des P-sélectines (et d’autres molécules d'adhésion) a été effectuée par tCEUS (Lindner 2002). Plus récemment, l'utilisation de USPIOs couplées à un anticorps ciblant la P-sélectine (VH10–VUSPIO)
a permis l'imagerie de l'athérosclérose chez la souris apoE-/- en MRI (Jacobin-Valat et al. 2011).
VCAM-1. La molécule d'adhésion VCAM-1 constitue l'une des cibles moléculaires les plus largement étudiées pour l'imagerie de l'athérosclérose. L'imagerie des lésions de la crosse aortique de souris apoE-/- a été réalisée par tCEUS avec l'injection de micro-bulles lipidiques porteuses
d'anticorps ciblant VCAM-1 (Kaufmann et al. 2007). L'imagerie MRI de MPIO ciblant à la fois VCAM-1 et la P-sélectine a montré, dans le sinus aortique de souris apoE-/-, une augmentation de
signal de 3.5 fois par rapport au contrôle (McAteer et al. 2008). L'association d'un peptide ciblant VCAM-1 à des USPIO donne un agent d'imagerie MRI (USPIO-R832) permettant de visualiser les plaques de souris apoE-/- à 24 h p.i. (Burtea et al. 2012). L'utilisation de nanobodies ciblant VCAM-
1 et radiomarqués au téchnétium-99m permet la visualisation de plaques d'athérome chez la souris apoE-/- en imagerie SPECT (Broisat et al. 2012). Des peptides sélectionnés par phage-display et
exprimés en surface de nanoparticules magnéto-fluorescentes ont été utilisés pour réaliser l'imagerie de VCAM-1 dans des lésions athéromateuses de souris apoE-/-, par MRI (Kelly et al. 2005;
Nahrendorf et al. 2006) et par PET, alors sous forme tétramérique et radiomarqué au fluor-18 (Nahrendorf et al. 2009).
D'autres molécules peptidiques, décrite comme ligands de VCAM-1 (Ling et al. 2000) ou leurs dérivés, ont été évaluées pour l'imagerie de VCAM-1 au sein du laboratoire (Broisat et al. 2007; Dimastromatteo 2010) ; ces molécules sont décrites dans la Partie expérimentale : Imagerie.
3.4.2.3 Activité protéolytique
L'imagerie de l'activité enzymatique liée aux cellules inflammatoires présente l'intérêt de rendre compte de l'état inflammatoire des plaques, mais aussi, notamment dans le cas de l'imagerie des MMPs, d'imager directement le processus de dégradation de la capsule fibreuse menant à son amincissement.
MMP. Les MMPs dégradent la ECM et participent notamment à l'amincissement et à la fragilisation de la capsule fibreuse ; l'activité MMP est liée aux cellules inflammatoires. Un agent de contraste MRI marqué au gadolinium, P947, a été évalué sur des modèles pré-cliniques d'athérosclérose et sur tissu humain issu d’endartèrectomies (Lancelot et al. 2008; Vardan Amirbekian et al. 2009; Ouimet
et al. 2012). L'imagerie SPECT des MMPs a également été réalisée dans le modèle de souris apoE-/-
avec ligature carotidienne avec un inhibiteur des MMPs radiomarqué : [123I]-CGS 27023A (Schäfers
et al. 2004); cette molécule a également été évaluée pour l'imagerie PET après marquage au fluor-
modèle de remodelage du myocarde en post-infarctus (H. Su et al. 2005) dans un modèle d'athérosclérose accéléré (Zhang et al. 2008), ainsi que dans l'aorte de souris apoE-/- (Razavian et al.
2011). Similairement, un autre inhibiteur des MMPs, RP805 a également été évalué comme agent d'imagerie dans des modèles murins d’athérosclérose après radiomarquage au technétium-99m (Ohshima et al. 2009). Ses performances dans le suivi thérapeutique expérimentale ont été évaluées (Fujimoto et al. 2008) et comparées à l'annexine V (Luma et al. 2010) (voir ci-dessous). L'imagerie de la MMP membranaire MT1-MMP a été réalisée dans un modèle d'athérosclérose chez le lapin par imagerie planaire 24 h après injection d'anticorps anti-MT1-MMP radiomarqué au téchnétium- 99m (Kuge et al. 2010). D'autres traceurs activables – basés sur la pénétration cellulaire – pour l'imagerie nucléaire (Watkins et al. 2009) ou MRI (Olson et al. 2010) de l'activité MMPs sont également évalués, dans d'autres contextes que l’athérosclérose.
