1 [FR]
Pastorex ™ Strep
60
61721 61728 61733
61726 61729 61734
61727 61732
Test d’agglutination pour le groupage des streptocoques des groupes A, B, C, D, F et G.
880999 – 2017/12 TABLE DES MATIÈRES1. APPLICATION ... 3
2. RÉSUMÉ ET EXPLICATION DU TEST ... 3
3. PRINCIPE DU TEST ... 3
4. RÉACTIFS ... 3
4.1. Description ... 3
4.2. Stockage et conditions de manipulation ... 4
5. PRÉCAUTIONS D'UTILISATION ... 5
5.1. Consignes d’hygiène et de sécurité ... 5
5.2. Précautions d’utilisation ... 5
6. ÉCHANTILLONS ... 5
7. PROCÉDURE ... 5
7.1. Matériel fourni ... 5
7.2. Matériel requis non fourni ... 5
7.3. Procédure de test ... 6
7.4. Contrôle de qualité ... 6
2 [FR]
7.5. Interprétation des résultats ... 6
8. LIMITES DU TEST ... 7
9. PERFORMANCES DU TEST ... 7
9.1. Etude de reproductibilité ... 7
9.2. Performances cliniques ... 8
10. RÉFÉRENCES BIBLIOGRAPHIQUES ... 9
3 [FR]
1. APPLICATION
Le test Pastorex™ Strep est un test d’agglutination rapide pour le groupage des streptocoques selon la classification de Lancefield. Le test comporte des suspensions de latex spécifiques permettant d’identifier les groupes A, B, C, D, F et G.
L’identification des antigènes spécifiques de groupe par des antisérums homologues nécessite une extraction enzymatique préalable.
2. RÉSUMÉ ET EXPLICATION DU TEST
L’identification des streptocoques repose sur la nature de l’hémolyse autour des colonies isolées sur gélose Columbia au sang (ß, ) et sur la détection des antigènes polyosidiques présents dans la paroi cellulaire et spécifiques du groupe streptococcique (classification de Lancefield [1]). Selon cette classification de Lancefield, les principaux sérogroupes sont A, B, C, D, F et G. Les souches appartenant à ces sérogroupes sont généralement ß-hémolytiques, mais certaines peuvent aussi être α-hémolytiques ou non-hémolytiques. Il est à noter que les souches d’Enterococcus et de Streptococcus bovis appartenant au groupe B, ne sont pas ß-hémolytiques.
Certains groupes de streptocoques (groupe A, C ou G) sont systématiquement associés à des pathologies cliniques [2, 3, 4], tandis que d’autres (groupes B, D ou F) sont des organismes commensaux des muqueuses buccales, génitales ou intestinales et ne sont pathogènes que lorsqu’ils se trouvent en dehors de leur milieu naturel [5, 6]. Les streptocoques sont responsables de nombreuses infections, incluant les pharyngites avec ou sans complications sceptiques [11, 12], les infections cutanées, les septicémies puerpérales [2] et les endocardites. Certaines maladies sont causées par un groupe spécifique, telles que les rhumatismes articulaires et les glomérulonéphrites aiguës (groupe A), les infections néonatales (septicémies, méningites) et les infections invasives chez l’adulte (groupe B) [5, 6, 14], les infections post- opératoires (groupe F) et les septicémies associées aux injections intraveineuses de drogues (groupe G) [4]. Les streptocoques du groupe C, hautement pathogènes chez les animaux, peuvent provoquer des infections sévères chez les patients pédiatriques (endocardites, méningites) [3] et de l’arthrite bactérienne grave chez les patients sans facteurs de risque [15]. Les streptocoques du groupe D sont responsables d’infections des voies urinaires et d’endocardites [13].
L’identification des streptocoques des groupes A, B, C, D, F ou G, sur la base des antigènes polysaccharidiques spécifiques de groupe selon la classification de Lancefield [1] peut parfois s’avérer difficile:
certaines souches possèdent les antigènes spécifiques des groupe D et G [7, 8, 9],
certaines souches -hémolytiques présentent l’antigène du groupe C [10],
certaines souches atypiques produisent des micro-colonies hémolytiques présentant des antigènes A, C ou G [11].
