à la diffusion variétale
chez la canne à sucre
Dém arrage des bourgeons axillaires de la canne à sucre. Cliché R. Fauconnier 15035
,
France
Diffusion et échanges
variétaux chez la canne
à sucre bénéficient
aujourd'hui des progrès
en biotechnologie.
Une collection
de variétés in vitro
a été constituée
pour autoriser un accès
rapide à du matériel
de grande qualité
agronomique
et garanti sain.
a canne à sucre se m ultip lie par bouturage, donc chaque varié té est un c lo n e . La c r é a t io n d 'u n e nouvelle variété par h y b rid a tio n est un processus p a r t ic u liè r e ment long et coûteux pour la canne à sucre. Les raisons en sont d 'a b o rd d 'o rd re génétique. Les variétés pré sentent un g én om e très c o m p le x e , avec 100 à 130 chrom osom es issus de p lu s ie u rs espèces a n c e s tra le s . C h a q u e c r o i s e m e n t p r o v o q u e la déstructuration com plète des carac téristiques des variétés parentales ; seule une proportion infime des des cendants présente un potentiel agro n om ique. L'é valuation de ce poten tiel constitue la deuxième source de
c o m p le xité. Le cycle de pro du ction de la canne à sucre c o m p re n d p lu sieurs récoltes, avec un premier sta de d it « en vierge », un an après la p la n ta tio n des boutures. Il est suivi de p lu s ie u r s r e p o u s s e s , d o n t les caractéristiques sont peu corrélées d 'u n stade à l'a u tre , en p a r tic u lie r e n tre le stade « en v ie rg e » et les repousses successives. De plus, pour un même stade, on observe des c o m portements variables selon le m ilieu et l'a n n é e . A in s i, la s é le c tio n des clones les plus performants demande des dispositifs d 'é v a lu a tio n p a rtic u lièrement lourds.
Les différents centres de sélection du monde produisent des variétés
adap-Culture
in vitro
d e canne à sucre
tées à le u r r é g io n . Ces m a t é r ie ls éprouvés peuvent a voir une grande v a le u r en ta n t q u e g é n ite u rs dans d'autres programmes d 'a m é lio ra tion variétale. Ils peu ven t é ga le m e nt se ré v é le r adaptés en d e h o rs de leur zone de sélection et représenter ainsi une source de r e n o u v e lle m e n t des variétés pour des stations qui ne pos sèdent pas leur p ro p re p ro gram m e d'am élioration génétique. La circu la tio n des variétés de canne à sucre, d i f f i c i l e s à s é l e c t i o n n e r , r e p r é sente d o n c un fa c te u r de p ro grès important.
Le matériel végétal transite sous for me de boutures qui sont susceptibles de p ro pa ge r des m aladies. D ep uis 197 8, le service de « Q u a ra n ta in e i n t e r n a t i o n a l e » o r g a n is é p a r le C I R A D à M o n t p e l l i e r ( C e n t re de c o o p é r a t i o n i n t e r n a t i o n a l e en r e c h e r c h e a g r o n o m i q u e p o u r le développement) met à la disposition d e n o m b r e u x p ays des v a r ié t é s d 'in té rê t industriel ou des matériels proches de ce niveau. D eu x cycles d 'o b s e rv a tio n d 'u n an sont néces saires pour obtenir les garanties phy- tosan¡taires requises ; les clones peu v e n t e n s u ite être e x p é d ié s à leurs utilisateurs sous form e de boutures ( B A U D I N , 1 9 8 4 ) . D u f a i t de contraintes matérielles, ce service se cantonne à une activité de transit et ne p e u t pas c o n s e r v e r les c lo n e s « libérés » à l'issue de la quarantaine. Face à ces limitations, il a été entre pris de constituer une c o lle c tio n de canne à sucre in vitro en aval du ser vice de quarantaine (PAULET et al.,
1991).
