1.5 Time Division Conflict-free MAC Protocols
1.5.3 Link Allocation
Neste teste, 0,5 mL da suspensão do microrganismo endofítico foi espalhada com alça de Drigalski sobre uma placa contendo meio ISP-2, seguindo-se incubação por sete dias a 30 ºC para a formação do tapete. Após este período, foram retirados blocos de 6 mm de diâmetro. Estes blocos foram transferidos para as placas semeadas com 0,1 mL da suspensão de cada microrganismos testes, e em seguida incubadas a 30 ºC por 48 horas. Após este período os halos de inibição quando observados, foram medidos em milímetro (mm). Neste teste foram realizadas três repetições (Figura 6).
Figura 6 – Ensaio antimicrobiano em “bloco de gelose”.
5.2 - Resultados
5.2.1 - Atividade enzimática
Os testes enzimáticos foram realizados em triplicata e através destes resultados foi verifica que o endófito Streptomyces sp. EBR49-A possui enzimas de interesse para a indústria farmacêutica e alimentícia como amilase, lipase e protease que apresentaram área de degradação de 455,88; 405,84 e 36,5 respectivamente (Tabela 4 e figuras 7,8) Neste teste não foi verificada atividade enzimática de celulase e xilase.
Tabela 4- Atividade enzimática em meio de cultura sólido do endófito Streptomyces sp. EBR49-A Enzimas Diâmetro do halo de degradação (mm) Diâmetro da colônia (mm) Área de degradação Amilase 26,5 11,5 455,88 Lipase 21,23 4 405,84 Protease 11,5 8 36,5
Figura 7 – Área de degradação amilolítica produzida por Streptomyces sp. ERB49-A.
Figura 8 – Área de degradação lipolítica produzida por Streptomyces sp. EBR49-A.
5.2.2 - Atividade para fungos fitopatógenos
O teste de atividade antagonista para os fungos fitopatógenos foi realizado em triplicada. Através deste resultado verificamos que o endófito Streptomyces sp EBR49- A apresentou atividade para a maioria dos fungos fitopatógenos com exceção do fungo Alternaria sp (Figuras 9 a 11).
Colletotrichum gloeosporioides Lasiodiplodia theobromae Colletotrichum musae Penicilium digitatum 0 5 10 15 20 25 30 Halo de inibição (mm) Fi to pat ógeno s
Figura 9 - Atividade antifúngica do endófito Streptomyces sp EBR49-A contra diferentes fitopatógenos.
Figura 10 – Atividade antifúngica de Streptomyces sp EBR49-A para o fitopatógeno Lasiodiplodia theobromae
Figura 11 - Atividade antifúngica de Streptomyces sp EBR49-A para o fitopatógeno Colletotrichum musae.
6. PERSPECTIVAS
Como continuidade ao presente trabalho é possível propor algumas etapas que levarão ao aprofundamento da pesquisa com o endófito isolado:
¾ Realizar a produção e purificação do composto bioativo do líquido metabólico do endófito Streptomyces sp. EBR49-A;
¾ Realizar a purificação do composto bioativo produzido pela massa celular do endófito Streptomyces sp. EBR49-A;
¾ Ampliar os testes de atividade biológica realizando teste de atividade antitumoral e antiparasitária.
¾ Realizar a purificação das enzimas amilase e lipase produzidas pelo endófito Streptomyces sp. EBR49-A.
¾ Verificar a atividade larvicida e moluscida do extrato bruto do endófito Streptomyces sp. EBR49-A
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8.1 ANEXO A- MEIOS DE CULTURA