Dans la plupart des cas, l’identification rapide du groupe de streptocoques selon la classification de Lancefield, permet d’établir un diagnostic présomptif des infections à streptocoques.
Pastorex™ Strep est un test simple nécessitant seulement du matériel de laboratoire de base, et facile à réaliser pour permettre cette identification.
3. PRINCIPE DU TEST
Le test Pastorex™ Strep utilise une méthode simple d’extraction enzymatique. L’antigène présent dans l’extrait obtenu est identifié à l’aide de particules de latex recouvertes d’anticorps spécifiques de groupe. Les particules de latex s’agglutinent en présence de l’antigène homologue. En l’absence de l’antigène, elles restent en suspension homogène.
4. RÉACTIFS 4.1. Description
A) Pastorex™ Strep, code 61721 (60 tests):
Identification Description Présentation
A Pastorex™ Strep A Latex
Suspension de latex rouge sensibilisé avec des immunoglobulines de lapin spécifiques de Streptococcus du Groupe A
Conservateur : 0,3 % de ProClin™ 300 et 0,005 % de sulfate de gentamicine
1 ml
1 flacon compte-gouttes à bouchon rouge,
prêt à l’emploi B Pastorex™ Strep B
Latex
Suspension de latex rouge sensibilisé avec des immunoglobulines de lapin spécifiques de Streptococcus du Groupe B
Conservateur : 0,3 % de ProClin™ 300 et 0,005 % de sulfate de gentamicine
1 ml
1 flacon compte-gouttes à bouchon jaune,
prêt à l’emploi C Pastorex™ Strep C
Latex
Suspension de latex rouge sensibilisé avec des immunoglobulines de lapin spécifique de Streptococcus du Groupe C
Conservateur : 0,3 % DE ProClin™ 300 et 0,005 % de sulfate de gentamicine
1 ml
1 flacon compte-gouttes à bouchon bleu,
prêt à l’emploi D Pastorex™ Strep D
Latex
Suspension de latex rouge sensibilisé avec des immunoglobulines de lapin spécifiques de Streptococcus du Groupe D
Conservateur : 0,3 % DE ProClin™ 300 et 0,005 % de sulfate de gentamicine
1 ml
1 flacon compte-gouttes à bouchon orange,
prêt à l’emploi F Pastorex™ Strep F
Latex
Suspension de latex rouge sensibilisé avec des immunoglobulines de lapin spécifiques de Streptococcus du Groupe F
Conservateur : 0,3 % DE ProClin™ 300 et 0,005 % de sulfate de gentamicine
1 ml
1 flacon compte-gouttes à bouchon prune,
prêt à l’emploi
4 [FR]
G Pastorex™ Strep G Latex
Suspension de latex rouge sensibilisé avec des immunoglobulines de lapin spécifiques de Streptococcus du Groupe G
Conservateur : 0,3 % de ProClin™ 300 et 0,005 % de sulfate de gentamicine
1 ml
1 flacon compte-gouttes à bouchon vert,
prêt à l’emploi
- Pastorex™ Strep Positive control
Antigène de contrôle positif polyvalent, contenant les antigènes polysaccharidiques des streptocoques des Groupes A, B, C, D, F2 et G
Conservateur : 0,3 % de ProClin™ 300 et 0,005 % de sulfate de gentamicine
1 x 1,5 ml (quantité suffisante pour
5 tests avec chaque suspension de latex)
- Pastorex™ Strep Extraction enzyme
Enzyme d’extraction dans TRIS (35,8 %) Conservateur : 1,43 % de Bronidox
2 flacons d’enzymes d’extraction lyophilisées à
reconstituer avec 10 ml d’eau stérile (volume suffisant pour 30 réactions)
- Cards Cartes d’agglutination jetables (8 cercles) 4 x 15 cartes
- Sticks Bâtonnets mélangeurs jetables 3 x 125 bâtonnets
B) Pastorex™ Strep, tests de latex individuels (60 tests chacun) :
4.2. Stockage et conditions de manipulation
Les réactifs peuvent être utilisés jusqu’à la date d’expiration indiquée sur l’emballage à condition qu’ils soient conservés à +2-8 °C et en l’absence de contamination microbienne (y compris après ouverture).