Ce t y p e de c o l l e c t i o n , a p p e lé e « vitrothèque », existe déjà pour d if férentes plantes, c o m m e la p om m e de terre ou le manioc (ROCCA et al., 1989). Il p e rm e t le rassem blem ent sous une forme peu volumineuse de m até rie ls p o te n t ie lle m e n t u tile s et représente une source d'a pp ro visio n n e m e n t ra p id e en m a té rie l sain. Il autorise égalem ent l'a p p lic a tio n de la c r y o c o n s e r v a tio n , un m o d e de conservation à très long terme, utile p ou r la préservation des ressources g én étiques. Le recours à l'é le c tr o - phorèse d'enzymes et aux nouveaux
Stockage à 1 8 °C des plantules in vitro.
Cliché CIRAD-CA
o u t i l s de la b i o l o g i e m o l é c u l a i r e v ie n t r e n fo rc e r une g estion r ig o u reuse de la collection.
La production
des plants
in vitro
Les plants in vitro, dits « vitroplants », so nt o b te n u s par c u lt u r e de b o u r g e o n s a x il l a i r e s p ré le v é s sur des plantes saines, en suivant les procé d u r e s d é f i n i e s p a r S A U V A IR E et GALZY (1978).
c h a m p ig n o n s sa prop hyte s, in d é s i rables u lté r ie u r e m e n t in vitro , des tr a ite m e n ts h e b d o m a d a ire s f o n g i c id e s et in s e c tic id e s s y s té m iq u e s sont réalisés en alternance.
La culture in vitro
Les bourgeons les plus jeunes (trois ou quatre par tige) sont prélevés sur des cannes de quatre à six mois, dans la serre de M o n tp e llie r. Ils sont mis en c u l t u r e en b o î t e de p é t r i sur m ilieu MS (MURASHIGE et SKOOG, 1962) à 25 °C. Ils sont repiqués in d i v i d u e l l e m e n t en tu b e au b o u t de deux à quatre semaines, lorsque de n o u v e a u x t a l le s s o n t a p p a r u s . Lorsque 10 belles p la ntules o n t pu être obtenues, elles sont repiquées sé pa ré m e nt dans 10 tubes et sto c kées à 18 °C sur m ilieu MS appauvri. Ces c o n d itio n s entraînent un ralen tissement de la croissance in vitro et donc d im inu en t le v olum e de m ani pulations nécessaires. La surveillan ce r é g u liè r e du n iv e a u du m ilie u n u t r i t i f e t du d e s s è c h e m e n t des feuilles permet de détecter les clones à re p iq u e r en p rio r ité . L 'in t e r v a lle e ntre d e u x rep iq u a g e s p e u t v a rie r e ntre 6 m ois et d e u x ans selon les v a r i é t é s ( c a p a c i t é de t a l la g e ) et l'épuisement du m ilieu.
Bourgeon de canne à sucre après 15 jours de repiquage in vitro.
Cliché CIRAD-CA
Le matériel de base
en serre
Un bouturage est effectué à partir des plantes libérées de la q u a ra nta ine , garanties saines. Après le démarrage, les boutures sont repiquées et m ain t e n u e s en s e rr e . Le b o u t u r a g e c o n d u i t à un r a j e u n i s s e m e n t du végétal, ce qui favorise par la suite le d é v e lo p p e m e n t des bourgeons lors de la mise en c u ltu re in vitro. A fin de m i n i m i s e r les a tt a q u e s de
L'utilisation
des vitroplants
Les vitroplants permettent l'in tro d u c t io n ra p id e d 'u n e n o u v e lle va riété dans une plantation. Ils peuvent être directement convertis en boutures ou f a ire l ' o b j e t d 'u n e m u l t i p l i c a t i o n a c c é lé r é e p a r m i c r o p r o p a g a t i o n in v i t r o ( F E L D M A N N et R O T T , 1991).
