JOURNAL DE PHYSIQUE
Colloque C2, supplément au n°2, Tome k5, février 1984 page C2-603
U T I L I S A T I O N DE LA SPECTROSCOPIE DE PERTES D'ÉNERGIE D'ÉLECTRONS À L ' I D E N T I F I C A T I O N DE DÉPÔTS INTRA-RÉNAUX
M. Mignon-Conte, F . C a r e n t z , J . P o u r r a t , J . J . C o n t e , Y. Kihn* e t J . S e v e l y *
Laboratoire d'Immunopathologie Rénale et d'Immuno-pharmacotogie, Service de Néphrologie et d'Hémodialyse, C.H.U. Purpan, 21059 Toulouse, France
Laboratoire d'Optique Electronique du C.N.R.S., B.P. 4347, 31055 Toulouse, France
Résumé : La technique de microanalyse par spectroscopie de pertes d ' é n e r g i e d ' é l e c - trons est u t i l i s é e pour l ' i d e n t i f i c a t i o n chimique de d i v e r s types de dépots i n t r a - rénaux. E l l e a permis l a d é t e c t i o n de dépôts de b é r y l l i u m , de s i l i c i u m , d ' i o d e , de f e r e t d ' a r g e n t .
Abstract : Microanalysis by EELS has been used for the elemental identification of urinal deposits identification observed in fine pathological kidney sections. The technique has allowed the detection of beryllium, silicium, iodine, iron and silver deposits.
La technique de microanalyse par spectroscopie de pertes d ' é n e r g i e d ' é l e c t r o n s e s t u t i l i s é e pour l ' i d e n t i f i c a t i o n chimique de dépôts minéraux i n t r a - r é n a u x . Cette métho- de a permis j u s q u ' à ce j o u r de mettre en évidence, au cours de tableaux c l i n i q u e s des éléments dont l a r e s p o n s a b i l i t é peut ê t r e discutée dans l a recherche de l ' o r i g i n e de c e r t a i n e s maladies r é n a l e s .
Cette méthode s ' a p p l i q u e sur des fragments de biopsie rénale humaine pratiquée à l ' a i - g u i l l e . Le t i s s u rénal e s t f i x é au g l u t a r a l d e h y d e , c e t t e o p é r a t i o n est s u i v i e d'une p o s t - f i x a t i o n osmique selon l e s techniques h a b i t u e l l e s . L'Epon est l e m a t é r i e l d ' i n - c l u s i o n . Les coupes sont non colorées ou colorées par l ' a c é t a t e d ' u r a n y l e e t l e c i t r a - t e de plomb. Leur épaisseur e s t comprise entre 190 e t 240 nm. E l l e s sont examinées en microscopie é l e c t r o n i q u e à haute t e n s i o n (1 MV) ( 3 ) . L ' a i r e analysée é t a n t d é f i n i e par un diaphragme de s é l e c t i o n de 10 um e t correspondant à une surface de 100 nm de diamètre. Un repérage des dépôts i n t r a - r é n a u x qui se présentent, s o i t sous l a forme de sphères m i c r o - c r i s t a l l i n e s , s o i t d'images de type l y s o s o m i a l , e s t f a i t sur l e s micro- graphies obtenues en microscopie é l e c t r o n i q u e c o n v e n t i o n n e l l e avant l ' a p p l i c a t i o n de
l ' a n a l y s e par spectroscopie de pertes d'énergie ( 4 , 5 ) . A i n s i ont pu ê t r e analysées des p a r t i c u l e s dont les dimensions sont d ' e n v i r o n 30 nm.
RESULTATS
L'observation privilégiée de deux malades présentant une glomérulonëphrite rapidement progressive au cours d'une silicose pulmonaire a donné lieu à l'identification de dé- pôts de silicium. Les dépôts se trouvent au niveau des glomérules : dans les capsules de Bowman (Figi A et B ) , les espaces urinaires, les axes mésangiaux.