NE PAS CONGELER LES RÉACTIFS LATEX.
S'assurer que les bouchons des deux flacons compte-gouttes sont bien fermés afin d’éviter toute contamination ou dessèchement des réactifs.
Stocker les flacons de réactif latex à la verticale (dans la mousse d’origine fournie dans le coffret).
Identification Conservation (après première ouverture)
A, B, C, D, F, G, Positive control Après la première ouverture : jusqu’à la date d’expiration mentionnée sur l’emballage à +2-8 °C Extraction enzyme Après reconstitution : 4 mois à +2-8 °C
Code
produit Identification Description Présentation
61726 A Pastorex™ Strep A Latex
Suspension de latex rouge sensibilisé avec des immunoglobulines de lapin spécifiques de Streptococcus du Groupe A
Conservateur : 0,3 % de ProClin™ 300 et 0,005 % de sulfate de gentamicine
1 ml
1 flacon compte-gouttes à bouchon rouge,
prêt à l'emploi
61727 B Pastorex™ Strep B Latex
Suspension de latex rouge sensibilisé avec des immunoglobulines de lapin spécifiques de Streptococcus du Groupe B
Conservateur : 0,3 % de ProClin™ 300 et 0,005 % de sulfate de gentamicine
1 ml
1 flacon compte-gouttes à bouchon jaune,
prêt à l’emploi
61732 C Pastorex™ Strep C Latex
Suspension de latex rouge sensibilisé avec des immunoglobulines de lapin spécifiques de Streptococcus du Groupe C
Conservateur : 0,3 % de ProClin™ 300 et 0,005 % de sulfate de gentamicine
1 ml
1 flacon compte-gouttes avec bouchon bleu,
prêt à l'emploi
61728 D Pastorex™ Strep D Latex
Suspension de latex rouge sensibilisé avec des immunoglobulines de lapin spécifiques de Streptococcus du Groupe D
Conservateur : 0,3 % de ProClin™ 300 et 0,005 % de sulfate de gentamicine
1 ml
1 flacon compte-gouttes à bouchon orange,
prêt à l’emploi
61733 F Pastorex™ Strep F Latex
Suspension de latex rouge sensibilisé avec des
immunoglobulines de lapin spécifiques de Streptococcus du Groupe F
Conservateur : 0,3 % de ProClin™ 300 et 0,005 % de sulfate de gentamicine
1 ml
1 flacon compte-gouttes à bouchon prune,
prêt à l’emploi
61734 G Pastorex™ Strep G Latex
Suspension de latex rouge sensibilisé avec des immunoglobulines de lapin spécifiques de Streptococcus du Groupe G
Conservateur : 0,3 % de ProClin™ 300 et 0,005 % de sulfate de gentamicine
1 ml
1 flacon compte-gouttes à bouchon vert,
prêt à l’emploi
61729 Pastorex™ Strep Extraction enzyme
Enzyme d’extraction dans TRIS (35,8 %) Conservateur : 1,43 % de Bronidox
2 flacons d’enzymes d’extraction lyophilisées à
reconstituer avec 10 ml d’eau stérile (volume suffisant pour 30 réactions) 61723 Agglutination Cards Cartes d’agglutination jetables (8 cercles) 4 x 15 cartes
5 [FR]
5. PRÉCAUTIONS D'UTILISATION
Uniquement pour le diagnostic in vitro réalisé par des techniciens de laboratoire, dans un environnement de laboratoire : 5.1. Consignes d’hygiène et de sécurité
La manipulation de ce test est exclusivement réservée à un personnel qualifié formé aux procédures de laboratoire et connaissant les risques potentiels. Porter des vêtements de protection adaptés, des gants et des lunettes ou masque, et procéder de manière appropriée en appliquant les Bonnes Pratiques de Laboratoire.