La fourniture
de vitroplants
Dès q u 'u n e d em an de est fo rm u lé e, une partie des vitroplants disponibles en v i t r o t h è q u e à M o n t p e l l i e r , est replacée à 25 °C pour m ultiplicatio n. Trois à six mois sont nécessaires pour p ro d u ire une d iz a in e de n ou v elles p la n tu le s p a r t a lla g e n a tu re l. Ces plantules sont alors repiquées sur un m ilieu d'e nracinem ent et expédiées. L'u tilisateur, s'il dispose du labora to ire adapté, p o u rra p o u rs u iv re la m u ltip lic a tio n en suivant les mêmes procédures. Le délai d'attente pour la fourniture de plants est donc réduit à six m ois alors que d eu x à trois ans seraient nécessaires p o u r réinsérer les v a r ié t é s d e m a n d é e s d a n s un nouveau cycle de quarantaine.Le comportement des plants
issus de culture in vitro
Au m o m e n t du sevrage — passage des c o n d it io n s in v itr o aux c o n d i tions naturelles — , il est essentiel de suivre rigoureusem ent le p ro to c o le f o u r n i p o u r o p t i m i s e r la r e p r is e au c h a m p (cf. Fiche de sevrage de v it r o p la n t s de c a n n e à sucre). Les vitroplants de canne à sucre repiqués au cham p présentent un faciès parti c u lie r, d iffé re n t de c e lu i des plants issus de b o u tu r e s t r a d i t i o n n e l l e s (F E L D M A N N et ROTT, 1991). Ces modifications dépendent de la varié té, mais se traduisent généralem ent par une a ugm entation du tallage et u n e d i m i n u t i o n du d ia m è t r e des tig es. Ce q u i c o n d u i t d 'a i l l e u r s à un ren de m e nt s im ila ire à c e lu i des boutures. Ces d iffé re n c e s s 'e s to m pent rapidement au cours des cycles de m ultiplication.
L'état actuel
de la vitrothèque
C réée en 1 9 8 2 , la v it r o t h è q u e de c a n n e à s u c re du C I R A D à M o n tp e llie r est constituée à l'h eure a c t u e l l e de 3 6 3 v a r ié t é s d o n t la
m a jo rité est é ta b lie et conservée à 18 °C. L'augmentation de son v o lu me a c o n d u it à rechercher diverses améliorations.
Contenu de la collection
La co lle ction com porte 187 variétés i n t e r n a t i o n a l e s d 'a c c è s l i b r e et 176 variétés dont l'accès est soumis à l'autorisation de l'obtenteur (Fiche variétés de canne à sucre conservées en vitrothèque).
Stabilité génétique
et technique
de cryoconservation
B ie n q u e la s t a b i l i t é g é n é t i q u e semble a p rio ri garantie par le m ain tien à l'état de tissu organisé (bo ur geon ou plantule, sans dédifférencia tio n c e llu la ir e ) sur des m il i e u x de c u l t u r e e x e m p ts d 'h o r m o n e s de croissance, il est utile de rechercher une technique permettrait de s'affran chir des manipulations sur vitroplants et surtout de lim ite r les m u lt ip lic a tions cellulaires en conditions artifi cielles. Une te c h n iq u e de c r y o c o n servation (DEREUDDRE, 1994) est m a i n t e n a n t d i s p o n i b l e . M is e au p o in t sur la va riété Co 6 4 1 5 , cette méthode permet de stocker des apex encapsulés dans des billes d'alginate et plongés dans l'azote liquide. Elle a été testée avec succès sur 16 va rié tés, conduisant à des taux de régéné ration co m p ris entre 14 % et 91 % (G O N Z A L E Z A R N A O et al., 1993 ; PAULET et al., 1993). En théorie, elle p e r m e t u n e c o n s e r v a t i o n d 'u n e durée indéfinie du matériel végétal.
Contrôle de l'identité
du matériel
Du fait du grand nombre de m anipu la t io n s e n tre l 'a r r i v é e d 'u n c lo n e sous forme de boutures et son envoi sous forme de vitroplants, le contrôle de l'identité des clones est nécessai re p o u r d é t e c t e r les é v e n t u e l le s erreurs d'étiquetage. L'électrophorè-Reprise de l'apex à 10 jours, après cryoconservation.
