1 TP3 : Organisation fonctionnelle de la cellule
La cellule végétale La cellule procaryote
I- Les cellules végétales
A- Architecture de deux tissus végétaux
Une cellule végétale est une cellule eucaryote dont la taille moyenne est de l’ordre de 100 µm.
Une cellule végétale possède obligatoirement une vacuole, organite très volumineux et transparent, et une paroi squelettique doublant la membrane plasmique et imposant une forme polygonale.
Une cellule végétale possède éventuellement des plastes, organites de plusieurs µm donc visibles au microscope optique. Par exemple les chloroplastes, de couleur verte, permettent la photosynthèse.
La forme des cellules, leur agencement, l’épaisseur de la paroi et la nature des plastes sont différents selon les tissus observés.
Exercice : réalisez un montage puis un dessin d’observation comparé de l’épiderme d’oignon et des feuilles d’élodée.
- protocole du montage de l’épiderme d’oignon
- protocole du montage des feuilles d’élodée
- notion de dessin comparé
3 B- Les colorants usuels
Exercice : sur des fragments d’épiderme d’oignon, réalisez une coloration avec l’un des quatre colorants proposés et identifiez le rôle de chaque colorant.
COLORANT ELEMENT MARQUE OBSERVATION
Vert de méthyl Pyronine Eau iodée
Bleu de méthylène
C- Les flux d’eau entre le milieu et la vacuole
On appelle flux osmotique les mouvements spontanés de l’eau d’un compartiment hypoosmotique vers un compartiment hyperosmotique.
SITUATION 1 SITUATION 2
L’épiderme d’oignon est monté dans une
goutte d’eau distillée L’épiderme d’oignon est monté dans une solution salée à 6%
Important : on observe le même résultat pour une solution de même osmolarité mais de chimie différente.
D- La diversité des plastes
On distingue plusieurs types de plastes selon leur contenu : - proplaste
- chloroplaste - chromoplaste - amyloplaste ….
Exemple des chromoplastes de Tomate :
5 E- Apport du microscope électronique
Une cellule végétale possède plusieurs compartiments : un noyau, un système endomembranaire avec réticulum et appareil de Golgi, une vacuole délimitée par le tonoplaste, des péroxysomes, des mitochondries, et éventuellement des plastes.
Détail d’un chloroplaste au MET
X 100 000
7 II- Les eubactéries, des cellules procaryotes
Les cellules procaryotes sont des petites cellules de l’ordre de 1 µm de long, non compartimentées, avec une information génétique libre dans le cytoplasme.
Les cellules procaryotes sont délimitées par une membrane plasmiques et une paroi en peptidoglycanes, éventuellement recouverte d’une seconde membrane.
A- La coloration de Gram Protocole :
1- réaliser un frottis bactérien, ici un frottis de yaourt, en étalant un film translucide à l’aide d’une lamelle
2- faire sécher jusqu’à obtenir un film mat
3- au-dessus du cristallisoir, recouvrir d’alcool pendant 1 minute ; refaire sécher : cette étape permet de fixer les bactéries sur la lame
4- recouvrir de Volet Cristal pendant 10 secondes ; égoutter sans rincer 5- recouvrir de Lugol (eau iodée) pendant 10 secondes ; égoutter sans rincer 6- recouvrir à nouveau de Lugol pendant 10 secondes ; égoutter sans rincer 7-recouvrir d’alcool pendant 10 secondes ; égoutter sans rincer
8- recouvrir d’alcool pendant 10 secondes ; égoutter sans rincer
Cette étape permet de colorer en violet les membranes des bactéries Gram+, le lugol fixant la coloration. L’alcool rince ensuite le violet qui n’est pas fixé.
9- recouvrir de fuschine pendant 30 secondes ; égoutter ; rincer 10- faire sécher avant observation. Un frottis s’observe sans lamelle.
Cette étape permet de recolorer en rose les bactéries Gram-.
Bilan : on distingue les bactéries selon 2 critères
- gram+ gram- : absence ou présence d’une membrane autour de la paroi - forme en bacille, forme en coque
B- L’apport du microscope électronique