Éliminer tous les échantillons et le matériel utilisé pour réaliser le test comme des déchets infectieux. Les déchets de laboratoire, chimiques ou biologiques dangereux doivent être manipulés et éliminés conformément à toutes les réglementations locales, régionales et nationales.
Pour connaître les recommandations liées aux risques et les précautions relatives à certains produits chimiques contenus dans ce kit, consulter le(s) pictogramme(s) figurant sur les étiquettes et les informations fournies à la fin de cette notice. La fiche de données de sécurité (FDS) est disponible sur www.biorad.com.
5.2. Précautions d’utilisation 5.2.1. Préparation
Avant l’utilisation, patienter 10 minutes pour permettre aux réactifs en flacon compte-gouttes de se stabiliser à température ambiante (18-30 °C).
Ne pas toucher la surface réactionnelle des cartes d’agglutination.
La solution d’enzyme d’extraction doit être reconstituée avec de l’eau distillée, en évitant toute contamination.
Il est recommandé d’identifier les cercles de la carte avec le(s) groupe(s) de latex avant de démarrer la procédure de groupage.
Utiliser les bâtonnets mélangeur en plastique fournis dans le kit pour mélanger les réactifs avec les colonies bactériennes.
Ne pas utiliser de réactifs périmés.
NE PAS UTILISER le kit si l’emballage des composants est endommagé.
5.2.2. Mode opératoire
Effectuer le test à température ambiante (entre 18 et 30°C), en évitant de s’exposer à un flux d’air climatisé.
Agiter doucement les réactifs avant chaque utilisation, puis vérifier que la suspension de latex reste homogène avant l'utilisation.
Pour garantir le dépôt adéquat des gouttes, tenir les flacons compte-gouttes à la verticale.
Essuyer l‘embout du compte-gouttes du réactif afin d'obtenir des gouttes correctement calibrées.
Changer de bâtonnet mélangeur pour chaque réaction.
Eliminer tous les matériaux jetables utilisés dans une poubelle autoclavable ou un bac désinfectant.
6. ÉCHANTILLONS
Le test Pastorex™ Strep doit être utilisé avec des colonies de streptocoques fraîches et bien isolées sur gélose Columbia au sang (par ex. Bio-Rad, codes 63804, 63784) ou sur gélose Columbia ANC (par ex. Bio-Rad, code 63954) (colonies de cocci à Gram positif, catalase négative).
Le latex Pastorex™ Strep B peut également être effectué avec des colonies fraîches et bien isolées de streptocoques supposées de groupe B isolées sur StrepBSelect™ (Bio-Rad, code 63750) [16].
7. PROCÉDURE 7.1. Matériel fourni
Tous les composants mentionnés dans la section « Réactifs » et leurs contrôles
Pastorex™ Strep Extraction enzyme (code 61729)
Cartes d’agglutination jetables (code 61723)
Etuve sèche à 37 °C (optionnel pour la préparation de l’enzyme d’extraction) 7.2. Matériel requis non fourni
Micropipettes standard pour distribuer 40 µl et 300 µl
Pipettes standard de 10 ml
Öse pour le prélèvement des colonies bactériennes
Eau distillée stérile
Sérum physiologique stérile
Tubes à hémolyse ou micro-tubes (1 par souche à tester)
Minuterie
Bac désinfectant
6 [FR]
7.3. Procédure de test Préparation de l’extraction :
Remarque : Des études internes ont montré que le latex Pastorex™ Strep B (61727) fournit de bons résultats en termes de spécificité et de sensibilité lorsqu’il est utilisé pour tester les colonies supposées de groupe B, qui se sont développées sur le milieu StrepBSelect™, sans extraction enzymatique préalable.
Déposer 300 µl de suspension d’enzyme d’extraction dans un tube à hémolyse pour chaque souche isolée à tester.