Culture
in vitro
d e canne à sucre
se d 'e n z y m e s fo u r n it un m oyen de v é r i f i c a t i o n . U n e é tu d e p i l o t e c o nduite sur 62 variétés a révélé 21 bandes p o ly m o r p h e s , c 'e s t- à - d ir e présentes chez certaines variétés et absentes chez d'autres. A partir des 1 891 c o m p a r a is o n s e ffe c tu é e s (62 va rié té s c o m p a ré e s d e u x à d eu x ), seuls deux couples n'o nt pas pu être distingués ; c h a c u n e des autres 58 variétés présente une c o m b in a is o n u n iqu e de bandes. Cette te c h n iq u e requiert l'e x tra c tio n des enzymes à partir d 'u n e jeune fe uille fraîche, et d o n c la d is p o n i b i l i t é d 'u n e je u n e p la n te . Le p o ly m o r p h is m e de lo n gueur des fragments de restriction de l'A D N (RFLP) est plus lourd à révéler mais présente une puissance de dis c rim ination bien supérieure. Ils fo ur n is s e n t u n e v é r i t a b l e e m p r e i n t e g é n é tiq u e de c h a q u e v a r ié t é . Au c o n t r a i r e de l ' é l e c t r o p h o r è s e d 'e n z y m e s , l'a n a ly s e des RFLP est réalisable à partir de feuilles séchées ; on peut ainsi à tout m om ent com pa rer les c lo n e s de la c o ll e c t i o n de M on tpe llie r à d'autres clones conser vés au cham p sous les tropiques.
Conclusion
Les biotechnologies sont parfois u tili sées pour créer une diversité nouvel le et o r i g i n a l e ; c 'e s t le cas p a r exem ple de la transform ation géné tique. Dans le cas de la collection de variétés de canne à sucre décrite ici, les b iotechnologies sont appliquées pour assurer l'intégrité génétique de matériels précieux ; elles offrent un moyen de m a in te n ir des centaines, voire des milliers de variétés dans un espace très restreint en les protégeant t o ta le m e n t des insectes, des m a la dies et des aléas c lim a tiq u e s , mais aussi en grande partie de la d érive g én étique et de mélanges a c c id e n tels. D'intérêt imm édiat pour la d iffu sion de matériel variétal, ce type de dispositif aura probablem ent sa p la ce dans un c a dre in t e r n a tio n a l de c o n s e rv a tio n des ressources gén é tiques de la canne à sucre.
Des empreintes génétiques
pour les variétés de canne à sucre
La révélation du po ly m o rp h is m e de longueur des fragments de restriction de l'A D N (on considère ici l'A D N du noyau et non l'A D N du cytoplasme) com porte plusieurs étapes : - l'extractio n de l'A D N ;
- la digestion de l'A D N , c 'est-à-dirésa cou pu re en des sites bien déterminés au moyen d 'e n z y m e s dites « de restriction », q u i p ro v o q u e la fo rm a tio n de fragm ents de lo n gueurs diverses ;
- la séparation des fragments par électrophorèse en gel d'agarose, en fon c tio n de leur longueur ;
- le transfert sur une m em brane en nylon des fragments ainsi séparés ;
- « l'h y b rid a tio n » m oléculaire avec une séquence d 'A D N particulière, dite « sonde » (préala blem ent marquée, au phosphore 32 par exemple) : parmi les fragments présents sur la m em brane, la sonde va reconnaître ceux qui con tien nen t une séquence qui lui est sim ilaire et se fixer sur eux ;
- la révélatio n des fragments reconnus, par la mise en con tact de la m em brane avec un film au torad iog rap hiq ue q u i sera im p rim é par la radioactivité de la sonde.
A in s i, c h a q u e c lo n e est cara cté risé par un e n s e m b le de bandes q u i c o n s titu e son em preinte génétique (photo). O n dispose de très nombreuses sondes. L'utilisatio n de c in q sondes s eu le m e nt p e rm e ttra it de d is tin g u e r plus de 10 000 variétés prises au hasard.
Profils de bandes obtenus pour 15 variétés de canne à sucre, dont l'ADN a été coupé avec l'enzyme de restriction Hind III, séparé par élecectrophorèse, puis hybridé avec la sonde UMC39. Cliché J.-C. Glaszmann
Conditionnem ent des vitroplants
Les v itr o p la n t s so nt c o n d it io n n é s sur un m ilie u d 'e n r a c in e m e n t en tubes de p la s tiq ue stériles et scellés. Repiqués, ils sont m a in te n u s trois à q u a tre semaines à une température de 25 à 30 °C avant l'envoi.Passage hors des conditions stériles
Possible lorsque les v itro p la n ts enracinés o n t 5 à 6 r a c in e s de 2 à 3 c e n tim è t r e s . Desceller les tubes, extraire les plantes d é li catement, rincer les racines à l'eau, couper les feuilles pour lim iter l'évaporation et pour stimuler le démarrage des bourgeons.Traitement fo n g icid e
T r e m p e r les p la n t s d a n s du B e n la te à 1 gramm e par litre de p ro d u it co m m ercial ou de l'A liette à 1 gramme par litre.
