une goutte de contrôle négatif sur un cercle de la lame.  Une goutte de contrôle positif sur un cercle de la lame.  Une goutte de spécimen sur un autre cercle de la lame.

 ajouter une goutte de réactif Latex à coté de chacune des gouttes de contrôles et spécimen (s).

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Mélanger les gouttes à l’aide d’une baguette et Mettez la plaque sur l’agitateur ( 80-100 t.p.m) pendant 02 minutes.

Lecture :

 Examiner l’absence ou la présence d’agglutination

 Sérum de rats

 Kit TOXOPLASMOSE  Kit test CRP

 Pipette

 Baguettes  Microplaque Agitateur Rotatif  Vortex

Département de Biologie

Licence L3 Biochimie Semestre S1

T.P. N°01

 Matière: Enzymologie Approfondie

 Intitulé : Cinétique de l’hydrolyse du P-Nitrophenyl Phosphate par la Phosphatase

Alcaline

 Protocole :

 Principe: La phosphatase alcaline est présente dans les os, les reins, le foie et l’intestin. Elle agit sur les esters phosphoriques avec libération du phosphate minéral.

 Carbonate-bicarbonate de sodium

 P-nitrophényl phosphate  (substrat)

 Phosphatase alcaline (enzyme)

 Erlen meyer  Béchers  Eprouvettes graduées  Pipettes graduées.  Poires.  Spectrophotomètre  Agitateur magnétique  pH –mètre

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T.P. N°02

 Matière:  Intitulé :  Protocole :  Principe:  Méthodologie (succincte):

T.P. N°03

T.P. N°04

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Licence L3 Biochimie Semestre

S1

T.P. N°01

 Matière: Purification des protéines

 Intitulé : purification du Lysozyme

 Protocole :

 Principe:

 carboxyméthyl - cellulose (CM-cellulose)  Réactif cuproalcalin  SAB  Réactif de FOLIN-CIOCALTEU  Séphadex G25  - suspension bacterienne de Micrococcus lysodeikticus  Tartrate double de Na+_{et K}+  Sulfate de cuivre  Na2CO3

 Tubes conique 15ml  Spectrophotomètre

T.P. N°02

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T.P. N°03

T.P. N°04

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