En utilisant une öse, émulsionner avec précaution 5 à 10 colonies d’une culture fraîche de streptocoques dans la solution enzymatique de manière à obtenir une suspension homogène. Si le diamètre des colonies est inférieur à 0,5 mm, augmenter l’inoculum jusqu’à l’obtention d’un trouble visible à l’œil nu.
Incuber soit pendant 15 à 45 minutes à température ambiante (18-30°C), soit 10 à 30 minutes à 37°C.
Procédure de groupage à partir d’une gélose Columbia au sang ou gélose Columbia ANC :
Déposer 40 µl de solution d’extrait sur chaque cercle de la carte d’agglutination.
Agiter lentement les réactifs. En maintenant le flacon compte-gouttes à la verticale, déposer une goutte de chacun des réactifs A, B, C, D, F et G à côté de la suspension, sur la carte d’agglutination.
A l’aide d’un bâtonnet mélangeur, mélanger la goutte de latex avec la suspension sur toute la surface du cercle en changeant de bâtonnet entre chaque réactif de latex.
Agiter lentement la carte, horizontalement, pendant 1 minute maximum.
Observer si une agglutination visible à l’œil nu se forme dans un délai d’1 minute maximum. La taille des agglutinats et la rapidité de leur apparition dépendent de la concentration antigénique de la suspension d’extrait.
Procédure de groupage à partir d’une gélose StrepBSelect™ :
D’après les études internes, il est recommandé d’effectuer le groupage des streptocoques présumés de groupe B (GBS) sur StrepBSelect™ avec le réactif de latex B directement sur colonies, sans extraction enzymatique préalable utilisée dans la procédure standard :
Agiter doucement le réactif au latex B. En maintenant le flacon compte-gouttes à la verticale, ajouter une goutte de réactif latex B à la périphérie de la carte d’agglutination.
A l’aide d’une öse, prélever 1 colonie bleue, présumée GBS sur StrepBSelect™.
En utilisant l’öse, émulsionner avec précaution les colonies dans la goutte de latex de manière à obtenir une suspension homogène, puis étaler la suspension sur toute la surface du cercle.
Agiter lentement la carte, horizontalement, pendant 1 minute maximum.
Observer si une agglutination visible à l’œil nu se forme dans un délai d’1 minute maximum. La taille des agglutinats et la rapidité de leur apparition des amas dépendent de la concentration antigénique de l’extrait.
7.4. Contrôle de qualité
Les réactifs de latex doivent être parfaitement homogènes après agitation.
Contrôle des suspensions de latex :
Déposer 1 goutte de contrôle positif (Positive control) sur chaque cercle de la carte jetable.
Agiter délicatement les réactifs de latex. En maintenant les flacons compte-gouttes à la verticale, déposer une goutte de chaque réactif de latex sur la carte d’agglutination en suivant les indications de distribution.
Mélanger les réactifs de latex avec le contrôle positif (Positive control) en utilisant un bâtonnet mélangeur, en changeant de bâtonnet entre chaque réactif de latex.
Agiter lentement la carte pendant 1 minute et observer l’apparition d’agglutinations.
De l’eau physiologique stérile est utilisée pour contrôler l’absence d’agglutinations non spécifiques pour chaque réactif de latex. Pour effectuer ce test, l’eau physiologique stérile est utilisée selon le protocole pour le contrôle positif.
Les réactifs de latex ne doivent pas être utilisés s’ils n’agglutinent pas avec le contrôle positif ou s’ils agglutinent de manière non spécifique avec l’eau physiologique stérile (cela s’explique par des conditions de stockage du kit incorrectes ou à une contamination du réactif de latex).
Contrôle d’extrait d’enzyme :
L’activité de la solution enzymatique peut être contrôlée à l’aide d’une souche de Streptococcus de groupe connu.
L’extrait antigénique de cette souche doit agglutiner rapidement avec le réactif latex correspondant.
7.5. Interprétation des résultats Réaction positive
Une réaction positive est indiquée par des agglutinats rouges sur fond vert visibles à l’œil nu. L’intensité et la vitesse d’apparition des agglutinats dépendent de la souche testée.
Seule une agglutination franche et rapide avec une seule des six suspensions de latex permet d’identifier le groupe de la souche testée.
