Durante a primeira exposição ao Regent®800WG comparou-se indivíduos no estágio larval com indivíduos no estágio pós-larval e observou-se que alguns parâmetros sofrem alteração apenas em um dos dois estágios, como a CAT, por exemplo, que é induzida apenas na fase pós-larval, ou a GST que é inibida apenas durante o estágio larval. Estudos anteriores realizados com girinos da espécie S. fuscovarius em diferentes estágios de desenvolvimento mostraram que a atividade específica da AChE e CbE diminuiu com o aumento do estágio de desenvolvimento, e isso está diretamente relacionado ao aumento na quantidade de proteína desses indivíduos ao longo do desenvolvimento.
Através dessas comparações observou-se a importância de considerar os estágios de desenvolvimento durante o delineamento experimental, bem como na avaliação de resultados. Estudos realizados por Ferrari et al., (2008; 2009) demonstram a influência dos estágios de desenvolvimento durante o estágio embrionário nas respostas antioxidantes durante exposições a praguicidas, sendo observado esse comportamento variável desde o desenvolvimento embrionário, mesmo para organismos do grupo controle.
Devido a tais variações metabólicas ao longo do desenvolvimento possivelmente girinos em determinados estágios de desenvolvimento estão mais susceptíveis aos danos causados pela presença de xenobióticos que outros, podendo causar nesses organismos comprometimento de funções na fase adulta.
Ao longo das duas exposições foram selecionados girinos para compor um grupo que seria exposto até atingir a metamorfose. Esse grupo, tanto para a primeira como para a segunda exposição ao Regent®800WG não apresentou nenhuma deformação física visível. Porém não foi possível constatar se as funções na fase adulta como reprodução, por exemplo, foram comprometidas devido à dificuldade de manter essa espécie viva em cativeiro durante essa fase.
Estudos realizados paralelamente por nosso grupo com girinos de E. natereri mostraram que quando expostos ao praguicida o tempo de metamorfose é reduzido. O organismo prioriza o desenvolvimento ao invés do crescimento visando livrar-se do ambiente nocivo. Uma hipótese é que girinos de S. fuscovarius apresentem o mesmo comportamento, o que impede que os mesmos sofram efeitos deletérios maiores causados pela presença do praguicida.
- Os experimentos prévios mostraram que os girinos são responsivos tanto ao cobre quanto ao benzo[a]pireno, visto que a CAT, GR, G6PDH e GST tiveram sua atividade alterada após as exposições. A atividade da EROD foi muito baixa quando comparada a de outros organismos, e não respondeu a presença do benzo[a]pireno, demonstrando sua baixa ou inexistente relevância toxicológica em girinos.
- Apesar das elevadas concentrações utilizadas de Regent®800WG, os girinos demonstraram extrema resistência a este praguicida, não tendo nenhum dos indivíduos morrido ao longo da exposição, impossibilitando assim o cálculo da CL50 96 horas. Estudos
mais aprofundados e novos testes são necessários para avaliar se há ocorrência de efeitos subletais nessas concentrações.
- Avaliando-se os resultados de forma integrada, ao longo das exposições ao Regent®800WG todos os parâmetros, exceto as esterases e a G6PDH, responderam em algum dos grupos expostos ao composto (concentração, tempo de exposição ou estágio), sendo considerados potenciais biomarcadores de contaminação em girinos de anfíbios anuros. Porém é necessária a avaliação de outros parâmetros complementares, como a GSH, GSSG, SOD, GPx, e outras enzimas de fase II, que não foram analisados durante esse estudo, visando respostas mais completas a respeito dos mecanismos de defesa e metabolização do praguicida em girinos.
- Durante a avaliação dos resultados é importante levar em consideração além da concentração do contaminante, o período de exposição, a classe a que pertence o composto, o estágio de desenvolvimento do organismo sob estudo, pois esses são fatores que também influenciam nos resultados.
- Os resultados descritos levam a crer que a presença do Regent®800WG não afeta a sobrevivência dos girinos de S. fuscovarius quando consideradas as condições experimentais utilizadas. Entretanto, constatou-se que a presença do praguicida leva a alterações metabólicas, que são consideradas informações iniciais relevantes sobre a toxicidade do Regent®800WG para girinos de anfíbios anuros.
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