Trempage des plants dans la solution fongicide.
Le repiquage des plants
Sevrage des vitrop la nts en J iffy 7 (pastilles de tourbe compressée). Faire d 'a bo rd gon fler les Jiffy 7 pendant 10 m inutes avec la s olution fo n g ic id e utilisée précédem ment. Faire un tro u à la s u rfa c e du Jiffy 7 et y glisser les racines. R eboucher et tasser la tourbe autour du plant.
Repiquage des plants en Jiffy 7.
de vitroplants
de canne à sucre
Vitroplants enracinés, prêts à être sevrés.
Les conditions de sevrage
Placer les plants sevrés à l'abri du vent et du soleil. L im iter le dessèchement en recouvrant les Jiffy 7 de plastique transparent, ju s q u 'à l'é m is s ion de d eu x ou trois nouvelles feuilles. En cas de dessèchement, brum iser un peu d 'e a u . E n tre te n ir par des arrosages quotidiens, puis c o m p lé t e r d e u x à tr o is s e m a in e s plus tard avec une s olution de type engrais foliaire (exemple : M a iro l, 2 grammes par litre de p ro du it com m ercial). C ontrôler les attaques fong iqu es par des p ulvérisations de Bayleton 5 à raison de 1 gramme par litre de p r o d u it c o m m e r c ia l, une fois par semaine.Le passage au cham p
Possible au bout de quatre à six s e m a in es si la c ro is s a n c e est v igo ureu se. T re m p e r le Jiffy 7 a v e c son p l a n t d a n s du Bayleton à 1 gram m e par litre, préparer le terrain, ménager un t r o u p o u r p la c e r le J iffy 7. Prendre soin de ne pas briser la m otte et de ne pas a b îm er les r a c in e s . M e t t r e d i r e c t e m e n t en terre les Jiffy 7. Couper légè rement les feuilles pour lim ite rPlants en serre, âgés de 6 à 8 semaines, en attente de plantation.
le dessèchement. Si au bout de six semaines en Jiffy 7, les plants ne sont pas suffisam ment vigoureux, les placer en pots, offrant p lus de substrat que les Jiffy 7 épuisées. T r a ite r a v e c un i n s e c t i c i d e s y s té m iq u e (Curater).
Effectuer le passage au c h a m p lorsque la température du sol est supérieure à 18 °C. U n e h u m id it é de l'a ir é le vée est s o u h a i table, il est co nse illé de brum iser un peu, même en présence d'irrigation.
Clichés P. Feldmann
59
Plants en Jiffy 7 sous mini-serre.
• V . / :
Laboratoire de culture in vitro, CIRAD-CA, BP 5 0 3 5 , 3 4 0 3 2 Montpellier Cedex 1, France.