Réaction négative
Une suspension brune homogène, sans agglutinats, obtenue après 1 minute d’agitation indique une réaction négative.
Ne pas conclure un résultat négatif avant 1 minute.
7 [FR]
Résultats non interprétables
Une réaction est non-interprétable si de petits agglutinats apparaissent sur un fond brun ou si une agglutination apparaît avec plus d’un réactif latex du kit. Si une réaction douteuse de ce type se produit, il est recommandé de répéter la procédure d’isolement des colonies.
8. LIMITES DU TEST
a) Des résultats erronés peuvent survenir si un nombre incorrect de colonies est utilisé pour l’extraction.
b) Certaines souches de Streptococcus dysgalactiae peuvent agglutiner avec le latex Strep A (code 61721).
c) De rares souches de Corynebacterium peuvent agglutiner avec le latex Strep B (code 61727). La taille des colonies et leur morphologie de type R (Rough) permettent leur différenciation avec des colonies de streptocoques typiques.
d) Certaines souches de Streptoccocus pneumoniae peuvent agglutiner avec le latex Strep C (code 61732). Cette réaction croisée est due à une similarité avec l’antigène pneumococcique F [10].
e) Certaines souches d’Enterococcus (E. durans, E. avium, E. faecium et E. gallinarium) peuvent ne pas agglutiner avec le latex Strep D (code 61728).
f) Le diagnostic final, comme tous les diagnostics de laboratoire, ne peut pas être basé sur les résultats d’un seul test, mais sur l’ensemble des données cliniques et des résultats biochimiques, cytologiques et immunologiques.
9. PERFORMANCES DU TEST 9.1. Etude de reproductibilité
Un panel de 2 échantillons a été utilisé pour déterminer la reproductibilité et la précision du test Pastorex™ Strep. Le panel de reproductibilité à 2 échantillons incluait 1 échantillon négatif (Streptococcus pneumoniae non-réactif avec tous les réactifs de latex) et 1 échantillon positif comprenant des colonies de Streptococcus ou Enterococcus des groupes A, B, C, F, G définies selon chaque réactif latex. Pour chaque échantillon à tester avec les différents latex A à G, une extraction enzymatique doit être réalisée sur les colonies de Streptococcus correspondantes.
9.1.1. Répétabilité
Le panel de reproductibilité (N = 2) décrit ci-dessus a été testé en dix réplicats, le même jour, sur un même lot de Pastorex™ Strep, et préparé par un même opérateur. Comme indiqué dans le tableau I, les échantillons négatifs et positifs ont donné les mêmes résultats attendus avec les 10 réplicats.
Tableau I : Résultats de répétabilité
Répétabilité avec le test Pastorex™ Strep Échantillon négatif Échantillon positif Réactif latex
Pastorex™ Strep Détection de souche Total de réplicats
Non-
réactif Réactif Total des réplicats
Non-
réactif Réactif
A Streptococcus du Groupe A 10 10 0 10 0 10
B Streptococcus du Groupe B 10 10 0 10 0 10
C Streptococcus du Groupe C 10 10 0 10 0 10
D Streptococcus du Groupe D 10 10 0 10 0 10
F Streptococcus du Groupe F 10 10 0 10 0 10
G Streptococcus du Groupe G 10 10 0 10 0 10
9.1.2. Précision intermédiaire
Le panel de reproductibilité (N=2) comme décrit ci-dessus a été testé sur 20 réplicats réalisés par deux opérateurs indépendants, avec 2 réplicats par jour durant 5 jours. Comme indiqué dans le tableau II, les échantillons négatifs et positifs ont fourni les mêmes résultats attendus avec les 20 réplicats.
