« calcul de la DL

Toxicologie expérimentale

« calcul de la DL ^{50 »}

Pharmacovigilance MM

AMM

Essais cliniques

Toxicologie expérimentale

Essais près-requis Essais post-requis

Pharmacologie expérimentale

Etudes physico-chimiques

2

Essais pré-requis

Essais de Mutagenèse Administration unique

Toxicité aigue

Administration réitérée à court terme Toxicité sub-aigue

Essais post – requis +

Administration réitérée à long terme Toxicité chronique

Essais de

cancérogenèse

Les buts finaux de l’évaluation expérimentale de la toxicité globale:

la DMT.

les organes, les tissus et les cellules cibles.

Déterminer les fonctions

physiologiques altérées.

les risques d’altération génétique et de

cancérogénèse.

les risques de

malformation congénitale.

Essais de toxicité par administration unique

TOXICITE AIGUE

 Évaluation qualitative et quantitative des phénomènes toxiques.

 Évolution dans le temps.

 Dose unique .

 symptômes

 temps d’apparition

qualitative quantitative

Dose / mort

 DMM

 DL50

Dose minimale mortelle DMM

 Dose minimale / Mort / animal

 IV lente et continue (perfusion)

 arrêt cardiaque = DMM

 But : choix les doses / DL50

Détermination de la dose létale 50 / DL50 :

Estimation statistique d’une dose unique capable de tuer la moitié des animaux.

 doses croissantes

 pourcentage de mortalité 0 et 100%.

Définition

Protocole expérimental

2 espèces de mammifères

Rongeurs (rat et souris) +++

Non rongeur (chien+++)

thérapeutique humaine biodisponibilité absolue ( IV parfois IP)

deux voies animaux

voies d’administrations

6 doses et + Rapport / doses successives : 1.2 et 1.5

10 à 20 animaux / lot Homogènes +++

élevage, espèce, souche, sexe, âge et poids.

Lot témoin : véhicule

Doses administrées

Constitution des lots

14 jours

 Heure de la mort

 Nombre de morts

 Symptômes

 Autopsie +++ ( morts et survivants )

 examen macroscopique des viscères

 examen histopathologique

durée d’observation

Examens

1 . Méthode de Karber et Behrens :

DL50: dose létale 50

DL100 : dose létale 100

a : différence entre deux doses successives.

b : moyenne de mort entre deux doses successives . n : nombre moyen d’animaux par lot

DL50 = DL100 - (∑ab / n)

Évaluation

Relation doses / effets

Calcul de la DL50 :

Probits

Log dose

Log (dl50)

84

16

2. Méthode de Miller et Tainer : méthode graphique

(papier log – probit ⁾

50

Méthode graphique



Pour utiliser les pourcentages 0 et 100 % dont les

probits tendent vers l’infini, ceux-ci sont remplacés par des valeurs corrigées. :



correction de 0% Y0 = 50 / n



correction du 100% : Y100 = (100n – 50) / n



n est le nombre d’animaux utilisés dans chacun de ces

lots

Résultats:

L’écart type S

S= (DL84% - DL16 %) / 2

L’écart à la moyenne δ ^:



δ = 2S / √2 n’

n’ : est le nombre total d’animaux dans les lots ayant

donnés des pourcentages de mortalité entre 7% et 93% .

Résultat :

Exprimé en poids du produit (mg) par Kg de poids de l’animal

DL50= DL50 graphique ± δ écart à la moyenne

Exploitation des résultats :

 Évaluation quantitative / dose létale

 Nature / effets toxiques aigus

 Organes cibles

 Signes cliniques / surdosage aigu chez l’homme

 Préparer les protocoles de toxicité par administration réitérée

 Index thérapeutique

Index thérapeutique IT

Marge De

Sécurité Zone

thérapeutique

Zone Toxique

DE50 DL50

50 %

Log dose

%

Rapport IT = DL50 / DE50

faible

Toxiques +++

moyen

large

Toxicité Faible

IT

Molécule abandonnée

Post- requis

Essais cliniques

Résultats Pré - requis

Faible

Acceptable

Toxicité +++

Merci de votre attention