187 variétés en libre accès
B37172 Co31 2 CP52-43 CP72-356 L60-25 P hil56226 RB705007 T u c 6 8 -1 8
B4362 Co331 CP52-48 C P72-370 L62-96 Ph i I58260 RB705146 T uc68-19
B 46364 C o 4 1 9 CP57-603 CP72-1 312 L65-69 Phil6553 RB705375 T u c 6 9 - 1 1 7
B47258 Co421 CP59-73 CP73-351 L66-97 Phil6559 RB735220 T uc71-5
B49119 C o449 CP60-01 C P 73-1547 L72-85 P hil6607 RB735275 Tuc72-1 6
B51129 C o462 CP62-258 CP74-383 LF63-863 POJ2878 RB748022 T uc72-23
B52107 Co527 CP63-306 CP74-2005 LF66-2918 PR1007 RD 7410 Tuc74-1
B60125 Co740 CP63-588 CP 77-414 M 31 /4 5 PR1016 RP14 8 -70 Tuc74-6
B63118 Co775 CP65-357 CR A6026 M 5 6 9 /6 9 PR61632 S17 T u c74 -10
B63119 Co785 CP66-31 5 EAK7076 N11 R397 SIP58-1 36 Tuc74 -24
B64277 Co842 CP66-346 FR80234 N12 R469 SP70-1005 Tuc74 -26
C 3 34-64 C0IOOI CP67-41 2 FR80236 N14 R472 SP70-1078 Tuc74 -34
C 3 23-68 C o l 148 CP67-41 3 FR80412 N15 R526 SP70-1081 Tuc74 -46
CB36-24 C0I I57 CP670 IAC4865 N I 6 R566 SP70-1284 Tuc75-1
CB40-13 C o l 177 C P68-350 IA C 51205 N17 R567 SP70-1423 Tuc75-2 CB41-76 C0I202 CP68-1022 IA C 52 150 N18 R568 SP70-1478 Tuc75-3 C B 4 5 -1 55 C0I23O CP68-1026 IA C 58480 N19 R570 SP70-3225 U C W 5 4 6 5 CB46-47 C062175 C P 68-1067 IAC64257 N 5 22 19 R572 SP70-3370 W I8 2 7 7 7 CB47-1 5 C o6304 C P 6 8-11 54 Ja59-03 N 5 32 16 R70367 SP71-799 CB47-355 Co641 5 CP69-1059 Ja64-11 N A 5 6-7 9 R7417 SP71-6163 C B 49-260 C068O6 C P 7 0-11 33 Ja64-1 5 N C o 3 1 0 R75631 SP72-4928 C B53-98 C0S443 CP72-353 ]a64-20 NC o334 RB7096 SP75-179
CB56-1 26 CoS510 CP72-355 K W T57-423 N C o376 RB70194 Tuc67 -27
176 variétés disponibles dont I emploi est restreint à des fins génétiques, avec autorisation de l'obtenteur
B6504 B7695 B7882 B79118 H 5 6-27 8 M 6 5 7 /6 6 M Y 6 4 -2 6 Q 1 2 6 B6623 B76102 B78130 B79130 H 5 6-48 48 M 3 0 3 5 /6 6 NI1 Q 1 2 7 B69379 B76113 B 78178 B79226 H 5 7-51 74 M 6 9 5 /6 9 NIF3 Q 1 2 9 B 69566 B76132 B 78224 B8007 H 5 9-37 75 M E X 64-1214 N IN 2 Q 1 3 0 B 69758 B76146 B 78237 B8008 H62-4671 M E X 65-1424 Q 7 5 Q 1 3 4 B70442 B76181 B78242 B8066 H 6 5-70 52 MEX66-1 247 Q 8 4 Q 1 3 5 B70462 B76196 B78244 B8093 FH 66-4927 M E X 68-200 Q 9 0 Q 1 3 7 B70482 B76247 B78245 B 80276 H 6 8 - 1 1 58 M E X 69-290 Q 9 5 Q 1 3 8 B70520 B76398 B78249 B80361 H 6 8-22 35 M EX70-485 Q 9 6 RK65-37 B70531 B7784 B78266 B80689 H 6 9-82 35 M0I45-O3 Q 10 2 SES14 B70532 B7795 B78299 BJ7013 H 6 9 -9 1 03 M Q 7 2 - 1 1 75 Q 10 3 SES231 B72191 B77123 B78358 F146 H 7 0 -1 4 4 M Q 7 2 -4 0 0 5 Q 1 0 8 US56-1 5-8 B74254 B77126 B 78360 FI 51 H 7 2 -8 5 9 7 M Q 7 2 -5 0 0 6 Q 1 0 9 G aloa B74359 B77392 B78366 F156 H 7 3 - 6 1 10 M Q 7 2 -5 0 8 9 Q 1 1 0 Kaba B74477 B77415 B78436 F160 H 7 5-87 76 M Q 7 6 -2 3 Q111 M ali B75300 B77565 B78482 F161 H 7 7-66 94 M Q 7 6 -5 3 Q 11 3 M ana B75412 B77639 B78560 F167 H 7 8 -7 2 3 4 M Y 53 -53 Q 1 1 4 O n o B75519 B 77740 B78604 F175 HJ57-41 MY53-1 73 Q 11 5 Tabongo B75524 B7802 B78628 F176 M 5 74/62 M Y 54 -62 Q 1 1 7 Triton B75527 B7814 B78697 F1 78 M 2 3 7/62 MY54-1 29 Q 1 2 0 Troja n B75532 B7852 B78700 H 3 7 -1 933 M 2 1 7 3 /6 3 M Y 5 5 -1 4 Q121 Uba Naguin B7639 B7877 B7997 H 5 0-72 09 M 3 76/64 M Y 57 -15 Q 1 2 4 Agriculture et développement n° 2 - Mai 1994
Variétés de canne
à sucre conservées
en vitrothèque
B ibliographie
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■ F. PAULET, J.-C. GLASZMANN - Les biotechnologies en soutien à la diffusion variétale chez la canne à '<D
£ sucre.