Tableau II : Résultats de la précision série par série, jour par jour et inter-opérateur Précision série par série, jour par jour et inter-opérateur
avec le test Pastorex™ Strep Échantillon négatif Échantillon positif Réactif latex
Pastorex™ Strep Détection de souche Total des
réplicats Non-réactif Réactif Total des
réplicats Non-réactif Réactif
A Streptococcus du Groupe A 20 20 0 20 0 20
B Streptococcus du Groupe B 20 20 0 20 0 20
C Streptococcus du Groupe C 20 20 0 20 0 20
D Streptococcus du Groupe D 20 20 0 20 0 20
8 [FR]
F Streptococcus du Groupe F 20 20 0 20 0 20
G Streptococcus du Groupe G 20 20 0 20 0 20
9.1.3. Précision inter-lot
La précision inter-lot a été étudiée à l’aide des résultats de contrôle de qualité (sensibilité et spécificité) de trois lots de fabrication. Les panels de souches de streptocoques et d’entérocoques ont été utilisés pour comparer les caractéristiques de sensibilité et spécificité des réactifs latex.
La conformité de la sensibilité inter-lot des latex est mise en évidence par agglutination de niveaux d’intensité très similaire sur trois lots, sur panels de souches positives (voir tableau III). La conformité de la spécificité inter-lot des latex est mise en évidence par l’absence d’agglutination sur trois lots, sur souches non ciblées (voir tableau IV).
Tableau III : Résultats de la précision inter-lot avec des panels de souches attendues positives avec le réactif latex testé
Précision inter-lot avec le test Pastorex™ Strep Intensité de l’agglutination (de 0 à 3)
Réactif de latex Détection de souche Lot 1 Lot 2 Lot 3
A Streptococcus du Groupe A (souche 1) 3 3 3
Streptococcus du Groupe A (souche 2) 3 2,5 3
B Streptococcus du Groupe B (souche 1) 3 3 3
Streptococcus du Groupe B (souche 2) 3 3 3
C Streptococcus du Groupe C (souche 1) 2,5 2,5 2,5
Streptococcus du Groupe C (souche 2) 2,5 3 3
D
Enterococcus du Groupe D (souche 1) 3 2,5 2,5
Enterococcus du Groupe D (souche 2) < 0,5 0,5 0,5
Enterococcus du Groupe D (souche 3) 3 3 2,5
F Streptococcus du Groupe F (souche 1) 3 3 3
Streptococcus du Groupe F (souche 2) 3 3 2,5
G Streptococcus du Groupe G (souche 1) 2,5 2 3
Streptococcus du Groupe G (souche 2) 2,5 3 2,5
Remarques : La mesure de l’intensité d’agglutination a été classée entre 0 et 3 (« 0 » = réaction homogène négative, « 1 » = fins agglutinats rouges sur fond vert, « 2 » = petits agglutinats clairement visibles sur fond vert, « 3 » = nombreux agglutinats visibles sur fond vert ; par ex. 2,5 est compris entre 2 et 3)
Tableau IV : Résultats de la précision inter-lot avec des panels de souches attendues négatives avec le réactif latex testé
Précision inter-lot avec le test Pastorex™ Strep Panel de souches (Intensité d’agglutination)
Réactif latex Détection de souche Lot 1 Lot 2 Lot 3
B, C, D, F, G Streptococcus du Groupe A (souche 1) 0 0 0
Streptococcus du Groupe A (souche 2) 0 0 0
A, C, D, F, G Streptococcus du Groupe B (souche 1) 0 0 0
Streptococcus du Groupe B (souche 2) 0 0 0
A, B, D, F, G Streptococcus du Groupe C (souche 1) 0 0 0
Streptococcus du Groupe C (souche 2) 0 0 0
A, B, C, F, G
Enterococcus du Groupe D (souche 1) 0 0 0
Enterococcus du Groupe D (souche 2) 0 0 0
Enterococcus du Groupe D (souche 3) 0 0 0
A, B, C, D, G Streptococcus du Groupe F (souche 1) 0 0 0
Streptococcus du Groupe F (souche 2) 0 0 0
A, B, C, D, F Streptococcus du Groupe G (souche 1) 0 0 0
Streptococcus du Groupe G (souche 2) 0 0 0
9.2. Performances cliniques 9.2.1. Spécificité
La spécificité testée sur 55 souches, telles que Streptococcus mitis (N=1), Streptococcus pneumoniae (N=7), Streptococcus viridans (N=6), streptocoques buccaux (N=16), Aerococcus viridans (N=1), Listeria monocytogenes (N=2), Gardnerella vaginalis (N=1) et Corynebacterium (N=21), est de 100 % (55/55) avec les réactifs latex Strep A, D, F et G, 98,2 % avec le latex Strep B et 90,9 % avec le latex Strep C, démontrant une réactivité non-spécifique. Un résultat faux-positif a été obtenu avec le latex Strep B et la souche de Corynebacterium (mais la taille/l’aspect de la colonie était différent(e) de celle/celui des streptocoques) et cinq résultats faux-positifs ont été obtenus avec le latex Strep C et les souches de Streptococcus pneumoniae (en raison de la réaction croisée commune avec l’antigène pneumococcique F).