Par imagerie SPECT, un inhibiteur de MMP à large spectre radiomarqué au technétium-99m a permis l'imagerie de l'athérosclérose dans un modèle de lapin (Hartung et al. 2009).
Globalement, l'approche visant à imager en imagerie nucléaire les MMPs par utilisation de petites molécules (souvent décrit comme inhibiteurs de MMPs) semble plus aisément transférable en clinique par rapport à l'utilisation d'anticorps entiers, qui présentent une cinétique sanguine bien plus lente nécessitant un temps d'imagerie tardif ce qui implique, entre autre, une dosimétrie élevée. L'imagerie de sondes NIRF activables par clivage enzymatique permet la visualisation directe de l'activité protéolytique, comme déjà mentionné pour l'imagerie intravasculaire. L'imagerie par FMT d'une sonde constituée de la séquence substrat de gélatinase, dont le clivage enzymatique augmente la fluorescence de 200 fois in vitro, permet la détection de lésions aortiques de souris apoE-/- (J.
Deguchi et al. 2006).
Cathépsines. Les cathépsines sont des enzymes lysosomiales abondantes dans les cellules inflammatoires. L'imagerie FMT de sonde NIRF activée par l'action de la cathépsine B permet la visualisation de l'athérosclérose dans un modèle murin (J. Chen et al. 2002).
3.4.2.4 Accumulation de lipides et oxydation
La taille du cœur lipidique est un facteur de vulnérabilité ; ce cœur est principalement constitué de lipides provenants de LDL. L'oxydation des LDL retenues dans l'espace sous-endothélial est responsable de la réponse inflammatoire des plaques et peut donc être une cible pertinente pour l'imagerie de la vulnérabilité associée à l'inflammation.
technétium-99m (Lees et al. 1988) et des oxLDL marqué au technétium-99m (Iuliano et al. 1996) ont permis la visualisation de l'athérosclérose au niveau des artères carotides chez l'homme dans le cadre d'études pilotes, cependant la cinétique de ces traceurs n'est pas compatible avec leur utilisation en routine clinique. Un peptide radiomarqué à l'iode-125 spécifique de oxLDL a montré en imagerie ex vivo une bonne fixation dans les plaques aortiques de lapin WHHLMI, corrélée au degré d'inflammation des lésions (Nishigori et al. 2013)
MDA. Le malondialdéhyde (MDA) est un épitope d'oxydation notamment présent sur les résidus lysine de l'apoB. L'utilisation d'anticorps spécifiques de cet épitope radiomarqué à l'iode-125 a permis de mettre en évidence une fixation sur les plaques de lapin WHHL ex vivo ainsi qu’en imagerie planaire (Tsimikas et al. 1999), modulée par l'effet de régime (Torzewski et al. 2004). La séquence peptidique IK-17 est spécifique de l'épitope MDA ; son radiomarquage à l'iode-125 donne un radiotraceur qui a montré ex vivo une accumulation dans l'aorte de souris LDLR-/- (Briley-Saebo
et al. 2008; Briley-Saebo et al. 2012).L'imagerie MRI de lésions de souris apoE-/- a été réalisée par
utilisation de LUSPIO (lipid-coated ultra-small superparamagnetic iron particles) conjugués avec des anticorps ciblant deux épitopes d'oxydation : MDA et phospholipides oxydés (Briley-Saebo et
al. 2012).
3.4.2.5 Apoptose
L'apoptose est impliquée à plusieurs niveaux dans la vulnérabilité. L'apoptose des SMCs de la capsule fibreuse est impliquée dans son amincissement tandis que l'apoptose des macrophages (associée à une efférocytose inefficace) participe à la formation d'un coeur lipidique volumineux.
Annexine V. Les éléments apoptotiques sont caractérisés par une expression de phosphatidylsérine