3 Diffusion et échanges variétaux chez la canne à sucre * d ) bénéficient aujourd'hui des progrès en biotechnologie. En 0 ^ complément du service de « quarantaine internationale » organisé par le CIRAD à Montpellier, il a été entrepris de constituer une collection de canne à sucre in vitro. La régénération in vitro de bourgeons axillaires et la conser vation en vie ralentie des plantules obtenues ont été mises au point. Prés de 400 variétés (ou clones) sont maintenant stockées à raison de 10 échantillons chacune. Cette « vitrothèque » occupe un espace réduit et permet de fournir rapidement des plants sains pour une large gamme de matériel. Cette forme in vitro rend possible également l'application de la cryoconservation, utile pour la préservation des resssources génétiques. Le recours à l'électrophorèse d'enzymes et aux nouveaux outils de la biologie moléculaire (RFLP) vient renforcer le contrôle et la fiabilité de la collection.
Mots-clés : Saccharum, canne à sucre, clone, culture in
vitro, biologie moléculaire, électrophorèse enzymatique,
cryoconservation, vitrothèque, quarantaine.
■ F. PAULET, J.-C. GLASZMANN - Las biotecnologías £ como ayuda a la difusión de variedades de caña (D de azúcar.
E
La diffusion y los intercambios de variedades de caña de 35 azúcar sacan provecho hoy de los progresos realizados en ^ biotecnologia. Como complemento del servicio de "cuarentena internacional" organizado por el CIRAD en Montpellier, se ha emprendido la constitución de una colección de caña de azúcar in vitro. Se ha llevado a cabo la regeneración in vitro de yemas axilares y la conserva ción en letargo de las plántulas obtenidas. Actualmente se tienen almacenadas cerca de 400 variedades (o clones), con 10 muestras por variedad. Esta "vitroteca" ocupa un espacio reducido y permite suministrar rápidamente plantas sanas para una amplia gama de material. Esta forma in vitro también posibilita la aplicación de la crio- conservación, que es útil para la preservación de recursos genéticos. La utilización de la electroforesis de enzimas y de las nuevas herramientas de la biologia molecular (RFLP) refuerza el control y la fiabilidad de la colección. Mols-dés : Saccharum, caña de azúcar, clon, cultivo
in vitro, biología molecular, electroforesis enzimática,
crioconservación, vitroteca, cuarentena.
■ F. PAULET, J,C . GLASZMANN - Biotechnological support for varietal extension of sugarcane. g Biotechnological advances have benefitted sugarcane £ varietal extension and exchange. An in vitro sugarcane o collection has now been set up as a supplement to the ^ "International Quarantine Service" organized by CIRAD in Montpellier (France). In vitro sucker regeneration and latency conservation of the resulting plantlets has been developed. Almost 400 varieties or clones (10 specimens of each) have now been stored. This "vitrotheque" does not take much space and enables distribution of a broad range of healthy plants rapidly. This in vitro plant mate rial can also be cryopreserved, a useful procedure for genetic resource conservation. Enzyme electrophoresis and other molecular biology tools (RFPL) are used to control the collection, thus guaranteeing its reliability. Key words: Saccharum, sugarcane, don, in vitro culture, molecular biology, enzyme electrophoresis, cryopreser- vation, vitrotheque, quarantine.