9 [FR]
Tableau V : Spécificité sur les colonies de la culture bactérienne Latex Pastorex™
Strep Détection de souche Nombre de
souches testées
Nombre de souches non-
réactives
Spécificité (%)
A Streptococcus du Groupe A 55 55 100
B Streptococcus du Groupe B 55 54 (**) 98,2
C Streptococcus du Groupe C 55 50 (*) 90,9
D Streptococcus du Groupe D 55 55 100
F Streptococcus du Groupe F 55 55 100
G Streptococcus du Groupe G 55 55 100
Remarques : (*) Fausse réactivité de 5 souches de S. pneumoniae sur 7 avec le réactif latex C, due à la réaction croisée commune avec l’antigène pneumococcique F [10].
(**) Fausse réactivité d’1 souche de Corynebacterium sur 21 testées avec du latex B, mais la taille/l’aspect de la colonie était différent(e) de celle/celui des streptocoques.
9.2.2. Sensibilité
Comme indiqué dans le tableau VI, la sensibilité, testée sur 162 souches (2 souches ont été exclues), est de 100% avec les latex A, B, C, F et G, et de 88,9% (24/27) avec le latex D en raison de la non-réactivité avec trois souches d’entérocoques (E. durans, E. avium et E. gallinarium). Chaque souche de streptocoques a été testée avec les 6 réactifs latex, aucune réaction croisée n’a été démontrée avec les réactifs latex non spécifiques.
Les 164 souches testées avec le test Pastorex™ Strep étaient des streptocoques des Groupes A (N = 67), B (N = 41), C (N
= 9), D (N = 29) incluant Enterococcus durans, Enterococcus casseliflavus, Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium, Enterococcus avium, Enterococcus gallinarium et Streptococcus bovis, F (N = 4) et G (N = 14).
Tableau IV : Sensibilité sur colonies bactériennes Latex Pastorex™
Strep Détection de souche
Nombre de souches
testées
Nombre de souches réactives
Sensibilité (%)
A Streptococcus du Groupe A 67 67 100
B Streptococcus Groupe du B 41 41 100
C Streptococcus du Groupe C 9 9 100
D Streptococcus Groupe du D 27 24 (*) 88,9
F Streptococcus du Groupe F 4 4 100
G Streptococcus du Groupe G 14 14 100
Remarques : (*) Cinq souches (1 E. durans; 1 E. avium; 1 E. gallinarium; 1 S. bovis et 1 E. faecium) sur les 29 souches testées ont été classées comme non-réactives au Latex D. Les deux dernières souches (S. bovis et E. faecium) ont été exclues car elles étaient également non-réactives avec le test de comparaison de référence pour finalement conduire à 3 faux-négatifs sur les 27 souches testées (spécificité de 88,9 %).
9.3. Réaction croisée Voir le chapitre 9.2.1 Spécificité.
9.4. Effet crochet
Le nombre de colonies à tester ne doit pas dépasser 10 à 15 (permettant d’obtenir des résultats exacts d’après l’étude de robustesse), ce qui rend non pertinent l’effet crochet avec le test Pastorex™ Strep.
10. RÉFÉRENCES BIBLIOGRAPHIQUES
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