Du béryllium a été trouvé dans une nëphropatie apparemment primitive. Dans le paren- chyme rénal, sa distribution est assez diffuse : basales tubulaires, tissu intertu- bulaire, capsules de Bowman, cellules épithéliales glomérulaires (Fig2 A et B) et axes mésangiaux.
Des dépôts d'argent sont retrouvés en quantité abondante, chez un malade longtemps traité par une thérapeutique à base de ce produit, mais sevré depuis de longues années, alors qu'apparait une insuffisance rénale. L'argent est situé dans les mitochondries tubulaires, (Fig 3 A et B ) .
Article published online by EDP Sciences and available at http://dx.doi.org/10.1051/jphyscol:19842141
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De l ' i o d e e t du f e r : s ' a s s o c i e n t dans l e s tubes rénaux d ' u n s u j e t recevant un t r a i - tement antiarythmique : l e c h l o r h y d r a t e d'amiodarone présentant par a i l l e u r s une hémochromatose. Ces dépôts sont découverts l o r s de 1 'examen de l a b i o p s i e r é n a l e e f - f e c t u é e en r a i s o n d'une d i m i n u t i o n de l a f o n c t i o n rénale. (La f i g u r e 4 A e t B i l l u s - t r e d'une p a r t l a l o c a l i s a t i o n des p a r t i c u l e s , d ' a u t r e p a r t l ' a n a l y s e chimique.)
On d o i t s o u l i g n e r q u ' i l n ' a jamais é t é r e t r o u v é aucun de ces dépots dans l e s r e i n s normaux p r i s comme témoins.
Le r ô l e pathogène de ces dépôts minéraux d o i t ê t r e b i e n entendu p l u s largement démon- t r é par des méthodes p l u s d i r e c t e s : épidémio'iogiques ou expérimentales en p a r t i c u - l i e r . Ces r é s u l t a t s s o n t d é j à prometteurs e t l ' i n t e r v e n t i o n de c e r t a i n s d ' e n t r e eux, l e s i l i c i u m , par exemple, comme p o i n t de départ de néphropathies à médiation immu- nologique r e s t e posée.
F i g . 1 : A - Dans l a capsule de Bowman d'un glomérule, images sphériques m i c r o c r i s t a l l i n e s contenant du s i l i c i u m .
B - Spectre des p e r t e s d ' é n e r g i e obtenu à 1 MV sur l ' a m a s sphérique f e n ê t r e d ' é n e r g i e 80 - 650 eV - mise en évidence du s i l i c i u m e t du carbone.
F i g . 2 :
A - Dans l e cytoplasme d'une ce1 1 u l e é p i thé1 i a l e g l oméru- l a i r e , images de type l y s o - somial contenant du b é r y l - l i u m .
B - Spectre de p e r t e s d'éner- g i e correspondant obtenu à 1 MV - f e n ê t r e d ' é n e r g i e 100 500 eV - mise en évidence du b é r y l l i u m e t du carbone.
F i g . 3 : A - L o c a l i s a t i o n i n t r a m i t o c h o n d r i a l e de g r a i n s d ' a r g e n t dans l e s tubes rénaux.
B - Spectre de pertes d ' é n e r g i e associé - f e n ê t r e d ' é n e r g i e 400 -
800 eV - mise en évidence de l ' a r g e n t e t de l'oxygène.
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Fig. 4 :
A c a l i s a t i o n i n t r a t u b u l a i r e d'un dépôt microcristal l i n .
B - Spectre de pertes d'énergie associé -
fenêtre d'énergie 400 - 900 eV - mise en
évidence d'oxygène, d'iode e t de f e r .
REFERENCES
(1) J.B. BERRY, P. GALLE, P . HENOC and G. LAGRUE, Path. Biol., 25 (1977) 37.
(2) The Lancet, 1978, July 1, 22.
( 3 \ \ - , G. ZANCHI. Thèse Science, Université Paul Sabatier, Toulouse, France, J u i l l e t
1978.
( 4 ) J . SEVELY, Le Vide, 191 (1978) 69.
(5) R.F. EGERTON, Proc. 10 t h International Congress on Electron Microscopy, Hamburg 1 (1982) 151.
